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    中國北方HLA-B27 陽性強(qiáng)直性脊柱炎患者同乙型肝炎表面抗原陽性率無相關(guān)性

    2015-11-29 08:31:44孫士鵬程實(shí)龐博馮雪安成劉貴建
    生物技術(shù)通訊 2015年5期
    關(guān)鍵詞:亞型陽性率陰性

    孫士鵬,程實(shí),龐博,馮雪,安成,劉貴建

    中國中醫(yī)科學(xué)院 廣安門醫(yī)院檢驗(yàn)科,北京 100053

    強(qiáng)直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一種慢性炎癥性疾病,發(fā)病原因尚不明確,目前主要認(rèn)為是由環(huán)境及遺傳因素等引起的一種自身免疫性疾病。HLA-B27 陽性率同AS 的易感性之間密切相關(guān),85%~90%的AS 患者HLA-B27 陽性[1]。同HLAB27 陰性的AS 患者相比,HLA-B27 陽性AS 患者往往病程長、功能狀態(tài)差、生活質(zhì)量差、關(guān)節(jié)外癥狀較多[2]。然而,目前HLA-B27 在AS 發(fā)病中的作用仍不清楚,主流觀點(diǎn)解釋為“分子模擬”和“關(guān)節(jié)源性抗原肽”假說。HLA-B27是MHC-Ⅰ類分子,能夠?qū)⒖乖蔬f給T 細(xì)胞引發(fā)機(jī)體的細(xì)胞免疫,一些微生物和宿主之間存在交叉反應(yīng)的多肽(序列一致或高度相似),微生物感染后刺激T 細(xì)胞產(chǎn)生針對(duì)宿主自身HLA-B27相關(guān)多肽的免疫反應(yīng)。

    乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是全球性的公共衛(wèi)生問題,血清學(xué)檢測結(jié)果顯示約30%的人正在或者既往感染過HBV。中國、南亞、非洲大部分地區(qū)、太平洋島國、中東部分地區(qū)和亞馬遜盆地為高發(fā)區(qū)[3]。Zheng 等研究發(fā)現(xiàn)[4],AS 患者中乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)陽性率為23.92%(105/439),顯著高于健康人群和脊柱關(guān)節(jié)病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎,而且HLA-B27 陽性AS 患者的HBsAg 陽性率顯著高于HLA-B27 陰性的AS 患者,因而他們認(rèn)為AS 患者較高的HBsAg 分布可能和HLA-B27 基因高度相關(guān)。由于HBsAg 能夠誘導(dǎo)細(xì)胞免疫[5-6],所以HBsAg 陽性或HBV 感染者可能參與到AS 這種自身免疫性疾病的發(fā)病。我們在前期研究中也發(fā)現(xiàn)HBV大S蛋白中的一段多肽(FRVVAVQNL)同人自身Ⅳ型骨膠原的一段多肽(FRVGNVQEL)僅有3 個(gè)氨基酸的差別[4],這段序列可能是HLA-B27 識(shí)別的抗原表位,通過分子模擬作用引起AS[7]。因而,研究HLA-B27陽性AS患者同HBsAg 陽性率之間的關(guān)系,可能有助于揭示AS 的致病機(jī)制。但也有研究表明AS 患者中HBsAg陽性率只有2%,和健康對(duì)照組相比無顯著差異[8]。因而,我們針對(duì)中國北方人群HLA-B27 陽性的AS患者同HBSAg陽性率之間的相關(guān)性進(jìn)行了研究。

    1 資料和方法

    1.1 研究對(duì)象

    我院2013年1~12月149例HLA-B27陽性的AS患者和281 例社區(qū)健康體檢者(表1),149 例入組患者符合AS 診斷的1984 修改的紐約標(biāo)準(zhǔn)。另有同期我院503 例門診病人,其中264 例為HLA-B27 陽性,239例為HLA-B27陰性(表2)。

    1.2 檢測方法

    表1 AS組和健康對(duì)照組資料

    表2 HLA-B27陽性組和HLA-B27陰性組資料

    用Beckman Coulter 公司的FC500 流式細(xì)胞儀和BD 公司的HLA-B27檢測試劑盒(流式細(xì)胞法)檢測外周血淋巴細(xì)胞HLA-B27陽性率。

