核轉(zhuǎn)錄因子—κB p65及干擾素—γ在急性創(chuàng)傷性腦損傷患者中表達(dá)關(guān)系的臨床研究

目前尚不十分清楚創(chuàng)傷性腦損傷的分子機(jī)制，但已有多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，在局限性和全腦性缺血?jiǎng)游锬Ｐ椭?，神?jīng)細(xì)胞的凋亡與腦組織的NF-κB表達(dá)的上調(diào)有直接關(guān)系，提示NF-κB的激活在神經(jīng)細(xì)胞凋亡的發(fā)生中確實(shí)起著重要的作用[1-2]。本研究的目的是以輕、中、重各型腦損傷患者為研究對(duì)象，檢測(cè)腦損傷患者血清中NF-κB p65的變化，進(jìn)一步分析創(chuàng)傷性腦損傷后繼發(fā)性神經(jīng)細(xì)胞損傷的規(guī)律，為探討新的神經(jīng)保護(hù)性治療措施提供理論依據(jù)。

1資料與方法

1.1一般資料 選擇單純腦損傷患者40例，年齡18～65歲，平均（37.8±7.4）歲，其中女性28例，男性12例。所有患者入院時(shí)均確診腦挫裂傷，并依據(jù)GCS評(píng)分將入選患者分為輕型組（GCS評(píng)分≥12分）、中型組（8分

1.2研究方法

1.2.1標(biāo)本的采集 最終入選的40例腦損傷和8例四肢骨折的患者分別于傷后24h抽取外周靜脈血樣3ml；健康成人組8人一次性抽取靜脈血5m1，將其分為4等份。分離血清并在-70℃下保存待測(cè)。

1.2.2主要試劑和儀器 人核轉(zhuǎn)錄因子-κB p65（NF-κB p65）和干擾素-γELISA（IFN-γ）試劑盒（RD Systems公司，美國(guó)）、多功能酶標(biāo)儀 （Spectra MaxM2）（BioTek 公司，美國(guó)）等。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料用（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析（ANOVA），兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，相關(guān)分析采用直線相關(guān)分析，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1各組腦損傷患者、四肢骨折患者及健康成年人血清中NF-κB p65及IFN-γ含量水平結(jié)果的比較，發(fā)現(xiàn)創(chuàng)傷性腦損傷患者和四肢骨折患者血清中NF-κB p65較健康成人組均升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而前二者NF-κB p65含量比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；創(chuàng)傷性腦損傷患者血清中IFN-γ依病情越重升高越顯著（P<0.05），健康成人組和四肢骨折組患者血清中IFN-γ含量水平較腦損傷組比較均明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2.2重型顱腦損傷患者血清中IFN-γ與NF-κB p65含量水平的相關(guān)性 通過(guò)相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)重型顱腦損傷患者血清中IFN-γ與NF-κB p65呈正線性相關(guān)，以NF-κB p65含量水平為自變量（independent variable），用X表示；IFN-γ含量水平為應(yīng)變量（dependent variable），用Y表示?；貧w方程=-0.432+0.271x， r=0.947（P<0.001）。

3討論

創(chuàng)傷性腦損傷后神經(jīng)細(xì)胞功能的缺失機(jī)制尚未明確，目前主要認(rèn)為繼發(fā)性腦損傷是指在原發(fā)性腦損傷的基礎(chǔ)上發(fā)生的一系列病理變化，它們均可導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞不同程度的破壞，且近年來(lái)越來(lái)越多的文獻(xiàn)報(bào)道創(chuàng)傷性腦損傷后程序性細(xì)胞凋亡與慢性神經(jīng)細(xì)胞功能缺失有關(guān)[3]，并經(jīng)過(guò)各種創(chuàng)傷性腦損傷動(dòng)物模型予以證實(shí)。

既往研究報(bào)道，核轉(zhuǎn)錄因子（nuclear transcription factor kappaB，NF-κB）能與其他細(xì)胞基因增強(qiáng)子或啟動(dòng)子序列發(fā)生特異性結(jié)合而促進(jìn)其轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，與免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)以及細(xì)胞的分化、增殖和凋亡等緊密相關(guān)[4]。其中小膠質(zhì)細(xì)胞被缺血激活后，釋放IFN-γ等細(xì)胞毒性物質(zhì)。IFN-γ還可通過(guò)利用JAK/STAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑誘導(dǎo)細(xì)胞的分化、增殖或凋亡[5-6]，進(jìn)一步加重創(chuàng)傷腦組織的損害。本研究也進(jìn)一步說(shuō)明了創(chuàng)傷性腦損傷后NF-κB p65參與神經(jīng)功能損傷的一個(gè)重要因素。本研究進(jìn)一步通過(guò)腦損傷患者外周血清中NF-κB p65與所選的8例四肢骨折患者和8位健康成人組血清含量進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，四肢骨折患者外周血中NF-κB p65升高，且與健康成人組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），我們認(rèn)為通過(guò)檢測(cè)外周血中NF-κB p65不可作為腦損傷后判斷神經(jīng)組織損傷的特異性指標(biāo)。

本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)傷情越重即GCS評(píng)分越低，IFN-γ升高越顯著；與此同時(shí)，本研究還發(fā)現(xiàn)腦損傷患者血清中IFN-γ所檢測(cè)的含量水平變化與四肢骨折患者相比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，由此推測(cè)IFN-γ是創(chuàng)傷性腦損傷后作為神經(jīng)功能缺失的一個(gè)特異性而靈敏的指標(biāo)，通過(guò)進(jìn)一步探討我們發(fā)現(xiàn)重型腦損傷組患者血清中IFN-γ與NF-κB p65的含量水平顯著降低且二者含量水平成顯著正相關(guān)，說(shuō)明NF-κB p65可誘發(fā)促炎介質(zhì)（IFN-γ）的含量水平。

綜上所述，創(chuàng)傷性腦損傷后神經(jīng)組織的繼發(fā)性損傷的病理生理改變及其復(fù)雜，既往開(kāi)展的實(shí)驗(yàn)及臨床研究所得出的結(jié)論尚不能完全適用于臨床。通過(guò)檢測(cè)外周血清指標(biāo)尚處于探索階段，本研究直接在臨床工作中選擇創(chuàng)傷性腦損傷患者，范圍較廣，但得出的結(jié)論還有待于在臨床工作中不斷完善。

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編輯/馮焱