子癇前期患者血清中PDGF-BB和U-Ⅱ檢測(cè)的臨床價(jià)值*

王秀珍，李連友，王秀梅(赤峰市醫(yī)院檢驗(yàn)科，內(nèi)蒙古赤峰 024000)

子癇前期是一種妊娠期特有的疾病，病理機(jī)制復(fù)雜、涉及多系統(tǒng)紊亂，該病多發(fā)生在孕20周以后，表現(xiàn)為高血壓、蛋白尿和(或)水腫，嚴(yán)重影響母嬰健康，其發(fā)病機(jī)理尚未完全清楚[1～3]。目前，研究報(bào)道多種血清細(xì)胞因子如肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子、可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-1等與子癇前期的發(fā)生發(fā)展有關(guān)[4～6]，但針對(duì)多生物標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)在子癇前期診斷中的報(bào)道較少。本研究通過(guò)分別檢測(cè)子癇前期患者血清中血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(platelet derived growth factor BB，PDGF-BB)和尿緊張素-Ⅱ(urotensin Ⅱ，U-Ⅱ)水平的變化，并與健康孕婦進(jìn)行比較，探討其在子癇前期診斷中的應(yīng)用，為臨床實(shí)踐提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 病例為2013年1月～2015年6月赤峰市醫(yī)院產(chǎn)科收住的子癇前期患者88例，其中子癇前期輕度患者52例，年齡28.4±5.8歲，孕周37.3±2.1周；子癇前期重度患者36例，年齡28.6±5.5歲，孕周37.5±2.0周；另選擇40例同期在我院檢查的正常孕婦作為對(duì)照，年齡28.5±5.9歲，孕周37.3±1.9周。子癇前期診斷標(biāo)準(zhǔn)參見(jiàn)文獻(xiàn)[7]，子癇前期輕度：妊娠20周以后出現(xiàn)140/90 mmHg≤血壓<160/110 mmHg；300 mg/24 h 或隨機(jī)尿蛋白(+)≤尿蛋白<2 000 mg/24 h或隨機(jī)尿蛋白(++)；可伴有上腹不適、頭痛等癥狀。子癇前期輕度患者符合以下任意一項(xiàng)臨床表現(xiàn)即診斷為子癇前期重度患者：血壓≥160/110 mmHg；尿蛋白≥2 000 mg/24 h或隨機(jī)尿蛋白≥(++)；血清乳酸脫氫酶升高；肌酐>106 μmol/L，血小板<1.0×1012/L；天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶或丙氨酸轉(zhuǎn)移酶升高；持續(xù)頭痛或視覺(jué)障礙；持續(xù)上腹部疼痛。所有對(duì)象均未服用鈣拮抗劑類(lèi)降壓藥病史和其它產(chǎn)科并發(fā)癥。所有孕婦均為單胎妊娠，所有對(duì)象入組研究前均簽訂知情同意書(shū)。各組間年齡、孕周比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性(P>0.05)。

1.2 試劑和儀器 血清PDGF-BB和U-Ⅱ試劑盒均購(gòu)自美國(guó)R&D公司，Synergy H1全功能酶標(biāo)儀為美國(guó)BioTek公司產(chǎn)品。

1.3 研究方法 清晨空腹抽取各組患者治療前和對(duì)照組靜脈血4 ml，緩慢注入含有10 ml/dl乙二胺四乙酸的干燥試管中，立即搖勻，2 000 r/min離心10 min分離血清，-80℃保存待測(cè)。血清PDGF-BB和U-Ⅱ水平測(cè)定均采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫檢測(cè)(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)法，測(cè)定過(guò)程嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

2.1 子癇前期患者與對(duì)照組孕婦血清PDGF-BB和U-Ⅱ水平的比較 見(jiàn)表1。子癇前期重度組和輕度組患者血清PDGF-BB和U-Ⅱ水平均顯著高于正常對(duì)照組，差異比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=11.841，8.496；7.680，5.836，均P<0.05)；與輕度組比較，重度組血清PDGF-BB和U-Ⅱ水平顯著升高，差異比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=7.133，4.835，均P<0.05)。

