不同抗凝劑對(duì)血氨檢測(cè)結(jié)果的影響

摘要：目的 探討肝素和EDTA抗凝血對(duì)血氨的檢測(cè)結(jié)果是否存在差異。方法 選取2013年1月～9月在大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院就診的患者90例根據(jù)血氨參考范圍入選病例分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三組，每組30例，分別采其靜脈血約3 ml，注入肝素抗凝、EDTA抗凝兩種不同真空采集管中，經(jīng)離心分離后即提取血漿用干化學(xué)法進(jìn)行血氨值測(cè)定并計(jì)算均值和差值，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，比較兩組均數(shù)差別有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，采用t檢驗(yàn)。結(jié)果 Ⅰ組肝素抗凝血值為（22.23±6.19）μmol/L，EDTA抗凝血值為（40.5±15.68）μmol/L，兩組相比較t=5.94，P<0.01；Ⅱ組肝素抗凝血值為（50.79±13.68）μmol/L，EDTA抗凝血值為（74.35±20.9）μmol/L，兩組相比較，t=5.17，P<0.01；Ⅲ組肝素抗凝血值為（121.59±24.72）μmol/L，EDTA抗凝血值為（156.83±21.82）μmol/L，兩組相比較，t=5.85，P<0.01。結(jié)論 不同血樣采集管對(duì)干化學(xué)法血氨測(cè)定結(jié)果有一定影響，肝素抗凝組的測(cè)定結(jié)果低于EDTA抗凝組，有顯著性差異（P<0.01）。由于本實(shí)驗(yàn)還受到環(huán)境溫度、標(biāo)本放置時(shí)間等因素的影響，而肝素的穩(wěn)定性較高。因此，為提高測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，建議臨床血氨測(cè)定使用肝素抗凝真空管采集標(biāo)本。

關(guān)鍵詞：血氨測(cè)定；抗凝劑；肝素；EDTA

Abstract：Objective To study the heparin and EDTA anticoagulant blood for blood ammonia detection results whether there are differences. Methods According to blood ammonia reference range selected cases into Ⅰ， Ⅱ， Ⅲ three groups，each group of 30 patients， 90 patients. Respectively adopt its venous blood about 3 ml， inject heparin anticoagulation， EDTA anticoagulation two different vacuum acquisition tube， the centrifugal separation namely after extraction plasma or serum with dry chemical method for blood ammonia value determination and calculation mean and difference， carries on the statistical analysis， and compared between the two groups have statistical significance difference mean， the t test. Results Ⅰgroup heparin anticoagulation group value was 22.23±6.19（μ mol/L）， EDTA anticoagulation group value was 40.5±15.68 （μ mol/L）， two groups of compared t = 5.94， P < 0.01； Ⅱ group heparin anticoagulation group value was 50.79±13.68 （μ mol/L）， EDTA anticoagulation group value was 74.35±20.9 （μ mol/L）， two groups of phase comparison， t= 5.17， P< 0.01； Ⅲ group heparin anticoagulation group value was 121.59±24.72 （μ mol/L），EDTA anticoagulation group value was 156.83±21.82 （μ mol/L）， two groups of phase comparison， t= 5.85， P< 0.01. Conclusion Different blood collection tube to dry chemical method blood ammonia determination results have a certain influence， heparin anticoagulation group of the determination results below EDTA anticoagulation group， there is significantly statistical difference （ P< 0.01）. Because of this experiment is influenced by environmental temperature， specimen placed time and so on factors， and the stability of the heparin higher. Therefore， in order to improve the veracity of test results， it is suggested that clinical blood ammonia determination using heparin anticoagulation vacuum tube specimen collection.

