• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    白介素—33、白介素—37在鼻息肉組織中的表達(dá)及意義

    2015-06-17 10:11:54薛軍芳柴向斌
    中國現(xiàn)代醫(yī)生 2015年12期
    關(guān)鍵詞:棕黃色弱陽性白介素

    薛軍芳++++++柴向斌

    [摘要] 目的 探討白介素-33(IL-33)、白介素-37(IL-37)在鼻息肉中的表達(dá)及其在鼻息肉中發(fā)揮的作用。 方法40例鼻息肉患者的鼻息肉組織及18例鼻中隔偏曲患者的正常鼻黏膜組織為本次研究對象,用免疫組織化學(xué)方法分別檢測其中IL-33及IL-37的表達(dá)情況。 結(jié)果 鼻息肉組IL-33陽性率為65.0%,IL-37陽性率為20.0%。正常鼻黏膜組中IL-33陽性率為33.3%,IL-37陽性率為77.8%。 結(jié)論 IL-33、IL37與鼻息肉發(fā)病密切相關(guān)。

    [關(guān)鍵詞] 鼻息肉;白介素-33;白介素-37;免疫組織化學(xué)

    [中圖分類號] R765.25 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-9701(2015)12-0009-03

    Expression of IL-33,IL-37 in human nasal polyps and clinical significance

    XUE Junfang CHAI Xiangbin

    Department of Otolaryngology Head and Neck Surgery,F(xiàn)irst Clinical Medical College of Shanxi Medical University,Taiyuan 030001,China

    [Abstract] Objective To investigate the expression of IL-33,IL-37 in nasal polyps tissue,and their relevance to the pathogenesis of human nasal polyps. Methods Immunohistochemistry was used to detect the expression of IL-33,IL-37, in excisional nasal polyps tissue from 40 patients with nasal polyps. In addition,the expression of IL-33,IL-37 was also detected in normal nasal mucosa from 18 patients with the nasal septum deviation. Results In the nasal polyps tissues,IL-33 positive rate was 65.0%,IL-37 positive rate was 20.0%.In the normal nasal mucosa, IL-33 positive rate was 33.3%,IL-37 positive rate was 77.8%. Conclusion IL-33 and IL-37 play an important role in the pathogenesis of nasal polyps.

    [Key words] Nasal polyps; IL-33; IL-37; Immunohistochemical

    鼻息肉為鼻科常見病,發(fā)病率較高,為感染、非感染性炎癥,解剖異常、免疫異常、遺傳因素等多致病因素導(dǎo)致的疾病實(shí)體,其發(fā)病機(jī)制尚不明確。近來研究表明,許多細(xì)胞因子在鼻息肉的發(fā)生發(fā)展中起重要的作用。IL-33、IL-37為新近發(fā)現(xiàn)的隸屬于IL-1家族的新型細(xì)胞因子,與許多炎癥性疾病及免疫性疾病密切相關(guān)。本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測鼻息肉組織及正常鼻黏膜組織中IL-33、IL-37的表達(dá)情況,探討此兩種細(xì)胞因子在鼻息肉發(fā)生中的作用。

    1 材料與方法

    1.1 材料來源

    所取標(biāo)本均來自2013年10月~ 2014年9月我院住院鼻息肉患者手術(shù)標(biāo)本及鼻中隔偏曲患者正常鼻黏膜標(biāo)本。所有患者取材前1周內(nèi)均未使用過任何激素類藥物。所有鼻息肉患者術(shù)前均已經(jīng)過鼻竇CT、鼻內(nèi)窺鏡的確認(rèn),術(shù)后所有鼻息肉組織均經(jīng)病理證實(shí)。其中男20例,女20例;年齡15~67歲。另取18例鼻中隔偏曲患者手術(shù)時(shí)的中鼻甲頭端距上緣3~5 mm 處、2 mm×2 mm大小的黏膜組織作為對照組,其中男 12例,女6例,年齡18~49歲,各組患者均無過敏性鼻炎及其他疾病史。鼻息肉組和正常黏膜組性別、年齡比較均無明顯差異(P>0.05),具有可比性。

