骨橋蛋白和E-鈣粘素與宮頸癌放療抵抗的相關(guān)性*

錢(qián)玉潔，黃昕瓊，申良方

（中南大學(xué)湘雅醫(yī)院 腫瘤科，湖南 長(zhǎng)沙410008）

宮頸癌是世界范圍內(nèi)女性第三常見(jiàn)的惡性腫瘤[1]，放射治療在宮頸癌的治療中占有重要地位，宮頸癌各期均可行放射治療，包括根治性放療和姑息性放療[2]。然而，放射治療中存在放療抵抗是治療失敗的原因之一。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）是哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育過(guò)程中的正常生理現(xiàn)象，但是在成熟組織中發(fā)生不恰當(dāng)?shù)腅MT則與腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。目前的研究表明腫瘤細(xì)胞的EMT過(guò)程與腫瘤放療抵抗也有相關(guān)性。早期研究表明丟失E-鈣粘素（E-cadherin）表達(dá)是EMT的顯著特點(diǎn)[3]，近來(lái)新證據(jù)表明骨橋蛋白（Osteopontin，OPN）可能參與了EMT過(guò)程[4]。目前，尚無(wú)研究表明與EMT相關(guān)的E-cadherin和Osteopontin蛋白在局部進(jìn)展期宮頸鱗癌（locally advanced cervical squamous cell carcinoma，LACSCC）中的表達(dá)是否與放療敏感性相關(guān)。

1 資料與方法

1.1 臨床病例及樣本資料

本回顧性隊(duì)列研究共入組132名患者，所有患者均在2005年1月-2012年3月于中南大學(xué)湘雅醫(yī)院腫瘤放射治療科和湖南省腫瘤醫(yī)院接受放射治療。入選標(biāo)準(zhǔn)：①病理學(xué)證實(shí)為宮頸鱗癌；②診斷時(shí)沒(méi)有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移證據(jù)（FIGO分期為IB-IVA）；③組織切塊可用于本研究；④放射治療前未接受其他抗腫瘤治療措施且放療后未實(shí)施手術(shù)者。本研究經(jīng)過(guò)倫理研究委員會(huì)批準(zhǔn)。隨訪(fǎng)時(shí)間至2012年5月，中位隨訪(fǎng)時(shí)間為45.0（2.0～85.5）個(gè)月。中位無(wú)進(jìn)展生存期（progression free survival，PFS）為43.5（0.0～85.5）個(gè)月。中位年齡為51（28～80）歲。132例病例分為放療敏感組（n=85）和放療抵抗組（n=47）。放療敏感組指初始治療后至少3年內(nèi)無(wú)局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，即PFS≥36個(gè)月。放療抵抗組指初始治療后3年內(nèi)出現(xiàn)放療未控制，局部復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，即PFS<36個(gè)月[5]。因此，本研究將放療抵抗組分為3個(gè)亞組：放療未控制亞組，局部復(fù)發(fā)亞組和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移亞組。放療未控制亞組指腫瘤從未消失直至患者死亡。局部復(fù)發(fā)亞組指初始治療后3年內(nèi)出現(xiàn)局部復(fù)發(fā)。遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移亞組指初始治療后3年內(nèi)出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。PFS定義為治療結(jié)束至第一次證實(shí)有局部復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的時(shí)期。如在初始放療后診斷為放療未控制、局部復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移必須有臨床檢查，病理活檢或影像學(xué)檢查等證據(jù)。每個(gè)宮頸腫瘤大小評(píng)估均由臨床檢查來(lái)直接測(cè)量，而不采用影像學(xué)手段間接測(cè)量。在本研究中，放療未控制亞組9例，局部復(fù)發(fā)亞組17例，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移亞組22例。其中1例在放療期間出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，且直至患者死亡腫塊從未消失，筆者認(rèn)為這1例患者既屬于放療未控制亞組也屬于遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移亞組。另外有3例患者在放療后出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，但該3例患者PFS大于36個(gè)月。所以，本研究將這3例患者歸為放療敏感組。

