高效液相色譜法同時測定遍山紅中8種化學(xué)成分含量

潘立衛(wèi) 羅澤萍 蘇逢晶 賴紅芳

摘要：【目的】建立高效液相色譜法（HPLC）測定遍山紅中沒食子酸、二氫楊梅素、原兒茶酸、蘆丁、楊梅苷、齊墩果酸、槲皮素、山柰酚化學(xué)成分含量的方法，以期更好地控制遍山紅的藥材質(zhì)量，為其藥用開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)?！痉椒ā坎捎肸ORBAX SB-C18色譜柱、乙腈-0.2%磷酸為流動相、流速0.6 mL/min、柱溫28 ℃的HPLC測定廣西都安縣4個采集點(diǎn)（弄蒼隊、卜凡隊、弄外隊、百外隊）遍山紅中8種化學(xué)成分的含量?！窘Y(jié)果】260 nm是測定混合對照品溶液和遍山紅供試液中8種化學(xué)成分的最大波長。4個采集點(diǎn)遍山紅中8種化學(xué)成分的含量范圍：沒食子酸1.53～1.75 mg/g、原兒茶酸1.11～1.28 mg/g、二氫楊梅素0.99～1.44 mg/g、蘆丁0.34～0.42 mg/g、楊梅苷1.58～1.83 mg/g、齊墩果酸0.63～0.77 mg/g、槲皮素1.03～1.11 mg/g、山柰酚0.65～0.69 mg/g。8種化學(xué)成分質(zhì)量濃度與峰面積線性關(guān)系及色譜峰分離效果均良好（r >0.9990）；沒食子酸、原兒茶酸、二氫楊梅素、蘆丁、楊梅苷、齊墩果酸、槲皮素和山柰酚的進(jìn)樣量范圍分別為7.20～43.20、3.36～20.16、5.92～35.52、1.60～9.60、6.40～38.40、3.68～22.08、3.20～19.20和3.52～21.12 μg/mL，對應(yīng)的平均加樣回收率為101.72%、96.49%、97.04%、99.79%、99.80%、99.44%、101.52%和96.63%。【結(jié)論】建立的HPLC具有操作簡便、準(zhǔn)確可靠、靈敏度高、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，可用于遍山紅的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞： 遍山紅；化學(xué)成分；高效液相色譜法；含量測定

中圖分類號： R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：2095-1191（2016）11-1939-06

Abstract：【Objective】The present study was conducted to establish high performance liquid chromatography（HPLC） method for determination of gallic acid， dihydromyricetin， protocatechuic acid， rutin， myricetrin， oleanic acid， quercetin and kaempferol in Oxyspora paniculata（Don） DC. in order to better control the quality and provide scientific basis for its medicinal development. 【Method】The eight kinds of chemical components in O. paniculata from four collection sites in Duan county， Guangxi（Nongcang hamlet，Bofan hamlet，Nongwai hamlet，Baiwai hamlet） were measured by HPLC method with ZORBAX SB-C18 column， acetonitrile-0.2% H3PO4 mobile phase， 0.6 mL/min flow rate and 28 ℃ column temperature. 【Result】260 nm was the maximum wave lengths for determined of mixed reference substances solution and eight chemical components in O. paniculata tested solution. Contents of the eight chemical components in O. paniculata collected from the four collection sites were as follows： gallic acid 1.53-1.75 mg/g， protocatechuic acid 1.11-1.28 mg/g， dihydromyricetin 0.99-1.44 mg/g， rutin 0.34-0.42 mg/g， myricetrin 1.58-1.83 mg/g， oleanic acid 0.63-0.77 mg/g， quercetin 1.03-1.11 mg/g and kaempferol 0.65-0.69 mg/g. Linear relations between mass concentration and peak area and chromatographic peak separation effects of the eight chemical components were sound（r>0.9990）. Sample sizes of the eight chemical components were as follows： gallic acid 7.20-43.20 μg/mL， protocatechuic acid 3.36-20.16 μg/mL， dihydromyricetin 5.92-35.52 μg/mL， rutin 1.60-9.60 μg/mL， myricetrin 6.40-38.40 μg/mL， oleanic acid 3.68-22.08 μg/mL， quercetin 3.20-19.20 μg/mL and kaempferol 3.52-21.12 μg/mL. Sample recovery rates of the eight chemical components were as follows： gallic acid 101.72%， protocatechuic acid 96.49%， dihydromyricetin 97.04%， rutin 99.79%， myricetrin 99.80%， oleanic acid 99.44%， quercetin 101.52% and kaempferol 96.63%. 【Conclusion】The HPLC method for O. paniculata is simple， feasible， accurate， reliable， highly sensitive and reproducible， which can be used in quality control of. O. paniculata.

