摘要:目的 ABO正定型檢測(cè)中使用最少量的抗A抗B檢測(cè)出患者的血型。方法 對(duì)門診32例建卡孕婦分別進(jìn)行ABO血型正定型測(cè)定,并逐步減少抗A抗B的加入量,觀察結(jié)果。結(jié)果 32例標(biāo)本用2%的RBC懸液分別加入50μl、40μl、30μl、20μl、10μl的抗A抗B,離心速度1000轉(zhuǎn)1min后均能檢測(cè)出患者的ABO血型。結(jié)論 ABO血型正定型檢測(cè)中用2%的RBC懸液加入10μl的抗A抗B即能檢測(cè)出患者的血型。
關(guān)鍵詞:ABO血型;正定型檢測(cè)
Determination of the Least Amount of Reagent in the ABO Type Positive Test
FAN Xiao-chun
(Department of Clinical Laboratory,Shuyang County Renci Hospital,Suqian 223600,Jiangsu,China)
Abstract:Objective ABO is setting using the least amount of anti A and anti B detected in the patient's blood type detection. Methods 32 cases of pregnant women were the cards ABO blood group positive type determination, and gradually reduce the amount of anti A and anti B, observations. Results 32 samples with 2% RBC suspension were added to 50 L, 40 L, 30 l, 20 L, 10 microliters of anti A and anti B, centrifugal speed 1000 rpm for 1 minutes could be detected with ABO blood group. Conclusion ABO blood group positive type detection by 2% RBC suspension into 10 microliters of anti A and anti B can detect the patient's blood type..
Key words:ABO blood group;Positive type detection
ABO血型系統(tǒng)是臨床輸血、器官移植和新生兒溶血、親緣鑒定、法醫(yī)學(xué)鑒定以及某些疾病相關(guān)調(diào)查的最重要的血型系統(tǒng)。1900年出生在奧地利的美國(guó)免疫學(xué)家Karl Landsteiner(1868年~1943年)發(fā)現(xiàn)了不同人的RBC膜上的A抗原和B抗原以及血清中的A抗體和B抗體各不相同。根據(jù)人類RBC膜上是否有A抗原或B抗原,以及血清中是否有A抗體和B抗體,將人類的血型分為四類,即A型、B型、AB型和O型。A型血中RBC膜表面有A抗原,血清中有B抗體;B型血中RBC膜表面有B抗原,血清中有A抗體;AB型血中RBC膜表面有A抗原和B抗原,血清中無(wú)A抗體和B抗體;O型血中RBC膜表面無(wú)A抗原和B抗原,血清中有A抗體和B抗體。
人類的ABO血型抗原一般是終身變的。ABO抗原主要存在于人體的RBC膜上,也存在于人體WBC﹑PLT﹑某些血漿蛋白以及其他組織細(xì)胞上。組織細(xì)胞合成并分泌的ABO血型抗原稱為血型物質(zhì),這種血型物質(zhì)的檢測(cè)可幫助ABO血型的鑒定,血型物質(zhì)存在于各種分泌物和體液中,唾液中含量是最高的,然后是血清﹑尿液﹑精液﹑羊水﹑汗液﹑胃液、乳液、膽汁等。
1 資料與方法
1.1一般資料 選取本院20~25歲建卡孕婦32例,每位患者采集1管EDTA抗凝的靜脈血液。
1.2 儀器 離心機(jī)、50μl的加樣槍、1000μl的加樣槍、上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司的抗A抗B血型定型試劑(單克隆抗體)、顯微鏡、玻片一次性塑料試管、一次性塑料吸管。
1.3方法 ①將32例標(biāo)本編號(hào)并分別制出2%的RBC懸液(用1000μl的加樣槍取出980μl的生理鹽水至一次性塑料試管中,將抗凝血液離心分離出RBC,用50μl的加樣槍取出20μl的RBC至980μl的生理鹽水中);②將一次性塑料試管分別按順序編號(hào),每個(gè)號(hào)碼分A管和B管(例1A,1B,2A,2B.);③用1000μl的加樣槍分別將每份標(biāo)本的2%RBC懸液吸取300μl加至A管和B管中;④在A管中加入50μl的抗A,在B管中加入50μl的抗B離心(1000轉(zhuǎn)1min)觀察結(jié)果:分別取出一次性塑料管輕輕晃動(dòng)觀察,再用一次性吸管分別吸取在玻片上至顯微鏡低倍視野下觀察;⑤然后再重復(fù)①~③的操作依次的減少在A管和B管中加入抗A抗B的量(40μl,30μl,20μl,10μl)分別離心觀看結(jié)果。
2結(jié)果
2.1結(jié)果的判斷標(biāo)準(zhǔn) ①A型:A管出現(xiàn)凝集,B管不出現(xiàn)凝集;②B型:A管不出現(xiàn)凝集,B管出現(xiàn)凝集;③AB型:A管出現(xiàn)凝集,B管出現(xiàn)凝集;④O型:A管不出現(xiàn)凝集,B管不出現(xiàn)凝集。
2.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果 32例標(biāo)本分別加入的50μl,40μl,30μl,20μl,10μl的抗A抗B,經(jīng)離心1000轉(zhuǎn)1min后均得到相應(yīng)的血型。
3 討論
新生兒的ABO血型抗原特別的弱,約為成人的20%,血清中的抗體也未穩(wěn)定,所以新生兒在做血型鑒定時(shí)只做正定型。之后隨著成長(zhǎng)ABO血型的抗原性也逐漸增強(qiáng),大概20歲左右就能到達(dá)高峰期,當(dāng)進(jìn)入老年期的時(shí)候ABO血型的抗原性則逐漸減低。本次試驗(yàn)共檢測(cè)了32例20~25歲的建卡孕婦,恒定的取了300微升的2%RBC懸液,分別取了50μl、40μl、30μl、20μl、10μl的抗A抗B,得出的結(jié)果的準(zhǔn)確率是100%。
4結(jié)論
通過(guò)本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,20歲左右的建卡孕婦血型檢測(cè)我們可以節(jié)省試劑的用量,即取2%的RBC懸液300μl,加入10μl的抗A抗B離心1000轉(zhuǎn)1min即可得出患者的血型。
參考文獻(xiàn):
[1]中華人民共和國(guó).中國(guó)輸血技術(shù)操作規(guī)程-血站部分[M].天津科學(xué)技術(shù)出版社,1997.60-63.
[2]熊立凡,劉成玉主編.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M].第4版,北京:人民衛(wèi)生出版社,2008.
編輯/馮焱