狹葉獐牙菜化學(xué)成分研究II

褚　嶠，夏從龍

（大理大學(xué)藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南大理　671000）

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狹葉獐牙菜化學(xué)成分研究II

褚嶠，夏從龍*

（大理大學(xué)藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南大理671000）

［摘要］目的：研究龍膽科（Gentianaceae）獐牙菜屬狹葉獐牙菜（Swertia angustifolia Buch.）的化學(xué)成分。方法：采用硅膠柱層析和Sephadex LH-20柱層析分離純化化合物，依據(jù)理化性質(zhì)和現(xiàn)代波譜技術(shù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果：從乙酸乙酯部分分離鑒定了7個單體化合物，分別為香草酸（vanillic acid，1）、1，3，8-三羥基-5-甲氧基口山酮（1，3，8- trihydroxy-5-methoxy xanthone，2）、5，7，4′-三羥基二氫黃酮（5，7，4′-trihydroxy flavanone，3）、1-羥基-3，5，6-三甲氧基口山酮（1-Hydroxy-3，5，6-trimethoxy xanthone，4）、3，4-二羥基苯甲酸甲酯（methy -3，4-dihydroxy-benzoate，5）、鄰苯二甲酸二異丁酯（diisobutyl phthalate，6）、1，8-二羥基-3，5-二甲氧基口山酮（methyl-bellidifolin，7）。結(jié)論：化合物1～7均為首次從狹葉獐牙菜中分離得到。

［關(guān)鍵詞］狹葉獐牙菜；化學(xué)成分；分離研究

［DOI］10. 3969 / j. issn. 2096-2266. 2016. 04. 004

狹葉獐牙菜（Swertia angustifolia Buch.）為龍膽科獐牙菜屬植物，分布于云南、廣西、貴州等地。狹葉獐牙菜具有清熱解毒、健胃、除濕利膽的功效，用于治療黃疸型肝炎、膽囊炎等疾病〔1〕，常代替青葉膽（藥典收載種）用藥，資源較為豐富。通過文獻(xiàn)查閱，國內(nèi)主要對其生藥學(xué)、含量進(jìn)行研究〔2-3〕；陳麗元等對其氯仿部分進(jìn)行了成分研究，分離得到4個單體化合物〔4〕。因此我們對其化學(xué)成分進(jìn)行進(jìn)一步研究，從95%的乙醇提取物的乙酸乙酯部位分離出7個化合物。分別鑒定為香草酸（vanillic acid，1）、1，3，8-三羥基-5-甲氧基口山酮（1，3，8- trihydroxy-5-methoxy xanthone，2）、5，7，4′-三羥基二氫黃酮（5，7，4′-trihydroxy flavanone，3）、1-羥基-3，5，6-三甲氧基口山酮（1-Hydroxy-3，5，6-trimethoxy xanthone，4）、3，4-二羥基苯甲酸甲酯（methyl -3，4-dihydroxy-benzoate，5）、鄰苯二甲酸二異丁酯（diisobutyl -phthalate，6）、1，8-二羥基-3，5-二甲氧基口山酮（methyl-bellidifolin，7）。

1　儀器與材料

1.1實驗材料實驗材料2008年10月采自云南省大理市鳳陽橋后山，由大理大學(xué)藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院夏從龍教授鑒定為龍膽科狹葉獐牙菜（Swertia angustifolia Buch.）的全草。

1.2儀器與試劑瑞士Büchi R-210型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；SHZ-D（Ⅲ）循環(huán)水式真空泵；Bruker AM-400型核磁共振波譜儀；柱層析硅膠、薄層層析硅膠G和GF254（青島海洋化工廠）；Sephadex LH-20（Pharmacia公司）；其他化學(xué)試劑均為分析純。CDCl3、DMSO-d6、Acetone-d6（Sigma-Aldrich公司）。顯色方法為10%硫酸乙醇溶液處理后烘烤顯色或碘蒸汽顯色。