所有患者均接受放射腫瘤醫(yī)師制定的外放射治療和高劑量率的腔內(nèi)放療。外照射開(kāi)始后的3～4周開(kāi)始腔內(nèi)放療。A點(diǎn)中位總劑量為90（66～102）Gy。外照射在A點(diǎn)的中位計(jì)量為46（30～52）Gy。腔內(nèi)放療在A點(diǎn)的中位計(jì)量為42（20～54）Gy。其中部分患者同時(shí)接受以鉑類(lèi)為基礎(chǔ)的化療。但化療藥物并不統(tǒng)一，甚至鉑類(lèi)藥物也不統(tǒng)一，如順鉑、卡鉑和奧沙利鉑等。這些差異增加了統(tǒng)計(jì)分析難度。

1.2 免疫組織化學(xué)檢測(cè)

用免疫組化的方法檢測(cè)Osteopontin與E-cadherin，將4μm的組織切片在二甲苯溶液中脫蠟，0.01M檸檬酸緩沖液（pH 6.0）微波處理（Osteopontin孵育10min，E-cadherin孵育15min）。冷卻30min并在磷酸鹽緩沖液中浸泡后，用3%過(guò)氧化氫孵育30min以消除內(nèi)源性過(guò)氧物酶活性，接下來(lái)在10%常規(guī)山羊血清（磷酸鹽緩沖液稀釋?zhuān)┲蟹跤?0min，滴加1∶200比例稀釋的抗Osteopontin（Santa Cruz Biotechnology Inc.，Dallas，TX）抗體和1∶200比例稀釋的抗E-cadherin（Cell Signaling Technology Inc.，Beverly，MA）抗體，4℃過(guò)夜。使用ChemMate試劑盒（Dako，Glostrup，Denmark）和3，3-二氨基聯(lián)苯胺（DAB）顯色試劑盒進(jìn)行染色。為陰性對(duì)照，使用非免疫性的同型抗體代替一級(jí)抗體。

1.3 染色評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

由兩名不知曉臨床特征及預(yù)后的病理科醫(yī)生對(duì)所有樣本進(jìn)行雙盲法閱片。首先低倍鏡（×40）下觀察全片Osteopontin和E-cadherin表達(dá)情況，然后高倍視野（×400）下觀察。采用免疫反應(yīng)評(píng)分（immunoreactivity score，IRS）系統(tǒng)[6]。根據(jù)染色細(xì)胞比例：0分為無(wú)染色，1分為陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≤1/3，2分為陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)>1/3且≤2/3，3分為陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)>2/3；根據(jù)染色強(qiáng)度：0分為陰性，1分為弱陽(yáng)性，2分為陽(yáng)性，3分為強(qiáng)陽(yáng)性。兩項(xiàng)得分之和作為免疫反應(yīng)得分（0～6）。最終得分為0～1分視為低表達(dá)，2～6分視為高表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

Osteopontin和E-cadherin表達(dá)與宮頸鱗癌臨床病理因素之間的分析，采用卡方檢驗(yàn)和Fisher's精確檢驗(yàn)。放療劑量差異采用t檢驗(yàn)分析。生存分析中截尾值包括隨訪(fǎng)截止及因其他原因而非宮頸鱗癌死亡的患者。采用Kaplan-Meier計(jì)算生存曲線(xiàn)，組間差異采用log-rank檢驗(yàn)。根據(jù)Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型進(jìn)行單因素和多因素分析?；貧w模型包括僅表達(dá)Osteopontin（高表達(dá)與低表達(dá)），僅表達(dá)E-cadherin（高表達(dá)與低表達(dá)），高表達(dá)Osteopontin同時(shí)低表達(dá)E-cadherin（是與否），年齡（≥50歲與<50歲），F(xiàn)IGO分期（Ⅲ+ⅣavsⅠb+Ⅱ），組織病理學(xué)分級(jí)（中分化+低分化與高分化），腫瘤大?。?4 cm vs≤4 cm）。所有統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，P≤0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 132例病例的臨床及組織病理學(xué)特征

患者的臨床及組織病理學(xué)特征見(jiàn)表1。共收集132名LACSCC患者（放療抵抗組47人，放療敏感組85人）。其中<50歲49人，≥50歲83人。FIGO分期為Ⅰb+Ⅱ及Ⅲ+Ⅳa的患者分別為70（6+64）人、62（56+6）人。按照WHO病理分級(jí)，高分化、中分化和低分化的人數(shù)分別為10、114和8。腫塊最大徑≤4 cm的人數(shù)為79人，>4 cm的人數(shù)為53人。放療抵抗組與放療敏感組病例之間的腫塊大小、FIGO分期和組織病理學(xué)分級(jí)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P值分別為0.000、0.004和0.014。兩組之間患者年齡、聯(lián)合化療（以鉑類(lèi)為基礎(chǔ)）、A點(diǎn)總劑量、外照射A點(diǎn)計(jì)量和腔內(nèi)照射A點(diǎn)劑量差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 Osteopontin與E-cadherin的表達(dá)與臨床病理學(xué)參數(shù)的關(guān)系