表1 孕婦血清PDGF-BB和U-Ⅱ含量的比較

2.2 血清PDGF-BB和U-Ⅱ診斷子癇前期的ROC曲線分析 用SPSS 20.0軟件對(duì)血清因子PDGF-BB和U-Ⅱ在88例子癇前期患者和40例正常孕婦診斷中的價(jià)值進(jìn)行ROC曲線分析，以敏感度為縱坐標(biāo)、1-特異度為橫坐標(biāo)。ROC曲線見(jiàn)圖1。PDGF-BB的ROC曲線下面積(area under the curve，AUC)為0.921，P=0.000，U-Ⅱ的AUC為0.927，P=0.000，PDGF-BB和U-Ⅱ的可信區(qū)間分別為0.842～1.000，0.866～0.988，均不包括0.5，表明都對(duì)子癇前期具有一定的診斷價(jià)值；從ROC曲線得出PDGF-BB和U-Ⅱ的診斷臨界值分別為81.43 ng/L和3.67 ng/L；取臨界值時(shí)，兩者診斷子癇前期的敏感度分別為86.5%和90.6%，特異度分別為91.4%和87.6%。PDGF-BB和U-Ⅱ聯(lián)合檢測(cè)對(duì)子癇前期的診斷敏感度和特異度分別為91.3%和92.2%，均高于單一指標(biāo)檢測(cè)。

圖1 PDGF-BB和U-Ⅱ的ROC曲線

3 討論

子癇前期發(fā)病機(jī)制目前尚未清楚，其病因可能涉及母體、胎盤(pán)和胎兒等多種因素，包括血管內(nèi)皮損傷和功能障礙、血管活性物質(zhì)失衡及滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲異常等[8～10]。PDGF-BB是貯存于血小板α顆粒中的一種堿性蛋白質(zhì)，由2條多肽鏈通過(guò)二硫鍵連接而成，在損傷早期從血小板α顆粒中釋放出來(lái)，啟動(dòng)并加速組織創(chuàng)傷修復(fù)，能引起血管收縮，誘導(dǎo)受損的上皮細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞分裂增殖，刺激血管平滑肌細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞的分裂增生[6，11]。子癇前期患者存在組織損傷，內(nèi)皮細(xì)胞損傷，血管重塑障礙，蛻膜螺旋動(dòng)脈粥樣硬化[2]。研究顯示PDGF-BB mRNA在子癇前期胎盤(pán)蛻膜血管表達(dá)升高，可能阻礙子癇前期胎盤(pán)血管重塑，致病變血管強(qiáng)烈收縮、局部缺血與缺氧[12]。本研究顯示，子癇前期輕度組、重度組患者血清PDGF-BB水平顯著高于對(duì)照組，且重度組顯著高于輕度組，說(shuō)明PDGF-BB參與子癇前期病理進(jìn)展過(guò)程，其分泌可能加速血管損傷，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖，促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞分裂增殖，PDGF-BB是子癇前期發(fā)生發(fā)展中的一個(gè)重要致病因子。

U-Ⅱ是從硬骨魚(yú)尾神經(jīng)系統(tǒng)中提純的一種生長(zhǎng)抑素樣結(jié)構(gòu)的神經(jīng)環(huán)肽，具有強(qiáng)大的縮血管和促平滑肌細(xì)胞增殖作用，主要是通過(guò)與受體結(jié)合后激活電壓依賴(lài)型和非依賴(lài)型Ca2+通路，促進(jìn)Ca2+內(nèi)流進(jìn)而激活蛋白激酶C等通路實(shí)現(xiàn)的[13，14]。研究顯示U-Ⅱ可能主要以血管收縮作用參與子癇前期全身小血管痙攣的病理變化[13，15]。本研究結(jié)果顯示，子癇前期輕度組、重度組患者血清U-Ⅱ水平顯著高于對(duì)照組，且重度組顯著高于輕度組，表明U-Ⅱ濃度隨子癇前期病情加重而升高，提示U-Ⅱ可能以血管收縮作用參與子癇前期全身小血管痙攣的病理變化。血清U-Ⅱ高表達(dá)可能作為繼發(fā)因素加重子癇前期胎盤(pán)的缺血缺氧，并促進(jìn)胎盤(pán)組織動(dòng)脈硬化的形成，加速病情發(fā)展[15，16]。

本研究ROC曲線分析結(jié)果表明PDGF-BB和U-Ⅱ?qū)ψ影B前期均有較高診斷效能，且兩者聯(lián)合檢測(cè)的敏感度和特異度都高于單個(gè)指標(biāo)檢測(cè)。血清PDGF-BB水平檢測(cè)可評(píng)價(jià)血管內(nèi)皮損傷和功能障礙，血清U-Ⅱ檢測(cè)可評(píng)估血管收縮和血管痙攣的情況；子癇前期患者在血管內(nèi)皮功能、血管活性物質(zhì)調(diào)節(jié)、血管收縮痙攣等因素之間相互影響、相互聯(lián)系，通過(guò)相同和不同的途徑導(dǎo)致胎盤(pán)缺血缺氧和系統(tǒng)性?xún)?nèi)皮損傷[17，18]。綜上所述，檢測(cè)血清中PDGF-BB和U-Ⅱ水平可作為臨床診斷子癇前期患者的輔助指標(biāo)，且PDGF-BB和U-Ⅱ兩項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)可提高其診斷敏感度和特異度，值得臨床推廣及應(yīng)用。

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