2　提取與分離

狹葉獐牙菜干燥全草9.8 kg粉碎，用95%乙醇回流提取，每次3 h，共提取3次，提取液合并濃縮得浸膏1.72 kg。加水分散后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，得乙酸乙酯部位（89 g）。將乙酸乙酯部位樣品用適量硅膠拌樣，200～300目硅膠裝柱，氯仿-甲醇系統(tǒng)洗脫得5個部分，經(jīng)反復(fù)硅膠層析（氯仿/丙酮、氯仿/甲醇）洗脫、凝膠柱Sephadex LH-20層析得化合物1（4.6 mg）、化合物2（5.1 mg）、化合物3（5.3mg）、化合物4（5.1mg）、化合物5（4.3mg）、化合物6（6.8 mg）、化合物7（5.6 mg）。

3　實驗結(jié)果

化合物1：C8H8O4；無色針晶（氯仿-丙酮）；13C NMR （100 MHz，Acetone-d6）δ：120.9（C-1），112.6（C-2），147.2（C-3），151.2（C-4），114.6（C-5），123.9（C-6），166.5（COOH），55.4（3-OCH3）。1H NMR（400 MHz，Acetone-d6）δ：13.31（1H，s，COOH），8.41（1H，s，OH），7.60（1H，dd，J=1.9，8.2 Hz，H-6），7.56（1H，d，J= 1.9 Hz，H-2），6.92（1H，d，J=8.2 Hz，H-5），3.91（3H，s，3-OCH3）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔5〕報道對比，鑒定化合物1為香草酸。

化合物2：C14H10O6；黃色粗棒狀結(jié)晶（氯仿-甲醇）；13C NMR（100 MHz，DMSO-d6）δ：181.5（C-9），164.9（C-1），98.7（C-2），166.0（C-3），93.9（C-4），158.3（C-4a），147.8（C-4b），146.2（C-5），124.4（C-6），115.9（C-7），151.1（C-8），114.2（C-8a），103.9（C-8b），62.3（5-OCH3）。1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ：13.33，9.89，8.36（3×1H，s，1，3，8-OH），4.37（1H，s，3-OH），7.40（1H，d，J=8.9 Hz，H-6），7.20（1H，d，J= 8.9 Hz，H-7），6.34（1H，d，J=2.2 Hz，H-4），6.23（1H，d，J=2.2 Hz，H-2），3.93（3H，s，5-OCH3）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔6〕報道對比，鑒定化合物2為1，3，8-三羥基-5-甲氧基口山酮。

化合物3：C15H12O5；淡黃色粉末；13C NMR（100 MHz，Actone-d6）δ：79.1（C-2），42.6（C-3），196.4（C-4），164.4（C-5），95.9（C-6），166.5（C-7），94.9（C-8），163.5（C-8a），102.3（C-4a），128.1（C-1′），129.9（C-2′，6′），115.3（C-3′，5′），157.9（C-4′）。1H NMR（400 MHz，Acetone-d6）δ：12.19（1H，s，5-OH），9.72（1H，s，7-OH），8.61（1H，s，4′-OH），7.41（2H，d，J=8.6 Hz，H-2′，6′），6.91（2H，d，J=8.6 Hz，H-3′，5′），5.98（2H，brs，H-6，8），5.48（1H，dd，J=3.0，12.9 Hz，H-2），3.23 （1H，dd，J=12.9，17.1 Hz，H-3a），2.77（1H，dd，J= 3.0，17.1 Hz，H-3b）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔7-8〕報道對比，鑒定化合物3為5，7，4′-三羥基二氫黃酮。

化合物4：C16H14O6；黃色針晶（氯仿-甲醇）；13C NMR（100 MHz，DMSO-d6）δ：162.9（C-1），96.8 （C-2），166.2（C-3），91.9（C-4），156.7（C-4a），149.1 （C-4b），147.6（C-5），149.9（C-6），114.9（C-7），120.9 （C-8），112.8（C-8a），103.2（C-8b），180.5（C-9），61.0 （5-OCH3），56.6（3-OCH3），56.1（6-OCH3）。1H NMR （400 MHz，DMSO- d6）δ：6.33（1H，d，J=1.8 Hz，H-2），6.51（1H，d，J=1.8 Hz，H-4），7.34（1H，d，J= 9.2 Hz，H-7），7.62（1H，d，J = 9.2 Hz，H-8），3.36 （3H，s，3-OCH3），3.96（3H，s，5-OCH3），3.93（3H，s，6-OCH3）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔9〕報道對比，鑒定化合物4為1-羥基-3，5，6-三甲氧基口山酮。