Key words： Oxyspora paniculata（Don） DC.； chemical component； high performance liquid chromatography（HPLC）； content determination

0 引言

【研究意義】遍山紅又名大葉朝天罐、酒瓶果、硯山紅，為野牡丹科植物尖子木[Oxyspora paniculata （Don） DC.]的根或全株，主要分布于我國廣西、貴州、云南、西藏等地（中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會，1984；國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會，1999）。民間常用其治療濕熱瀉痢、風(fēng)濕痛、尿血、月經(jīng)過多、產(chǎn)后血崩、瘡腫、跌打腫痛等癥（四川省中草研究所，1971）。已有研究從遍山紅中分離純化出β-谷甾醇、胡蘿卜苷、熊果酸、沒食子酸、蘆丁、楊梅苷、齊墩果酸、槲皮素、山柰酚等多個單體化合物（王皓等，2003）。本課題組的前期化學(xué)成分研究也發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地的遍山紅藥材中均含有沒食子酸、原兒茶酸、二氫楊梅素、蘆丁、楊梅苷、齊墩果酸、槲皮素、山柰酚等化學(xué)成分，大致以黃酮和酚酸兩大類成分為主，但至今尚未發(fā)現(xiàn)遍山紅化學(xué)成分含量測定方法的相關(guān)報道，難以全面控制其質(zhì)量。因此，建立同時測定遍山紅中化學(xué)成分含量的方法，對合理開發(fā)利用廣西遍山紅藥材資源具有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】目前，國內(nèi)對遍山紅的研究主要集中在植物分類學(xué)、資源學(xué)等領(lǐng)域（Liao et al.，2006；趙健等，2008），對其化學(xué)成分和藥理作用的研究甚少。而關(guān)于野牡丹科植物化學(xué)成分含量測定的研究報道較多，且多采用高效液相色譜法（HPLC）進(jìn)行測定。翟小玲（2007）采用HPLC[甲醇-0.1%磷酸（10∶90）為流動相，Hypersil ODS2為色譜柱，流速0.5 mL/min，檢測波長273 nm]測定地菍胃內(nèi)漂浮片中的沒食子酸和槲皮素含量，結(jié)果表明，在色譜條件下樣品中沒食子酸和槲皮素分離良好，含量分別為4.86%和0.0312%。劉燕和唐鐵鑫（2011）采用HPLC[流動相為甲醇-0.4%磷酸水溶液（50∶50），色譜柱Shimpack VP-ODS C18，流速1.0 mL/min，檢測波長360 nm]測定野牡丹中槲皮素含量，結(jié)果表明該方法結(jié)果可靠、準(zhǔn)確性高、實(shí)用性強(qiáng)，3個產(chǎn)地的野牡丹樣品槲皮素含量分別為0.3815%、0.3542%和0.4378%。鄒準(zhǔn)等（2012）采用HPLC測定了10個批次羊開口中沒食子酸和鞣花酸含量，得到?jīng)]食子酸和鞣花酸平均加樣回收率分別為100.15%和97.20%，含量范圍分別為0.076～0.332和0.022～0.646 mg/g。范蕾等（2013）采用HPLC測定6個產(chǎn)地畬藥地稔中沒食子酸和槲皮素含量，結(jié)果顯示該方法簡便快速、誤差小、結(jié)果可靠，沒食子酸和槲皮素平均加樣回收率分別為97.72%和99.75%，含量范圍分別為0.85～1.92和0.24～0.33 mg/g。曹丹等（2015）采用SunFireTM C18色譜柱、檢測波長365 nm、流動相為甲醇-0.2%甲酸水溶液、流速1.0 mL/min、柱溫40 ℃的HPLC測得地菍中牡荊素和異牡荊素含量分別為1.25和1.86 mg/g?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】目前尚無關(guān)于遍山紅化學(xué)成分含量測定及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制方面的研究報道?！緮M解決的關(guān)鍵問題】在前期化學(xué)成分研究的基礎(chǔ)上，采用HPLC同時測定遍山紅中沒食子酸、原兒茶酸、二氫楊梅素、蘆丁、楊梅苷、齊墩果酸、槲皮素、山柰酚8種化學(xué)成分含量，建立遍山紅藥材的質(zhì)量控制方法，為其藥用開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

