維生素D及日照量對單純性肥胖兒童血清瘦素水平影響的研究*

胡森安，艾紅紅，嚴麗花，鐘劍文(佛山市高明區(qū)人民醫(yī)院.檢驗科；.兒科，廣東佛山 528500)

近年來，隨著人們生活水平的不斷提高及生活方式的改變，單純性肥胖兒童逐年增多。兒童期肥胖與許多成年期慢性疾病如高血壓、糖尿病、動脈粥樣硬化性心腦血管疾病等密切相關(guān)，肥胖使這些疾病的患病率和病死率急劇上升[1]。肥胖是由機體脂肪細胞數(shù)量增多和體積變大引起，而脂肪細胞不僅僅是作為脂質(zhì)的儲存庫，它更是一個分泌器官，瘦素(Leptin)就是主要從脂肪細胞分泌出來的一種激素類物質(zhì)[2]。瘦素具有廣泛的生物學(xué)活性，其受體分布于人體的多種組織器官表面，瘦素可以影響人體食欲及能量代謝，是影響肥胖的一個重要因素。維生素D(VitD)曾經(jīng)被醫(yī)學(xué)界認為是一種營養(yǎng)物質(zhì)，但是近來研究發(fā)現(xiàn)，VitD的生物學(xué)作用已經(jīng)遠遠超出營養(yǎng)物質(zhì)范疇，它除了調(diào)節(jié)機體鈣磷代謝平衡外，還參與免疫、生殖、內(nèi)分泌等各方面的調(diào)節(jié)，其中肥胖與VitD水平的關(guān)系受到越來越多的關(guān)注。近年來的研究表明，肥胖與體內(nèi)VitD含量減少有關(guān)[3]，有研究認為VitD含量降低后，體內(nèi)甲狀旁腺激素(PTH)分泌增加，PTH使大量的鈣離子涌入脂肪細胞內(nèi)，刺激了脂肪細胞的生長，所以導(dǎo)致肥胖[3]。本研究設(shè)計了針對維生素D水平及日照量對單純性肥胖兒童干預(yù)的影響情況，并進行前瞻性研究，觀察分析VitD及日照量與肥胖兒童血液中25羥基VitD[25(OH)D]含量和血清瘦素水平的關(guān)系，以期對兒童單純性肥胖的預(yù)防及治療帶來幫助。

1 材料與方法

1.1 研究對象 根據(jù)受試者的身體質(zhì)量指數(shù)[BMI= 體重(kg)/身高2(m2)]，參照單純性肥胖兒童診斷標準[4]，收集2015年6月～12月期間，來佛山市高明區(qū)人民醫(yī)院兒科體檢的單純性肥胖兒童150例作為研究對象，其中男性102例，女性48例，年齡5～7歲，平均年齡6.4±0.6歲，平均BMI 25.6±0.4 kg/m2。

1.1.1 排除標準：①近1年內(nèi)系統(tǒng)服用過VitD或近2周內(nèi)連續(xù)服用過VitD者；②遺傳性、代謝性、內(nèi)分泌性肥胖者；③有重要器官功能障礙，如肝衰竭、腎衰竭者；④腫瘤患者。同期隨機選擇來我院健康體檢的入學(xué)兒童50例作為對照組，其中男性34例，女性16例，平均年齡6.2±0.5歲，BMI指數(shù)均正常，平均15.6±0.4 kg/m2，所有受試者的性別、年齡經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析均無顯著性差異。

1.1.2 倫理道德要求：組織受試者家長，采取觀看錄像、講座等方式，宣傳肥胖防治知識，并告知其治療方法、目的及采取的干預(yù)措施，所有受試對象均經(jīng)家長同意并簽署知情同意書后納入研究，整個實驗經(jīng)過醫(yī)學(xué)倫理道德委員會評定符合要求。

