內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激致2型糖尿病缺血心肌易損性增強(qiáng)的機(jī)制研究

顧晨，李俊明

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內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激致2型糖尿病缺血心肌易損性增強(qiáng)的機(jī)制研究

顧晨，李俊明

摘要

Mechanism of Increased Myocardial Ischemic Vulnerability in Mice Type 2 Diabetes Mellitus Induced by Endoplasmic Reticulum Stress

GU Chen, LI Jun-ming.
Three Gorges University People’s Hospital, Yichang (443002), Hubei, China
Corresponding Author: LI Jun-ming, Email: lijunming@medmail.com.cn

Abstract

Objective: To study the relationship between endoplasmic reticulum stress (ERS) and adiponectin; to explore the role of ERS for increasing myocardial ischemic vulnerability in type 2 diabetes mellitus (DM) mice.

Methods: Type 2 DM model was established by high fat diet with streptozotocin (STZ) injection. A total of 35 C57BL/6J male type 2 DM mice were divided into 4 groups: ①Control group, n=5. ②Tauroursodeoxycholic acid (TUDCA) group, ③Thapsigargin (TG) group and ④Normal saline group. The mice in Groups ②, ③, ④ were fed by high fat and high glucose diet by injecting streptozotocin (STZ), in the last 3 weeks and respectively received intraperitoneal injections of TUDCA (250 mg/kg), thapsigargin (TG) (300 μg/kg) and normal saline twice a day, n=10 in each group. Then myocardial infarction (MI) model was established in 5 mice from each group. 72 hours later, the MI ranges were measured, serum levels of adiponectin were detected, mRNA expressions of adiponectin and CHOP in myocardial tissue were examined.

Results: The MI range in TUDCA group (21.47 ± 2.85) % and in Normal saline group (39.92 ± 4.28) % were both lower than TG group (66.56 ± 8.15) %, both P<0.01. Before MI occurrence, serum levels of adiponectin in TUDCA group (79.25 ± 6.40) pg/ml and in Normal saline group (70.23 ± 4.15) pg/ml were both higher than TG group (62.64 ± 5.70) pg/ml,both P<0.01; serum levels of adiponectin in each group were higher than they were 72 h after MI. In each group, the mRNA expression and protein content of adiponectin in myocardial tissue were constant to serum adiponectin; while the mRNA expression and protein content of CHOP was opposite to serum adiponectin.

Conclusion: ESR could increase myocardial vulnerability in type 2 DM mice which might be related to down-regulating adiponectin expression.

Key words Diabetes mellitus, Type 2; Endoplasmic reticulum; stress; Myocarial ischemia

(Chinese Circulation Journal, 2016,31:91.)

高血糖和高脂血癥不僅導(dǎo)致血管損傷從而誘發(fā)缺血性心臟病，且直接損害心肌細(xì)胞，導(dǎo)致在缺血再灌注后更廣泛的心肌梗死和更嚴(yán)重的心力衰竭[1-5]。脂聯(lián)素是一種主要由脂肪組織合成、分泌的脂肪細(xì)胞因子，具有調(diào)節(jié)代謝、抗炎及心血管保護(hù)作用，血清脂聯(lián)素水平降低能導(dǎo)致心肌纖維化的發(fā)生、發(fā)展[6]。多項(xiàng)研究表明糖尿患者血漿脂聯(lián)素水平降低可能是導(dǎo)致缺血性心臟病的關(guān)鍵因素[7，8]。脂聯(lián)素通過(guò)多個(gè)信號(hào)通路發(fā)揮其心血管的保護(hù)作用[9]。因此，上調(diào)脂聯(lián)素水平能夠減輕糖尿病心肌缺血損傷，但對(duì)于脂聯(lián)素的上游調(diào)節(jié)機(jī)制仍不是很清楚。缺氧等多種因素導(dǎo)致未折疊或錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔蓄積，致使內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能發(fā)生改變，統(tǒng)稱內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）[10-12]。而?；敲撗跄懰幔═UDCA）是一種緩解ERS的化學(xué)分子伴侶，能減輕ERS狀態(tài)下的巨噬細(xì)胞的脂質(zhì)蓄積[13]，毒胡蘿卜內(nèi)酯是一種通過(guò)抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Ca2+-ATP酶導(dǎo)致ERS的化學(xué)抑制劑。凋亡相關(guān)蛋白C/EBP 同源蛋白（CHOP）是ERS的一種特征性標(biāo)志分子。心肌缺血/再灌注損傷（IRI）時(shí)，ERS信號(hào)通路被激活，分子伴侶以及促凋亡信號(hào)分子表達(dá)增加[14-16]。TUDCA能降低CHOP的表達(dá)即緩解ERS，明顯緩解毒胡蘿卜內(nèi)酯所引起的脂聯(lián)素水平的下調(diào)[17]。

