Notch3、pS6在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)及其與臨床預(yù)后的關(guān)系＊

劉朝霞，余筱琳，賴小青，贠榮納，馮小麗，譚布珍

1廣東醫(yī)學(xué)院附屬南山醫(yī)院婦產(chǎn)科，深圳 518052

2南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，南昌 330006

3河南省新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科，新鄉(xiāng) 453000

4珠海市第二人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，珠海 519020

5南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，南昌 330006

Notch3、pS6在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)及其與臨床預(yù)后的關(guān)系＊

劉朝霞1＃，余筱琳2＃，賴小青1＃，贠榮納3，馮小麗4，譚布珍5△

1廣東醫(yī)學(xué)院附屬南山醫(yī)院婦產(chǎn)科，深圳 518052

2南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，南昌 330006

3河南省新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科，新鄉(xiāng) 453000

4珠海市第二人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，珠海 519020

5南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，南昌 330006

目的 探討Notch3、pS6蛋白在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)及其與臨床病理學(xué)特征及總生存期的關(guān)系。方法采用免疫組化法檢測(cè)30例正常卵巢上皮組織、30例卵巢囊腺瘤以及120例上皮性卵巢癌組織中Notch3及pS6蛋白的表達(dá)。結(jié)果 Notch3、pS6蛋白在正常卵巢組織、良性卵巢囊腺瘤組織、上皮性卵巢癌組織中均有陽(yáng)性表達(dá)，陽(yáng)性率分別為16.7%、70.0%、91.7%和16.7%、76.7%、90.0%，上皮性卵巢癌中Notch3、pS6蛋白的表達(dá)顯著高于正常卵巢組織及良性卵巢囊腺瘤組織（均P＜0.01），與臨床分期、病理分級(jí)、組織類型、淋巴轉(zhuǎn)移及腹水有關(guān)，與患者年齡無(wú)關(guān)。Notch3蛋白與pS6蛋白在上皮性卵巢癌中的表達(dá)呈正相關(guān)（rs＝0.668，P＜0.01）。Notch3及pS6高表達(dá)組總生存期較短，低表達(dá)組的總生存期明顯較長(zhǎng)（χ2＝41.479，P＜0.01）。Notch3和pS6高表達(dá)組腹水陽(yáng)性率為82.1%，顯著高于中表達(dá)組（51.9%）及低表達(dá)組（27.0%）（χ2＝28.448，P＜0.01）。結(jié)論 上皮性卵巢癌組織中Notch3、pS6蛋白的高表達(dá)與患者生存期（不良預(yù)后）密切相關(guān)，高表達(dá)Notch3及pS6患者總生存期縮短。

