泌尿生殖道標(biāo)本濃度對(duì)支原體檢測(cè)的影響

摘要：目的 探討泌尿生殖道采集標(biāo)本濃度不同對(duì)支原體液體培養(yǎng)法檢測(cè)結(jié)果及藥敏效果的影響。方法 對(duì)患者常規(guī)采樣接種，將剩余的培養(yǎng)液加空白培養(yǎng)液至檢測(cè)量后再接種，觀察結(jié)果差異。結(jié)果 標(biāo)本稀釋后，女性支原體檢出率無(wú)變化，男性變低，但與原液檢測(cè)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；藥敏方面：四環(huán)素、交沙霉素、強(qiáng)力霉素、美滿霉素、克拉霉素稀釋前后敏感性相同，而左氧沙星、紅霉素、氧氟沙星、羅紅霉素的藥物敏感性升高，有顯著差異。結(jié)論 支原體檢測(cè)結(jié)果差異與標(biāo)本濃度有關(guān)系。

關(guān)鍵詞：標(biāo)本濃度；支原體檢測(cè)

支原體是寄生在泌尿生殖道的病原體，是非淋性尿道炎的主要病因，也是發(fā)病率較高的性傳播疾病。目前實(shí)驗(yàn)室對(duì)支原體檢測(cè)，主要采集泌尿生殖道分泌物，用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)法檢測(cè)支原體中的解脲脲原體（UU）和人型支原體（MH）。由于男女采樣部位的解剖位置不同，所用的采樣拭子不同，采集到標(biāo)本量會(huì)有差別。我們利用患者標(biāo)本進(jìn)行濃度稀釋，比較稀釋前后結(jié)果，觀察支原體檢測(cè)與標(biāo)本濃度的關(guān)系。

1資料與方法

1.1一般資料 本院2012年1月～2014年12月皮膚性病門診疑似生殖道非淋感染的患者，收集到116例支原體陽(yáng)性結(jié)果，其中女76例，男40例，年齡22～50歲。

1.2標(biāo)本采集 由醫(yī)生采集。女性患者宮頸分泌物：先擦去宮頸口多余的粘液，再用女性拭子在宮頸管內(nèi)1～2cm處取宮頸分泌物，拭子在宮頸內(nèi)旋轉(zhuǎn)并至少停留20s，立即床邊接種培養(yǎng)液，然后送檢。對(duì)男性患者囑其在試驗(yàn)前1h內(nèi)不要排尿，用男性拭子探入尿道口2～3cm ，適當(dāng)旋轉(zhuǎn)至少停留20s，拭子取出后床邊接種培養(yǎng)液即刻送檢。

1.3試劑 珠海迪爾生物工程有限公司的支原體（UU/MH）分離培養(yǎng)藥敏試劑盒（微生物檢測(cè)法）。

1.4試驗(yàn)方法 嚴(yán)格按試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作接種后，瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液還剩0.9ml。用一次性無(wú)菌注射器吸取新開(kāi)瓶的培養(yǎng)液2.1ml加入混勻，培養(yǎng)液稀釋約3倍，剛好夠接種一塊檢測(cè)卡，于24h和48h后分別觀察結(jié)果。

1.5觀察指標(biāo) 觀察稀釋前后支原體檢出率和藥敏的差異。

1.6數(shù)據(jù)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS11.5 軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料的對(duì)比用？字2檢驗(yàn)，以P<0.05顯示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1原接種液與稀釋后培養(yǎng)液的支原體檢出率比較 女性無(wú)變化，男性UU陽(yáng)性有4例不符，其中2例為UU濃度<104，UU+MH陽(yáng)性結(jié)果有1例MH濃度<104，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表1。

2.2兩種濃度的藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比 男性藥敏不相同率比女性高。但是，無(wú)論男女，四環(huán)素、交沙霉素、強(qiáng)力霉素、美滿霉素、克拉霉素稀釋前后敏感相同。左氧沙星、紅霉素、氧氟沙星、羅紅霉素敏感所占的比例顯著高于原液，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2。

3討論

支原體檢測(cè)的液體培養(yǎng)基培養(yǎng)法是根據(jù)培養(yǎng)液由黃色變?yōu)榧t色來(lái)判斷支原體的存在與藥物敏感結(jié)果，對(duì)實(shí)驗(yàn)室要求不高，簡(jiǎn)單易行，被廣大醫(yī)院采用。目前，支原體檢測(cè)主要采集泌尿生殖道分泌物標(biāo)本，由于男女采集的部位與所用的拭子不同，且標(biāo)本來(lái)源隱避和不可重復(fù)，不象血清一樣穩(wěn)定可以相互比較結(jié)果。本文用患者剩余標(biāo)本稀釋到檢測(cè)量后再接種，觀察到支原體濃度影響檢測(cè)結(jié)果。如表1顯示，男性的支原體檢出率有變化，其主要原因是男性采樣拭子小，粘取的樣品量比女性少，稀釋后標(biāo)本濃度更少，代謝產(chǎn)物濃度不夠，指示劑不顯色或顯色不明顯[1]。

藥物敏感試驗(yàn)方面，如表2顯示：四環(huán)素、交沙霉素、強(qiáng)力霉素、美滿霉素、克拉霉素稀釋前后結(jié)果相同，而且敏感度高。左氧沙星、紅霉素、氧氟沙星、羅紅霉素受濃度影響大，稀釋后部分由耐藥變成中敏或者由中敏變成敏感，敏感性變高，藥敏結(jié)果有顯著差異，這是因?yàn)椴煌目咕幬飳?duì)支原體最小抑菌濃度MIC不同[2]。

本文采用原接種液與稀釋后培養(yǎng)液比較，觀察到標(biāo)本濃度對(duì)支原體檢測(cè)結(jié)果影響小，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；部分藥敏結(jié)果有顯著差異。由于兩性生殖道不同，女性宮頸口神經(jīng)末梢較少，幾乎沒(méi)有痛覺(jué)，可以標(biāo)準(zhǔn)化采集樣本。男性使用的拭子比女性小幾倍，粘取支原體數(shù)量比女性少，另外，其尿道對(duì)痛覺(jué)敏感，拭子還沒(méi)進(jìn)到位，部分人感到痛苦難忍，不能按標(biāo)準(zhǔn)程序采集到足夠的標(biāo)本，導(dǎo)致女性患者支原體感染陽(yáng)性率和耐藥率比男患者高[3-5]，性伴之間比較也是如此[6]，容易誤導(dǎo)臨床診療，應(yīng)引起高度重視。

參考文獻(xiàn)：

[1]甘超，占滿桂.泌尿生殖道支原體培養(yǎng)存在問(wèn)題及對(duì)策[J].吉林醫(yī)學(xué)，2012，33（27）：5945.

[2]馬寒，陸春，朱國(guó)興，等.解脲脲原體124株對(duì)抗菌藥物最小抑菌濃度測(cè)定[J].中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志，2008，22（3）：162-163.

[3]夏晴晴，王芳，賀娟.男女泌尿生殖道支原體屬感染特點(diǎn)的分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2010，20（8）：1188-1190.

[4]賴秀梅.不同性別泌尿生殖道支原體培養(yǎng)及藥敏結(jié)果的分析[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2012，10（25）：556-558.

[5]白衛(wèi)君，曹愛(ài)華，王立麗，等.泌尿生殖道支原體感染及藥敏結(jié)果分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，30（5）：467-469.

[6]葛玉東，張艷麗.200例支原體感染女性與配偶支原體培養(yǎng)結(jié)果對(duì)比分析[J].中國(guó)醫(yī)藥科學(xué)，2011，1（11）：125.編輯/馮焱