沙蓬粗寡糖對GK大鼠胰島素抵抗的影響

包書茵，韓淑英，澈力格爾，朝日雅，奧·烏力吉

（1.內(nèi)蒙古民族大學，內(nèi)蒙古通遼 028000；2.華北理工大學基礎(chǔ)醫(yī)學院，河北唐山 063000）

沙蓬粗寡糖對GK大鼠胰島素抵抗的影響

包書茵1，2，韓淑英2，澈力格爾1，朝日雅1，奧·烏力吉1

（1.內(nèi)蒙古民族大學，內(nèi)蒙古通遼 028000；2.華北理工大學基礎(chǔ)醫(yī)學院，河北唐山 063000）

目的 觀察沙蓬粗寡糖（AOS）對糖尿病GK大鼠降血糖、改善胰島素抵抗作用，探討可能機制。方法 將符合2型糖尿病GK大鼠隨機分為模型對照組（MC）、格列苯脲組（GLB）、沙蓬粗寡糖高（AOS-H）、中（AOS-M）、低劑量組（AOS-L），以同源Wistar大鼠為正常對照（NC）。各組均灌胃給藥8周，測定給藥前后空腹血糖（FBG）、隨機血糖（RBG）、糖耐量（OGTT）；給藥8周測定非空腹非糖負荷狀態(tài)的給藥前后血糖及血清胰島素含量變化；結(jié)束時測空腹血清血糖（FPG）、胰島素（FINS）、OGTT，計算胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）；取胰腺常規(guī)石蠟包埋，HE染色，觀察其病理組織形態(tài)改變。結(jié)果 AOS對GK大鼠空腹血糖影響不明顯，但明顯降低隨機血糖，改善糖耐量，增加胰島素敏感性，且明顯減小AUC（P＜0.01），以中劑量效果更好，與格列苯脲相似；AOS能促進胰島素釋放，以AOS中、低劑量促胰島素釋放作用更強，在釋放時間和釋放量上均早于和強于格列本脲；AOS可抑制GK大鼠胰島組織病理改變，增加胰島及胰島細胞數(shù)量，與模型組比較，AOS 給藥組胰島組織結(jié)構(gòu)改變明顯減輕。結(jié)論 AOS具有明顯改善胰島素抵抗和降低血糖作用，其機制可能是與快速促進胰島素釋放，增加胰島細胞增值，改善胰島功能有關(guān)。

沙蓬；粗寡糖；2型糖尿??；GK大鼠；胰島素抵抗；血糖

胰島素抵抗（insulin resistance，IR）是多種代謝疾病的病理基礎(chǔ)，是引起2型糖尿病的關(guān)鍵機制，也是2型糖尿病的主要特征及病情進展的關(guān)鍵因素［1－2］。因此，改善IR藥物的研究備受人們關(guān)注。GK大鼠（Goto-Kakizaki Rat）是國際公認的研究2型糖尿病較為理想的自發(fā)性非肥胖型動物模型［3］，主要表現(xiàn)胰島功能受損及胰島素抵抗，與人類2型糖尿病發(fā)病因素及病程特點尤為相似，在新藥研究與開發(fā)中具有重要價值［4］。沙蓬為藜科植物沙蓬Agriophyllum squarrosum（L.）Moq.的干燥地上部分，是中國蒙醫(yī)常用傳統(tǒng)藥材，具有祛疫、清熱、解毒、利尿功能，亦用于治療消渴病［5－7］。目前尚未見有關(guān)沙蓬提取的粗寡糖（AOS）對胰島素抵抗影響的研究報道。本實驗應用AOS干預自發(fā)2型糖尿病GK大鼠，觀察其對胰島素抵抗的影響，為沙蓬的進一步開發(fā)應用提供研究基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 實驗動物 ♂SPF級自發(fā)性2型糖尿病GK大鼠，體質(zhì)量210～240 g，10～13周齡；購自上海斯萊克斯實驗動物責任有限公司，許可證號：SCXK（滬）2012-0002；♂SPF級Wistar大鼠，體質(zhì)量230 ～240 g，12～13周；購自北京華阜康生物科技股份有限公司，許可證號：SCXK（京）2014-0002；大鼠飼料購自中國解放軍軍事醫(yī)學科學院，許可證號：SCXK（軍）2014-0001；高脂飼料由北京華阜康生物科技股份有限公司提供，合格證號：SCXK（京）2009-0008；均于華北理工大學動物實驗中心SPF級屏障實驗室，以每籠5只進行飼養(yǎng)。