上皮性卵巢癌； Notch信號(hào)通路； mTOR通路； Notch3； pS6

卵巢癌是致死率最高的婦科惡性腫瘤，大多數(shù)患者確診時(shí)已屬晚期，多伴有腹腔種植及轉(zhuǎn)移，故總死亡率一直居于高位。盡管手術(shù)技術(shù)及化療方案不斷改進(jìn)，晚期患者的有效治療率仍僅為15%～20%。研究發(fā)現(xiàn)，Notch信號(hào)通路的抑制、基因突變或異常激活存在于多種惡性腫瘤當(dāng)中。Notch信號(hào)的異常激活不僅能直接引起腫瘤的發(fā)生，而且它可通過(guò)與其他多條信號(hào)通路的交互作用，以間接的方式最終誘導(dǎo)腫瘤的形成。許多深入的研究顯示PI3K／Akt／mTOR信號(hào)通路是Notch信號(hào)的關(guān)鍵下游中介［14］，該通路在惡性腫瘤細(xì)胞增殖、血管新生和轉(zhuǎn)移以及腫瘤對(duì)放、化療的拮抗中起著重要作用［5］。核糖體蛋白S6激酶（ribosomal S6－kinase，S6K）是mTOR的下游效應(yīng)分子，當(dāng)PI3K／Akt／mTOR通路被激活后，S6K磷酸化（pS6K）而被活化，進(jìn)而磷酸化核糖體蛋白S6，從而對(duì)蛋白合成進(jìn)行調(diào)節(jié)。Notch3和pS6在上皮性卵巢癌組織中表達(dá)的特點(diǎn)及對(duì)預(yù)后影響的意義，目前國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)這方面的研究報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)的目的是檢測(cè)Notch3、pS6在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)情況，并分析上述分子的表達(dá)水平變化與上皮性卵巢癌臨床病理學(xué)特征及預(yù)后的關(guān)系，從而為臨床上對(duì)上皮性卵巢癌的預(yù)后判斷提供理論依據(jù)，并為上皮性卵巢癌的治療提供新的靶點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 組織標(biāo)本 標(biāo)本選取1998年12月至2008年12月在南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院因上皮性卵巢癌接受手術(shù)治療且臨床病理資料完整的患者共120例，年齡36～68歲，平均（49±6）歲。所有患者均行手術(shù)治療，術(shù)前均未行化療及免疫治療。其中41例Ⅰ、Ⅱ期卵巢癌患者行子宮全切除＋雙側(cè)附件切除＋大網(wǎng)膜切除＋闌尾切除＋盆腔淋巴清掃術(shù)，79例晚期（Ⅲ～Ⅳ期）卵巢癌患者均行腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)及盆腔淋巴清掃或淋巴結(jié)活檢術(shù)，37例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，70例患者有明顯腹水。病理類型:漿液性癌77例，黏液性癌43例；病理分化程度:高分化17例，中分化40例，低分化63例。選取同期于本院因卵巢良性囊腺瘤行囊腫剝除或一側(cè)附件切除者30例（漿液性囊腺瘤14例，黏液性囊腺瘤16例），患者年齡23～46歲，平均（35±7）歲。另選取同期于本院因子宮肌瘤或子宮腺肌病及其他非卵巢病變行子宮全切除＋單側(cè)（或雙側(cè)）附件切除術(shù)者共30例作為對(duì)照，患者年齡46～69歲，平均（58±9）歲；術(shù)后病理檢查證實(shí)為正常卵巢。卵巢癌患者中，12例術(shù)后未行化療，44例術(shù)后行順鉑聯(lián)合阿霉素、環(huán)磷酰胺化療，64例術(shù)后行卡鉑聯(lián)合紫杉醇化療。

1.1.2 主要試劑和抗體 EnvisionTM二步法檢測(cè)試劑、PBS磷酸鹽緩沖液、檸檬酸鹽抗原修復(fù)液（福建邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司），DAB顯色劑、蘇木精、中性樹膠（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司），Notch3抗體（Santa Cruz公司）、p70S6K抗體（Cell Signaling Technology公司）。

1.2 方法

所有組織標(biāo)本經(jīng)10%甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋連續(xù)切片，厚4μm，作免疫組織化學(xué)染色。結(jié)果判定:細(xì)胞質(zhì)和（或）胞核出現(xiàn)黃色或棕黃色顆粒為陽(yáng)性反應(yīng)。由2位病理學(xué)醫(yī)師在不知臨床病理學(xué)資料的情況下對(duì)免疫組化的結(jié)果進(jìn)行評(píng)估。在高倍鏡（×200）下，隨機(jī)取5個(gè)視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)腫瘤細(xì)胞，按陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)的平均百分?jǐn)?shù)進(jìn)行計(jì)分［6］。0.0%～記0分，5.0%～記1分，25.0%～記2分，50.0%～記3分，＞75.0%記4分。染色強(qiáng)度按多數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞呈現(xiàn)的染色特征計(jì)分。未著色記0分，染色呈淡黃色記1分，棕黃色記2分，棕褐色記3分。最后根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞的百分比和染色強(qiáng)度計(jì)分之和進(jìn)行結(jié)果判定。陰性（－）:0～1分；陽(yáng)性（＋）:2～4分；強(qiáng)陽(yáng)性（?）:5～7分。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析利用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行。多組間的差異用Wilcoxon和Kruskal－Wallis檢驗(yàn)，用Spearman等級(jí)相關(guān)進(jìn)行相關(guān)性分析，用Kaplan Meier法進(jìn)行生存分析，假設(shè)檢驗(yàn)選用Log rank test，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Notch3、pS6蛋白在不同卵巢組織中的表達(dá)

免疫組化結(jié)果顯示，上皮性卵巢癌組織中Notch3主要表達(dá)于腫瘤細(xì)胞的胞質(zhì)和（或）胞核。pS6主要表達(dá)于腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)中。