基于上述研究結(jié)果，我們提出假設(shè)：2 型糖尿病心肌缺血可以引發(fā)ERS，ERS加重可下調(diào)血漿與心肌脂聯(lián)素水平，進(jìn)而導(dǎo)致缺血心肌易損性增加。

1　材料與方法

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組：SPF級(jí)6周齡健康C57BL/6J雄性小鼠35只，購(gòu)于武 漢 大 學(xué) 動(dòng) 物 實(shí) 驗(yàn) 中 心。小鼠在無(wú)特定病原體的環(huán)境中喂養(yǎng)，給予充足飲水，室溫在22～24℃，光照時(shí)間（上午8:00起至下午8:00）共12小時(shí)照明、12小時(shí)黑暗的燈光明暗周期。采用高糖高脂飲食聯(lián)合鏈脲佐菌素（STZ）誘導(dǎo)小鼠發(fā)生高血糖后，小鼠稱重后按隨機(jī)數(shù)字表法將糖尿病小鼠分為對(duì)照組（n=5）、生理鹽水組（n=10）、TUDCA組（n=10）和毒胡蘿卜內(nèi)酯組（n=10）。在高糖高脂飼料喂養(yǎng)的最后3周，TUDCA組、毒胡蘿卜內(nèi)酯組和生理鹽水組分別經(jīng)腹腔注射給予 TUDCA （250 mg/kg）、毒胡蘿卜內(nèi)酯（300 μg/kg）和等量生理鹽水，每日兩次（上午8:00和下午8:00），連續(xù)給藥3周。

主要實(shí)驗(yàn)材料和試劑：高糖高脂飼料購(gòu)于武漢春龍實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料機(jī)械經(jīng)營(yíng)部；STZ購(gòu)于北京博愛(ài)港商貿(mào)中心；便 攜 式 穩(wěn) 步 系 列 血 糖 儀 及血糖試紙購(gòu)于強(qiáng) 生（上海）醫(yī) 療 器 材 有 限 公 司 ；戊巴比妥鈉購(gòu)于德國(guó)Merck公司；TUDCA購(gòu)于美國(guó)Calbiochem公司；毒胡蘿卜內(nèi)酯購(gòu)于美國(guó) ALEXIS Biochemicals公司；小鼠脂聯(lián)素酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試劑盒購(gòu)于上海偉進(jìn)生物科技有限公司；One Step SYBR PrimeScript RT-PCR Kit Ⅱ購(gòu)于大連寶生物工程有限公司；引物購(gòu)于上海生工生物工程有限公司；脂聯(lián)素抗體購(gòu)于美國(guó)ABcom公司；CHOP抗體購(gòu)于美國(guó)Proteintech公司。

2 型糖尿病動(dòng)物模型：采用高糖高脂飲食聯(lián)合STZ誘導(dǎo)小鼠發(fā)生高血糖。先給予35只小鼠標(biāo)準(zhǔn)的嚙齒類動(dòng)物飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，1周后給予脂肪含量為60%的高糖高脂飼料喂養(yǎng)，于第3周末腹腔注射STZ 85 mg/kg（連續(xù)注射兩天，1 次/天），給藥后繼續(xù)給予脂肪含量為60%的高糖高脂飼料喂養(yǎng)，高糖高脂飼料喂養(yǎng)共3個(gè)月。應(yīng)用便攜式穩(wěn)步系列血糖儀檢測(cè)空腹血糖并記錄體重[18，19]時(shí)間點(diǎn)為：給藥前及第4、5、7個(gè)周末，最后為第3個(gè)月末。血 糖 ≥16.7 mmol/L 認(rèn) 為糖 尿 病 模 型 建 立 成 功。