遍山紅藥材分別采自廣西都安縣保安鄉(xiāng)保安村的弄蒼隊、卜凡隊、弄外隊和百外隊，經(jīng)河池學(xué)院化學(xué)與生物工程學(xué)院鄧晰朝副教授鑒定為野牡丹科遍山紅的全株。對照品：槲皮素（批號2015080）和蘆?。ㄅ?0150702）購自上海金穗生物科技有限公司；山柰酚（批號20150410）和楊梅苷（批號20150302）購自西安瑞迪生物科技有限公司；二氫楊梅素（批號27200120）購自西安玉泉生物科技有限公司；齊墩果酸（批號110709200304）和原兒茶酸（批號110809200503）購自中國藥品生物制品檢定所；沒食子酸為自制，純度98.4%。其他試劑均為國產(chǎn)分析純；試驗(yàn)用水為純凈水。主要儀器設(shè)備：Agilent 1260型高效液相色譜儀、Agilent 1260 series色譜工作站、Agilent 8453型紫外可見分光光度計（美國安捷倫公司）；KQ250DE超聲波清洗儀（昆山市超聲儀器有限公司）；98-1-B電熱套（天津市泰斯特儀器有限公司）；AUW220D型十萬分之一天平（日本島津公司）；MilliporeD-Q3超純水機(jī)（美國密理博公司）。

1. 2 試驗(yàn)方法

1. 2. 1 混合對照品溶液制備 稱取適量沒食子酸、原兒茶酸等8種對照品，加入70%乙醇溶解，并定容至10 mL，配制成每1 mL含沒食子酸0.45 mg、原兒茶酸0.21 mg、二氫楊梅素0.37 mg、蘆丁0.10 mg、楊梅苷0.40 mg、槲皮素0.20 mg、山柰酚0.22 mg、齊墩果酸0.23 mg的混合對照品溶液。

1. 2. 2 供試品溶液制備 遍山紅藥材全株用鍘刀切段，自然干燥后打碎成粗粉，過40目篩，備用。精密稱取藥材粉末2 g置于具塞錐形瓶，加入75 mL 70%乙醇，密塞、稱重，設(shè)定溫度80 ℃，電熱套回流提取60 min，放冷稱重，用70%乙醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻、過濾，取續(xù)濾液10 mL，定容至50 mL，經(jīng)0.22 μm微孔濾膜過濾即得。穩(wěn)定性、重復(fù)性、加樣回收率和樣品含量測定試驗(yàn)的供試品制備方法均同上。

1. 2. 3 最大吸收波長確定 取混合對照品溶液，用70%乙醇稀釋100倍后，利用紫外二極管陣列分光光度計進(jìn)行全波長掃描，確定最大吸收波長。

1. 2. 4 色譜條件 ZORBAX SB-C18（2.1 mm×100 mm，3.5 μm）色譜柱，以乙腈（A）-0.2%磷酸（B）為流動相進(jìn)行梯度洗脫（表1），設(shè)定流速0.6 mL/min、檢測波長260 nm、柱溫28 ℃、進(jìn)樣量5 μL。

