摘要:目的 探討常規(guī)切片時間長,放置蠟塊的冰盤易化成水,使蠟塊變軟,使切片速度變慢及影響切片質(zhì)量的方法。方法 分別在-10℃冷臺、冰盤各放置50個待切蠟塊,按照平常的工作方式進行常規(guī)切片,并鏡下觀察比較切片質(zhì)量。結果 采用冷臺的切片速度和質(zhì)量優(yōu)于采用冰盤的。結論 使用冷臺可以加快切片速度及更好切片,使切片質(zhì)量得到更好的提高。
關鍵詞:可調(diào)控溫度;冷臺;病理切片;應用
1 材料與方法
1.1材料 選取汕頭市中心醫(yī)院病理科2014年5月12日常規(guī)手術切除標本,按規(guī)范[1]進行取材、固定、脫水、透明、浸蠟、包埋過程,制作成石蠟蠟塊,進行挑選蠟塊100個,蠟塊的挑選按照盡量同一病例同一部位的腫瘤組織各取兩個的原則,這樣才有更好的可比性,并按照相對應的標本進行編號。
1.2方法
1.2.1分別在預設好溫度-10℃冷臺(維格斯CP380型)、冰盤上各放置組織相對應50個蠟塊,都凍上15min,冰盤的蠟塊放于冰箱冷藏室內(nèi)。
1.2.2將冷臺、冰盤凍好的蠟塊分別由兩組技術人員,按照平時方式,進行常規(guī)切片[2],并對各自50個蠟塊切片的時間,同時進行計時。
1.2.3將兩組切片,都放在60℃烤箱烤60min。
1.2.4最后在櫻花全自動染色封片一體機上進行常規(guī)HE染色,封片,由同一個醫(yī)生鏡下觀察每張切片質(zhì)量,并做好切片質(zhì)量報告。
2 結果
采用-10℃冷臺的切片時間為22min,切片效果相對較好、滿意;采用冰盤的切片時間為28min,較久,切片效果剛開始的蠟塊切片的效果還是較滿意,后面蠟塊的開始慢慢變軟,切的效果一般,稍厚。
3 討論
在傳統(tǒng)的病理切片過程中,包括許多大醫(yī)院采用冰盤來冷凍蠟塊,使蠟塊的硬度適宜,好切,但冰盤隨之在室內(nèi)放置的時間越來越久,尤其是夏天,容易化成水溫度降低,沒法使蠟塊達到適宜的硬度,無法切出完整的切片或是切出的切片出現(xiàn)皺折,大大降低了切片的速度和質(zhì)量[3]。本次實驗通過可調(diào)控溫度冷臺與冰盤在病理切片的比較分析,覺得冷臺的實用性是優(yōu)于冰盤的。
冷臺在病理科較普遍應用于包埋過程中,置于包埋機旁邊,用于速凍剛包埋好的模蠟塊,讓石蠟與組織凝固、不易變動位置,以便更快的做好蠟塊;小型的冷凍臺還應用于快速冷凍切片機里面,加快組織與OCT的凝結,達到快速冷凍組織,進行快速冰凍切片等。
本次實驗采用可調(diào)控溫度冷臺應用于病理切片,其主要原理是采用壓縮機制冷系統(tǒng),臺面結滿冰霜,表面平整均勻,使蠟塊快速冷卻;冷臺可一次性容納70個蠟塊,可以縮減更換蠟塊冷凍的次數(shù);可自由設定溫度(室溫到零下15℃),本試驗冷臺采用的是-10℃,是參考相關文獻資料[4]和實踐工作中得出的,如下所述:冷臺處于-5℃時,蠟塊的切片效果一般,而對于纖維組織多、致密、富含脂肪組織者, 在這個溫度下的蠟塊的硬度是不夠的, 無法切出完整的切片或是切片出現(xiàn)皺折;冷臺處于-10℃時,對大多數(shù)的標本蠟塊來說, 切片的效果是較為滿意,此時蠟塊的硬度適宜, 比較容易切出滿意的切片, 但是對于含脂肪組織較多的組織蠟塊, 有時仍難以切出令人滿意的片子;冷臺處于-15℃時, 蠟塊會變硬易碎,也就是蠟塊出現(xiàn)凍裂現(xiàn)象,則難以切出完整的片子, 特別對于含纖維組織較少的蠟塊, 如前列腺組織,甲狀腺組織,宮內(nèi)膜組織等, 切出的片子在顯微鏡下觀察常有裂隙現(xiàn)象,即蠟塊出現(xiàn)凍裂。不同的溫度的蠟塊對于病理切片還是有影響的,所以可調(diào)控溫度冷臺在病理切片起了很大的作用,它可以根據(jù)組織的不同而選擇適宜的溫度,但同一溫度下的蠟塊,標本不同,其組織結構、成分不同, 其物理性狀也不同,切片效果也是不盡相同的。因此,不能一概而論的說,采用同一適當溫度的冷臺就可以切出好的片子,要看許多因素的。
可調(diào)節(jié)溫度的冷臺應用于病理切片中,既能達到保持蠟塊的硬度適宜和整個切面都充分凍均勻,又解決冰盤化成水、表面凹凸不平很難將整個蠟塊切面充分凍均勻,需要反復換冰盤的問題,加快了切片的速度和提高了切片質(zhì)量;而且冷凍臺的面積大,可放置較多的待切蠟塊,尤其是做免疫組化的蠟塊,切片質(zhì)量甚是滿意。但由于冷臺的體積都相對較大,在我們國內(nèi)許多的病理科空間都較狹小,切片臺的面積都不打,擺放還是較難,有待病理科技術室的規(guī)??臻g擴大的情況下,可調(diào)節(jié)溫度的冷臺會廣泛應用于病理切片過程中。
凍好每個蠟塊,保證蠟塊的硬度適宜,在病理切片過程中是影響切片質(zhì)量的重要因素,很多技術員沒給予重視,因此可調(diào)節(jié)溫度冷臺是值得在我們病理實驗室廣泛應用的,尤其是在病理切片中的應用。
參考文獻:
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[3]方慶全,陳宏.病理切片常出現(xiàn)的問題及對策[J].實用醫(yī)技雜志,2010,17(6):568-569.
[4]張同海,樊克武.不同的溫度在病理切片制作中的影響[B].實用醫(yī)技雜志,2006,13-14.
編輯/成森