小鼠在體心肌梗死模型：糖尿病模型建立成功后，除對(duì)照組外，從其他各組的10只小鼠中隨機(jī)選5只進(jìn)行心肌梗死手術(shù)。用2%戊 巴比妥鈉溶液經(jīng)腹腔給藥麻醉小鼠 ，剪去小鼠胸前毛，快速開(kāi)胸，開(kāi)口處于小鼠左側(cè)第4肋間，迅速擠出心臟，用6-0絲 線 在 小 鼠 冠 狀動(dòng)脈 左 前 降 支 距 根 部2～3 mm處打一死結(jié)造成心肌缺血，迅速關(guān)閉小鼠胸腔。

標(biāo)本的收集與處理：（1）血清的收集與處理：心肌梗死72 h后，用2%戊巴比妥鈉經(jīng)腹腔注射將小鼠麻醉后，將小鼠頭朝下倒置片刻使其頭部充血，再用無(wú)齒眼科鑷子摘取小鼠眼球取血，將血至于1.5 ml離心管中室溫靜置30 min后，再放于4℃冰箱中靜置30 min后，離心15 min（8000 g），取上清后，分組標(biāo)記后，-80℃冰箱保存，后用ELISA法檢 測(cè)血 清 脂 聯(lián) 素 含 量 。（2）心肌的收集與處理：心肌梗死72 h后，用2%戊 巴 比 妥 鈉 將小鼠麻醉后，打開(kāi)小鼠胸腔，分離心臟，剝離心臟，用 冰 生 理 鹽水 將 心 腔 內(nèi) 血 液 沖 洗 干 凈 ，分組標(biāo)記后，放于-80℃冰箱保存后，用三苯基氯化四氮唑（TTC）染色法檢測(cè)心肌梗死范圍。免 疫 組 織 化 學(xué) 法 檢測(cè)心肌組織中脂聯(lián)素以及CHOP，實(shí)時(shí)定量熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Real time-PCR）方法檢測(cè)心肌組織中脂聯(lián)素以及CHOP的表達(dá)水平。

心肌梗死面積測(cè)定：小鼠缺血72 h后，取心肌用于檢測(cè)心肌梗死范圍。用2%戊巴比妥鈉將小鼠麻醉后，打開(kāi)小鼠胸腔，分離心臟，剝離心臟，-20℃凍存1 h后，將冰凍后的心臟做垂直左心室長(zhǎng)軸連續(xù)環(huán)切，每片厚 1～1.5 mm，將心肌組織置于 1% TTC液中 37℃水浴 15 min（避光、每1 min翻面1次），取出切片，用濾紙吸干液體后，在10%福爾馬林中固定20 min后取出，用濾紙吸干液體后照相，正常區(qū)域?yàn)榧t色，梗死區(qū)為白色。用Image J軟件分析照片。以梗死心肌（白色區(qū)）與全左心室心?。t色區(qū)與白色區(qū)）的比值表示心肌梗死面積。

血清脂聯(lián)素檢測(cè)：使用ELISA法檢測(cè)血清脂聯(lián)素濃度[20]，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟操作。得到數(shù)據(jù)后，以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，光密度（OD）值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；根據(jù)OD值查找各自對(duì)應(yīng)的濃度。

免疫組織化學(xué)法檢測(cè)心肌組織中脂聯(lián)素以及CHOP含量：用顯微鏡觀察并拍照。應(yīng)用Image-Pro Plus 6.0軟件對(duì)每張照片進(jìn)行分析得出每張照片陽(yáng)性的累積光密度（IOD）值。陽(yáng)性表達(dá)越強(qiáng)、IOD值越大，含量也越大。每組所有照片的平均IOD值代表該組的IOD值用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

Real time-PCR 方法檢測(cè)心肌組織中脂聯(lián)素mRNA以及CHOP mRNA表達(dá)水平：先根據(jù)Trizol試劑盒說(shuō)明書(shū)提取細(xì)胞總RNA，再根據(jù)One Step SYBR PrimeScript RT-PCR Kit Ⅱ的說(shuō)明配制反應(yīng)體系進(jìn)行Real Time One Step RT-PCR反應(yīng)，反應(yīng)完畢后，將樣本的擴(kuò)增曲線、融解曲線、CT值導(dǎo)入Word文檔中，待數(shù)據(jù)分析。