1.2 受試藥物 沙蓬粗寡糖（AOS）由內(nèi)蒙古蒙醫(yī)藥工程技術(shù)研究院提供。為沙蓬稀醇提取，大孔樹脂純化，脫色得粗寡糖。

1.3 主要藥品、試劑 格列苯脲（glibenclamide）（天津太平洋制藥有限公司，批號：1301120），葡萄糖氧化酶試劑盒（長春匯力生物技術(shù)有限公司，批號：20140505），CHO、TG、HDL-C、LDL-C試劑盒（北京瑞正善達生物工程技術(shù)有限公司，批號：20140330），胰島素試劑盒（美國拜力生物科技有限公司，批號：20150505）。

1.4 實驗儀器 電子天平（型號FA2104N，上海菁海儀器有限公司），高速低溫離心機（型號5180R，德國Eppendorf公司），實驗室超純水制備系統(tǒng)（型號RODI-P，上海和泰儀器有限公司），生物安全柜（型號BSC-1300IIA2，上海博訊實業(yè)有限公司），γ放射免疫計數(shù)器（型號GC-1200，安徽中科中佳科學儀器有限公司），羅氏血糖儀及試紙（德國羅氏診斷有限公司），生物組織自動石蠟包埋機（型號TB718，湖北泰維科技實業(yè)有限公司），輪轉(zhuǎn)式切片機（型號RM2245，德國Leica公司），電熱恒溫鼓風干燥機（型號DGG-9140A，上海森信實驗儀器有限公司），高倍顯微鏡（型號OLYMPUS BX5，日本奧林巴斯有限公司），真彩病理圖像分析系統(tǒng)（型號HMIAS-2000，高騰科技有限公司）。

2 方法

2.1 給藥劑量與給藥途徑設計 受試藥物沙蓬原藥材臨床用法與用量為65 g·d－1，相當于1.083 g ·kg－1生藥（成人體質(zhì)量按60 kg計算）。每克沙蓬粗寡糖（AOS）相當14.4 g生藥，成人AOS用量為0.075 g·kg－1。大鼠與人的等效劑量比為6.3∶1，故大鼠治療的等效劑量為0.475 g·kg－1（0.48），相當6.83 g·kg－1生藥。大鼠實驗時采用3個劑量，分別相當于人臨床用量的2倍、1倍（等倍）及0.5倍。給藥量分別為AOS 0.96、0.48、0.24 g·kg－1。給藥途徑為口服（灌胃），容量為5 ml·kg－1，每天一次，均為上午8～10點給藥。格列苯脲給藥劑量為1.2 mg·kg－1（為人用量6.3倍，相當于人等效量），給藥容積為5 ml·kg－1。

2.2 2型糖尿病模型的確定標準 大鼠隨機血糖及糖負荷2 h血糖均高于11.1 mmol·L－1，即認為已形成2型糖尿病。由于GK大鼠空腹血糖升高不明顯（在4～8 mmol·L－1），隨機血糖有1/2在11.1 mmol·L－1，糖負荷2 h有3/4血糖在11.1 mmol· L－1以上，因此隨機血糖在11.1 mmol·L－1以下大鼠給予高脂飼料誘導4～5周。65只GK大鼠經(jīng)5周的高脂飼料誘導，有53只（81.5％）大鼠隨機血糖及糖耐量2 h血糖均高于11.1 mmol·L－1，即符合2型糖尿病模型。