    1.2試劑與檢測方法

    兩組標(biāo)本以10%的福爾馬林固定 24~48 h,常規(guī)石蠟包埋。4 μm 厚切片,兔抗人白介素-33抗體(博奧森,北京)工作濃度為 1∶100,兔抗人白介素-37抗體(博奧森,北京)工作濃度為 1∶200。免疫組化染色試劑盒(博奧森,北京)包括:3%H2O2去離子水、封閉用正常山羊血清工作液、生物素二抗工作液、辣根酶標(biāo)記鏈霉鏈霉卵白素工作液。DAB顯色,蘇木素襯染,封片,顯微鏡觀察。

    1.3結(jié)果判斷

    IL-33主要表達(dá)于上皮細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的胞核[1],胞漿也有少量表達(dá),IL-37主要表達(dá)于炎癥細(xì)胞、上皮細(xì)胞的胞漿[2],胞核也有少量表達(dá),以上兩種因子均以胞核及胞漿中出現(xiàn)棕黃色至深棕黃色顆粒為陽性,分析5 個(gè)不同視野染色細(xì)胞百分?jǐn)?shù)并計(jì)算,陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)在0~25%為“+”,26%~50%為“++”,≥51%為“+++”。

    1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    所有數(shù)據(jù)采用 SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理,組間比較采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2結(jié)果

    IL-33主要表達(dá)于細(xì)胞核中,在細(xì)胞漿中也有少量表達(dá),呈棕黃色和深棕黃色(圖 1、2)。18 例正常鼻黏膜組 6例為陽性(+),陽性表達(dá)率為 33.3%,其中5 例為弱陽性(+),1 例為中度陽性(++)。40 例鼻息肉組26 例陽性,陽性表達(dá)率為65%,其中 9 例為弱陽性(+),9 例為中度陽性(++),8例為強(qiáng)陽性(+++)。兩組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表 1。

    IL-37主要表達(dá)于細(xì)胞漿中,呈棕黃色和深棕黃色(圖3、4)。18 例正常鼻黏膜組14例為陽性(+),陽性表達(dá)率為 77.8%,其中8例弱陽性(+),5 例為中度陽性(++),1例強(qiáng)陽性(+++)。40 例鼻息肉組8例陽性,陽性表達(dá)率為20.0%,其中 5 例弱陽性(+),2 例中度陽性(++),1例強(qiáng)陽性(+++)。兩組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表1。

    3 討論

    鼻息肉作為一種多因素致病的炎癥性疾病,其發(fā)病機(jī)制一直沒有統(tǒng)一的認(rèn)識。目前發(fā)現(xiàn)多種細(xì)胞因子對鼻息肉的發(fā)生有一定作用[3]。近些年來的研究顯示,在鼻腔外側(cè)壁有一個(gè)不穩(wěn)定的組織微環(huán)境,在某些誘導(dǎo)因子的作用下,能產(chǎn)生、分泌許多不同類型的細(xì)胞因子。這些細(xì)胞因子不僅可以使血管內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、腺細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞增殖,而且可以激活某些細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì),引起嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞等多種炎性細(xì)胞釋放大量炎性介質(zhì),導(dǎo)致局部病理改變,最終形成息肉。此次研究表明鼻息肉組織較正常鼻腔黏膜組織中的IL-33表達(dá)增高,IL-37表達(dá)降低,提示這些因素參與了鼻息肉的發(fā)病過程。

