用TP—ELISA、RPR與TP—PA法檢測梅毒的價(jià)值評價(jià)

摘要：目的 探討TP-ELISA、RPR以及TP-PA法對于梅毒篩查的臨床價(jià)值。方法 收集2010年1月～2013年12月，我院經(jīng)梅毒檢測顯示為陽性的130份血清標(biāo)本以及正常血清標(biāo)本60份，分別采用TP-ELISA、RPR以及TP-PA進(jìn)行檢測。結(jié)果 TP-ELISA、RPR以及TP-PA三種檢測方法的特異度依次為95.2%76.3%、100.0%，靈敏度依次為93.1%、62.4%、99.0%，總陽性率依次為100.0%、77.7%、100.0%，TP-PA及TP-ELISA的陽性率、特異度及總陽性率均顯著高于RPR（P<0.05），而TP-PA與TP-ELISA無明顯差異（P>0.05）。結(jié)論 TP-ELISA、RPR與TP-PA法對梅毒血清學(xué)診斷各具優(yōu)勢，應(yīng)根據(jù)臨床檢驗(yàn)需求及目的合理選擇檢測方式。

關(guān)鍵詞：梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；梅毒螺旋體凝集法；快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)；梅毒

梅毒（TP）是臨床較為常見的一種慢性系統(tǒng)性性傳播疾病，主要是因梅毒螺旋體感染所致。本病的傳染性及危害性極強(qiáng)，早期準(zhǔn)確診斷并及時(shí)予以規(guī)范化治療，對于減輕患者的痛苦并控制病情蔓延具有重要意義[1]。目前臨床常用的梅毒血清學(xué)檢測法國法有快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（RPR）、梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（TP-ELISA）以及梅毒螺旋體凝集法（TP-PA）法，各種方法均具有其特殊應(yīng)用價(jià)值。本研究對比了這3種方法在梅毒篩查中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2010年1月～2013年12月，我院住院及門診梅毒患者的血清標(biāo)本101份，其中，26份來自梅毒一期患者，36例份來自梅毒二期患者，21例份來自梅毒三期患者，18份來自治愈后復(fù)查梅毒患者；同時(shí)收集其他疾病患者的血清標(biāo)本29份，其中，6份類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者，3份系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者，7分妊娠期女性，13份乙肝患者；選擇同期來院體檢的健康志愿者血清標(biāo)本60份。

1.2方法 所用TP-PA試劑盒選自日本富士瑞必歐株式會(huì)社，RPR劑盒選自上?？迫A生物技術(shù)有限公司，TP-ELISA試劑盒選自珠海麗珠試劑股份有限公司。所用儀器包括酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、加樣器，選自北京普朗新技術(shù)有限公司。此外，實(shí)驗(yàn)室常用微量振蕩器、離心機(jī)以及恒溫水浴箱等。分別采用RPR、TP-ELISA以及TP-PA法對全組190份血清標(biāo)本進(jìn)行梅毒篩查，嚴(yán)格按照說明書操作，均進(jìn)行平行檢測以及室內(nèi)質(zhì)控。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 數(shù)據(jù)以SPSS18.0軟件進(jìn)行分析，以率（%）表示計(jì)數(shù)資料，比較經(jīng)χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3種方法的檢測結(jié)果 190份血清標(biāo)本經(jīng)RPR、TP-ELISA以及TP-PA法檢測統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表1。

2.2 3種方法對梅毒檢驗(yàn)的陽性率、特異度比較 統(tǒng)計(jì)分析顯示，TP-ELISA法和TP-PA法的陽性率、特異度以及總陽性均顯著高于RPR法（P<0.05），而TP-ELISA法與TP-PA法之間無明顯差異（P>0.05）。治愈后復(fù)發(fā)梅毒患者不計(jì)入特異度計(jì)算（見表2）。

3 討論

TP是臨床常見性傳播疾病，主要經(jīng)性行為而傳播，胎盤以及輸血等途徑亦可傳播。梅毒螺旋體在侵入人體以后，可生成各類抗體，其中，IgM及IgG抗體最為常見。其中梅毒一期患者主要為IgM抗體，梅毒二期可為IgM和IgG，而梅毒三期主要為IgG抗體[2]。不同臨床分期梅毒患者的血清抗體出現(xiàn)時(shí)間以及濃度均存在較大的差異。因此，TP血清學(xué)檢驗(yàn)對于梅毒診斷以及臨床分期判斷具有重要意義。IgM抗體的持續(xù)時(shí)間較短，而IgG抗體能夠終身存在，由于其在血液中的濃度較低，故無法預(yù)防再感染的發(fā)生。非特異性抗體多是由于組織受損后裂解產(chǎn)生出的類脂成分，其能夠與梅毒螺旋體中的蛋白質(zhì)相結(jié)合而產(chǎn)生抗原，這類抗原對機(jī)體產(chǎn)生刺激作用即可產(chǎn)生反應(yīng)素[3]。大量臨床研究證實(shí)，TP血清學(xué)檢測會(huì)受到其他有損機(jī)體的反應(yīng)的影響，合理選擇檢測方法對于檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性以及可靠性至關(guān)重要[4]。