1. 2. 5 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性確定 精確移取混合對照品溶液2、4、6、8、10、12 mL分別置于25 mL容量瓶中，依次稀釋定容，取上述各溶液按1.2.4分別進(jìn)樣5 μL。以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)，求出線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)。

1. 2. 6 精密度試驗(yàn) 取同一混合對照品溶液重復(fù)進(jìn)樣6次，每次5 μL，測定峰面積，計算精密度。

1. 2. 7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 遍山紅藥材供試液于室溫分別放置2、4、6、8、12、24 h后，按1.2.4測定峰面積。

1. 2. 8 重復(fù)性試驗(yàn) 精確稱取6份同一采集點(diǎn)遍山紅藥材粉末2 g，按1.2.2制備供試液，按1.2.4測定峰面積。

1. 2. 9 加樣回收率試驗(yàn) 精確稱取6份已知含量的遍山紅粉末1 g，分別加入25 mL混合對照品稀釋溶液（含沒食子酸0.060 mg/mL、原兒茶酸0.044 mg/mL、二氫楊梅素0.036 mg/mL、蘆丁0.012 mg/mL、楊梅苷0.072 mg/mL、齊墩果酸0.028 mg/mL、槲皮素0.044 mg/mL、山柰酚0.028 mg/mL），按1.2.4測定供試溶液，計算供試樣液含量和回收率，考察方法的準(zhǔn)確性和可靠性。

回收率（%）=（測得量-已知量）/加入量×100

1. 2. 10 樣品含量測定 按1.2.4測定4個采集點(diǎn)遍山紅中沒食子酸、原兒茶酸、二氫楊梅素、蘆丁、楊梅苷、齊墩果酸、槲皮素、山柰酚8種化學(xué)成分的含量，5次重復(fù)，記錄對照品、樣品色譜圖及峰面積，并用外標(biāo)法計算各采集點(diǎn)遍山紅中8種成分含量的平均值。

M=C×V×n/m

式中，M為遍山紅藥材粉末含量（mg/g），C為供試液質(zhì)量濃度（mg/mL），V為供試液體積（75 mL），n為稀釋因子，m為遍山紅樣品質(zhì)量（g）。

2 結(jié)果與分析

2. 1 最大吸收波長的確定

利用紫外二極管陣列分光光度計，在190～800 nm范圍內(nèi)對混合對照品溶液中沒食子酸、原兒茶酸、二氫楊梅素、蘆丁、楊梅苷、齊墩果酸、槲皮素、山柰酚進(jìn)行全波長掃描，結(jié)果見圖1。由圖1可知，混合對照品溶液最大紫外吸收峰分別為210、260和289 nm；為確保各成分均在其最大吸收波長下進(jìn)行測定，提高分析方法的靈敏度，本研究選擇260 nm作為測定遍山紅中8種化學(xué)成分的最大吸收波長。

2. 2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性考察結(jié)果

由表2可知，遍山紅中沒食子酸、原兒茶酸、二氫楊梅素、蘆丁、楊梅苷、齊墩果酸、槲皮素、山柰酚8種化學(xué)成分進(jìn)樣量范圍分別為7.20～43.20、3.36～20.16、5.92～35.52、1.60～9.60、6.40～38.40、3.68～22.08、3.20～19.20和3.52～21.12 μg/mL；進(jìn)樣線性范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)r均大于0.9990，表明各成分在相應(yīng)進(jìn)樣量濃度范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2. 3 精密度試驗(yàn)結(jié)果

由表3可知，沒食子酸、原兒茶酸、二氫楊梅素、蘆丁、楊梅苷、齊墩果酸、槲皮素和山柰酚的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）分別為0.34%、0.48%、0.36%、0.35%、0.05%、0.79%、0.06%和0.19%，均小于2.00%，表明儀器精密度良好。

2. 4 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

由表4的峰面積可計算得到?jīng)]食子酸、原兒茶酸、二氫楊梅素、蘆丁、楊梅苷、齊墩果酸、槲皮素和山柰酚的RSD分別為0.16%、0.30%、1.26%、0.58%、0.15%、1.24%、0.33%和0.30%，均小于2.00%，說明被測供試品溶液在24 h內(nèi)表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性。