2.3 分組與給藥 將符合成模標準的53只大鼠，剔除體重較低或較高及血糖過高的3只大鼠，余下50只，按隨機數(shù)字表法分為5組，加上正常對照組共6組，每組10只。分別為：模型對照組（MC）、格列苯脲組（GLB）、AOS高（AOS-H）、中（AOS-M）、低劑量組（AOS-L）、正常對照組（NC）。分組后，按設計灌胃給予相應藥物，模型對照組與正常對照組每天灌胃同容積蒸餾水。各組均在上午8～10點灌胃給藥，每天1次，連續(xù)8周。

2.4 觀察指標

2.4.1 空腹和隨機血糖 分別于給藥前、后用羅氏血糖儀測定禁食16 h空腹血糖（fasting blood glu-cose，F(xiàn)BG）和非禁食的隨機血糖（random blood glu-cose，RBG）（上午8：00給藥后30 min）。

2.4.2 非葡萄糖負荷的血糖、胰島素變化及糖耐量（OGTT） 給藥7周進行非禁食情況下（上午8：00點）灌胃給藥，分別于給藥前（0 min）及給藥后30、60和120 min用毛細管取眼眶靜脈叢血，用血糖儀測定血糖，同時分離血清用放免法測定0、60、120 min的血清胰島素含量，目的是觀察藥物對胰島素釋放的影響及與血糖關(guān)系；OGTT：給藥8周（處死之前）用血糖儀測定葡萄糖耐量：即前一天晚上斷食不斷水，更換墊料，斷食16 h后，用血糖儀檢測0 min血糖值，灌胃葡萄糖（2.5 g·kg－1）后30、60、120 min血糖值，根據(jù)血糖值和梯形面積求和法計算曲線下面積（AUC），其中G0、G30、G60、G180為各點血糖值。AUC＝15（G0＋G30）＋15（G30＋G60）＋30 （G60＋G120）。

2.4.3 血清空腹血糖（FPG）、胰島素（FINS）和胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR） 給藥8周后禁食12 h，大鼠用10％水合氯醛以3 ml·kg－1腹腔注射麻醉，經(jīng)腹主動脈取血并分離血清，用葡萄糖氧化酶法測定FPG（fasting plasma glucose，F(xiàn)PG），放射免疫法測定FINS含量并計算HOMA-IR，HOMA-IR＝（FPG× FINS）/22.5。

2.4.4 大鼠胰腺組織HE染色病理觀察 大鼠取血后，立即剖腹取胰腺，固定于4％多聚甲醛中（72 h以上）。將胰腺從固定液中取出，作常規(guī)石蠟包埋，HE染色。將染色的組織切片置于OLYMPUS BX50高倍顯微鏡下觀察并用病理圖像分析系統(tǒng)記錄和拍照組織形態(tài)改變。

3 結(jié)果

3.1 AOS對GK大鼠FBG和RBG的影響 Tab 1顯示，給藥前后所有GK大鼠FBG和RBG均明顯高于正常對照組（P＜0.01），給藥前、后各GK大鼠間FBG無差異（P＞0.05）；AOS干預8周后，與模型組比較，AOS各劑量組大鼠RBG明顯降低（P＜0.01），AOS 3個劑量之間無明顯量效關(guān)系（P＞0.05），以中劑量效果更好，與格列本脲相近。