由表1可見(jiàn)，Notch3蛋白在正常卵巢上皮、卵巢囊腺瘤、上皮性卵巢癌組織中均有不同程度的表達(dá)。從正常卵巢上皮、卵巢囊腺瘤到上皮性卵巢癌，Notch3的陽(yáng)性表達(dá)率呈遞增趨勢(shì)，分別為16.7%、70.0%、91.7%，各組間差異顯著（P＜0.01）；進(jìn)一步兩兩比較發(fā)現(xiàn)，上皮性卵巢癌組織中Notch3的表達(dá)顯著高于正常卵巢上皮、卵巢囊腺瘤（均P＜0.01），正常卵巢上皮與卵巢囊腺瘤之間表達(dá)差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

pS6蛋白在正常卵巢上皮、卵巢囊腺瘤、上皮性卵巢癌組織中均有不同程度的表達(dá)。從正常卵巢上皮、卵巢囊腺瘤到上皮性卵巢癌，pS6的陽(yáng)性表達(dá)率呈遞增趨勢(shì)，分別為16.7%、76.7%、90.0%，各組間差異顯著（P＜0.01）；進(jìn)一步兩兩比較發(fā)現(xiàn)，上皮性卵巢癌組織中pS6的表達(dá)顯著高于正常卵巢上皮、卵巢囊腺瘤（均P＜0.01），正常卵巢上皮與卵巢囊腺瘤之間表達(dá)差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

2.2 上皮性卵巢癌組織中Notch3、pS6蛋白表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

上皮性卵巢癌組織中Notch3、pS6蛋白表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系見(jiàn)表2、3。

由表2可見(jiàn)，上皮性卵巢癌組織中Notch3蛋白的表達(dá)與臨床分期、病理分級(jí)、組織類型、淋巴轉(zhuǎn)移及有無(wú)腹水均有關(guān)（均P＜0.01），與患者的年齡無(wú)關(guān)（P＞0.05）。臨床分期為Ⅲ～Ⅳ者Notch3蛋白的表達(dá)強(qiáng)于Ⅰ～Ⅱ期患者；病理分級(jí)越高其Notch3蛋白的表達(dá)越強(qiáng)；從組織類型可見(jiàn)，漿液性囊腺癌的Notch3蛋白的表達(dá)強(qiáng)于黏液性囊腺癌；有淋巴轉(zhuǎn)移者Notch3蛋白的表達(dá)強(qiáng)于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者；有腹水者Notch3蛋白的表達(dá)強(qiáng)于無(wú)腹水者。

表1 Notch3、pS6蛋白在不同卵巢組織中的表達(dá)Table1 The protein expressions of Notch3and pS6in different ovarian tissues

表2 Notch3表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系Table2 The relationship between Notch3expression and clinical pathological characteristics in ovarian epithelial cancer tissues

表3 pS6表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系Table3 The relationship between pS6expression and clinical pathological characteristics in ovarian epithelial cancer tissues

由表3可見(jiàn)，上皮性卵巢癌組織中pS6蛋白的表達(dá)與臨床分期、病理分級(jí)、組織類型、淋巴轉(zhuǎn)移及有無(wú)腹水有關(guān)（P＜0.05或P＜0.01），與患者的年齡無(wú)關(guān)（P＞0.05）。臨床分期為Ⅲ～Ⅳ期者pS6蛋白的表達(dá)強(qiáng)于Ⅰ～Ⅱ期患者；病理分級(jí)越高其pS6蛋白的表達(dá)越強(qiáng)；從組織類型可見(jiàn)，漿液性囊腺癌的pS6蛋白的表達(dá)強(qiáng)于黏液性囊腺癌；有淋巴轉(zhuǎn)移者pS6蛋白的表達(dá)強(qiáng)于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者；有腹水者pS6蛋白的表達(dá)強(qiáng)于無(wú)腹水者。