Key words：Ammonia determination； Anticoagulant； Heparin；EDTA

腦組織對(duì)氨的作用特別敏感，而人體中的氨主要是在肝臟合成尿素而解毒的，肝功能損傷時(shí)可引起明顯的血氨升高，進(jìn)而引起腦功能的紊亂[1]，目前，血氨的測(cè)定越來(lái)越受到臨床的重視，同時(shí)血氨測(cè)定的準(zhǔn)確性也逐漸受到大家的關(guān)注。選擇抗凝劑的標(biāo)準(zhǔn)是根據(jù)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目而確定的，抗凝劑的性質(zhì)不同，對(duì)血液成分的影響就不相同。因此需要根據(jù)檢驗(yàn)的目的而做出適當(dāng)?shù)倪x擇，才能得到預(yù)想的結(jié)果[2]。本文旨在探討兩種抗凝劑（肝素、EDTA）對(duì)血氨的檢測(cè)結(jié)果是否有影響及影響程度，以便更好選取抗凝劑。

1資料與方法

1.1一般資料 選取2013年1月～9月在大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院就診的患者90例，其中男性47例，女性43例，年齡38～88歲，平均63歲，同時(shí)以肝素、EDTA真空抗凝管抽取標(biāo)本，所有標(biāo)本均排除溶血、乳糜和凝集等因素的影響。

1.2標(biāo)本采集及處理 要求患者早晨空腹，抽取患者靜脈血分別注入真空肝素鋰抗凝管、EDTA-K2抗凝管各3 ml，采血后，顛倒混勻5～10次后立即送檢，血液離體后，隨著二氧化碳失去，通過(guò)酶反應(yīng)蛋白和谷氨酰氨等化合物產(chǎn)氨，會(huì)使實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏高，因此樣品采集后盡快離心標(biāo)本（3500 r/min，6 min），分離血漿，離心后標(biāo)本不能溶血及血漿不能含有顆粒物，立即檢測(cè)。

1.3儀器和試劑 采用美國(guó)強(qiáng)生公司Vitros-350干式生化分析儀對(duì)血氨進(jìn)行分析；試劑由積水醫(yī)療科技（中國(guó)）有限公司生產(chǎn)的含有EDTA-K2抗凝血的真空采血管、肝素鋰抗凝血的真空采血管。所有試劑都采用廠家原裝試劑及質(zhì)控品，以求處于穩(wěn)定狀態(tài)。所有結(jié)果均采用國(guó)家現(xiàn)行檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判斷。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所有計(jì)量數(shù)據(jù)用（x±s）表示，采用 SPSS 13.0 統(tǒng)計(jì)軟件統(tǒng)計(jì)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

由于血氨的參考范圍為9～33 μmol/L，故將90例患者的檢測(cè)結(jié)果按照血氨的參考范圍分成三組（Ⅰ組：血氨值<33.00 μmol/L，Ⅱ組：血氨值33.00～80.00 μmol/L，Ⅲ組：血氨值>80.00 μmol/L），并分別求出差值，見表1。

三組2種方法血氨結(jié)果的比較：Ⅰ組肝素抗凝標(biāo)本血氨值為（22.23±6.19）μmol/L，EDTA抗凝標(biāo)本血氨值為（40.5±15.68）μmol/L；Ⅱ組肝素抗凝標(biāo)本血氨值為（50.79±13.68）μmol/L時(shí)，EDTA抗凝標(biāo)本血氨為（74.35±20.9）μmol/L；Ⅲ組肝素抗凝標(biāo)本血氨值為（121.59±24.72）μmol/L時(shí)，EDTA抗凝標(biāo)本血氨值為（156.83±21.82）μmol/L。肝素抗凝組與EDTA抗凝組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性意義（P<0.01），見表2、圖1。

3討論

血氨是由機(jī)體代謝產(chǎn)生的氨以及消化道吸收來(lái)的氨進(jìn)入血液而形成的。正常情況下，氨在肝臟內(nèi)代謝成為尿素，嚴(yán)重肝臟疾病時(shí)氨不能被清除而導(dǎo)致血氨的升高，所以其測(cè)定主要應(yīng)用于肝昏迷等的檢測(cè)和處理[3]。另外，血氨測(cè)定對(duì)兒科診斷氏綜合癥非常有用，該征有嚴(yán)重低血糖、大塊肝壞死和急性肝衰竭并伴有肝脂肪變性，在肝酶譜增高前即可見到血氨的升高[4]，對(duì)診斷某些先天性代謝的紊亂如鳥氨酸循環(huán)的氨基酸代謝缺陷（高血氨）也很重要，它提供了一個(gè)準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果，對(duì)臨床診斷和進(jìn)一步明確病因有重大意義。