Tab 1 Effect of AOS on FBG and RBG of GK rats（±s，n＝10；mmol·L－1）

Tab 1 Effect of AOS on FBG and RBG of GK rats（±s，n＝10；mmol·L－1）

△△P＜0.01 vs normal group；**P＜0.01 vs model group

Group Dose /mg·kg－1 FBG RBG 0 wk 8 wk 0 wk 8 wk CN － 4.33±0.54 4.62±0.53 5.25±0.49 5.60±0.54 MC － 5.66±0.58△△ 5.64±0.29△△ 13.45±1.57△△ 17.49±2.88△△GLB 1.2 5.61±0.97△△ 5.84±0.97△△ 13.57±1.52△△ 〗9.07±1.07**△△AOS-H 960 5.68±1.13△△ 5.71±0.43△△ 13.65±2.48△△ 11.58±3.02**△△AOS-M 480 5.89±0.91△△ 5.63±0.50△△ 13.97±2.70△△ 11.10±3.85**△△AOS-L 240 5.63±1.51△△ 5.67±0.64△△ 13.87±2.55△△ 12.39±1.97**△△

Tab 2 Effect of no sugar load status blood glucose and elevated blood sugar percentage of GK rats（±s，n＝7；mmol·L－1）

Tab 2 Effect of no sugar load status blood glucose and elevated blood sugar percentage of GK rats（±s，n＝7；mmol·L－1）

△△P＜0.01 vs normal group；*P＜0.05，**P＜0.01 vs model group；“－”indicates reduction

Group 0 min 30 min（↑％） 60 min（↑％） 120 min（↑％）CN 5.31±0.55 5.54±0.55 （4.35±0.39）5.77±0.43 （8.41±0.47）5.66±0.64 （6.68±0.57）9.72±1.4.24△△**（－17.64±2.48△△**）AOS-M 11.04±2.82△△** 10.17±1.87△△**（－7.74±1.28△△**）MC 14.28±2.99△△ 16.08±1.78△△（12.61±1.27△△）17.18±0.94△△（20.58±3.23△△）8.86±2.09△△**（－21.10±3.35△△**）AOS-H 12.13±1.95△△* 11.29±1.48△△**（－6.76±1.05△△**）16.28±3.41△△（14.71±2.06△△）GLB 11.23±2.28△△** 11.06±2.05△△**（－1.52±0.54△△**）10.19±2.18△△**（－9.53±2.35△△**）11.17±1.11△△**（－7.44±1.08△△**）8.74±0.82△△**（－20.83±3.53△△**）AOS-L 12.41±2.851△△* 11.38±2.04△△**（－9.65±2.10△△**）9.28±1.10△△**（－15.94±2.47△△**）11.51±2.27△△**（－7.25±1.59△△**）10.68±1.69△△**（－13.94±2.25△△**）

Tab 3 Effect of no sugar load status serum insulin and elevated serum insulin percentage of GK rats（±s，n＝7；μg·L－1）

Tab 3 Effect of no sugar load status serum insulin and elevated serum insulin percentage of GK rats（±s，n＝7；μg·L－1）

△P＜0.05，△△P＜0.01 vs normal group；*P＜0.05，**P＜0.01 vs model group；“－”indicates reduction

Group 0 min 30 min（↑％） 60 min（↑％） 120 min（↑％）CN 0.99±0.35 1.07±0.28 （8.01±1.51）1.31±0.181 （32.36±0.47）1.35±0.15 （36.3±4.46）1.13±0.35 （94.82±16.83△△**）AOS-M 0.42±0.22△* 0.64±0.28△（52.38±6.26△△**）MC 0.86±0.35 0.85±0.36△（－1.11±0.33△△）0.82±0.32△△（－4.65±1.26△△）1.16±0.34 （78.89±12.62△△**）AOS-H 0.58±0.19 0.61±0.27△（5.17±1.12△△**）1.01±0.31△（17.09±4.37△△）GLB 0.65±0.47 0.80±0.29△（23.08±3.83△△**）0.92±0.36 （41.45±6.27△**）0.63±0.22△△（8.63±2.41△△**）1.07±0.26△△（154.75±15.74△△**）AOS-L 0.32±0.18△△* 0.49±0.23△△（53.13±8.46△△**）0.68±0.31△△（61.91±9.41△△**）0.52±0.23△△（62.65±8.35△△**）0.93±0.32△（190.63±15.51△△**）