RPR法主要用于體內(nèi)反應(yīng)素的檢測，多用于TP篩查以及療效判斷，因其操作簡便、費(fèi)用低廉，在臨床中應(yīng)用廣泛。但蔣紅霞等人認(rèn)為，自身免疫性疾?。ɡ缦到y(tǒng)性紅斑狼瘡及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等）、病毒性肝炎、妊娠以及惡性腫瘤等對機(jī)體亦具有刺激性損害，可引起假陽性。本組所選101例梅毒患者中，陽性率為62.4%（63/101），其中包括了一部分康復(fù)期梅毒患者。此外，乙肝、妊娠、系統(tǒng)性紅斑狼瘡以及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者中均具有部分陽性病例。趙棉[3]等人研究發(fā)現(xiàn)，梅毒血清學(xué)檢測過程中，梅毒螺旋體感染時(shí)間較短的一期患者，因血清中尚未形成抗體或者抗體濃度較低，經(jīng)血清學(xué)檢查往往難以篩查出而產(chǎn)生假陰性。本組26例一期患者中，RPR法檢出3例為陰性。由此可見，經(jīng)RPR篩查為陽性患者，并非均感染梅毒螺旋體，為陰性患者，亦不能完全排除早期梅毒螺旋體感染的可能，需聯(lián)合其他檢測方法綜合判斷，以提高診斷準(zhǔn)確率。

TP-PA法主要是利用明膠粒子作為人工載體，將梅毒螺旋體的毒株置入其中，使兩者發(fā)生凝集反應(yīng)后，檢測血清梅毒特異性抗體，其靈敏度及特異性均較高，可信度較高。本組中，TP-PA檢測法的靈敏度為99.0%，特異度達(dá)100.0%。但這種檢測方法的檢測試劑較為昂貴，檢測成本較高，且操作較為繁瑣，檢測操作耗時(shí)較長，不適用于大樣本篩查。

TP-ELISA主要是利用特異性基因工程檢測技術(shù)進(jìn)行檢測，可作為梅毒螺旋體感染的重要診斷依據(jù)。該技術(shù)操作簡便，試劑便宜，靈敏度以及特異度均較高，且可自動(dòng)化操作，是一種快速、簡便且高效的檢測手段。本研究中，TP-ELISA的總陽性率為77.7%，敏感度和特異度分別為93.1%和95.2%。但由于TP-ELISA法與TP-PA法均是檢測IgG與IgM混合抗體，而梅毒IgG抗體即便在治愈后仍能長期存在，檢測結(jié)果仍可呈陽性，這部分陽性只能說明患者曾經(jīng)感染過或者正處于感染期內(nèi)，并不能確定是否為梅毒活動(dòng)期，無法進(jìn)行療效監(jiān)測[5]。

綜上所述，RPR、TP-PA以及TP-ELISA三種檢測方法各具應(yīng)用優(yōu)勢，在TP血清學(xué)檢查中均具有重要意義。在臨床TP血清學(xué)檢驗(yàn)中，應(yīng)根據(jù)檢查目的合理選擇檢測方法，必要時(shí)可聯(lián)合監(jiān)測，以排除假陽性或假陰性，最大限度地降低誤診和漏診率，提供診斷準(zhǔn)確率。

參考文獻(xiàn)：

[1]蔣瑩，鄭利民.三種梅毒檢測方法的應(yīng)用分析[J].中國誤診學(xué)雜志，2011，11（31）：7643-7644.

[2]蔣紅霞.四種梅毒檢測方法的臨床應(yīng)用價(jià)值[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，32（7）：1099.

[3]趙棉，王君，邢立亞，等.批量標(biāo)本梅毒檢測方法探討[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2011，17（23）：146-147.

[4]龔建紅，陳衛(wèi)武，馬吉輝，等.三種梅毒血清學(xué)檢測方法的應(yīng)用分析[J].中外健康文摘，2013，（4）：220-221.

[5]周琳，胡雪玲，張健倩，等.RPR、TPPA、TP-ELISA3種檢測梅毒方法的比較及評價(jià)[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2012，21（1）：86-87.

編輯/蘇小梅