2. 5 重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果

由表5可知，以HPLC測定遍山紅中沒食子酸、原兒茶酸、二氫楊梅素、蘆丁、楊梅苷、齊墩果酸、槲皮素和山柰酚，其RSD分別為0.21%、0.83%、1.98%、0.32%、0.43%、1.14%、0.43%和0.45%，均小于2.00%，表明該方法重復(fù)性良好。

2. 6 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

由表6可知，沒食子酸、原兒茶酸、二氫楊梅素、蘆丁、楊梅苷、齊墩果酸、槲皮素和山柰酚的平均回收率分別為101.72%、96.49%、97.04%、99.79%、99.80%、99.44%、101.52%和96.63%，對應(yīng)的RSD為1.89%、1.10%、1.68%、1.72%、2.06%、1.98%、1.04%和1.52%。說明采用HPLC法測定遍山紅中8種化學(xué)成分含量具有較好的準(zhǔn)確性和可靠性。

2. 7 不同采集點(diǎn)遍山紅中8種化學(xué)成分含量的測定結(jié)果

由圖2可知，8種化學(xué)成分組間分離度均大于1.50，理論塔板數(shù)按各成分計算不少于3000，基本能將待測成分完全分離，達(dá)到色譜分離要求，柱效良好。其中成分4和成分5靠得較近，通過色譜工作站數(shù)據(jù)分析，分離度達(dá)1.73，理論塔板數(shù)大于10000，滿足測試條件。

由表7可知，4個采集點(diǎn)遍山紅的8種化學(xué)成分含量范圍：沒食子酸1.53～1.75 mg/g、原兒茶酸1.11～1.28 mg/g、二氫楊梅素0.99～1.44 mg/g、蘆丁0.34～0.42 mg/g、楊梅苷1.58～1.83 mg/g、齊墩果酸0.63～0.77 mg/g、槲皮素1.03～1.11 mg/g、山柰酚0.65～0.69 mg/g；其中百外隊遍山紅的沒食子酸、二氫楊梅素、蘆丁和槲皮素含量最高，卜凡隊遍山紅的原兒茶酸和齊墩果酸含量最高，弄蒼隊遍山紅的楊梅苷含量最高，而4個采集點(diǎn)的山柰酚含量無明顯差別。總體上來看，4個采集點(diǎn)遍山紅的8種化學(xué)成分含量均無顯著差異（P>0.05），表明所采集的藥材在該地區(qū)無地域性差異。