引物序列如下：CHOP：上游引物：5'-AAGTCAGCCCGAGAAGAACC-3'，下游引物：5'-TGTGAAGGTCCAACTCAAGA-3'；脂聯(lián)素：上游引物：5'- CCGCTTATGTGTATCGCTCCG -3'，下游引物：5'- TGGTCGTAGGTGAAGAGAAAG-3'；β-肌動(dòng)蛋白：上游引物：5'- ATATCGCTGCGCTGGTCGGC-3'，下游引物：5'- AGGATGGCGTGAGGGAGATC-3'。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。所有數(shù)據(jù)先進(jìn)行正態(tài)分布檢驗(yàn)、方差齊性檢驗(yàn)，不同組間均采用One-way ANOVA單因素方差分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

4組小鼠心肌梗死面積比較：TUDCA組和生理鹽水組小鼠心肌梗死面積分別為（21.47±2.85）%和（39.92±4.28）%，均小于毒胡蘿卜內(nèi)酯組[（66.56±8.15）%，P<0.01]。

ELISA法檢測(cè)血清脂聯(lián)素濃度（表1）：TUDCA組與生理鹽水組血清脂聯(lián)素濃度均高于毒胡蘿卜內(nèi)酯組（P<0.01），各組心肌梗死前血清脂聯(lián)素濃度較心肌梗死72 h時(shí)水平高（P<0.01）。

表1　4組小鼠血清 脂 聯(lián) 素 濃 度比較（pg/ml，?±s）

4組小鼠心肌組織中脂聯(lián)素及CHOP含量比較（表2）：TUDCA組和生理鹽水 組小鼠心肌組織中脂聯(lián)素含量均高于毒胡蘿卜內(nèi)酯組（P<0.01），各組小鼠心肌梗死前心肌組織中脂聯(lián)素含量均高于心肌梗死72 h（P<0.01）。TUDCA組和生理鹽水 組小鼠心肌組織中CHOP含量低于毒胡蘿卜內(nèi)酯組（P<0.01），各組小鼠心肌梗死前心肌組織中CHOP含量均低于心肌梗死72 h（P<0.01）。

表2　4組小鼠心肌組織中脂聯(lián)素及CHOP含量比較

4組小鼠心肌組織中脂聯(lián)素mRNA及CHOP mRNA表達(dá)水平比較（表3）：生理鹽水組和TUDCA組小鼠的心肌組織中脂聯(lián)素mRNA表達(dá)水平均高于毒胡蘿卜內(nèi)酯組（P<0.01），各組小鼠心肌梗死前心肌組織中脂聯(lián)素mRNA表達(dá)水平均高于心肌梗死72 h（P<0.01）。生理鹽水組和TUDCA組小鼠心肌組織中CHOP mRNA表達(dá)水平低于毒胡蘿卜內(nèi)酯組（P<0.01），各組小鼠心肌梗死前心肌組織中CHOP mRNA表達(dá)水平均低于心肌梗死72 h時(shí)水平（P<0.01）。

表3　4組小鼠心肌組織中脂 聯(lián) 素 mRNA及CHOP mRNA表達(dá)水平比較

3　討論

多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，在糖尿病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，心肌組織結(jié)構(gòu)和（或）功能發(fā)生改變[21]，對(duì)缺血損傷敏感性增加，即在糖尿病狀態(tài)下，心肌組織本身對(duì)缺血具有高敏感性，容易發(fā)生缺血性損傷。但是這種易感性增高的具體機(jī)制并不十分明確。