    用上??迫A生物公司的HBsAg檢測ELISA 試劑盒和TECAN Freedom EVOlyzer 150/4 全自動(dòng)酶聯(lián)免疫工作站進(jìn)行HBsAg 血清學(xué)檢測,實(shí)驗(yàn)步驟參照試劑盒和儀器說明書。設(shè)4 個(gè)陰性對(duì)照(NC)和1 個(gè)陽性對(duì)照(PC),檢測結(jié)果以D450/630nm值示,PC 的D值≥1和NC的D值≤0.100則判定結(jié)果有效。Cutoff值=(NC1+NC2+NC3)/3+0.100。樣本的D值≥Cutoff 值判定為陽性,D值<Cutoff判定為陰性。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,數(shù)據(jù)采用數(shù)值和百分?jǐn)?shù)的方式進(jìn)行Pearson 卡方檢驗(yàn)。檢測數(shù)據(jù)以表示,進(jìn)行單因素方差分析,隨后最小顯著性差異進(jìn)行析因分析或獨(dú)立樣本t檢定。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 AS患者和健康人群HBsAg陽性率

    149 例HLA-B27 陽性的AS 患者中僅有2 例為HBsAg 陽性(1.34%),281 例健康人對(duì)照組中有9 例為HBsAg 陽性(3.20%),二者之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.343)。健康男性HBsAg 陽性率為3.33%(7/210),女性為2.8%(2/71);AS 患者中男性HBsAg 陽性率為1.75%(2/114),女性為0%(0/35),2 組性別之間結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。見表3。

    2.2 HLA-B27陽性/陰性樣本的HBsAg陽性率

    264例HLA-B27陽性樣本組和239例HLA-B27陰性樣本組的HBSAg陽性樣本分別為7(2.65%)和5(2.09%),二者之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。HBsAg陽性率在2 組性別之間結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。見表4。

    3 討論

    2006年我國HBsAg 陽性率為7.18%[9],近年來由于乙肝疫苗的接種,HBsAg 陽性率應(yīng)低于7%[10]。本研究檢測到正常人群HBsAg 陽性率為3.20%,與前期國家統(tǒng)計(jì)調(diào)查結(jié)果一致。我們發(fā)現(xiàn)中國北方HLA-B27 陽性AS 患者同HBsAg 陽性率無相關(guān)性,同Aksu 的 研究結(jié)果一致[8],但與Zheng 等的AS 患者中HBsAg 的高陽性率(23.92%)不一致[4]。為了鑒定HBsAg 的分布是否同HLA-B27 基因相關(guān),我們對(duì)HLA-B27陽性和陰性樣本的HBSAg進(jìn)行了檢測,發(fā)現(xiàn)2 組之間HBSAg 陽性率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,這說明HLA-B27 基因同HBSAg 無相關(guān)性。不同的研究結(jié)果可能是由于以下原因造成的:①Zheng等回顧性分析的對(duì)象是同時(shí)進(jìn)行了HBsAg檢測的AS患者,沒有進(jìn)行HBsAg檢測的AS患者未入組,這樣可能會(huì)造成統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)的不足和偏差;②不同地區(qū)、種族間的HLA-B27 亞型存在差異[11],我國漢族人群最為常見的是B*2704和B*2705亞型,南方人群多為B*2704,而北方人群多為B*2705 亞型[12-15],甚至有研究發(fā)現(xiàn)南方人群B*2705 基因能夠使個(gè)體不發(fā)生AS[16-17]。Zheng等的研究對(duì)象是中國南方人群,而本研究對(duì)象是北方人群,可能不同地域人群HLA-B27 亞型的差異造成結(jié)果不一致。因此,HBsAg 同AS 之間的相關(guān)性及HLA-B27不同亞型間的關(guān)系還有待深入探討。

    表3 AS組和健康對(duì)照組HBsAg陽性率比較

    表4 HLA-B27陽性組和HLA-B27陰性組HBsAg陽性率比較

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