HPV分型檢測(cè)在CIN患者LEEP術(shù)后隨訪的臨床研究

摘要：目的 檢測(cè)宮頸上皮內(nèi)瘤變患者Ⅰ-Ⅲ（CINⅠ-Ⅲ）高頻電刀錐切術(shù)（LEEP）治療后高危型乳頭瘤病毒（HPV）及其亞型清除的情況，評(píng)價(jià)手術(shù)療效及其隨訪價(jià)值。方法 200例因CINⅠ-Ⅲ接受LEEP手術(shù)治療的患者，隨機(jī)分為三組，術(shù)前HPVDNA檢測(cè)證實(shí)高危型HPV感染。治療后6個(gè)月再次檢測(cè)HPVDNA，如為高危型HPV持續(xù)感染再次行活檢病理學(xué)檢查。比較各組HPV及其亞型術(shù)后清除率。結(jié)果 各年齡組LEEP治療后HPV清除率分別為93.7%、71.4%、64.2%，各年齡組兩兩比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；隨CIN級(jí)別增加，術(shù)后HPV清除率下降，不同級(jí)別間HPV清除率分別具有顯著性（P<0.05）；HPV16、18亞型清除率各年齡組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其它亞型清除率各年齡組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；隨CIN級(jí)別增加，術(shù)后HPV16、18亞型清除率下降，其它亞型清除率下降， 不同級(jí)別間各亞型清除率比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 LEEP可在切除病變的同時(shí)清除HPV，是一種簡(jiǎn)單安全的手術(shù)；術(shù)后6個(gè)月HPV分型檢測(cè)是一種較好的隨訪方法；對(duì)年齡較大，病變程度高，尤其是術(shù)后HPV16、18亞型持續(xù)感染人群應(yīng)密切加強(qiáng)隨訪。

關(guān)鍵詞：宮頸上皮內(nèi)瘤變；人乳頭瘤病毒；高頻電刀錐切術(shù)

中圖分類(lèi)號(hào)：R711.74 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A

Detection of HPV Types in CIN LEEP Postoperative Follow-up of Patients with Clinical Studies

HU Yan-mei

（Panzhihua Maternal and Child Health Hospital， Panzhihua 617071，Sichuan，China）

Abstract：Objective Detection in patients with cervical intraepithelial neoplasia Ⅰ - Ⅲ （CIN Ⅰ - Ⅲ） high frequency electric knife cut method （LEEP） after treatment of high-risk type cone papilloma virus （HPV） and its subtypes removal， evaluating the effect of surgery and follow-up value. Methods 200 cases for CIN Ⅰ-ⅢLEEP surgery treatment of the patients， randomly divided into 3 groups， preoperative HPVDNA tests identified high-risk type HPV infection. 6 months after treatment HPVDNA again detection， such as high risk type HPV persistent infection， biopsy pathology examination again. Comparison between groups of HPV and its subtypes postoperative clearance. Results HPV clearance after LEEP treatment among all age groups are 93.7%， 71.4% and 93.7% respectively， two comparison among all age groups was statistically significant （P<0.05）； With the increase of level of CIN， HPV clearance decreased postoperatively， HPV clearance between different levels， respectively is significant （P<0.05）； HPV16， 18 subtype clearance comparison among all age groups was statistically significant （P < 0.05）， other subtypes clearance comparison among all age groups had no statistical significance （P>0.05）； With the increase of level of CIN， HPV16， 18 subtype clearance decreased postoperatively， other subtypes clearance decreased，each subtype of clearance between different levels is no statistical significance （P>0.05）. Conclusion ①LEEP in the diseased clear HPV at the same time， is a kind of simple and safe operation；②after 6 months of HPV types detection method is a kind of good follow-up；③To older， high degree of pathological changes， especially postoperative HPV16， 18 subtype infected people should strengthen follow-up closely。

Key words： Cervical intraepithelial neoplasia；Human papilloma virus；High frequency electricity knife cone cut method

宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepthelial neoplasia CIN）是與宮頸浸潤(rùn)癌密切相關(guān)的一組癌前病變。宮頸高頻電刀錐切（loop electrosurgical excision procedure LEEP）是目前治療CIN的主要有效手段。研究表明[1]，消融或切除治療CIN失敗的比率在1%～25%，且大多數(shù)失敗發(fā)生在治療2年后。因此，治療后隨訪是必需的。

治療后隨訪中應(yīng)用HPV-DNA檢測(cè)的系統(tǒng)性綜述表明，其性能優(yōu)于細(xì)胞學(xué)隨訪方法[2]。本文對(duì)200例CINⅠ-Ⅲ患者術(shù)后隨訪，通過(guò)比較術(shù)前及術(shù)后6月HPV及其亞型清除率改變，從而為HPVDNA分型檢測(cè)在 CINⅠ-Ⅲ LEEP治療后的隨訪提供進(jìn)一步的依據(jù)。

1資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011年11月～2013年12月在我院診斷為CINⅠ-Ⅲ 并實(shí)施LEEP術(shù)的患者200例，隨機(jī)按年齡分為三組。每組分別為 63例、70例、67例。納入標(biāo)準(zhǔn)：術(shù)前行HPV檢測(cè)高危型HPV陽(yáng)性，陰道鏡活檢病理檢查證實(shí)為CINⅠ-Ⅲ，無(wú)腺體累及、頸管搔刮結(jié)果陰性的已婚婦女。排除標(biāo)準(zhǔn)：妊娠期、哺乳期婦女。

1.2 方法

1.2.1 HPV標(biāo)本采集 每位患者使用HPV專用刷完全插入宮頸口同一方向旋轉(zhuǎn)3～5w，將采集的樣本刷頭放入保存液試管小瓶?jī)?nèi)蓋緊瓶蓋。經(jīng)專利Invader酶切信號(hào)放大法可以檢測(cè)出14種高危型HPV病毒（51、56、66、18、39、45、59、68、16、31、33、35、52、58）。

1.2.2 LEEP手術(shù) 將陰道鏡下病檢結(jié)果為CINⅠ-Ⅲ的患者在簽署知情同意書(shū)的情況下行LEEP手術(shù)治療。手術(shù)時(shí)間均在月經(jīng)干凈后3～7d進(jìn)行。手術(shù)器械：德國(guó)WALLACH高頻電刀。操作方法：根據(jù)宮頸大小及病變范圍選用不同型號(hào)環(huán)形電刀。切割功率為40-60W，電凝功率為50W?；颊呷“螂捉厥?，常規(guī)消毒鋪巾，放置窺陰器，充分暴露宮頸陰道部，擦拭宮頸分泌物后碘染宮頸，標(biāo)記移形帶及病灶區(qū)域，電極從碘不著色外緣3～5mm處開(kāi)始。電切環(huán)與宮頸表面垂直切入宮頸組織，到達(dá)需要深度，緩慢均勻連續(xù)移動(dòng)電切環(huán)，直至患者病變外側(cè)3～5mm處出電切環(huán)。宮頸管切除深度：CIN Ⅰ-Ⅱ切除深度約1.5～2.0cm，CIN Ⅲ切除深度約2.0～2.5cm。宮頸標(biāo)本在\"12點(diǎn)\"標(biāo)記后送病檢。宮頸殘端有滲血者用球形電凝器止血，必要時(shí)予以止血紗布?jí)浩龋?4h取出。

1.2.3 術(shù)后隨訪 術(shù)后3月常規(guī)檢查創(chuàng)面愈合情況，術(shù)后6月行HPVDNA分型檢測(cè)，持續(xù)感染者行陰道鏡檢查，必要時(shí)活檢。所有活檢標(biāo)本由2名病理醫(yī)生盲法閱片做出判斷。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料采用χ2，等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)ɑ=0.05，P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同年齡組術(shù)后6個(gè)月HPV清除情況 隨年齡增加，術(shù)后6月HPV清除率逐漸下降，不同年齡組清除率兩兩比較，三組中21～30歲組分別與另兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2.2不同CIN病變程度術(shù)后6個(gè)月HPV清除情況 隨CIN級(jí)別的增加，術(shù)后6個(gè)月HPV清除率逐漸下降，不同級(jí)別間清除率兩兩比較分別具有顯著性（P<0.05）。

