食品理化檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)熒光法的實(shí)際應(yīng)用

□ 鄒詩婷　廣東省惠州市質(zhì)量計(jì)量監(jiān)督檢測(cè)所

食品理化檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)熒光法的實(shí)際應(yīng)用

□ 鄒詩婷廣東省惠州市質(zhì)量計(jì)量監(jiān)督檢測(cè)所

近些年，國(guó)內(nèi)食品工業(yè)化程度日益擴(kuò)大與迅猛提升，廣泛應(yīng)用了更多新添加劑與工業(yè)技術(shù)，導(dǎo)致國(guó)內(nèi)屢次發(fā)生食品安全事件。食品安全已升級(jí)為現(xiàn)階段全社會(huì)重點(diǎn)關(guān)注的重點(diǎn)話題。從根本上說，食品安全問題一方面與國(guó)民生命安全、身體健康有著直接相關(guān)性，另一方面還會(huì)對(duì)社會(huì)長(zhǎng)期發(fā)展與安全產(chǎn)生直接性影響。熒光檢測(cè)技術(shù)是以輻射躍遷原理為基礎(chǔ)的一種特異性檢測(cè)工藝，該技術(shù)的出現(xiàn)和原子、分子結(jié)構(gòu)的相關(guān)性極強(qiáng)，而且具有較強(qiáng)的選擇性、較高靈敏度以及精準(zhǔn)定量等諸多優(yōu)勢(shì)，在復(fù)雜基質(zhì)中分析與檢測(cè)相關(guān)化合物較為適用。

食品檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)分子熒光法的應(yīng)用

熒光分光光度法

充分粉碎、凈化、提取以及濃縮定容待測(cè)基質(zhì)之后，無需其他手段，將樣液直接導(dǎo)入檢測(cè)比色皿中，通過其所出現(xiàn)的熒光強(qiáng)度進(jìn)行定量檢測(cè)，此為當(dāng)前標(biāo)準(zhǔn)中應(yīng)用比較廣泛的一種分光光度檢測(cè)模式。因?yàn)檫x擇無分離檢測(cè)模式，所以通常具有較高前處理凈化要求，一般會(huì)結(jié)合應(yīng)用層析凈化?，F(xiàn)階段國(guó)內(nèi)食品安全檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中，選擇這一方法檢驗(yàn)的主要物質(zhì)包括黃曲霉毒素、伏馬毒素、噻菌靈和腹瀉型貝類毒素等，所涉及主要基質(zhì)有乳制品、糧油、果蔬、茶葉、水質(zhì)以及飼料等。該法的優(yōu)勢(shì)在于：不需要分離，人工操作方便，因采用比色皿作為檢測(cè)池，具有較大的光程，有較高的靈敏度。

薄層色譜-熒光法

該方法是基于初步分離而實(shí)現(xiàn)的半定量檢測(cè)方法。前處理試樣后，在薄層色譜板中點(diǎn)樣，以標(biāo)準(zhǔn)溶液為參比，其定量依據(jù)是：若試樣點(diǎn)熒光強(qiáng)度比標(biāo)準(zhǔn)溶液點(diǎn)強(qiáng)，那么必須適度稀釋試樣，直到試樣點(diǎn)強(qiáng)度等同于標(biāo)準(zhǔn)溶液點(diǎn)，同時(shí)依照稀釋倍數(shù)對(duì)具體濃度進(jìn)行計(jì)算；若熒光強(qiáng)度比標(biāo)準(zhǔn)溶液點(diǎn)弱，那么其具體含量比檢出限低。定性依據(jù)是：標(biāo)準(zhǔn)溶液點(diǎn)和試樣點(diǎn)遷移距離具有一致性；標(biāo)準(zhǔn)溶液點(diǎn)和試樣點(diǎn)具有相同的熒光色度，那么能夠判斷試樣內(nèi)部存在目標(biāo)化合物?，F(xiàn)階段，國(guó)內(nèi)食品安全檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中，選擇這一方法展開檢驗(yàn)的相關(guān)物質(zhì)包括玉米赤霉烯酮、黃曲霉毒素以及T-2毒素等，涉及到的相關(guān)基質(zhì)有奶油、配合飼料、新鮮豬組織和牛乳制品等。該法的優(yōu)勢(shì)在于：儀器簡(jiǎn)單，引入分離設(shè)置，增加Rf值作為定性依據(jù)，對(duì)試樣中的熒光雜質(zhì)進(jìn)行分離，降低干擾。