    白介素-33(IL-33)是2005年發(fā)現(xiàn)的一個(gè)多功能、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎因子,屬于IL-1家族新成員[4],它的分子量約18kD,含有270個(gè)氨基酸[5]。IL-33常表達(dá)于屏障組織細(xì)胞,如皮膚、腸、肺等,當(dāng)這些細(xì)胞發(fā)生損傷時(shí),全長IL-331-270在胞外可經(jīng)中性粒細(xì)胞絲氨酸蛋白酶、組織蛋白酶G和彈性蛋白酶酶切,產(chǎn)生3種活性形式,分別是IL-3395-270、IL-3399-270和IL-33109-270[6]。由于IL-33的特殊結(jié)構(gòu),它具有核因子和細(xì)胞因子兩個(gè)功能,能激活肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞產(chǎn)生Th2類細(xì)胞因子,在炎癥、感染、自身免疫性疾病中發(fā)揮著十分重要的作用。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn),IL-33具有核因子和細(xì)胞因子的雙重功能[7],作為細(xì)胞因子它可以參與調(diào)節(jié)Th2免疫反應(yīng),作為核因子可以定位于細(xì)胞核內(nèi)起轉(zhuǎn)錄抑制作用[8]。IL-33作為一種細(xì)胞因子,是在細(xì)胞發(fā)生損傷時(shí)分泌,其促進(jìn)炎癥發(fā)生的生物學(xué)活性是由細(xì)胞壞死引起的[9]。它可以作為一種危險(xiǎn)信號從細(xì)胞中釋放,激活肥大細(xì)胞和嗜酸或嗜堿性粒細(xì)胞等多種炎性細(xì)胞釋放炎性介質(zhì),并促進(jìn)幼稚T細(xì)胞向Th2細(xì)胞轉(zhuǎn)化,趨化Th2細(xì)胞達(dá)到病灶,發(fā)揮促炎作用[10]。IL-33的信號傳導(dǎo)通路與典型的Th2類細(xì)胞因子的傳導(dǎo)通路不同,IL-33是通過與細(xì)胞胞膜上的IL-1受體相關(guān)蛋白ST2及IL-1受體輔助蛋白組成的異二聚體將信號轉(zhuǎn)導(dǎo)至細(xì)胞內(nèi),募集下游的信號分子,來調(diào)節(jié) IL-4、IL-5、IL-13等Th2型細(xì)胞因子的轉(zhuǎn)錄和隨后的生物學(xué)活性[11],并且具有前炎癥因子的作用[12]。在對哮喘的研究中發(fā)現(xiàn),在急性本實(shí)驗(yàn)中研究發(fā)現(xiàn)鼻息肉組織中白介素-33的表達(dá)較正常鼻黏膜高,IL-33可能在鼻息肉的發(fā)病過程中發(fā)揮促進(jìn)作用。

    IL-37是Kumar等[13]在2000年發(fā)現(xiàn)的一種白介素-1家族新成員。人類IL-37基因存在于2號染色體上,結(jié)構(gòu)與IL-1家族相似,可分為5個(gè)亞型IL-37a-e,分子量是17-24kD[14-17]。它與其他IL-1家族成員不同,它是一種天然的免疫應(yīng)答抑制物,并且可以抑制促炎癥因子的產(chǎn)生[2],在炎癥性疾病中發(fā)揮抑制作用[18]。已經(jīng)有研究證實(shí),IL-37可以與IL-18Rα鏈非競爭性的形成復(fù)合體,從而抑制了NF-κB 和 MAPK 等途徑,使得IFN-γ的合成下調(diào),對TLR 后信號傳導(dǎo)和 DC 細(xì)胞活性產(chǎn)生抑制作用,但對IL-18本身的活性卻無影響[15],并且成熟的 IL-37 還可以進(jìn)入細(xì)胞核與 Smad3 結(jié)合,形成復(fù)合體,通過調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄來抑制促炎因子的產(chǎn)生[2]。在本實(shí)驗(yàn)中,我們發(fā)現(xiàn)鼻息肉組織中IL-37的表達(dá)水平較正常鼻黏膜中的低,表明IL-37可能在鼻息肉的發(fā)病過程中起抑制作用。

    綜上所述,此次試驗(yàn)應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)在細(xì)胞學(xué)的水平上依次對IL-33及IL-37在鼻息肉及正常鼻黏膜中的表達(dá)進(jìn)行了定性研究。結(jié)果顯示,IL-33在鼻息肉組織中的陽性表達(dá)明顯高于正常鼻黏膜,IL-37在鼻息肉組織中的陽性表達(dá)明顯低于正常鼻黏膜,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。說明鼻息肉的發(fā)病過程可能與IL-33、IL-37密切相關(guān),IL-33可能在鼻息肉的發(fā)病中發(fā)揮促進(jìn)作用,而IL-37則可能發(fā)揮抑制作用。因此,本實(shí)驗(yàn)為臨床靶向治療鼻息肉提供用藥指導(dǎo),為預(yù)防鼻息肉的復(fù)發(fā)提供新理論依據(jù)。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1] Baekkevold ES,Roussigné M,Yamanaka T,et al. Molecular characterization of NF-HEV,a nuclear factor preferentially expressed in human high endothelial venules[J]. Am J Pathol,2003,163(1):69-79.

    [2] Sharma Sheetal,Kulk Nicole,Nold Marcel F,et al. The IL-1 family member 7b translocates to the nucleus and down-regulates proinflam-matory cytokines[J]. J Immunol,2008,8:5477-5482.

    [3] Kountakis SE,Arango P,Bradley D,et al. Molecular and cellular staging for the severity of chronic rhinosinusitis[J].Laryngoscope, 2004,114(11):1895,1905.

