尿蛋白電泳在糖尿病早期腎損害診斷中的應(yīng)用

摘要：目的 初步研究尿蛋白電泳在糖尿病早期腎損害診斷中的應(yīng)用。方法 對54例糖尿病患者采用十二烷基硫酸鈉-瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行尿蛋白組分分析。結(jié)果 經(jīng)分析，可區(qū)分為腎小球性、腎小管性、生理性、以及混合性蛋白尿等分類，其中對照組中有4例出現(xiàn)清蛋白條帶。測試患者中3例未檢出，生理性蛋白尿4例，腎小管性蛋白尿33例。腎小球性蛋白尿13例，混合性蛋白尿7例。結(jié)論 十二烷基硫酸鈉-瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行尿蛋白分析，尿蛋白按分子量大小予以分離，結(jié)果清晰，可靠，能真正反映尿中各種蛋白組分的含量及變化，對糖尿病早期腎損害的診斷有較高的臨床應(yīng)用價值。

關(guān)鍵詞：尿蛋白電泳；糖尿病；腎損害

在腎臟疾病中，最常見的臨床表現(xiàn)是尿中出現(xiàn)蛋白。它不僅會有量的變化，也可以出現(xiàn)成分的變化。所以，分析尿蛋白的成分及模式，可以正確了解尿蛋白性質(zhì)，了解腎臟損害的部位以及損害程度，對臨床具有重要意義[1]。糖尿病腎病是糖尿病常見的嚴(yán)重并發(fā)癥之一，嚴(yán)重時可導(dǎo)致尿毒癥，早期診斷有利于治療和緩解病情，通過電泳分析尿蛋白組分，可以幫助明確它的來源，如果出現(xiàn)混合性尿蛋白，表示腎功能損害累及腎小球及腎小管，從而有助于病情診斷和預(yù)后判斷[2]。本次實驗通過分析，尿蛋白電泳技術(shù)對患者無創(chuàng)傷，利用尿蛋白來源，分析腎臟損害部位及程度，從而為臨床診斷與鑒別診斷提供可靠的依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 ①患者組：為我院內(nèi)一科確診的糖尿病患者54例，其中男32例，女22例，年齡37～82歲，病齡2～22年；②對照組：為我院體檢中心健康體檢者25例，已排除為臨床糖尿病患者。

1.2儀器設(shè)備 ①桂林優(yōu)利特150尿液分析儀及配套試紙；②sebia HYDRASYS全自動電泳分析儀及配套試劑。

1.3方法 住院患者新鮮晨尿，尿常規(guī)項目檢測，如尿蛋白≥3+，則稀釋至2+。將80ul尿液和20ul十二烷基硫酸鈉-溴酚藍(lán)稀釋液混勻。電泳儀打開預(yù)熱30min。取10ul加入孔中，10min后開始電泳。染色，烘干后掃描報告結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1尿常規(guī)檢測結(jié)果 25例對照組尿常規(guī)檢測，尿蛋白均為陰性。54例糖尿病患者尿蛋白檢測，其中6例為陰性，占11.1%；48例陽性，占88.9%。

2.2尿蛋白電泳結(jié)果 25例對照組中有4例出現(xiàn)單純淡染的蛋白條帶，為生理性蛋白尿。糖尿病患者蛋白尿標(biāo)本經(jīng)過十二烷基硫酸鈉-瓊脂糖凝膠電泳在凝膠片中出現(xiàn)了4種不同的電泳圖譜：①生理性蛋白尿：其圖形特征為少量淡染的單一的清蛋白帶，其他高、低分子量區(qū)帶均未出現(xiàn)；②腎小管性蛋白尿：為低分子蛋白，其圖形特征為除清蛋白區(qū)帶以外，在凝膠片陽極和清蛋白之間出現(xiàn)其他電泳區(qū)帶；③腎小球性蛋白尿：為高分子蛋白，其圖形特征是除清蛋白區(qū)帶外，在加樣點與清蛋白之間出現(xiàn)其他電泳區(qū)帶；④混合性蛋白尿：其圖形特點是低、中、高分子蛋白條帶均同時出現(xiàn)電泳區(qū)帶。