多種因素如低氧、高血糖、化學(xué)毒物等能誘發(fā)ERS[10-12]，而誘發(fā)因素的持續(xù)存在能導(dǎo)致ERS持續(xù)存在并逐漸加重。由于本研究中實(shí)驗(yàn)組均為糖尿病組，故而所指ERS為持續(xù)性ERS。ERS 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡主要通過(guò)三種途徑: CHOP 途徑、細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1-c-Jun N-末端激酶（ASK1-JND）途徑和半胱氨酸蛋白酶-12（Caspase-12）途徑[22，23]。本研究通過(guò)測(cè)量CHOP的表達(dá)來(lái)衡量ERS，發(fā)現(xiàn)各組心肌梗死前心肌組織中CHOP的表達(dá)水平及含量均低于心肌梗死72 h時(shí)水平，提示ERS與2型糖尿病心肌缺血損傷有相關(guān)性。此外， TUDCA組小鼠心肌梗死72 h心肌組織中CHOP的表達(dá)水平以及含量均低于毒胡蘿卜內(nèi)酯組，表明心肌梗死72 h TUDCA組小鼠ERS的程度低于毒胡蘿卜內(nèi)酯組。同時(shí)心肌梗死72 h TUDCA組小鼠心肌梗死面積小于毒胡蘿卜內(nèi)酯組，提示緩解ERS能減輕缺血心肌的受損程度。而抑制ERS和炎癥，能阻止2型糖尿病小鼠缺血損傷誘導(dǎo)的血管病變[24]。綜合這些結(jié)果，我們可以得出ERS與2型糖尿病缺血心肌受損程度正相關(guān)。

臨床研究發(fā)現(xiàn)，血漿脂聯(lián)素水平與心肌梗死發(fā)病率呈明顯負(fù)相關(guān)，2 型糖尿患者血液中脂聯(lián)素水平降低不僅可能參與糖尿病所致的缺血性心臟病的發(fā)生，也可能是糖尿病患者缺血性心臟病發(fā)作后心肌損傷程度加重的重要原因。在心肌細(xì)胞中，脂聯(lián)素通過(guò)磷酸腺苷活化蛋白激酶（AMPK）通路抗凋亡和環(huán)氧合酶2-前列腺素E2-受體EP4（COX2-PGE2-EP4）通路抑制腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的產(chǎn)生，從而保護(hù)缺血再灌注心臟。也可以通過(guò)抑制誘導(dǎo)型一氧化氮合酶和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶的表達(dá)進(jìn)而抑制氧化/硝化聯(lián)合應(yīng)激，直接保護(hù)心肌[8]。

在心臟損傷的研究中，臨床資料顯示血漿脂聯(lián)素濃度持續(xù)降低可以顯著增加糖尿病患者急性心肌梗死的發(fā)生率，同時(shí)，脂聯(lián)素的血漿水平與心肌梗死面積和左心室射血分?jǐn)?shù)呈高度負(fù)相關(guān)[25]。脂聯(lián)素基因敲除小鼠心肌缺血/再灌注損傷明顯加重，而補(bǔ)充外源重組脂聯(lián)素具有明確的心臟保護(hù)作用。越來(lái)越多的數(shù)據(jù)顯示，血漿脂聯(lián)素水平較低的人群，其缺血性心臟病發(fā)病率較高，提示脂聯(lián)素水平降低可能是導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈損傷和心肌缺血的重要原因。本研究結(jié)果與早期發(fā)現(xiàn)一致。

在3T3-L1脂肪細(xì)胞中，誘導(dǎo)ERS有效促進(jìn)自噬相關(guān)的脂聯(lián)素降解，相反，抑制ERS后3T3-L1脂肪細(xì)胞中脂聯(lián)素水平增加，緩解了小鼠體內(nèi)高脂飲食誘導(dǎo)的脂聯(lián)素水平下調(diào)[26]；此外，ERS在糖尿病、肥胖引起的脂聯(lián)素下調(diào)中起到關(guān)鍵作用：ERS持續(xù)加重的過(guò)程中，脂聯(lián)素多聚體的合成及分泌減少，提示ERS是細(xì)胞中脂聯(lián)素水平下調(diào)的原因[27]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，ERS加重能下調(diào)脂聯(lián)素的水平，而緩解ERS可以減輕脂聯(lián)素水平的下調(diào)，ERS與脂聯(lián)素的水平負(fù)相關(guān)，ERS可能通過(guò)下調(diào)脂聯(lián)素的水平，增加了缺血心肌的易損性。但ERS下調(diào)脂聯(lián)素的機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