    [4] Carriere V,Roussel L,Ortega N,et al. IL-33,the IL-1-like cytokine ligand for ST2 receptor,is a chromatin-associated nuclear factor in vivo[J]. Proc Natl Acad Sic usa,2007,104(1):282-287.

    [5] Schmitz J,Owyang A,Oldham E,et al. IL-33,an intefleukin-1- like cytokine that signals via the IL-I receptor-related protein ST2 and induces T helper type 2-associated cytokines[J]. Immunity,2005,23(5):479-490.

    [6] Lefrancais E,Roga S,Gautier V,et al. IL-33 is processed into mature bioactive forms by neutrophil elastase and cathepsin G[J]. Pro Natl Acad Sci USA,2012,109(5):1673-1678.

    [7] Roussel L,Eard M,Cayrol C,et al. Molecular mimicry between IL-33 and KSHV for attachment to chromatin through the H2A-H2B acidic poket[J]. Embo Rep,2008, 9(10):1006-1012.

    [8] Carriere V,Roussel L,Ortega N,et al. IL-33,the IL-1-like cytokine ligand for ST2 receptor,is a chromatin-associated nuclear factor in vivo[J]. Proc Natl Acad Sci USA,2007,104:282-287.

    [9] Weldy V,Bonilla,Anja Frhlich,et al. The alarmin interleukin-33 drives protective antiviral CD8+ T cell responses[J]. Science,2012,335(6071):984-989.

    [10] Kobori A,Yagi Y,Imaeda H,et al. Interleukin-33 expression is specifically enhanced in inflamed mucosa of ulcerative colitis[J]. J Gastroenterol,2010,45(10):999-1007.

    [11] Borish L.Steinke JW. Intedeukin-33 in asthma:how big of a role does it play?[J]. Curr Allergy Astluna Rep,2011,11(1):7-11.

    [12] Likura M,Suto H,Kajiwara N,et al. IL-33 can promote survival,adhesion andcytokine production in human mast cells[J]. Lab Invest,2007,87:971-978.

    [13] Kumar S,McDonnell PC,Lehr R,et al. Identification and initial characterizationof four novel members of the interl-eukin-1 family[J]. J Biol Chem,2000,275:10308-10314.

    [14] Wong CK,Cheung PF,Ip WK,et al. Interleukin-25 induced chemokines and interleukin-6 release from eosinophils is mediated by p38[J]. Genomics,2000,66(2):213-216.

    [15] Taylor SL,Renshaw BR,Garka KE,et al. Genomic Organization of the Interleukin-1Locus[J]. Genomics,2002, 79(5):726-733.

    [16] Smith VP,Alcami A. Expression of secreted cytokine and chemokine inhibitors by ectromelia virus[J]. Virol,2000,74(18): 8460-8471.

    [17] Kumar S,Hanning CR,Brigham-Burke MR,et al. Interleukin-1F7B (IL-IH4/IL-IF7)is processed by caspase-1 and mature IL-1F7B binds to the IL-18 receptor but does not induce IFN-gamma production[J]. Cytokine,2002,18(2):61-71.

    [18] Boraschi D,Lucchesi D,Hainzl S. IL-37:A new antiinflammatory cytokine of the IL-1 family[J]. European Cytokine Network,2011,(3):127-147.

    (收稿日期:2015-02-27)