2.3 上皮性卵巢癌組織中Notch3與pS6表達(dá)的關(guān)系

由表4可見(jiàn)，上皮性卵巢癌組織中Notch3與pS6的表達(dá)呈正相關(guān)（rs＝0.668，P＜0.01）。

表4 Notch3與pS6的相關(guān)性Table4 The association between Notch3and pS6

2.4 生存分析

2.4.1 隨訪的64例上皮性卵巢癌患者生存情況對(duì)64例術(shù)后接受卡鉑和紫杉醇化療的上皮性卵巢癌患者進(jìn)行了隨訪調(diào)查，其中，死亡46例，失訪或截尾人數(shù)18人，患者的生存時(shí)間最短為1個(gè)月，最長(zhǎng)為102個(gè)月，平均生存期為35.16個(gè)月。患者1～5年的累積生存率分別為0.55、0.36、0.36、0.28、0.21，生存分布函數(shù)見(jiàn)圖1。

圖1 隨訪的64例上皮性卵巢癌患者的生存分布函數(shù)Fig.1 The survival distribution function of 64ovarian epithelial cancer patients on follow－up

2.4.2 Notch3、pS6表達(dá)對(duì)生存期的影響 將64例（術(shù)后接受卡鉑和紫杉醇化療）有隨訪資料的卵巢癌患者分為3組:①Notch3及pS6高表達(dá)組，兩者均為“＋＋”，n＝42；②Notch3及pS6低表達(dá)組，兩者均為“－”，n＝18；③Notch3及pS6中表達(dá)組，Notch3或pS6僅其中一項(xiàng)高表達(dá)者，n＝4。結(jié)果發(fā)現(xiàn)Notch3及pS6高表達(dá)組總生存期較短，低表達(dá)組的總生存期明顯較長(zhǎng)（χ2＝41.479，P＜0.01）。見(jiàn)表5。

表5 不同Notch3、pS6表達(dá)患者的生存期分布Table5 The distribution of survival time of patients with different Notch3and pS6expressions

2.4.3 上皮性卵巢癌患者多因素COX回歸分析對(duì)64例上皮性卵巢癌患者進(jìn)行了隨訪調(diào)查，其中，死亡46例，失訪或截尾人數(shù)18人，以患者的生存時(shí)間和生死為應(yīng)變量，以患者的年齡（＜50歲為“1”，≥50歲為“2”）、臨床分期（Ⅰ～Ⅱ期為“1”，Ⅲ～Ⅳ期為“2”）、病理分級(jí)（G1為“1”，G2為“2”，G3為“3”）、組織類型（漿液性囊腺癌為“1”，黏液性囊腺癌為“2”）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（有為“1”，無(wú)為“2”）、腹水（無(wú)為“1”，有為“2”）、Notch3（－為“0”，＋為“1”，?為“2”）、pS6（－為“0”，＋為“1”，?為“2”）為自變量，采用多因素COX回歸分析，用向前wald法進(jìn)行逐步回歸分析。納入變量的水準(zhǔn)為0.05。結(jié)果發(fā)現(xiàn):臨床分期對(duì)患者的生存期有影響，臨床分期Ⅲ～Ⅳ期與Ⅰ～Ⅱ期相比，其風(fēng)險(xiǎn)比例為HR＝5.398（95%CI 1.154～25.259）；Notch3的表達(dá)也與患者的生存期有關(guān)，高表達(dá)者的危險(xiǎn)比例為HR＝8.362（95.0%CI 2.154～32.461）。見(jiàn)表6。

表6 上皮性卵巢癌患者多因素COX回歸分析Table6 Multiple COX regression analysis of patients with ovarian epithelial cancer

2.4.4 Notch3和pS6聯(lián)合表達(dá)與腹水的關(guān)系 由表7可見(jiàn)，Notch3和pS6高表達(dá)組患者腹水陽(yáng)性率82.1%，中表達(dá)組腹水陽(yáng)性率為51.9%，低表達(dá)組腹水陽(yáng)性率為27.0%，3種不同表達(dá)組間腹水陽(yáng)性率存在顯著差別（χ2＝28.448，P＜0.01）。經(jīng)卡方檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，3組間腹水陽(yáng)性率均有差別，即高表達(dá)組陽(yáng)性率最高，中表達(dá)組次之，低表達(dá)組最弱。

表7 Notch3和pS6聯(lián)合表達(dá)與腹水的關(guān)系Table7 Relationship between the co－expression of Notch3and pS6and ascites