因?yàn)檠邪焙糠浅Ｉ?，在?biāo)準(zhǔn)狀況下1L水能溶解1176L氨，所以血氨的檢測(cè)對(duì)抗凝劑和環(huán)境有著嚴(yán)格的要求。

本次實(shí)驗(yàn)中肝素抗凝組測(cè)定結(jié)果和EDTA抗凝組測(cè)定結(jié)果相比較低，一個(gè)重要原因是肝素是一種含硫酸基團(tuán)的黏多糖，分子量約為1.5萬(wàn)，屬于一種陰離子多聚電解質(zhì)，和陽(yáng)離子有不同的親和力。其抗凝的機(jī)制是和抗凝酶Ⅱ一起，在低濃度的情況下能夠抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之間的作用，并且能夠使抗凝血酶Ⅲ滅活絲氨酸蛋白酶的作用加強(qiáng)，進(jìn)而阻止凝血酶的形成。另外，它還有抑制因子x和抑制凝血酶的自我催化的作用，因此對(duì)測(cè)定結(jié)果一般無(wú)影響[5]。臨床常用肝素鋰，雖其價(jià)格較貴，但抗凝效果較好。而EDTA的作用機(jī)制是通過(guò)與水相中的鈣離子形成穩(wěn)定的螯合物而阻止血液凝固。通過(guò)不同的抗凝劑來(lái)獲得血漿標(biāo)本，肝素鋰作為重要的抗凝劑在國(guó)外被廣泛地應(yīng)用，而再國(guó)內(nèi)多使用肝素鈉抗凝劑和EDTA-K2抗凝劑，與國(guó)外使用的有所不同[6]。

有研究表明，在20℃時(shí)，血氨濃度每小時(shí)約增加5.2 μmol/L[7]，如果血氨濃度在測(cè)定前已經(jīng)發(fā)生變化，則易導(dǎo)致誤診、漏診。另外，標(biāo)本放置時(shí)間越長(zhǎng)，其血氨濃度越高。因此，血氨檢測(cè)中標(biāo)本的前處理至關(guān)重要。標(biāo)本放置時(shí)間越長(zhǎng)或不及時(shí)分離血漿或血清易造成血氨結(jié)果的升高。同時(shí)，有文獻(xiàn)顯示[8-9]，某些藥物和患者的自身狀況也會(huì)改變體內(nèi)氨的濃度。血氨測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性在很大程度上取決于標(biāo)本的收集和儲(chǔ)存，也因此常常造成測(cè)定的結(jié)果出現(xiàn)變動(dòng)及在參考值上難以統(tǒng)一[10-11]。所以，在分析測(cè)試檢驗(yàn)的標(biāo)本之前需要進(jìn)行質(zhì)量控制，同時(shí)也希望臨床醫(yī)護(hù)人員引起重視，共同做好質(zhì)量控制[12]。

由本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，三組2種方法測(cè)得的數(shù)值比較，EDTA抗凝組結(jié)果普遍高于肝素抗凝組，且變化幅度也大小不一，數(shù)據(jù)變化亦不穩(wěn)定。因此，為了保證血氨檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，減少患者的誤診和漏診，血氨的標(biāo)本很有必要使用能抑制其分解的抗凝劑，特別是那些標(biāo)本量大而不能及時(shí)處理和檢測(cè)時(shí)更應(yīng)該注意，肝素抗凝穩(wěn)定性高，對(duì)測(cè)定結(jié)果影響不大，是血氨測(cè)定的首選抗凝劑。

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編輯/肖慧