3.2 AOS對GK大鼠非葡萄糖負荷的血糖、胰島素的影響 Tab 2～3和Fig 1～2為非禁食非糖負荷情況下觀察（上午8點）灌胃給藥前（0 min）、后（30、60、120 min）血糖和血清胰島素變化情況，目的是觀察AOS對胰島素釋放的影響及與血糖的關(guān)系。結(jié)果顯示。正常對照大鼠血糖略有升高，而GK模型組大鼠血糖明顯升高，可能是由于眼眶取血對大鼠應激性刺激使血糖升高；格列本脲及AOS各劑量組大鼠血糖并未升高；反而有不同程度降低。與灌胃給藥前比較，灌胃給藥30 min AOS各組血糖就開始降低，血糖降低百分率明顯高于格列本脲；給藥60 min血糖降低百分率以AOS中劑量最明顯（15.94％），其次是格列本脲（9.53％）；120 min血糖降低百分率AOS中劑量組（20.83％）與格列本脲（21.10％）非常相近，其次為AOS高（17.64％）、低（13.94％）劑量，見Fig 1、Tab 2。

Fig 1 Effect of AOS on no sugar load status before and after dosing changes in blood glucose of GK rats

從Tab 3和Fig 2可見，正常大鼠胰島素水平隨著血糖升高而增加，以120 min增加更明顯；與0 min比較，模型對照組胰島素升高百分比在30 min 和60 min為0，在120 min有低幅度升高；格列本脲和AOS各劑量組均能升高血清胰島素水平，并且血清胰島素含量與血糖水平呈負相關(guān)；雖然在不同劑量AOS組各時間點胰島素含量上均低于格列本脲，但與0 min比較，AOS各點胰島素含量提高百分率均明顯高于格列本脲（P＜0.01），以AOS中、低劑量升高更明顯。提示AOS可促進胰島素釋放，在釋放時間和釋放量上均早于和強于格列本脲。

Fig 2 Effect of AOS on no sugar load status before and after dosing changes in serum insulin level of GK rats

3.3 AOS對GK大鼠OGTT的影響 給藥8周后OGTT結(jié)果顯示，與模型組比較，AOS對葡萄糖負荷后的血糖升高均有明顯抑制作用，以AOS中劑量血糖降低幅度最大（P＜0.01），AUC最?。黄浯问茿OS低、高劑量（P＜0.01）；AOS降血糖作用好于格列本脲（P＜0.05）；AOS各劑量間差異不明顯，見Tab 4。

3.4 AOS對GK大鼠FPG、FINS及HOMA-IR的影響 給藥8周后禁食12 h，各組GK大鼠FPG明顯高于正常對照組（P＜0.01），與模型組比較，GLB 和AOS-M組FPG值明顯降低（P＜0.05），AOS-H與AOS-L組FPG值也較低，但與模型組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；FINS含量以正常對照組最高，明顯高于各組GK大鼠（P＜0.05，P＜0.01），各藥物干預組FINS含量與模型組比較無統(tǒng)計學差異；而各藥物干預組HOMA-IR均低于模型組（P＜0.05，P＜0.01），其中以AOS-M最低，AOS高、中、低劑量組間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見Tab 5。

Tab 4 Effect of AOS on glucose tolerance of GK rats（±s，n＝10；mmol·L－1）

Tab 4 Effect of AOS on glucose tolerance of GK rats（±s，n＝10；mmol·L－1）

△△P＜0.01 vs normal group；*P＜0.05，**P＜0.01 vs model group

Group 0 min 30 min 60 min 120 min AUC CN 4.62±0.53 6.59±0.61 6.91±0.70 5.48±0.74 742.35±82.9 MC 5.64±0.29△△ 16.10±1.73△△ 15.84±1.59△△ 15.31±1.5△△ 1827.30±185.36△△GLB 5.84±0.97△△ 14.47±1.33△△* 13.71±1.79△△** 9.11±2.05△△** 1407.96±186.38△△**AOS-H 5.71±0.43△△ 12.81±2.14△△** 11.56±2.08△△** 10.19±1.90△△** 1295.77±221.38△△**AOS-M 5.63±0.50△△ 11.05±2.74△△** 10.02±2.36△△** 8.12±1.13△△** 1110.45±229.23△△**AOS-L 5.67±0.64△△ 12.43±3.00△△** 10.81±1.71△△** 9.30±1.83△△** 1222.95±231.33△△**