Osteopontin位于宮頸癌細(xì)胞胞膜和胞質(zhì)，其在放療抵抗組的著色較放療敏感組明顯（圖1A和1B）。132例宮頸癌患者中，Osteopontin低表達(dá)者65例，占49.2%（65/132），高表達(dá)67例，占50.8%（67/132）。分析數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)Osteopontin的表達(dá)與FIGO分期和腫瘤大小顯著相關(guān)（P值分別為0.001和0.004），而與患者年齡和病理分級(jí)不相關(guān)（P值分別為0.963和0.203）。見(jiàn)表2。

E-cadherin位于宮頸癌細(xì)胞膜，其在放療敏感組的著色較放療抵抗組明顯（圖1C和1D）。132例宮頸癌患者中，E-cadherin低表達(dá)者83例，占62.9%（83/132），高表達(dá)者49例，占37.1%（49/132）。分析數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)E-cadherin的表達(dá)與病理分級(jí)相關(guān)（P=0.039）。而與患者年齡、FIGO分期和腫瘤大小無(wú)顯著相關(guān)性（P值分別為0.234，0.070和0.626）。

132例患者中，OPN高表達(dá)且E-cadherin低表達(dá)者為37.9%（50/132），其他表達(dá)組合占62.1%和（82/132）。見(jiàn)表2。

分析發(fā)現(xiàn)，Osteopontin高表達(dá)且E-cadherin低表達(dá)與FIGO分期（P=0.000）和腫瘤大小（P=0.030）密切相關(guān)。但與患者年齡（P=0.342）和病理分級(jí)（P=0.089）不相關(guān)。

表1 放射敏感性與臨床病理學(xué)特征的關(guān)系

表2 宮頸癌組織中Osteopontin與E-cadherin表達(dá)與臨床病理學(xué)特征的關(guān)系

2.3 Osteopontin表達(dá)與E-cadherin表達(dá)之間的關(guān)系

本研究共有132例合格標(biāo)本為Osteopontin與E-cadherin免疫染色評(píng)估。兩種標(biāo)記物均按照免疫組織化學(xué)染色程度分為低、高兩種類(lèi)型，詳見(jiàn)表3。在Osteopontin高表達(dá)的67例病例中，32.8%（22/67）的病例顯示E-cadherin高表達(dá)。與此相反的是，Osteopontin低表達(dá)的65例病例中，41.5%（27/65）的病例顯示E-cadherin高表達(dá)。Osteopontin的表達(dá)與E-cadherin的表達(dá)無(wú)相關(guān)性（r=-0.09，P=0.304）。見(jiàn)表3。

表3 OPN與E-cadherin的表達(dá)關(guān)系

2.4 Osteopontin表達(dá)與E-cadherin表達(dá)對(duì)放療的反應(yīng)

132例LACSCC標(biāo)本Osteopontin的表達(dá)情況總結(jié)見(jiàn)表4。47例放療抵抗組中，6例為Osteopontin低表達(dá)，占12.8%（6/47），41例為Osteopontin高表達(dá)，占87.2%（41/47）。85例放療敏感組中，59例為Osteopontin低表達(dá)，占69.4%（59/85），26例為Osteopontin高表達(dá)，占30.6%（26/85）。Osteopontin的高表達(dá)率在放療抵抗組與放療敏感組之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.000）。根據(jù)患者的臨床資料放療抵抗組分為3個(gè)亞組：放療未控制亞組，局部復(fù)發(fā)亞組和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移亞組。Osteopontin的高表達(dá)率在這3個(gè) 亞 組 中 的 比 例 分 別 為：88.9%（8/9），88.2%（15/17）和86.4%（19/22）。同樣的，Osteopontin在這3個(gè)放療抵抗亞組中的高表達(dá)與放療敏感組之間的差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（放療未控制組與放療敏感組，P=0.001；局部復(fù)發(fā)亞組與放療敏感組，P=0.000；遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移亞組與放療敏感組，P=0.000）。