1.2 試劑和儀器

1.2.1 BMI測量：采用數(shù)字電子體質(zhì)量計測定體質(zhì)量，測量要求：受測者必須空腹，只穿貼身衣褲，脫去鞋帽，立于體質(zhì)量計中央，不接觸其他物體，由經(jīng)過培訓(xùn)的兒科護士測量讀數(shù)，以千克為計量單位，精確到小數(shù)點后一位。采用立式身高坐高計測定身高，單位為米，精確到小數(shù)點后兩位。BMI=體質(zhì)量(kg)/身高2(m2)。

1.2.2 25-羥維生素D和血清瘦素檢測：取晨起空腹左手肘靜脈血3 ml，室溫放置1～2 h后離心(3 000 r/min，5min)，離心后留取血清，血清送廣州金域醫(yī)學(xué)檢驗中心檢測25(OH)D含量和瘦素水平。采用Applied Biosystems公司高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)儀和美國原裝進口試劑檢測25(OH)D含量。而瘦素檢測采用安科生物生產(chǎn)的酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)瘦素檢測試劑盒(皖食藥監(jiān)械(準)字2009第2400014號)，檢測儀器包括上?？迫A生物公司生產(chǎn)的KHBST-360自動多功能酶標儀和KHBST-96W全自動洗板機，所有實驗過程均應(yīng)用高、低水平質(zhì)控品監(jiān)測，以對檢測結(jié)果進行全程質(zhì)量跟蹤管理。

1.3 方法 將150例單純性肥胖兒童按照自愿原則隨機分配為未添加VitD組、添加VitD組和日照組3個小組。每組50例，其中未添加VitD組單純的保持合理膳食和適量運動。添加VitD組則在合理膳食、保持適量運動的前提下，每天一次性口服VitD3制劑700IU，并持續(xù)跟蹤6個月。日照組則在合理膳食和適量運動的前提下，堅持每周平均日照時間不少于10 h，持續(xù)6個月。對照組不加任何干預(yù)。要求所有受試者每個季度定期檢測血液25(OH)D含量和瘦素水平。四組兒童年齡、性別等具有可比性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS22.0軟件包對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計處理。兩組間比較采用t檢驗，多組獨立樣本均數(shù)比較采用方差方析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 在干預(yù)治療前，所有受試者25(OH)D含量、瘦素水平結(jié)果 見表1。單純性肥胖兒童與健康對照組比較，25(OH)D含量顯著降低，瘦素水平顯著升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)。

表1 單純性肥胖兒童與健康兒童25(OH)D含量、瘦素水平比較

2.2 6個月干預(yù)治療后，四組的25(OH)D含量、瘦素水平結(jié)果 見表2。在合理膳食、適量運動的基礎(chǔ)上適當補充VitD或者適度的日照量效果是一樣的，都能使血液25(OH)D含量達到對照組水平，同時對降低血清瘦素水平也有較明顯的作用。而單純的合理膳食與適量運動雖然對降低瘦素水平也有一定的作用，但是效果遠不及添加VitD組與日照組。

表2 日照量及添加VitD對單純性肥胖兒童的影響

注：與對照組比較：aP>0.05,*P<0.01；與添加VitD組比較：★P>0.05,△P<0.01；與日照組比較：◇P<0.01；與未添加VitD組比較：#P<0.01。

3 討論

肥胖是一種疾病，兒童單純性肥胖更應(yīng)受到重視，它可影響兒童體力、智力及生長發(fā)育，是其成年期各種心腦血管疾病的獨立危險因素[5]。因此，人們越來越關(guān)注兒童肥胖的問題，而影響兒童肥胖發(fā)生的重要因素之一就是瘦素水平。

瘦素是由167個氨基酸組成的蛋白活性因子，其作用主要表現(xiàn)在兩個方面，一是使機體進食減少，二是促進能量代謝，瘦素系統(tǒng)通過對調(diào)節(jié)性T細胞(Treg)的調(diào)節(jié)參與肥胖的發(fā)病機制[6]，如果瘦素在人體內(nèi)有相同的生物學(xué)效應(yīng)，肥胖應(yīng)該和瘦素表達呈負相關(guān)關(guān)系，但是本研究顯示，單純性肥胖兒童體內(nèi)血清瘦素水平遠遠高于健康兒童，這一現(xiàn)象與國內(nèi)文獻報道一致[7]。目前研究認為發(fā)生這一現(xiàn)象的原因可能是由于肥胖個體內(nèi)存在瘦素抵抗現(xiàn)象，使瘦素沒能發(fā)揮其應(yīng)有的調(diào)節(jié)作用[8]。具體機制的確認有待未來研究者的努力。

隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展，近年來的研究發(fā)現(xiàn)VitD是一種具有多種生物調(diào)節(jié)作用的激素類物質(zhì)，新近研究表明肥胖與體內(nèi)VitD含量減少有關(guān)[3]，而英國的一項研究顯示，肥胖也會導(dǎo)致體內(nèi)VitD含量不足，兩者之間互成因果[9]，與本研究觀點相近。25(OH)D是目前公認的可以反映體內(nèi)VitD缺乏的可靠指標，一般認為：血清25(OH)D濃度>50 nmol/L為適宜水平，37.5～50 nmol/L為VitD不足，<37.5 nmol/L為VitD缺乏[10]。本研究依據(jù)這一標準，采用了25(OH)D檢測的參考方法(液相色譜-質(zhì)譜法)[11]，檢測分析了150例單純性肥胖兒童的血清25(OH)D水平，結(jié)果顯示，在這150例單純性肥胖兒童中，VitD缺乏者超過30%，超過60%患兒處在VitD不足狀態(tài)，經(jīng)過回歸分析發(fā)現(xiàn)，患兒體內(nèi)25(OH)D含量與患兒BMI指數(shù)呈負相關(guān)。反面證明，適量補充VitD對單純性肥胖兒童控制體重有正面積極的效應(yīng)。血清25(OH)D缺乏可導(dǎo)致兒童肥胖的原因仍在研究中，目前有部分學(xué)者認為可能與VitD是血清PTH水平的重要調(diào)節(jié)因子有關(guān)，VitD缺乏可導(dǎo)致血PTH水平升高，PTH能刺激鈣離子流入脂肪細胞內(nèi)，刺激脂肪細胞數(shù)量增加，導(dǎo)致體質(zhì)量增加。1，25(OH)2D通過VDR抑制脂肪形成過程中的關(guān)鍵分子過氧化物酶體增殖物活化受體γ及CCAAT增強子結(jié)合蛋白a來調(diào)節(jié)脂肪形成。因此VitD儲存的減少可導(dǎo)致前脂肪細胞向脂肪細胞的過度分化。還有部分學(xué)者認為1，25-(OH)2-D3通過nVDR(維生素D受體)介導(dǎo)的基因調(diào)節(jié)作用抑制脂肪細胞UCP2(解耦聯(lián)蛋白2)的表達，并通過mVDR刺激脂肪細胞Ca2+的非基因作用，促進脂肪分解[10]。本研究發(fā)現(xiàn)，在合理膳食，適量運動的基礎(chǔ)上，適當補充VitD或者適度的日照量，都有利于補充單純性肥胖患兒體內(nèi)25(OH)D含量，改變肥胖兒童VitD不足甚至缺乏的狀況，并降低瘦素水平，有利于控制肥胖。從而為兒童單純性肥胖提供了新的防控思路。

本研究的結(jié)果數(shù)據(jù)表明，適當補充VitD和適度的日照量對改觀單純性肥胖兒童體內(nèi)25(OH)D缺乏及不足均有積極的作用，并能有效降低患兒血清瘦素水平，可作為一項簡單快捷的防控兒童單純性肥胖的有效手段，且對于機體的其它機能的調(diào)節(jié)有正面作用。當然，過度的日照會增加皮膚癌的風(fēng)險，長期大劑量的服用VitD也會帶來諸如高鈣血癥等潛在不良反應(yīng)，關(guān)于VitD含量及日照量最適參考范圍的確立，有待未來研究者們開展大范圍前瞻性的研究來解決。

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