高效液相色譜-熒光法

該方法是現(xiàn)階段國(guó)內(nèi)食品安全標(biāo)準(zhǔn)中廣泛應(yīng)用的分子熒光檢測(cè)法，普遍應(yīng)用于真菌毒素、獸藥殘留以及人工色素等相關(guān)檢驗(yàn)中。

1.獸藥殘留檢測(cè)

所選藥物為阿維菌素類藥物，主要有多拉菌素、阿維菌素以及伊維菌素等，屬于大環(huán)內(nèi)酯類獸藥，其功效主要包括殺螨、殺菌等。現(xiàn)階段標(biāo)準(zhǔn)中所選檢測(cè)方式主要是甲醇-乙腈提取，通過N-甲基咪唑啉衍生化，結(jié)合液相色譜-熒光檢測(cè)系統(tǒng)，475 nm的發(fā)射波長(zhǎng)，365 nm的激發(fā)波長(zhǎng)?，F(xiàn)階段，選擇這一方法的有農(nóng)業(yè)部公告與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)等，樣品基質(zhì)主要包括牛、乳制品、水產(chǎn)品、雞組織以及牛組織等。

2.色素染料檢測(cè)

應(yīng)用比較常見的一種人工色素就是堿性桃紅T，區(qū)域標(biāo)準(zhǔn)所選檢測(cè)方法是：堿化甲醇提取樣品，正己烷加以凈化、二氯甲烷加以萃取，由高效液相色譜熒光檢測(cè)器展開檢測(cè)，572 nm的發(fā)射波長(zhǎng)，271 nm的激發(fā)波長(zhǎng)，4 μg/kg的檢出限。結(jié)晶紫與孔雀石綠均為兼具殺菌劑與燃料功能的兩種化學(xué)藥品，而且普遍應(yīng)用于水產(chǎn)品中。國(guó)際檢測(cè)方法是：對(duì)于樣品內(nèi)部所殘留結(jié)晶紫或者孔雀石綠，通過氰化鉀將其還原成代謝產(chǎn)物隱性結(jié)晶紫或者孔雀石綠，乙酸銨-乙腈混合液加以提取，酸性氧化鋁-丙基磺酸加以凈化，進(jìn)入熒光檢測(cè)器展開高效檢測(cè)，360 nm的發(fā)射波長(zhǎng)，265 nm的激發(fā)波長(zhǎng)，0.5 μg/kg的檢出限。

食品檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)原子熒光法的應(yīng)用

原子熒光法就是在原子吸收光譜與原子發(fā)射光譜間介入的一種光譜分析技術(shù)。其基本原理是原子化待測(cè)元素，對(duì)原子蒸氣進(jìn)行光源輻射到高能態(tài)，將特征波長(zhǎng)熒光發(fā)射出來，通過熒光波長(zhǎng)定性與強(qiáng)度定量，被廣泛應(yīng)用于檢測(cè)食品重金屬含量中。此處主要介紹原子熒光法中的微波消除-原子熒光光譜法，該方法是將特定酸與樣品置于消解罐中，放入微波消解儀內(nèi)部，高溫增壓環(huán)境下根據(jù)設(shè)定消解程序確保樣品能夠及時(shí)消化與溶解，與以往消解方法相比，該法的優(yōu)勢(shì)在于：充分消解樣品，具有較高回收率；較低空白值，便于消化、無交叉污染與元素?fù)p失，能夠同時(shí)完成多元素聯(lián)測(cè)。被廣泛應(yīng)用于檢驗(yàn)檢疫行業(yè)與農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)中，選擇這一方法檢驗(yàn)的主要物質(zhì)包括硒、砷以及銻等，涉及主要基質(zhì)有食品接觸材料、稻米以及飼料等。

展望

隨著近些年電子學(xué)與材料學(xué)的進(jìn)步與發(fā)展，使得很多新型光源的激發(fā)光強(qiáng)度得到很大程度的提升，進(jìn)而提升熒光檢測(cè)靈敏度，微型化與小型化成為熒光檢測(cè)的主流。而且在聯(lián)用技術(shù)領(lǐng)域，芯片電泳與毛細(xì)管電泳等技術(shù)得到廣泛應(yīng)用，同時(shí)也為定量與定性工作奠定技術(shù)型支持，隨著近些年食品理化檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的逐漸成熟，具有更為優(yōu)越性能的分離聯(lián)用技術(shù)與新型光源技術(shù)必然成為食品安全領(lǐng)域發(fā)展的主流趨勢(shì)。