另一方面，應(yīng)用脂聯(lián)素受體激動(dòng)劑或?qū)⑸险{(diào)脂聯(lián)素受體水平作為治療靶點(diǎn)可保護(hù)缺血心臟；而脂聯(lián)素信號(hào)受損則可加重缺血心肌損傷。但脂聯(lián)素基因敲除或補(bǔ)充外源重組脂聯(lián)素對(duì)ERS下調(diào)脂聯(lián)素水平有何影響；給予加重ERS的藥物后補(bǔ)充外源重組脂聯(lián)素，2型糖尿病缺血心肌受損程度能否緩解，均有待進(jìn)一步研究。

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（編輯：許菁）

難忘病例

收稿日期：（2015-06-30）

中圖分類號(hào)：R54

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1000-3614（2016）01-0091-05

doi:10.3969/j.issn.1000-3614.2016.01.020

作者簡(jiǎn)介：顧晨 住院醫(yī)師 碩士 研究方向?yàn)樾难芗膊》肿訖C(jī)制 Email: 382197751@qq.com 通訊作者：李俊明 Email: lijunming@medmail.com.cn

基金項(xiàng)目：湖北省教育廳自然科學(xué)研究項(xiàng)目（D20121309）；國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（81270280）

目的：研究?jī)?nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）與脂聯(lián)素的相關(guān)性及其在2型糖尿病缺血心肌易損性增強(qiáng)中的作用。

方法：35只C57BL/6J 雄性小鼠采用高糖高脂飲食聯(lián)合鏈脲佐菌素（STZ）誘導(dǎo)2型糖尿病模型，按隨機(jī)數(shù)字表法將糖尿病小鼠分為對(duì)照組（n=5）、?；敲撗跄懰幔═UDCA）組（n=10）、毒胡蘿卜內(nèi)酯組（n=10）和生理鹽水組（n=10）。對(duì)照組不做任何處理，其他三組在高糖高脂飼料喂養(yǎng)的最后3周，分別用TUDCA（250 mg/kg）、毒胡蘿卜內(nèi)酯（300 μg/kg）和等量生理鹽水腹腔注射給藥，2次/天，連續(xù)給藥3周后，TUDCA組、毒胡蘿卜內(nèi)酯組和生理鹽水組各隨機(jī)選取5只建立小鼠在體心肌梗死模型。心肌梗死72 h后，檢測(cè)心肌梗死面積、血清脂聯(lián)素含量、心肌組織中脂聯(lián)素和凋亡相關(guān)蛋白C/EBP 同源蛋白（CHOP）的含量及脂聯(lián)素和CHOP mRNA表達(dá)水平。

結(jié)果：TUDCA組及生理鹽水組小鼠心肌梗死面積分別為（21.47±2.85）%和（39.92±4.28）%，均小于毒胡蘿卜內(nèi)酯組[（66.56±8.15）%，P均<0.01]。心肌梗死前，TUDCA組[（79.25±6.40） pg/ml]和生理鹽水組[（70.23±4.15）pg/ml]血清脂聯(lián)素濃度均高于毒胡蘿卜內(nèi)酯組[（62.64±5.70）pg/ml，P均<0.01]，各組小鼠心肌梗死前血清脂聯(lián)素濃度均高于心肌梗死72 h時(shí)濃度；各組小鼠心肌組織中脂聯(lián)素含量及mRNA表達(dá)水平檢測(cè)結(jié)果與血清脂聯(lián)素檢測(cè)結(jié)果一致，而CHOP含量及mRNA表達(dá)水平檢測(cè)結(jié)果則與之相反。

結(jié)論：2 型糖尿病導(dǎo)致的心肌缺血損傷加重與ERS相關(guān)；ERS可能在2型糖尿病心肌易損性增強(qiáng)中起著重要作用，ERS加重后通過(guò)下調(diào)脂聯(lián)素水平，增加了2型糖尿病心肌易損性。關(guān)鍵詞 糖尿病，2 型；內(nèi)質(zhì)網(wǎng)；心肌缺血

作者單位：443002 湖北省宜昌市，三峽大學(xué)人民醫(yī)院（宜昌市第一人民醫(yī)院）