3 討論

Notch信號(hào)通路是一個(gè)在進(jìn)化過(guò)程中高度保守的信號(hào)通路，它通過(guò)介導(dǎo)細(xì)胞和細(xì)胞之間直接接觸，調(diào)控機(jī)體的細(xì)胞凋亡、增殖及其分化。1991年，Notch1在人類急性T淋巴細(xì)胞白血病（T－ALL）中被鑒定出來(lái)，首次提示Notch信號(hào)通路與腫瘤相關(guān)［7］。隨后的研究發(fā)現(xiàn)，Notch信號(hào)通路在卵巢癌組織及卵巢癌細(xì)胞系中存在異常表達(dá)。Rose等［8］研究發(fā)現(xiàn)Notch1的活化與卵巢癌細(xì)胞的增殖密切相關(guān)。另有研究發(fā)現(xiàn)對(duì)順鉑耐藥的卵巢癌細(xì)胞中Notch1表達(dá)上調(diào)［910］。近年研究發(fā)現(xiàn)Notch3基因與腫瘤的發(fā)生關(guān)系密切，其在信息傳遞過(guò)程中起著重要作用，并參與胚胎發(fā)育過(guò)程中特異性細(xì)胞凋亡的過(guò)程，但其在卵巢癌中的調(diào)控機(jī)制研究尚不足。

我們的研究顯示，Notch3蛋白在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)明顯高于卵巢良性囊腺瘤及正常卵巢組織（H＝74.313，P＜0.01），尤其在漿液性囊腺癌表達(dá)增強(qiáng)，且Notch3蛋白的過(guò)表達(dá)與臨床分期、病理分級(jí)、組織類型、淋巴轉(zhuǎn)移、腹水有關(guān)，提示Notch信號(hào)通路在上皮性卵巢癌組織中處于被激活的狀態(tài)，在卵巢上皮性癌的發(fā)生發(fā)展中起到了重要的作用。另外我們對(duì)64例術(shù)后接受卡鉑和紫杉醇化療的上皮性卵巢癌患者進(jìn)行了隨訪調(diào)查，結(jié)果顯示患者1～5年的累積生存率分別為0.55、0.36、0.36、0.28、0.21。采用多因素COX回歸分析發(fā)現(xiàn):臨床分期對(duì)患者的生存期有影響，Ⅲ～Ⅳ期與Ⅰ～Ⅱ期相比，其風(fēng)險(xiǎn)比例為HR＝5.398（95.0%CI 1.154～25.259）；Notch3的表達(dá)也與患者的生存期有關(guān)，高表達(dá)者的危險(xiǎn)比例為HR＝8.362（95.0%CI 2.154～32.461），提示Notch3高表達(dá)及FIGO分期是卵巢上皮性癌的獨(dú)立不良預(yù)后因素，因此Notch3可作為判斷卵巢癌預(yù)后的指標(biāo)之一。

腫瘤的發(fā)生是多種信號(hào)傳導(dǎo)紊亂的綜合結(jié)果。研究顯示PI3K／Akt信號(hào)通路是Notch信號(hào)的關(guān)鍵下游中介［14］。Cantley［11］在Notch信號(hào)通路促進(jìn)干細(xì)胞增殖機(jī)制的研究中發(fā)現(xiàn):Notch配體激活Notch通路，經(jīng)PI3K－Akt旁路起始的胞質(zhì)磷酸化級(jí)聯(lián)途徑調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖，進(jìn)而激活下游mTOR。mTOR活性增強(qiáng)后激活其下游效應(yīng)分子，S6K和真核細(xì)胞翻譯起始因子4E結(jié)合蛋白1（eukaryotic initiation factor 4E－binding protein 1，4EBP1）。S6K活化后促進(jìn)磷酸化核糖體蛋白pS6以及翻譯調(diào)節(jié)蛋白p4EBP1的合成，從而對(duì)蛋白合成進(jìn)行調(diào)節(jié)。在造血系統(tǒng)T－ALL中可以觀察到Notch信號(hào)通路的持續(xù)激活，同時(shí)伴隨有mTOR信號(hào)通路的持續(xù)激活。

本研究結(jié)果顯示，pS6蛋白在上皮性卵巢癌中呈高表達(dá)，顯著高于良性卵巢囊腺瘤及正常卵巢組，并且發(fā)現(xiàn)Notch3與pS6呈正相關(guān)（rs＝0.668，P＜0.01），提示PI3K／Akt／mTOR信號(hào)通路在上皮性卵巢癌的發(fā)生發(fā)展中起了重要作用，且Notch及PI3K／Akt／mTOR信號(hào)通路在功能上具有相關(guān)性。

