急性呼吸窘迫綜合征患者血清中嗜酸性粒細胞趨化因子－3、白細胞介素－13和－35的表達及意義

急性呼吸窘迫綜合征患者血清中嗜酸性粒細胞趨化因子-3、白細胞介素-13和-35的表達及意義

劉鈺曾俊汪衛(wèi)立

(金華廣福醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，浙江金華321000)

摘要〔〕目的觀察急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)患者血清中嗜酸性粒細胞趨化因子(EOTAXIN)-3、白細胞介素(IL)-13及-35表達，分析其臨床價值。方法78例ARDS患者作為觀察組，70例正常成人血清樣本作為對照組，檢測兩組血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表達，分析三者在不同臨床特征中的表達差別。結(jié)果兩組血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義。觀察組血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表達與病變嚴重程度及預(yù)后密切相關(guān)。相關(guān)分析顯示觀察組中EOTAXIN-3和IL-13具有正相關(guān)性，IL-13和IL-35具有負相關(guān)性。結(jié)論ARDS患者血清中EOTAXIN-3和IL-13高表達、IL-35低表達不僅可以促進病變進展，還能在一定程度上判斷病情嚴重程度和預(yù)后。EOTAXIN-3、IL-13和IL-35可能具有一定的協(xié)同作用。

關(guān)鍵詞〔〕急性呼吸窘迫綜合征；嗜酸性粒細胞趨化因子-3；白細胞介素(IL)-13；IL-35

中圖分類號〔〕R56〔文獻標識碼〕A〔

第一作者：劉鈺(1977-)，男，主治醫(yī)師，主要從事重癥醫(yī)學(xué)研究。

急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)是一種常見的危重癥，病死率較高〔1〕，其發(fā)病機制復(fù)雜，主要與肺水腫形成和肺組織炎癥反應(yīng)發(fā)生相關(guān)〔2〕。嗜酸性粒細胞趨化因子(EOTAXIN)-3被認為與遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)相關(guān)的炎性因子，同時對判斷急、慢性炎癥的程度有一定作用〔3〕。白細胞介素(IL)-13是一種由CD4+的Th2細胞分泌的多效性細胞因子，不僅具有免疫調(diào)節(jié)作用，還可以激活EOTAXIN，形成炎性的瀑布效應(yīng)〔4〕。IL-35是IL家族的新成員，可以抑制炎癥反應(yīng)，并防止過度的自身免疫反應(yīng)發(fā)生〔5〕。本研究關(guān)注ARDS患者血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表達，探討其臨床意義。

1資料與方法

1.1一般資料2011年1月至2013年12月我院診治的ARDS患者78例作為觀察組，其中男41例，女37例；年齡42~84歲，平均60.3歲。納入?yún)⒖糐AMA：ARDS柏林定義〔6〕。排除標準：①伴有惡性腫瘤的患者；②有風(fēng)濕免疫性疾病史的患者；③嚴重血液系統(tǒng)疾病的患者。選擇同期在我院體驗證實為健康的成年人血清標本作為對照組，其中男35例，女35例；年齡45~67歲，平均57.7歲。

1.2EOTAXIN-3、IL-13和IL-35檢測方法觀察組于確診后抽取空腹靜脈血10 ml，對照組抽取空腹靜脈血10 ml，離心后分離血清，放在-20℃冰箱中待檢。EOTAXIN-3、IL-13和IL-35檢測均應(yīng)用ELISA法。嚴格實驗步驟，努力減少誤差。

1.3氧合狀態(tài)分級輕度：血氧分壓(PaO2)/吸入氣氧濃度分數(shù)(FIO2)=201~300 mmHg，且呼氣末正壓(PEEP)或持續(xù)氣道正壓(CPAP)≤5 cmH2O。中度：PaO2/FIO2=101~200 mmHg，且PEEP≥5 cmH2O。重度：PaO2/FIO2≤100 mmHg，且PEEP≥10 cmH2O。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SAS6.12軟件進行t檢驗、方差分析和線性相關(guān)性分析。

2結(jié)果

2.1兩組血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35表達的比較觀察組中EOTAXIN-3和IL-13表達明顯高于對照組，IL-35表達明顯低于對照組。見表1。

2.2不同氧合狀態(tài)分組患者血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35表達的比較不同氧合狀態(tài)分組患者血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義。見表2。

2.3隨訪存活組與死亡組血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35表達量的比較存活和死亡組血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表達量差異有統(tǒng)計學(xué)意義。見表3。

2.4觀察組中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35表達的相關(guān)性觀察組中EOTAXIN-3和IL-13具有正相關(guān)性(r=0.46，P=0.041 2)，IL-13和IL-35具有負相關(guān)性(r=-0.48，P=0.040 9)。