    猜你喜歡
    棕黃色弱陽性白介素
    乙型肝炎表面抗原弱陽性的檢測分析
    你真的認(rèn)識蝗蟲嗎
    細(xì)微之處顯本真
    膠體金法檢測梅毒抗體價(jià)值及弱陽性影響因素分析
    銀屑病患兒血清腫瘤壞死因子α、白介素6、白介素8的檢測
    哮喘患兒血清白介素與免疫球蛋白檢測的臨床意義
    尋常性銀屑病患者外周血白介素17 、白介素23 mRNA 的表達(dá)及與病情相關(guān)性研究
    自制弱陽性質(zhì)控品對無償獻(xiàn)血者進(jìn)行ABO血型鑒定室內(nèi)質(zhì)控的可行性探討
    酶聯(lián)免疫吸附法檢測乙肝表面抗原弱陽性結(jié)果分析與報(bào)告
    淋巴瘤患者血液和瘤組織白介素-6、白介素-10的表達(dá)及意義
    少妇丰满av| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 精品人妻在线不人妻| 精品久久久久久久久亚洲| a 毛片基地| 啦啦啦在线观看免费高清www| 精品人妻一区二区三区麻豆| 一级毛片我不卡| 精品一区二区免费观看| 黄色配什么色好看| 最后的刺客免费高清国语| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 高清黄色对白视频在线免费看| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 99热这里只有是精品在线观看| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 男男h啪啪无遮挡| av在线观看视频网站免费| 在线播放无遮挡| 亚洲精品日本国产第一区| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 国产又色又爽无遮挡免| 亚洲精品一区蜜桃| 少妇人妻精品综合一区二区| 免费观看性生交大片5| 99久久中文字幕三级久久日本| 久久久精品免费免费高清| 最近手机中文字幕大全| 日韩伦理黄色片| 欧美日韩综合久久久久久| 夜夜爽夜夜爽视频| 日韩一区二区三区影片| 嫩草影院入口| 一级a做视频免费观看| 欧美日韩精品成人综合77777| 亚洲av日韩在线播放| 91精品一卡2卡3卡4卡| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 免费观看性生交大片5| 国产成人精品婷婷| 国产一区二区三区av在线| 桃花免费在线播放| 久久久久久久久久人人人人人人| 亚洲精品第二区| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 成人国产av品久久久| 大香蕉久久成人网| 成年人免费黄色播放视频| 天天影视国产精品| 久久99热6这里只有精品| 亚洲精品国产av成人精品| 亚洲精品国产色婷婷电影| av免费观看日本| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 91精品三级在线观看| h视频一区二区三区| 免费黄色在线免费观看| 欧美bdsm另类| 人妻夜夜爽99麻豆av| 赤兔流量卡办理| 黄色视频在线播放观看不卡| 亚洲成人手机| xxxhd国产人妻xxx| 亚洲欧洲日产国产| 亚洲国产精品专区欧美| 观看av在线不卡| 熟女人妻精品中文字幕| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 欧美日韩精品成人综合77777| 亚洲在久久综合| 91成人精品电影| videossex国产| 国产国拍精品亚洲av在线观看| av播播在线观看一区| 国产精品久久久久久久电影| 伦精品一区二区三区| 秋霞伦理黄片| 精品亚洲成a人片在线观看| av卡一久久| 午夜激情久久久久久久| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 欧美日韩av久久| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产精品一区二区在线不卡| 精品国产一区二区久久| 一级,二级,三级黄色视频| 大话2 男鬼变身卡| 精品一品国产午夜福利视频| 91精品国产九色| 丰满饥渴人妻一区二区三| 日韩免费高清中文字幕av| av一本久久久久| 婷婷色综合大香蕉| 91久久精品电影网| 九九在线视频观看精品| 亚洲国产日韩一区二区| 国产精品人妻久久久久久| 夜夜爽夜夜爽视频| 国产在线一区二区三区精| 久久精品久久久久久久性| 日韩 亚洲 欧美在线| 老司机影院成人| 丰满少妇做爰视频| av在线播放精品| 久久综合国产亚洲精品| 夫妻午夜视频| av又黄又爽大尺度在线免费看| 精品国产乱码久久久久久小说| 日本与韩国留学比较| 成人毛片60女人毛片免费| 99精国产麻豆久久婷婷| 成年人免费黄色播放视频| 伊人久久国产一区二区| 婷婷色av中文字幕| 狂野欧美激情性bbbbbb| 曰老女人黄片| 91精品国产国语对白视频| 亚洲av二区三区四区| 中文字幕亚洲精品专区| 国产精品一区www在线观看| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 少妇人妻 视频| 最新的欧美精品一区二区| 永久免费av网站大全| 大陆偷拍与自拍| 久久久久国产网址| 国产毛片在线视频| 一区二区日韩欧美中文字幕 | 黄片播放在线免费| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 