另外將64例術(shù)后接受卡鉑和紫杉醇化療的卵巢癌患者，根據(jù)Notch3及pS6表達(dá)情況，分為高表達(dá)組、低表達(dá)組及中表達(dá)組3組。結(jié)果發(fā)現(xiàn)Notch3及pS6高表達(dá)組總生存期較短，低表達(dá)組的總生存期明顯較長(zhǎng)（χ2＝41.479，P＜0.01）。提示Notch3及pS6聯(lián)合可作為判斷卵巢癌預(yù)后的綜合指標(biāo)之一。同時(shí)對(duì)120例上皮性卵巢癌患者是否伴有腹水的研究發(fā)現(xiàn)，Notch3和pS6高表達(dá)組患者腹水陽(yáng)性率顯著高于低表達(dá)組及中表達(dá)組。提示Notch3和pS6的高表達(dá)可能與腹腔種植播撒有關(guān)。

綜上所述，Notch3與pS6在上皮性卵巢癌的發(fā)生發(fā)展中可能存在一定的相關(guān)性，Notch3、pS6蛋白的高表達(dá)與患者生存期密切相關(guān)，兩者聯(lián)合使用可作為判斷卵巢癌預(yù)后的綜合指標(biāo)之一。

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（2014－09－23 收稿）

Expressions of Notch3 and pS6 in Ovarian Epithelial Cancer Tissues and Their Relationship with Clinical Prognosis

Liu Zhaoxia1＃，Yu Xiaolin2＃，Lai Xiaoqing1＃et al
1Department of Obstetrics and Gynecology，Nanshan Affiliated Hospital of Guangdong Medical College，Shenzhen 518052，China
2Department of Obstetrics and Gynecology，The First Affiliated Hospital of Nanchang University，Nanchang 330006，China

Objective To investigate the protein expressions of Notch3and pS6in ovarian epithelial cancer tissues，and to explore their relationship with the clinical pathological characteristics and overall survival time.Methods Immunohistochemistry was used to detect the protein expressions of Notch3and pS6in different ovarian tissues，including 30cases of normal ovarian tissue，30cases of benign ovarian cystadenoma and 120cases of ovarian epithelial cancer.Results Notch3and pS6proteins were positively expressed in normal ovarian tissue，benign ovarian cystadenoma and ovarian epithelial cancer and the positive rates were 16.7%，70.0%，91.7%and 16.7%，76.7%，90.0%，respectively.The expression levels of Notch3and pS6in ovarian epithelial cancer were significantly higher than those in normal ovarian tissue and benign ovarian cystadenoma（P＜0.01）.The levels of Notch3and pS6protein expression were associated with clinical stages，pathological grades，histological types，lymphatic metastasis and ascites，but not with age.The protein expression levels of Notch3were positively correlated with those of pS6（rs＝0.668，P＜0.01）.Patients with high expression of Notch3and pS6had shorter overall survival time，while those with lower Notch3and pS6protein expression had significantly longer overall survival time（χ2＝41.479，P＜0.01）.The ascite rate was 82.1%in high Notch3and pS6expression group，significantly higher than in groups with moderate（51.9%）and low expression of Notch3and pS6（27.0%）（χ2＝28.448，P＜0.01）.Conclusion Notch3and pS6are closely associated with survival time（poor prognosis）of patients with ovarian epithelial cancer.Patients with overexpression of Notch3and pS6have shorter overall survival time.

epithelial ovarian cancer； Notch signaling pathway； mTOR pathway； Notch3； pS6

R737.31

10.3870／j.issn.1672－0741.2015.01.020

＊深圳市南山區(qū)科研基金資助項(xiàng)目（No.2013015）

＃同為第一作者

劉朝霞，女，1970年生，主任醫(yī)師，副教授，E－mail:lzxia77＠163.com；余筱琳，女，1974年生，副主任醫(yī)師，講師，E－mail:zyg0511＠hotmail.com；賴小青，女，1972年生，主治醫(yī)師，E－mail:lai00606＠163.com

△通訊作者，Corresponding author，E－mail:tanbuzhen＠tom.com