組別nEOTAXIN-3(μg/L)IL-13(mg/L)IL-35(mg/L)觀察組7878.20±16.4376.71±12.5755.86±20.87對照組7053.34±11.8546.54±9.7698.45±16.76t/P值8.68/0.010811.23/0.003110.13/0.0086

表2不同氧合狀態(tài)分組患者血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35表達的比較

氧合狀態(tài)nEOTAXIN-3(μg/L)IL-13(mg/L)IL-35(mg/L)輕度2670.81±20.3266.37±18.5166.46±14.32中度2877.51±19.8674.77±20.4154.65±16.13重度2485.51±20.3189.61±21.2655.73±13.31F/P值8.09/0.01527.97/0.01987.61/0.0214

組別nEOTAXIN-3(μg/L)IL-13(mg/L)IL-35(mg/L)存活組6070.41±20.5164.56±11.2463.47±20.12死亡組1897.13±21.32113.13±32.4633.74±7.65t/P值7.08/0.029811.23/0.00029.31/0.0119

3討論

ARDS是全身炎癥性反應(yīng)發(fā)生在肺部的表現(xiàn)，也提示機體正常炎性反應(yīng)過度〔7,8〕。在ARDS發(fā)展過程中，促炎介質(zhì)與抗炎介質(zhì)的平衡失調(diào)〔9,10〕。EOTAXIN-3是一種選擇性EOTAXIN和強有力的激活劑，通過與其受體結(jié)合，引起機體一系列的反應(yīng)，主要見于炎性疾病，尤其是在炎性介質(zhì)誘導(dǎo)后使其分泌增多〔11〕。EOTAXIN-3在機體內(nèi)環(huán)境中升高提示機體存在著明顯的致炎因子及持續(xù)性亞急性或慢性炎癥改變〔12〕。IL-13主要由活化的Th2細胞分泌，活化的單核細胞、CD8+細胞和B細胞也可以少量產(chǎn)生。IL-13可以刺激B細胞的增殖過程，減少其凋亡現(xiàn)象，同時對Ig合成有一定的影響〔13,14〕。有研究認為IL-13可抑制單核細胞的抗體介導(dǎo)的細胞毒作用，并調(diào)節(jié)炎性相關(guān)因子DNA和mRNA的表達，在轉(zhuǎn)錄水平上抑制其發(fā)生，其常與IL-1、IL-6、腫瘤壞死因子(TNF)-α等協(xié)同作用〔15〕。IL-35是IL家族的新成員，主要由Treg分泌，在正常機體中表達較為穩(wěn)定，對抑制炎性反應(yīng)及免疫因子的活性有重要作用〔16,17〕。IL-35可以防止過度的自身免疫反應(yīng)發(fā)生〔18〕。也有觀點認為IL-35在經(jīng)樹突細胞刺激后產(chǎn)生，能抑制外周血中CD4和CD8陽性的T細胞反應(yīng)，抑制過敏性疾病的發(fā)展〔19,20〕。

本實驗提示EOTAXIN-3和IL-13、IL-35三者異常表達對促進病變進展有重要作用。EOTAXIN-3的高表達是機體炎性高反應(yīng)狀態(tài)的一個指標，可以激活嗜堿性粒細胞、CD4陽性的T細胞和樹突細胞。研究認為EOTAXIN-3還可以促進IL-1B、IL-4和IL-5的表達，使機體的亞急性炎癥或慢性炎癥呈持續(xù)性發(fā)展〔12〕。本實驗結(jié)果提示EOTAXIN-3、IL-13和IL-35蛋白均參與ARDS的進展過程，也提示在ARDS病變形成和發(fā)展過程中聯(lián)合檢測EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表達可以在一定程度上判斷病變程度和患者的預(yù)后，即EOTAXIN-3和IL-13高表達、IL-35低表達時病變進展快，患者的預(yù)后差。本文提示EOTAXIN-3、IL-13和IL-35之間具有一定的協(xié)同作用。孟瑩等〔15〕認為EOTAXIN-3是嗜酸性粒細胞化學(xué)激動劑，可以釋放信號促使嗜酸性粒細胞向炎癥區(qū)域浸潤，并在過敏反應(yīng)的早期階段激活免疫相關(guān)細胞，IL-13對EOTAXIN-3有刺激作用，呈明顯的量效關(guān)系。Li等〔21〕也認為IL-13是引起EOTAXIN-3表達的最重要的細胞因子，而與炎癥相關(guān)最重要的TNF-α，不能刺激EOTAXIN-3的產(chǎn)生，但是TNF-α可以增加IL-13的表達，進而有效刺激EOTAXIN-3的分泌。

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〔2013-12-19修回〕

(編輯苑云杰)