婷婷色综合大香蕉| 22中文网久久字幕| 男女边摸边吃奶| 久久国产精品大桥未久av| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲经典国产精华液单| 亚洲无线观看免费| 日韩在线高清观看一区二区三区| 秋霞伦理黄片| 少妇的逼水好多| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 午夜福利,免费看| 国产成人freesex在线| 大香蕉久久网| videosex国产| 插逼视频在线观看| 人妻一区二区av| 欧美日本中文国产一区发布| 伦理电影大哥的女人| kizo精华| 成年女人在线观看亚洲视频| 丁香六月天网| 999精品在线视频| 18禁动态无遮挡网站| 久久精品国产亚洲网站| 国产精品99久久99久久久不卡 | 成人影院久久| 日韩强制内射视频| av一本久久久久| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 精品一区在线观看国产| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 久久久久久久亚洲中文字幕| 日本91视频免费播放| 国产成人精品一,二区| 99热6这里只有精品| 亚洲精品日本国产第一区| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 在线观看免费日韩欧美大片 | 精品国产国语对白av| 久久久久网色| 天堂8中文在线网| 国产精品女同一区二区软件| 黄色怎么调成土黄色| 能在线免费看毛片的网站| 老司机亚洲免费影院| 秋霞在线观看毛片| 中文字幕亚洲精品专区| 纯流量卡能插随身wifi吗| 精品亚洲成国产av| 秋霞伦理黄片| 看免费成人av毛片| 亚洲无线观看免费| 亚洲性久久影院| 全区人妻精品视频| 成年人免费黄色播放视频| 亚洲在久久综合| 欧美最新免费一区二区三区| 免费av不卡在线播放| 在线天堂最新版资源| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 成人毛片60女人毛片免费| 亚洲精品视频女| 街头女战士在线观看网站| 亚洲天堂av无毛| 亚洲伊人久久精品综合| 男女国产视频网站| 久久ye,这里只有精品| 一边亲一边摸免费视频| 高清av免费在线| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产片内射在线| 久久影院123| 天美传媒精品一区二区| √禁漫天堂资源中文www| 日本av手机在线免费观看| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 国产极品粉嫩免费观看在线 | 国产精品国产三级专区第一集| 国产 一区精品| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 色吧在线观看| 欧美少妇被猛烈插入视频| 制服丝袜香蕉在线| 国产精品久久久久久久久免| 99热这里只有精品一区| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 亚洲欧美色中文字幕在线| 成人午夜精彩视频在线观看| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 波野结衣二区三区在线| 亚洲欧美精品自产自拍| 蜜臀久久99精品久久宅男| 精品国产乱码久久久久久小说| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 多毛熟女@视频| 91久久精品国产一区二区三区| 丝袜美足系列| av不卡在线播放| 日韩一区二区三区影片| 九九爱精品视频在线观看| 99热这里只有精品一区| 国产淫语在线视频| 久久精品国产亚洲av涩爱| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 日本与韩国留学比较| 爱豆传媒免费全集在线观看| 在线观看美女被高潮喷水网站| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 美女视频免费永久观看网站| 精品一区二区三卡| 一区二区日韩欧美中文字幕 | 丰满迷人的少妇在线观看| a级毛片黄视频| 欧美丝袜亚洲另类| 97在线人人人人妻| 日韩一区二区视频免费看| 精品人妻在线不人妻| 少妇高潮的动态图| 亚洲精品视频女| 亚洲av男天堂| 国产一区亚洲一区在线观看| 男女高潮啪啪啪动态图| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲不卡免费看| 国产午夜精品一二区理论片| 免费av不卡在线播放| 久久热精品热| 搡女人真爽免费视频火全软件| 亚洲内射少妇av| 国产高清有码在线观看视频| 亚洲国产色片| 久久久久久人妻| 国产成人aa在线观看| 男人爽女人下面视频在线观看| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 黄色视频在线播放观看不卡| 在线免费观看不下载黄p国产| 超碰97精品在线观看| 亚洲三级黄色毛片| 欧美+日韩+精品| 两个人的视频大全免费| 成人国产麻豆网| 久久午夜综合久久蜜桃| 国产亚洲精品久久久com| 18禁动态无遮挡网站| 两个人免费观看高清视频| 精品国产露脸久久av麻豆| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 男的添女的下面高潮视频| 国产精品人妻久久久影院| 黄色怎么调成土黄色| 国产日韩欧美视频二区| 亚洲av综合色区一区| 免费黄频网站在线观看国产| 国产成人一区二区在线| 亚洲精品aⅴ在线观看| 精品国产一区二区久久| 久久影院123| 老司机影院成人| 亚洲图色成人| 亚洲欧美成人精品一区二区| 欧美xxⅹ黑人| 国产伦精品一区二区三区视频9| 国产精品三级大全| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产高清三级在线| 国产精品.