2.3 不同年齡組術(shù)后HPV亞型清除情況 隨年齡增加，術(shù)后6月HPV各亞型清除率逐漸下降，16、18亞型清除率各年齡組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其它亞型清除率各年齡組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

注：凡是HPV 16、18亞型感染與其它亞型有多重感染者均列入HPV16、18亞型感染中。

2.4不同CIN病變程度術(shù)后6個(gè)月HPV亞型清除情況 隨CIN級(jí)別增加，術(shù)后6個(gè)月HPV各亞型清除率逐漸下降， 不同級(jí)別間各亞型清除率比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.5 術(shù)后6個(gè)月HPV持續(xù)感染患者再次病理檢查情況 見(jiàn)表5。

3 討論

3.1.LEEP術(shù)對(duì)宮頸CIN患者治療效果 研究表明[3]，LEEP可降低HPV的感染，HPV在LEEP治療后6個(gè)月清除最明顯，其清除率約為79.7%。本研究中，HPV在不同年齡及病變程度間均有明顯下降，與既往研究結(jié)果一致，進(jìn)一步說(shuō)明LEEP有利于HPV的清除。LEEP通過(guò)對(duì)宮頸病灶的燒灼，祛除了宮頸表面的異常細(xì)胞，切除了HPV賴以生存的部位，從而減少、消除了HPV病毒的感染，達(dá)到了治療的目的[4]。

3.2 不同年齡組術(shù)后HPV及其亞型清除率的比較 有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)[5]，年齡因素是CIN術(shù)后HPV復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素，尤其是超過(guò)35歲的患者容易出現(xiàn)HPV持續(xù)感染，故年齡較大的患者容易造成治療效果差，高危型HPV感染不易被清除，術(shù)后持續(xù)感染率高。本研究中，在同一隨診期限內(nèi)，隨年齡增加，HPV及其亞型清除率均逐漸下降。分析以上結(jié)果，反映出年齡在CIN術(shù)后對(duì)療效的影響，年齡越大，病灶越不易清除，病灶殘留時(shí)間越長(zhǎng)，治療效果越差。故臨床上對(duì)年齡較大的CIN術(shù)后患者，應(yīng)加強(qiáng)隨訪，鞏固治療。

3.3 不同級(jí)別間術(shù)后HPV及其亞型清除率的比較 文獻(xiàn)報(bào)道切緣陽(yáng)性與病變程度有關(guān)[6]。本研究中，隨著病變程度的提高，術(shù)后HPV及其亞型清除率均逐漸下降，這提示我們，隨著病變級(jí)別的增加，LEEP術(shù)后病灶殘留機(jī)率增加，因此，對(duì)病變程度高的患者應(yīng)加強(qiáng)隨訪，以早期發(fā)現(xiàn)殘留病灶。

CIN 治療失敗或術(shù)后復(fù)發(fā)的主要危險(xiǎn)因素同一亞型高危型HPV的持續(xù)感染[7]。如果HPV分型結(jié)果是陽(yáng)性，則需要判別患者現(xiàn)在感染的HPV亞型與術(shù)前感染的亞型是否相同，如果相同則說(shuō)明術(shù)后還存在著殘留的風(fēng)險(xiǎn)，如果感染的是不同亞型，說(shuō)明患者又有新的感染，對(duì)HPV 16、18亞型感染的患者其隨訪次數(shù)應(yīng)大于其它亞型感染者。因此，HPV分型檢測(cè)在隨訪中有助于判斷高危型持續(xù)感染還是新亞型的新型感染，是多型混合感染還是單獨(dú)亞型病毒感染。由于HPV分型檢測(cè)的優(yōu)越性，它已成為宮頸疾病治療后最好的隨訪指標(biāo)。

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編輯/王海靜