3 討論

目前，中藥材的化學(xué)成分含量測定方法主要有高效毛細(xì)管電泳法、氣相色譜法、HPLC、超臨界流體色譜法、離子交換色譜法等，其中HPLC具有分離效果好、選擇性和檢測靈敏度高，分析速度快等優(yōu)點(diǎn)，應(yīng)用最廣泛（王新軍等，2014；趙茜和鄒素蘭，2014；祝洪艷等，2015）。本研究采用HPLC測定遍山紅中8種化學(xué)成分含量，在前期進(jìn)行流動相和色譜柱的選擇試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)以乙腈-0.2%磷酸為流動相進(jìn)行梯度洗脫時，8種化學(xué)成分色譜峰峰形及分離效果較好；ZORBAX SB-C18色譜柱分析效果較好，且所耗溶劑較少、分析時間較短，故以乙腈-0.2%磷酸為流動相，采用窄徑柱ZORBAX SB-C18柱在最佳流速0.6 mL/min下進(jìn)行試驗(yàn)，在此條件下基線平穩(wěn)，分離度大于1.50，柱效高，能滿足含量測定的要求。HPLC測得遍山紅中8種化學(xué)成分的平均含量分別為：沒食子酸1.66 mg/g、原兒茶酸1.20 mg/g、二氫楊梅素1.16 mg/g、蘆丁0.37 mg/g、楊梅苷1.74 mg/g、齊墩果酸0.71 mg/g、槲皮素1.07 mg/g、山柰酚0.68 mg/g。與野牡丹科其他植物相比，遍山紅中沒食子酸含量比羊開口沒食子酸含量（0.076～0.332 mg/g）（鄒準(zhǔn)等，2012）高，與地稔中沒食子酸含量（0.85～1.92 mg/g）（劉敏等，2012）相近；遍山紅中槲皮素含量高于地稔中槲皮素含量（0.24～0.33 mg/g）（劉敏等，2012），但低于野牡丹中槲皮素含量（3.542～ 4.378 mg/g）（劉燕和唐鐵鑫，2011）。表明野牡丹科中含有一些共有成分，其含量存在不同程度的差異，通常會影響藥材的品質(zhì)。中藥材所含化學(xué)成分相當(dāng)豐富，目前2015版《中國藥典》所規(guī)定的采用1種或2種成分含量測定方法已不能有效地控制其質(zhì)量，而多種指標(biāo)成分同時測定是今后控制藥材質(zhì)量的一種趨勢。本研究采用HPLC同時測定遍山紅中8種化學(xué)成分含量，能更全面有效控制遍山紅的質(zhì)量；且本研究發(fā)現(xiàn)上述化學(xué)成分在同一色譜條件下均能同時分離測定，該方法簡單快速，重復(fù)性好，基本達(dá)到由多種有效指標(biāo)成分定量測定來控制遍山紅藥材內(nèi)在質(zhì)量的目的，可用于遍山紅的質(zhì)量控制。

本研究僅用有限的對照品初步建立遍山紅中8種化學(xué)成分的HPLC測定方法，為更好地控制遍地紅的藥材質(zhì)量，今后可結(jié)合LC-MS-MS技術(shù)測定盡可能多的指標(biāo)成分，并考察遍山紅藥材全年不同采集時間、不同藥用部位及不同炮制品的有效成分含量。

4 結(jié)論

建立的HPLC可同時測定遍山紅中沒食子酸、二氫楊梅素、原兒茶酸、蘆丁、楊梅苷、齊墩果酸、槲皮素、山柰酚的含量，具有操作簡便、準(zhǔn)確可靠、靈敏度高、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，可用于遍山紅的質(zhì)量控制。

參考文獻(xiàn)：

曹丹，姜巖，林瑞超，馬志強(qiáng)，王金鳳，趙崇軍. 2015. HPLC法測定地菍藥材中牡荊素和異牡荊素的含量[J]. 世界科學(xué)技術(shù)—中醫(yī)藥現(xiàn)代化，17（5）：1012-1015.

Cao D，Jiang Y，Lin R C，Ma Z Q，Wang J F，Zhao C J. 2015. HPLC simultaneous determination of vitexin and isovitexin in Melastoma dodecandrum Lour.[J]. World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica，17（5）：1012-1015.

范蕾，胡劍影，王建偉，余華麗，劉敏，李水福. 2013. 畬藥地稔藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J]. 中華中醫(yī)藥雜志，28（12）：3739-3741.

Fan L，Hu J Y，Wang J W，Yu H L，Liu M，Li S F. 2013. Study on the quality specification of traditional She medicine Melastoma dodecandrum Lour.[J]. China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy，28（12）：3739-3741.

國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會. 1999. 中華本草（第5卷）[M]. 上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社.

Chinese Materia Medica Editorial Board of State Administration of Traditional Chinese Medicine. 1999. Chinese Materia Medica（Vol.5）[M]. Shanghai：Shanghai Scientific and Technical Publishers.

劉敏，李水福，程科軍. 2012. HPLC法測定畬藥地稔藥材中沒食子酸和槲皮素[J]. 中草藥，43（4）：721-723.

Liu M，Li S F，Cheng K J. 2012. Determination of gallic acid and quercetin in traditional She medicine-Melastoma dodecandrum by HPLC[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs，43（4）：721-723.

劉燕，唐鐵鑫. 2011. 野牡丹中槲皮素的測定[J]. 中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，17（12）：85-87.