久久久| 国产极品天堂在线| 97超视频在线观看视频| 日日摸夜夜添夜夜爱| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲三级黄色毛片| 国产男女超爽视频在线观看| 亚洲精品日韩av片在线观看| 国产亚洲欧美精品永久| 久久国产亚洲av麻豆专区| 在线观看www视频免费| 人妻一区二区av| 九草在线视频观看| 成人毛片60女人毛片免费| 精品国产一区二区久久| 天美传媒精品一区二区| 亚洲精品456在线播放app| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 在现免费观看毛片| 亚洲图色成人| 少妇高潮的动态图| 免费高清在线观看日韩| 极品人妻少妇av视频| 久久午夜综合久久蜜桃| 99九九在线精品视频| 香蕉精品网在线| 中国美白少妇内射xxxbb| 人妻夜夜爽99麻豆av| 日韩大片免费观看网站| 卡戴珊不雅视频在线播放| 婷婷色av中文字幕| 久久久精品免费免费高清| 国产成人精品久久久久久| 日日撸夜夜添| 精品卡一卡二卡四卡免费| 亚洲av不卡在线观看| 伦精品一区二区三区| 久久久午夜欧美精品| 高清av免费在线| 在现免费观看毛片| 国产色爽女视频免费观看| 亚洲经典国产精华液单| av福利片在线| 国产综合精华液| 久久久精品区二区三区| 欧美变态另类bdsm刘玥| 人成视频在线观看免费观看| 精品国产乱码久久久久久小说| 天美传媒精品一区二区| 亚洲成人一二三区av| 九草在线视频观看| 亚洲熟女精品中文字幕| 国产精品一区二区在线不卡| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 日日啪夜夜爽| 十八禁网站网址无遮挡| 国产精品无大码| 亚洲情色 制服丝袜| 欧美3d第一页| 久久精品国产亚洲av涩爱| 日韩中字成人| 丝袜美足系列| 精品亚洲成a人片在线观看| 久久人妻熟女aⅴ| 2018国产大陆天天弄谢| 五月天丁香电影| 久久久a久久爽久久v久久| 伦理电影大哥的女人| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 国产在视频线精品| 99久久精品一区二区三区| 18在线观看网站| 夫妻午夜视频| 久久精品夜色国产| 午夜免费男女啪啪视频观看| 人妻夜夜爽99麻豆av| 高清av免费在线| 啦啦啦在线观看免费高清www| 久久 成人 亚洲| 18禁观看日本| 伊人久久精品亚洲午夜| 3wmmmm亚洲av在线观看| 国产黄片视频在线免费观看| 国产视频内射| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 日韩中字成人| 热re99久久国产66热| 97在线人人人人妻| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产 精品1| 少妇的逼水好多| 久久久午夜欧美精品| 免费观看无遮挡的男女| 午夜福利视频在线观看免费| 99精国产麻豆久久婷婷| 精品午夜福利在线看| 国产 精品1| 18+在线观看网站| 久久99蜜桃精品久久| 天堂8中文在线网| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产熟女欧美一区二区| 国产精品三级大全| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 久久精品人人爽人人爽视色| 日韩大片免费观看网站| 久久精品国产亚洲网站| 国产精品一区二区在线观看99| 日韩强制内射视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲无线观看免费| 色哟哟·www| 免费黄频网站在线观看国产| 免费观看a级毛片全部| 成人无遮挡网站| 秋霞伦理黄片| 91国产中文字幕| 一二三四中文在线观看免费高清| 精品人妻一区二区三区麻豆| 我的老师免费观看完整版| 久久久久人妻精品一区果冻| 18禁动态无遮挡网站| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 欧美精品国产亚洲| 人妻系列 视频| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 日韩三级伦理在线观看| 免费黄色在线免费观看| 国产欧美亚洲国产| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 久久久久国产精品人妻一区二区| 伊人久久精品亚洲午夜| 国产精品免费大片| 亚洲国产成人一精品久久久| 我的老师免费观看完整版| 国产黄片视频在线免费观看| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 久久毛片免费看一区二区三区| 久久久久精品久久久久真实原创| 老司机亚洲免费影院| 亚洲久久久国产精品| 