132例宮頸鱗癌標(biāo)本E-cadherin的表達(dá)情況總結(jié)見(jiàn)表4。47例放療抵抗組中，E-cadherin低表達(dá)有34例，占72.3%（34/47），E-cadherin高表達(dá)有13例，占27.7%（13/47）。85例放療敏感組中，49例為E-cadherin低 表 達(dá)，占57.6%（49/85），36例 為E-cadherin高表達(dá)，占42.4%（36/85）。E-cadherin的低表達(dá)率在放療抵抗組與放療敏感組之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.094）。E-cadherin的低表達(dá)率在放療未控制亞組，局部復(fù)發(fā)亞組，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移亞組的比例分別為88.9%（8/9）、76.5%（13/17）和77.3%（17/22）。分析3個(gè)放療抵抗亞組與放療敏感組中E-cadherin的低表達(dá)發(fā)現(xiàn)，E-cadherin低表達(dá)率在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移亞組與放療敏感組之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.049），而放療未控制亞組及局部復(fù)發(fā)亞組與放療敏感組之間的E-cadherin表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P值分別為0.084和0.147）。

132例宮頸鱗癌標(biāo)本Osteopontin與E-cadherin聯(lián)合表達(dá)情況總結(jié)見(jiàn)表4。表達(dá)Osteopontin且低表達(dá)E-cadherin的病例在放療抵抗組中占72.3%（34/47），在放療敏感組中占18.8%（16/85）。比較放療抵抗組與放療敏感組之間Osteopontin高表達(dá)且E-cadherin低表達(dá)的情況，發(fā)現(xiàn)兩組之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.000）。在放療抵抗亞組中分析O steopontin高表達(dá)且E-cadherin低表達(dá)分別為：放療未控制亞組88.9%（8/9），局部復(fù)發(fā)亞組70.6%（12/17），遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移亞組68.2%（15/22）。3個(gè)亞組的Osteopontin高表達(dá)且E-cadherin低表達(dá)與放療敏感組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（放療未控制亞組與放療敏感組，P=0.000；局部復(fù)發(fā)亞組與放療敏感組，P=0.000；遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移亞組與放療敏感組，P=0.000）。

2.5 Osteopontin表達(dá)和E-cadherin表達(dá)與生存的關(guān)系

將患者根據(jù)腫瘤Osteopontin表達(dá)情況進(jìn)行分層，Osteopontin低表達(dá)組（n=65）與高表達(dá)組（n=67）的5年無(wú)進(jìn)展生存率分別為88.1%和44.1%。Kaplan-Meier生存分析（log-rank檢驗(yàn)）發(fā)現(xiàn)兩組之間生存差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.000，圖2A）。

同樣將患者根據(jù)腫瘤E-cadherin的表達(dá)情況分層，E-cadherin低表達(dá)組（n=83）與高表達(dá)組（n=49）的5年無(wú)進(jìn)展生存率分別為60.2%和78.3%。Kaplan-Meier生存分析（log-rank檢驗(yàn)）發(fā)現(xiàn)兩組之間生存差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.097，圖2B）。

表4 宮頸癌組織中osteopontin與E-cadherin表達(dá)與放射敏感性的關(guān)系

圖1 Osteopontin與E-cadherin在放療抵抗組和放療敏感組中典型的染色圖像（×400）

如果將患者根據(jù)腫瘤高表達(dá)Osteopontin且低表達(dá)E-cadherin分層，那么高表達(dá)Osteopontin且低表達(dá)E-cadherin病例（n=50）與其他表型病例（n=82）的5年無(wú)進(jìn)展生存率分別為38.1%和81.8%。Kaplan-Meier生存分析（log-rank檢驗(yàn)）發(fā)現(xiàn)高表達(dá)Osteopontin同時(shí)低表達(dá)E-cadherin的患者預(yù)后顯著不良（P=0.000，圖2C）。對(duì)于所有入組的132例病例，5年無(wú)進(jìn)展生存率為66.8%（圖2D）。

