摘要:目的 探討病毒滅活冰凍血漿融化后24h內凝血因子、纖維蛋白的變化,為指導臨床用血漿治療提供理論依據。方法 采用血栓彈力圖儀,對20份血漿樣品分別于融化后0、6、12、24h測定R時間和α角度。結果 病毒滅活血漿融化后放置12hα角度與剛融化時相比差異有統(tǒng)計學意義,放置24hR時間與0h相比差異有統(tǒng)計學意義。結論 病毒滅活冰凍血漿融化后放置會有凝血因子、纖維蛋白活性衰減,為保證輸血質量,應盡可能融化后12h內輸注。
關鍵詞:病毒滅活血漿;血栓彈力圖;凝血因子;纖維蛋白
輸血是臨床搶救和治療患者的重要手段之一,但同時也有傳染疾病的風險。血液成分中傳播病毒危險性最大的是白細胞,其次為血漿,因此對血漿進行病毒滅活并濾除白細胞成為保障輸血安全的主要措施之一[1]。亞甲基藍光化學法( methylene blue photochemistry ,MB-P )是已獲準用于臨床的光化學血漿病毒滅活技術[2],現已被應用于國內血站系統(tǒng),并取得了良好的臨床效果。然而,凝血因子的不穩(wěn)定性及臨床時常出現血漿融化后不能及時應用等原因會影響治療的效果。為了準確了解冰凍血漿的治療時效性,我們用血栓彈力圖(thrombelastogram,TEG)反映病毒滅活冰凍血漿融化后放置不同時間凝血酶的狀態(tài)和纖維蛋白原功能,現報告如下。
1 資料與方法
1.1一般資料 20份病毒滅活冰凍血漿來自南京市紅十字血液中心,嚴格按照《中國輸血技術操作規(guī)程》進行制備,達到國家規(guī)定的成份血質量要求。
1.2 實驗儀器與試劑 采用 Haemoscope TEG 5000 血栓彈力圖儀,試劑均為 Haemoscope 公司生產,有普通杯 ( Lot.HMO9132 ) ,Kaolin管( Lot.HMO400) ,另有上海長島生物技術有限公司生產氯化鈣試劑(批號:1312241)。
1.3 取樣方法 隨機分批留取病毒滅活冰凍血漿20例份,37℃水浴融化。融化后立即在超凈工作臺內嚴格按無菌技術要求各留取兩試管血漿,每管5ml,隨即進行血栓彈力圖測定為0時值,然后把一份血漿樣品放入4℃ 冰箱,另一份血漿樣品室溫保存,在6、12、24h 分別進行測定。
1.4檢測方法 血栓彈力圖R時間和α角度測定方法嚴格按照 Haemoscope TEG 5000 血栓彈力圖儀操作說明和試劑要求。工作原理為測試杯隨著杯架以40~45′來回旋轉,杯蓋與懸垂絲結合在一起,血塊使杯子和杯蓋耦合在一起。杯蓋的運動使懸垂絲產生扭動,杯蓋的運動反映血塊的強度。機器里面的傳感器將懸垂絲的扭動的位移變化轉化成電信號,電信號傳導到計算機供TEG軟件進行分析,繪制出血凝速度和強度曲線[3],從而檢測計算受檢血漿R時間和α角度。
1.5統(tǒng)計學方法 所測數據用均數±標準差(x ±s)表示,采用配對資料t檢驗。P <0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。
2 結果
病毒滅活冰凍血漿融化后室溫和4℃冰箱放置24h 內R時間和α角度變化見表1。
3 討論
血栓彈力圖(Thrombelastograghy,TEG)儀是整體評價凝血過程的分析儀,它用少量樣本可監(jiān)測凝血因子、纖維蛋白原、纖溶系統(tǒng)和其他成分之間的相互作用,準確的提供患者的凝血概況[4]?,F已成為臨床上監(jiān)測凝血功能的重要檢查方法之一,在多個國家的輸血、麻醉、重癥、心外等指南里被建議使用。本資料檢測指標R(反應時間):時間參數,是從測試開始到2mm開口的時間,用分鐘來表示。這最能反應凝血中凝血酶的狀態(tài)。α(角度):用于測量纖維蛋白形成和聯結成網的速度。這最能反映纖維蛋白原的水平。本資料顯示病毒滅活冰凍血漿融化后4℃和常溫存放6hR時間和α角度與血漿剛融化時比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),存放12h后α角度有明顯的改變(P<0.05),24h后R時間有明顯變化(P<0.05)。本資料α角度的改變與多篇文獻資料直接檢測纖維蛋白含量變化結果不同,文獻[5,6]提示纖維蛋白含量在血漿融化后放置24h內均無顯著變化,而血栓彈力圖曲線顯示病毒滅活血漿纖維蛋白原的功能在融化放置12h后即有明顯改變,這可能與血栓彈力圖儀檢測的是凝血的連續(xù)狀態(tài)有關,提示我們?yōu)楸WC輸血質量,應盡可能在病毒滅活冰凍血漿融化后12h內輸注。
參考文獻:
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編輯/馮焱