Liu Y，Tang T X. 2011. Assay of quercetin in Melastoma candidum[J]. Chinese Journal of Experimental Traditional Me-

dicine Formulae，17（12）：85-87.

四川省中藥研究所. 1971. 四川常用中草藥[M]. 成都：四川人民出版社.

Szechwan Institute of Chinese Medicine. 1971. Commonly Used Chinese Herbal Medicine in Sichuan Province[M]. Chengdu：Sichuan People Publishers.

王皓，陳燕方，溫遠(yuǎn)影. 2003. 尖子木化學(xué)成分研究[C]. 中國植物學(xué)會七十周年年會論文摘要匯編（1933-2003）. 北京：高等教育出版社.

Wang H，Chen Y F，Wen Y Y. 2003. Studies on chemical constituents from Oxyspora paniculata[C]. Chinese Abstract Assembly Plant to the Seventieth Anniversary of the Convention（1933-2003）. Beijing：Higher Education Press.

王新軍，何念武，鄧寒霜. 2014. HPLC法測定不同產(chǎn)地桔梗的桔梗皂苷D含量[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報，26（8）：57-60.

Wang X J，He N W，Deng H S. 2014. Determination of content of platycodin D in Platycodon grandiflorum from different areas by HPLC[J]. Acta Agriculturae Jiangxi，26（8）：57-60.

翟小玲. 2007. 地菍胃內(nèi)漂浮片的制備與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[D]. 北京：北京中醫(yī)藥大學(xué).

Zhai X L. 2007. Research on Melastoma dodecandrum Lour. gastric-floating tablet of preparation and quality standard[D]. Beijing：Beijing University of Chinese Medicine.

趙健，仇碩，李秀娟，張翠萍. 2008. 廣西野牡丹科觀賞植物種質(zhì)資源及開發(fā)前景[J]. 河北農(nóng)業(yè)科學(xué)，12（7）：80-82.

Zhao J，Qiu S，Li X J，Zhang C P. 2008. The gemplasm resource of Melastamataceae omamental plants in Guangxi and its development prospect[J]. Journal of Hebei Agricultural Sciences，12（7）：80-82.

趙茜，鄒素蘭. 2014. HPLC法測定紫蘇不同來源不同部位中迷迭香酸的含量[J]. 廣西植物，34（6）：865-868.

Zhao Q，Zou S L. 2014. Determination of rosmarinic acid in different populations and parts of Perilla frutescens by HPLC[J]. Guihaia，34（6）：865-868.

中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會. 1984. 中國植物志[M]. 北京：科學(xué)出版社.

Chinese Flora Editorial Board of Chinese Academy of Sciences. 1984. Flora of China[M]. Beijing：Science Press.

祝洪艷，張力娜，唐姍，林海成，王國麗，何忠梅，郜玉鋼，張連學(xué). 2015. HPLC法測定3個產(chǎn)地酸棗仁中斯皮諾素和酸棗仁皂苷A、B的含量[J]. 藥物分析雜志，35（12）：2099-2104.

Zhu H Y，Zhang L N，Tang S，Lin H C，Wang G L，He Z M，Gao Y G，Zhang L X. 2015. Determination of spinosin，jujubosides A and B in Ziziphi Spinosae Semen from three diffe-

rent origins by HPLC[J]. Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis，35（12）：2099-2104.

鄒準(zhǔn)，壽曉云，閔建國，周艷林，劉華鋼，鄒節(jié)明. 2012. HPLC法測定壯藥羊開口中沒食子酸和鞣花酸的量[J]. 中草藥，43（11）：2206-2208.

Zou Z，Shou X Y，Min J G，Zhou Y L，Liu H G，Zou J M. 2012. Determination of gallic acid and ellagic acid in Zhuang Medicine radix and rhizome of Melastomus normale by HPLC[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs，43（11）：2206-2208.

Liao H W，Liu E G，Wang D Y. 2006. Chemical constituents of the bark of Myrica ruba[J]. Central South Pharmacy，（3）：196.

（責(zé)任編輯 羅 麗）