單因素分析發(fā)現(xiàn)LACSCC患者的PFS的預(yù)測(cè)因素包括Osteopontin表達(dá)[風(fēng)險(xiǎn)比（95%CI），6.725（3.246，13.936）；P=0.000]，Osteopontin高表達(dá)且Ecadherin低表達(dá)[風(fēng)險(xiǎn)比（95%CI），5.814（3.144，10.752）；P=0.000]，F(xiàn)IGO分期 [風(fēng)險(xiǎn)比（95%CI），2.610（1.453，4.689）；P=0.001]，及腫瘤大小[風(fēng)險(xiǎn)比（95%CI），3.366（1.885，6.012）；P=0.000]。見(jiàn)表5。

多因素Cox回歸分析發(fā)現(xiàn)LACSCC患者的PFS的預(yù)測(cè)因素包括Osteopontin表達(dá)[風(fēng)險(xiǎn)比（95%CI），2.847（1.048，7.730）；P=0.040]，Osteopontin高表達(dá)且E-cadherin低 表 達(dá) [風(fēng) 險(xiǎn) 比（95%CI），2.571（1.121，5.894）；P=0.026]，及腫瘤大小[風(fēng)險(xiǎn)比（95%CI），2.635（1.462，4.750）；P=0.001]。見(jiàn)表5。

表5 宮頸癌無(wú)進(jìn)展生存期的單因素COX回歸分析

圖2 LACSCC K-M生存曲線(xiàn)

3 討論

本研究顯示E-cadherin的表達(dá)與病理分級(jí)相關(guān)，而與本試驗(yàn)涉及的其他臨床病理學(xué)因素（年齡、FIGO分期和腫瘤大?。┎幌嚓P(guān)。在YONG等[7]的宮頸癌研究中，E-cadherin與病理分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)和與臨床分期不相關(guān)。同時(shí)，YONG等人的研究表明E-cadherin的低表達(dá)提示預(yù)后不良，但是，本數(shù)據(jù)顯示，E-cadherin低表達(dá)和E-cadherin高表達(dá)兩組間的5年無(wú)進(jìn)展生存率并無(wú)差異，而且，E-cadherin不是宮頸鱗癌的預(yù)后因素。因此，筆者考慮E-cadherin是否在放療抵抗中發(fā)揮作用，進(jìn)而影響預(yù)后。

本研究首次做了E-cadherin表達(dá)與放療抵抗相關(guān)性的研究，發(fā)現(xiàn)E-cadherin在放療抵抗組和放療敏感組的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但在3個(gè)放療抵抗亞組中分析E-cadherin的表達(dá)情況時(shí)，發(fā)現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移亞組和放療敏感組間E-cadherin的低表達(dá)率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。已有研究證實(shí)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移灶的形成不止與腫瘤細(xì)胞發(fā)生EMT增加流動(dòng)性相關(guān)，更與其逆過(guò)程間質(zhì)上皮轉(zhuǎn)化（mesenchymal-epithelial transition，MET）過(guò)程相關(guān)[3]。因此，筆者推斷，E-cadherin對(duì)放射治療的影響主要是因?yàn)槟[瘤細(xì)胞發(fā)生了EMT，發(fā)生了EMT的腫瘤細(xì)胞遷徙到其他組織，逃離輻射作用，再經(jīng)過(guò)MET形成轉(zhuǎn)移灶，造成最終的放療抵抗。而放射治療區(qū)域內(nèi)的放療失敗，即放療未控制和局部復(fù)發(fā)與腫瘤細(xì)胞E-cadherin表達(dá)無(wú)關(guān)。所以基于本試驗(yàn)，筆者認(rèn)為抗腫瘤治療前EMT的水平與放射治療區(qū)域內(nèi)發(fā)生的放療抵抗不相關(guān)，而與放療抵抗中遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移亞組有關(guān)，即治療前EMT高水平提示有更大的可能在放療后3年內(nèi)出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，表現(xiàn)為放療抵抗。