化合物5：C8H8O4；無色針狀結(jié)晶（氯仿-丙酮）；13C NMR（100 MHz，DMSO-d6）δ：122.8（C-1），115.4（C-2），147.9（C-3），151.9（C-4），113.4（C-5），124.7（C-6），167.5（C-7），56.2（-OCH3）。1H NMR （400 MHz，DMSO-d6）δ：7.60（1H，d，J=1.9 Hz，H-2），6.29（1H，d，J = 8.2 Hz，H-5），7.58（1H，dd，J = 1.9 Hz，J=7.4 Hz，H-6），3.90（3H，s，-OCH3）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔10-11〕報道對比，鑒定化合物5為3，4-二羥基苯甲酸甲酯。

化合物6：C16H22O4；無色油狀物；13C NMR（100 MHz，DMSO-d6）δ：132.3（C-1，2），130.9（C-3，6），128.8（C-4，5），167.7（C-7，7′），71.8（C-8，8′），27.7（C-9，9′），19.2（C-10，10′，11，11′）。1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ：7.77（2H，m，H-3，6），7.58（2H，m，H-4，5），4.12（4H，d，J=8 Hz，H-8，8′），2.07（2H，m，H-9，9′），1.02（12H，d，J=8 Hz，H-10，10′，11，11′）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔12〕報道對比，鑒定化合物6為鄰苯二甲酸二異丁酯。

化合物7：C15H12O6；黃色針狀結(jié)晶（氯仿-甲醇）；13C NMR（100 MHz，DMSO-d6）δ：184.31（C-9），161.9 （C-1），97.3（C-2），167.2（C-3），92.9（C-4），157.7（C-4a），148.8（C-4b），142.6（C-5），121.4（C-6），107.2（C-7），149.1（C- 8），105.7（C- 8a），105.7（C- 8b），56.64（3-OCH3），56.29（5-OCH3）。1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ：11.93（1H，s，1-OH），11.52（1H，s，8-OH），7.52 （1H，d，J=9.0 Hz，H-6），6.99（1H，d，J=9.0 Hz，H-7），6.62（1H，d，J=2.3 Hz，H-4），6.40（1H，d，J = 2.3 Hz，H-2），3.89（3H，s，3-OCH3），3.84（3H，s，5-OCH3）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔13-14〕報道對比，鑒定化合物7為1，8-二羥基-3，5-二甲氧基口山酮。

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（責(zé)任編輯李楊）

Chemical Constituent of Swertia angustifolia Buch.II

Chu Qiao，Xia Conglong*
（College of Pharmacy and Chemistry，Dali University，Dali，Yunnan 671000，China）

〔Abstract〕Objective: To explore the chemical constituents of Swertia angustifolia Buch. Methods: Compounds were separated and purified by silica gel and Sephadex LH- 20 column chromatography and their structures were elucidated on the basis of physicochemical properties and spectral analysis. Results: Seven monomeric compounds were obtained from ethyl acetate extract of S. angustifolia，which were characterized to be vanillic acid（1），1，3，8-trihydroxy-5-methoxy xanthone（2），5，7，4′-trihydroxy flavanone （3），1-Hydroxy-3，5，6-trimethoxy xanthone（4），methyl -3，4-dihydroxy benzoate（5），diisobutyl-phthalate（6），methyl-bellidifolin （7）. Conclusion: All seven compounds were obtained from S. angusifolia for the first time .

〔Key words〕Swertia angustifolia Buch.；chemical constituents；separation study

［中圖分類號］R284

［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］A

［文章編號］2096-2266（2016）04-0014-03

［基金項目］國家自然科學(xué)基金資助項目（81260677）；云南省教育廳科研基金資助項目（2012Z118）

［收稿日期］2015-09-21［修回日期］2016-01-05

［作者簡介］褚嶠，碩士研究生，主要從事天然藥物資源與品質(zhì)評價研究.

*通信作者：夏從龍，教授.