3 討論

3.1正常情況下，由于腎小球濾過膜的孔徑屏障和電荷屏障作用，血漿的中、高相對分子質(zhì)量的白蛋白、球蛋白不能通過濾過膜；相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)，如微球蛋白、溶菌酶等，則可以自由通過濾過膜，但其濾過量低，95%又在近曲小管中被重吸收。因此，終尿中的蛋白質(zhì)含量很少，僅為30～130mg/24h.隨機(jī)尿中蛋白質(zhì)為0～80mg/L，尿蛋白定性試驗為陰性。

3.2蛋白尿是腎臟疾病的重要臨床表現(xiàn)，正確判斷蛋白尿性質(zhì)來源對了解腎臟的損害程度以及指導(dǎo)臨床治療具有重要的意義。腎臟是糖尿病腎損害的主要靶器官，容易發(fā)生結(jié)構(gòu)和功能減弱，腎或其他組織分泌蛋白質(zhì)增加時即可形成蛋白尿。

3.3蛋白質(zhì)是尿液化學(xué)成分檢查中最重要的項目之一。目前臨床實驗室采用干化學(xué)試帶法測蛋白質(zhì)。試帶法采用PH指示劑蛋白質(zhì)誤差原理。在PH3.2的條件下，酸堿指示劑產(chǎn)生的陰離子與帶陽離子的蛋白質(zhì)結(jié)合生成復(fù)合物，引起指示劑進(jìn)一步電離，當(dāng)超越緩沖范圍時，指示劑發(fā)生顏色改變。顏色的深淺與蛋白質(zhì)含量成正比。定性陽性稱之為蛋白尿，它只適合于清蛋白的檢測，對球蛋白不太敏感。尿蛋白定量檢測是測得尿液中的蛋白質(zhì)總量，不能將蛋白進(jìn)行分類。電泳儀它的瓊脂凝膠介質(zhì)，在電場的作用下，可將尿液中的蛋白質(zhì)完全依據(jù)相對分子量的大小分成不同條帶，尿蛋白按分子量的大小分為低分子量蛋白、中分子量蛋白、高分子量蛋白及混合性蛋白。通過區(qū)分不同位置蛋白區(qū)帶，判斷尿液蛋白質(zhì)分子的大小，進(jìn)而判斷為生理性、腎小管性、腎小球性、混合性蛋白尿。

3.4糖尿病出現(xiàn)蛋白尿是由于長期高濃度血糖導(dǎo)致腎小動脈硬化，腎組織缺氧及缺血，微循環(huán)發(fā)生障礙，導(dǎo)致腎小球通透性增加，蛋白質(zhì)濾過的結(jié)果。也是腎小管對濾過蛋白重吸收障礙的結(jié)果。糖尿病腎損害早期，腎小管受累早于腎小球損害，患者多表現(xiàn)為多尿、夜尿，臨床檢測發(fā)現(xiàn)尿滲透壓及尿比重下降，出現(xiàn)不同程度腎小管性蛋白尿，其可能機(jī)制是由于腎血管自身調(diào)節(jié)障礙，導(dǎo)致血管痙攣，從而血流量減少，而腎小管對缺血損害相較腎小球靈敏，故先出現(xiàn)腎小管損害，所以腎小管排出蛋白增加。本文結(jié)果顯示糖尿病患者中出現(xiàn)4例生理性蛋白尿，33例腎小管性蛋白尿，13例腎小球性蛋白尿，7例混合性蛋白尿，結(jié)果符合糖尿病腎損害早期腎小管受累較為突出的特點，且隨著病情的進(jìn)展，出現(xiàn)腎小球性蛋白尿，甚至出現(xiàn)混合性蛋白尿。由于結(jié)果也提示對于尿蛋白陰性的糖尿病患者應(yīng)做尿蛋白電泳，對于早發(fā)現(xiàn)腎損害有很大的意義。

綜上所述，尿蛋白電泳可以作為糖尿病早期腎損害的診斷指標(biāo)，更加透徹的了解尿蛋白的組分以及腎臟損害的部位和程度，在對疾病治療和預(yù)后判斷有十分重要價值。

參考文獻(xiàn)：

[1]叢玉隆，王丁.當(dāng)代檢驗分析技術(shù)與臨床[M].北京：中國科學(xué)技術(shù)出版社，2002：228-229.

[2]劉成玉，羅春麗.臨床檢驗基礎(chǔ)[M].第5版.人民教育出版社，2012.

編輯/哈濤