本研究數(shù)據(jù)表明，Osteopontin的表達(dá)與FIGO分期及腫瘤大小相關(guān)，而與患者年齡和病理分級(jí)不相關(guān)。在胃癌[8]中的研究也顯示Osteopontin表達(dá)與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)。目前O steopontin在宮頸癌中的預(yù)后提示意義仍有爭(zhēng)議。HAN[9]報(bào)道Osteopontin在宮頸癌中高表達(dá)與總生存（overall survival，OS；P=0.002）及無(wú)疾病生存（disease-free survival，DFS；P=0.033）負(fù)相關(guān)。JAE[10]的研究則認(rèn)為Osteopontin在宮頸癌中的表達(dá)與生存不相關(guān)。本研究結(jié)果顯示Osteopontin高表達(dá)患者的5年無(wú)進(jìn)展生存率低于Osteopontin低表達(dá)患者。并且，Osteopontin高表達(dá)是LACSCC患者PFS的獨(dú)立不良預(yù)后因子。此外，本研究顯示Osteopontin表達(dá)與放療反應(yīng)呈負(fù)相關(guān)，且Osteopontin在3個(gè)放療抵抗亞組分別與放療敏感組間的表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明治療前組織Osteopontin高表達(dá)提示放療抵抗。關(guān)于其具體的機(jī)制，目前尚不清楚。由于O steopontin被認(rèn)為是組織乏氧的內(nèi)源性標(biāo)記物[11]及腫瘤放療后再生的指標(biāo)[12]，筆者推測(cè)，宮頸癌組織高表達(dá)Osteopontin與放療抵抗有關(guān)，部分原因是瘤體乏氧，進(jìn)而影響放療敏感性，以及放療相關(guān)的腫瘤再生。

有研究表明Osteopontin在EMT的起始過(guò)程發(fā)揮作用[4]，E-cadherin作為EMT發(fā)生的標(biāo)志性表型變化因子，目前缺乏其與Osteopontin表達(dá)的關(guān)系及兩者聯(lián)合異常表達(dá)與放療抵抗之間的關(guān)系的研究，本研究則填補(bǔ)了這個(gè)空白。第一，本研究數(shù)據(jù)中，O steopontin的表達(dá)與E-cadherin的表達(dá)并無(wú)相關(guān)性（r=-0.090，P=0.304）；第二，筆者分析了Osteopontin與E-cadherin聯(lián)合表達(dá)與放療抵抗的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)O steopontin高表達(dá)且E-cadherin低表達(dá)提示放療抵抗，并且提示意義較單獨(dú)Osteopontin高表達(dá)更顯著。這提示聯(lián)合檢測(cè)腫瘤組織Osteopontin和E-cadherin的表達(dá)，有助于評(píng)估放療敏感性；第三，高表達(dá)O steopontin且低表達(dá)E-cadherin的5年無(wú)進(jìn)展生存率低于其他表型。

到目前為止，EMT與放療抵抗之間的關(guān)系尚不明確。首先，有研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞發(fā)生EMT后不僅表達(dá)間質(zhì)表型特征獲得流動(dòng)性，還表達(dá)某些干細(xì)胞表型獲得自我更新能力等干性[13]。因此，筆者認(rèn)為，治療失敗與腫瘤組織中存在通過(guò)EMT獲得干細(xì)胞表型的腫瘤細(xì)胞有關(guān)。其次，Slug、Snail等上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子（epithelial mesenchymal transition-Transcription factors，EMT-TFs）不僅使腫瘤細(xì)胞更具遷徙性和侵入性，還賦予腫瘤細(xì)胞輻射抵抗性。Slug突變或Slug敲除鼠表現(xiàn)出放療敏感。因此，認(rèn)為Slug可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生輻射抵抗[14-16]。研究表明Slug通過(guò)活化SCF/kit信號(hào)通路[14]，調(diào)節(jié)DNA損傷修復(fù)[15]，抑制輻射后凋亡[16]，使細(xì)胞接受致死量輻射后仍可存活。最后，由于腫瘤細(xì)胞EMT過(guò)程是可逆性的[3]，即發(fā)生了EMT的腫瘤細(xì)胞遷徙到遠(yuǎn)處器官或組織后，可以通過(guò)MET重獲增殖能力，發(fā)展成為轉(zhuǎn)移灶。因此，這種動(dòng)態(tài)過(guò)程既增加了研究EMT與放療抵抗相關(guān)性的困難，同時(shí)提示腫瘤細(xì)胞發(fā)生EMT的可逆性可能與放療抵抗有關(guān)。

綜上所述，本研究研究顯示局部進(jìn)展期宮頸鱗癌高表達(dá)Osteopontin、高表達(dá)Osteopontin且低表達(dá)E-cadherin提示放療抵抗及預(yù)后不良，并且，高表達(dá)Osteopontin且低表達(dá)E-cadherin更具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。EMT與腫瘤放療抵抗的關(guān)系有待進(jìn)一步的研究。

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