Tab 5 Effect of AOS on FPG，F(xiàn)INS and HOMA-IR of GK rats（±s，n＝10）

Tab 5 Effect of AOS on FPG，F(xiàn)INS and HOMA-IR of GK rats（±s，n＝10）

△P＜0.05，△△P＜0.01 vs normal group；*P＜0.05，**P＜0.01 vs model group

Group FPG/mmol·L－1 FINS/ng·L－1HOMA-IR CN 4.91±0.52 0.75±0.16 0.16±0.04 MC 6.87±0.60△△ 0.59±0.16△ 0.18±0.05△GLB 6.21±0.49△△* 0.62±0.17△ 0.17±0.01*AOS-H 6.29±0.57△△ 0.57±0.15△△ 0.16±0.03*AOS-M 6.16±0.62△△* 0.56±0.11△△ 0.15±0.04**AOS-L 6.28±0.67△△ 0.58±0.17△ 0.16±0.03*

3.5 AOS對GK大鼠胰腺病理組織結(jié)構(gòu)的影響正常大鼠胰島為圓形、橢圓形細胞團，與周圍組織界限清晰，形態(tài)規(guī)則，胰島數(shù)及胰島內(nèi)細胞數(shù)較多，胰島細胞胞質(zhì)豐富，核圓、較大且居中，未見異常（Fig 3A）；GK模型大鼠胰島與周圍組織界限模糊不清，形態(tài)不規(guī)則，部分胰島細胞完全萎縮，胞質(zhì)疏松或空泡化，間質(zhì)明顯增生，胰島組織出現(xiàn)明顯的纖維化（Fig 3B）；與模型組相比，格列本脲（Fig 3C）組大鼠胰島形態(tài)有所改善，但也存在胰島數(shù)量減少，形狀不規(guī)則，胰島內(nèi)細胞數(shù)和體積較模型組有所增加；AOS高（Fig 3D）、中（Fig 3E）、低劑量（Fig 3F）組大鼠胰島與周圍組織界限較清晰，形態(tài)稍不規(guī)則，胰島細胞排列基本整齊，細胞間質(zhì)少量增生，同時可見散在胰島細胞團塊增殖，特別是在血管周圍出現(xiàn)胰島細胞增殖現(xiàn)象，尤其是AOS中劑量胰島體積較大，與周圍組織分布界線較清晰，胰島細胞排列較整齊，出現(xiàn)散在胰島細胞團，胰島細胞增殖現(xiàn)象更明顯。

4 討論

2型糖尿病早期階段以胰島素抵抗為主，隨著病程延長，胰島β細胞功能逐漸減退，胰島素分泌減少，使得2型糖尿病病情進一步惡化。目前對糖類的降血糖作用研究主要集中在多糖成分，而對寡糖的降血糖作用研究尚較少［8］。更未見有關(guān)沙蓬粗寡糖（AOS）對胰島素抵抗影響的研究報道。本實驗應用AOS高、中、低劑量干預GK大鼠，考察了AOS的降糖和改善胰島素抵抗作用，并探討可能機制。

本實驗顯示，GK大鼠主要特點為空腹血糖升高不明顯，并且隨著空腹時間延長，血糖反而逐漸降低；但餐后血糖及非空腹血糖（隨機血糖）明顯升高，隨著大鼠周齡的增加而升高；同時發(fā)現(xiàn)胰島及β細胞數(shù)量減少、有明顯胰島素抵抗，非常符合2型糖尿病特點，與文獻報道一致［9－10］。AOS能明顯降低GK大鼠隨機血糖（P＜0.01），增加胰島素釋放，改善胰島素抵抗，促進胰島細胞增殖/和抑制胰島細胞凋亡。