日韩中文字幕视频在线看片| 天堂俺去俺来也www色官网| 色94色欧美一区二区| 五月玫瑰六月丁香| 国产乱来视频区| 久久精品人人爽人人爽视色| 大片电影免费在线观看免费| 热re99久久精品国产66热6| 久久国产精品大桥未久av| 亚洲欧洲日产国产| 涩涩av久久男人的天堂| 国产永久视频网站| 久久97久久精品| 日韩电影二区| 亚洲美女视频黄频| 最近的中文字幕免费完整| 国产成人精品在线电影| 国产精品三级大全| 国产在线一区二区三区精| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 九九在线视频观看精品| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 99热6这里只有精品| 久久人妻熟女aⅴ| 久久97久久精品| 亚洲丝袜综合中文字幕| 又大又黄又爽视频免费| 九色亚洲精品在线播放| 伦理电影大哥的女人| 一级a做视频免费观看| 亚洲人成网站在线播| 亚洲精品视频女| 亚洲精品国产av成人精品| 日本黄色日本黄色录像| 国产男女内射视频| 乱人伦中国视频| 国产极品天堂在线| 性色avwww在线观看| 日韩在线高清观看一区二区三区| 亚洲国产av影院在线观看| 午夜激情福利司机影院| 99精国产麻豆久久婷婷| 欧美性感艳星| 亚洲av成人精品一区久久| 欧美日韩视频精品一区| 老司机影院成人| 成人免费观看视频高清| 一级a做视频免费观看| 欧美成人午夜免费资源| 国产黄色免费在线视频| 一区二区三区乱码不卡18| 熟女av电影| 中国三级夫妇交换| 91精品国产九色| freevideosex欧美| 亚洲欧美清纯卡通| 国产一区二区三区综合在线观看 | 99热网站在线观看| 日本黄色片子视频| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲四区av| 亚洲经典国产精华液单| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 国产成人精品福利久久| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 欧美bdsm另类| a级毛色黄片| 男的添女的下面高潮视频| 亚洲欧美清纯卡通| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 中文字幕人妻丝袜制服| 中文字幕av电影在线播放| 国产不卡av网站在线观看| 黑人高潮一二区| 亚洲不卡免费看| 国产精品无大码| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 91在线精品国自产拍蜜月| 欧美变态另类bdsm刘玥| 久久久久视频综合| 免费黄网站久久成人精品| 日本与韩国留学比较| 午夜激情av网站| 久久人妻熟女aⅴ| 丝袜美足系列| 国产成人freesex在线| 亚洲精品国产色婷婷电影| 免费少妇av软件| 国产成人91sexporn| 如何舔出高潮| 这个男人来自地球电影免费观看 | 国产亚洲精品久久久com| 女性生殖器流出的白浆| 中国国产av一级| 午夜免费观看性视频| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 九九爱精品视频在线观看| 国产精品无大码| 婷婷成人精品国产| 精品国产乱码久久久久久小说| 熟妇人妻不卡中文字幕| 日韩制服骚丝袜av| 中文字幕制服av| 欧美日韩视频精品一区| 麻豆乱淫一区二区| 精品人妻偷拍中文字幕| 老司机影院成人| 大话2 男鬼变身卡| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产高清不卡午夜福利| 91久久精品国产一区二区成人| www.av在线官网国产| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 大香蕉久久网| 国产成人a∨麻豆精品| 少妇高潮的动态图| 在线观看免费高清a一片| 久久久国产精品麻豆| 久久久久久久精品精品| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产精品三级大全| 国产淫语在线视频| 大片电影免费在线观看免费| av在线老鸭窝| 99久久中文字幕三级久久日本| 91成人精品电影| 一本色道久久久久久精品综合| 丁香六月天网| av免费在线看不卡| 极品少妇高潮喷水抽搐| 少妇人妻久久综合中文| 久久久久久久久久久丰满| 草草在线视频免费看| 亚洲不卡免费看| 亚洲av成人精品一二三区| 免费黄网站久久成人精品| 视频区图区小说| 亚洲图色成人| 精品一区二区免费观看| 国产在线一区二区三区精| 亚洲国产av影院在线观看| 乱人伦中国视频| 国产成人91sexporn| videos熟女内射| 亚洲av男天堂| 久久久国产欧美日韩av| 黑人高潮一二区| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 精品国产乱码久久久久久小说| 中文字幕制服av| 少妇人妻 视频| 国产乱人偷精品视频| av免费在线看不卡| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 欧美精品国产亚洲| 欧美3d第一页| 亚洲美女黄色视频免费看| 中文字幕亚洲精品专区| 亚洲美女视频黄频| 伊人久久国产一区二区| 女人精品久久久久毛片| 精品久久久噜噜| 一边亲一边摸免费视频| 国产成人午夜福利电影在线观看|