Fig 3 Effect of AOS on pancreatic pathology organization structure of GK rats

AOS對GK大鼠空腹12 h血糖有降低作用，而對空腹16 h血糖無影響，但能明顯降低隨機血糖及糖負荷后的血糖，說明AOS對糖尿病GK大鼠血糖有穩(wěn)定作用。AOS各劑量之間無明顯量效關(guān)系（P ＞0.05），其中，中劑量使大鼠RBG下降最為明顯，與格列本脲的結(jié)果相近，說明其效果更好。為探討AOS降糖作用的機制，考察了在非糖負荷非空腹狀態(tài)下，應用AOS后血糖變化與胰島素釋放情況，排除了糖負荷刺激胰島細胞釋放胰島素的可能。結(jié)果發(fā)現(xiàn)GK模型大鼠血糖明顯升高，可能是由于眼眶取血對大鼠應激性刺激使血糖升高，同時GK模型大鼠血清胰島素在30～60 min低于0 min，到120 min較0 min增加了17％，這符合2型糖尿病特點；灌胃給藥60 min，AOS中劑量的血糖降低百分率比格列本脲的大；120 min時AOS中劑量組與格列本脲相近；各劑量AOS均能升高血清胰島素水平，并且血清胰島素含量與血糖水平呈負相關(guān)；與0 min比較，AOS給藥組各點胰島素含量提高百分率均明顯高于格列本脲（P＜0.01），以AOS中、低劑量升高更明顯。提示AOS可促進胰島素釋放，在時間和劑量上均早于和強于格列本脲。進一步OGTT實驗也顯示，AOS對糖負荷后的血糖升高也有抑制作用，明顯降低AUC，其中AOS中劑量降低AUC最明顯。2型糖尿病患者胰島素分泌特點是，第一時相項分泌消失，第二時相項分泌遲緩（峰值后移）［11－12］。本研究證明AOS應用后第一時相項即能促進胰島素分泌，提示其對糖尿病餐食血糖調(diào)節(jié)可能更好。

令人興奮的是不管是空腹還是非空腹血清胰島素，在給AOS前均低于模型組，進一步證明AOS促進胰島素的釋放。同時發(fā)現(xiàn)，AOS能降低HOMA-IR，以AOS-M最明顯，表明AOS能降低胰島素抵抗，增加胰島素敏感性，降糖作用可能還存在其它降糖機制。

胰島β細胞具有一定的自我復制和再生功能，且不需要特定的祖細胞或干細胞參與分化［13－14］，因此如何長期維持胰島β細胞的數(shù)量和正常功能以及促進β細胞增殖已成為治療糖尿病的關(guān)鍵因素之一［15－16］。有研究表明，維持胰島細胞功能最直接有效的方法就是利用藥物或其他因子在胰腺內(nèi)刺激胰島β細胞增殖或誘導其他細胞向胰島β細胞轉(zhuǎn)化［17］。本研究通過顯微鏡觀察胰島組織病理形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，AOS可使糖尿病GK大鼠胰島組織病變有不同程度改善，使胰島體積增大，增加胰島及胰島細胞數(shù)量，特別是在血管周圍出現(xiàn)散在胰島細胞團塊，認為AOS可促進胰島細胞增殖?？赡苁茿OS中的成分刺激胰島β細胞增殖或誘導其他細胞向胰島β細胞轉(zhuǎn)化或抑制胰島β細胞凋亡，值得深入研究。

綜上所述，AOS對自發(fā)性2型糖尿病GK大鼠有明顯降低隨機血糖、改善糖耐量、降低胰島素抵抗，其中中劑量的結(jié)果與格列本脲相近，或是優(yōu)于格列本脲，說明AOS中劑量效果最好。同時中劑量組比高劑量組的劑量小一倍，從經(jīng)濟方面考慮，其亦為最佳劑量。AOS作用機制可能是快速促進胰島素釋放，促進胰島細胞增殖，但確切機制有待進一步研究。

（致謝：本研究及論文實驗內(nèi)容是在華北理工大學實驗動物中心、基礎(chǔ)醫(yī)學院、河北省慢性疾病重點實驗室及唐山市慢性病臨床基礎(chǔ)研究重點實驗室完成的，在藥物提取及制備過程中白明剛老師給予很大幫助及支持，在此一并表示衷心感謝?。?/p>

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Effects of agiophyllum oligo saccharides on insulin resistance of Goto-Kakizaki rats

BAO Shu-yin1，2，HAN Shu-ying2，Cheli-geer1，Chao-riya1，AO·Wu-liji1
（1.Inner Mongolia University for Nationalities，Tongliao Inner Mongolia 028300，China；2.School of Basic Medical Sciences，North China Universitiy of Science and Technology for Hebei，Tangshan Hebei 063000，China）

Aim To observe the effect of agiophyllum oligo saccharides（AOS）on reducing blood sugar，im-proving insulin resistance on diadetic Goto-Kakizaki （GK）rats，and to explore the possible mechanism.Methods The type 2 diabetes GK rats were divided into six groups：model control group（MC），Glenn benzene urea group（GLB），high agriophyllum squar-rosum coarse oligosaccharides（AOS-H），medium （AOS-M），low dose group（AOS-L），homologous Wistar rats as normal control（NC）.All animals were administered with AOS by oral gavage，for 8 weeks.The fasting blood glucose（FBG），random blood sugar （RBG），glucose tolerance（OGTT）were tested before and after administration.No fasting sugar load status before and after dosing changes in blood glucose and serum insulin level in rats were measured in the previ-ous 8 weeks.At the end of administration，the fasting serum glucose（FPG），insulin（FINS），OGTT and in-sulin resistance index（HOMA IR）in fasting rats were analyzed.Lastly，the pathological changing of pancreas was observed by HE staining.Results The blood glu- cose of fasting GK rats was not influenced after using AOS.However，the random blood glucose significantly reduced，the glucose tolerance was improved and AUC was obviously reduced（P＜0.01）after using AOS.The best effect was on AOS-M group，which was simi-lar with Glenn benzene urea.Through our research，we found AOS could promote release of insulin.This best effect was on AOS-M and AOS-L groups，and the time and quantity of release were better than Glenn benzene urea.Finally，AOS inhibited the pathological changes of islet tissue on GK rats，increased the quan-tity of pancreas and islet cells.Compared with model group，the changing of islet structure was significantly reduced in AOS group.Conclusion AOS could obvi-ously improve insulin resistance and lower blood sugar，and the mechanism of this effect may be related with rapidly promoting insulin release，increasing the islet cell proliferation，and improving the function of islet.Key words：agriophylli herba；crude oligosaccha-rides；type 2 diabetes mellitus；Goto-Kakizaki rat；insu-lin resistance；blood sugar

時間：2016－2－26 10：20 網(wǎng)絡出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20160226.1020.042.html

10.3969/j.issn.1001－1978.2016.03.021

A

1001－1978（2016）03－0403－07

E-332；R284.1；R322.57；R458.5；R587.1

2015－10－12，

2015－11－10

國家“十二五”科技支撐項目（No 2012BAI28B01）

包書茵（1988－），女，碩士，助教，研究方向：中蒙藥藥理學，Tel：0475-8314242，E-mail：325110003＠qq.com；奧·烏力吉（1961－），男，博士，教授，博士生導師，研究方向：蒙醫(yī)內(nèi)治法研究與蒙藥新藥研發(fā)，Tel：0475-8314240，E-mail：wuliji＠126.com