上、下坡跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)對(duì)去卵巢小鼠破骨細(xì)胞分化NF-κB信號(hào)通路的影響

馬濤 李世昌

1 齊魯師范學(xué)院（濟(jì)南250200）

2 華東師范大學(xué)

骨組織的正常生長(zhǎng)及更新有賴于骨吸收與骨形成的動(dòng)態(tài)平衡[1]。由破骨細(xì)胞作用的骨吸收是骨重建的起點(diǎn)，它可以清除損傷或沒(méi)有承載功能的骨組織，繼而啟動(dòng)由成骨細(xì)胞作用的骨形成過(guò)程， 使骨組織始終處在不斷動(dòng)態(tài)更新的過(guò)程中[2]。 我們前期的研究[3]已經(jīng)研究了下坡跑運(yùn)動(dòng)對(duì)去卵巢小鼠成骨細(xì)胞分化和骨形成的影響， 發(fā)現(xiàn)下坡跑運(yùn)動(dòng)能夠促進(jìn)去卵巢小鼠成骨細(xì)胞的分化和骨形成作用。然而，運(yùn)動(dòng)對(duì)去卵巢小鼠破骨細(xì)胞分化的影響及分子機(jī)制還少見報(bào)道。

在某些狀態(tài)下， 破骨細(xì)胞數(shù)量異常及功能紊亂會(huì)發(fā)生骨量過(guò)分減少的疾病， 如骨吸收功能亢進(jìn)的骨質(zhì)疏松癥等[4]。婦女絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥就是由于絕經(jīng)后雌激素迅速下降引起破骨細(xì)胞大量生成及活化造成的[5]?？咕剖崴嵝粤姿崦福╰artrate-resistant acid phosphatase，TRAP）屬于溶酶體酶，具有5a和5b兩個(gè)亞型，后者由破骨細(xì)胞特異性釋放[6]，因此，骨組織中TRAP的分泌及表達(dá)量可以間接反映破骨細(xì)胞生成及活化情況。 在破骨細(xì)胞的分化和活化過(guò)程中，OPG-RANKL-RANK系統(tǒng)起著至關(guān)重要的作用，目前發(fā)現(xiàn)破骨細(xì)胞內(nèi)與OPGRANKL-RANK相關(guān)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路主要有NF-κB信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路、Ca2+/CN/ NFAT信號(hào)通路、PI3K/Akt信號(hào)通路和蛋白激酶C信號(hào)通路等。 其中，NF-κB信號(hào)通路是破骨細(xì)胞分化和活化最重要的一條通路[7，8]。

已有研究表明[2]，適度運(yùn)動(dòng)可有效降低婦女絕經(jīng)后的骨質(zhì)流失， 從而有效防止婦女絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生。 運(yùn)動(dòng)時(shí)骨代謝調(diào)節(jié)激素的變化以及骨組織所受的機(jī)械應(yīng)力均可能對(duì)骨代謝產(chǎn)生影響。 本研究探討運(yùn)動(dòng)對(duì)去卵巢小鼠破骨細(xì)胞分化的影響， 以及NF-κB信號(hào)通路在介導(dǎo)運(yùn)動(dòng)對(duì)破骨細(xì)胞分化影響過(guò)程中的作用， 并進(jìn)一步深入研究運(yùn)動(dòng)影響骨組織的細(xì)胞及分子機(jī)制； 本研究還探索上坡跑和下坡跑兩種不同方式的運(yùn)動(dòng)對(duì)骨組織影響的差異， 進(jìn)一步豐富防治骨質(zhì)疏松的運(yùn)動(dòng)方式。

1 材料與方法

1.1 主要試劑與儀器

主要試劑：Citrate Solution （Sigma）、Acid Phosphatase、Leukocyte （TRAP） Kit（Sigma）、BCA蛋白定量試劑盒（碧云天）、胰蛋白酶（碧云天）、紅細(xì)胞裂解液（碧云天）、溴酚藍(lán)（上海生工）、TEMED（明睿生物）、Glycine（明睿生物）、β-actin一抗（兔抗鼠，Santa Cruz）、各目的蛋白一抗（兔抗鼠，Santa Cruz）、Odyssey熒光二抗（山羊抗兔，Odessey）。

主要儀器：包埋機(jī)（Leica）、切片機(jī)（Leica）、撈片機(jī)（Leica）、烤片機(jī)（Leica）、Leica DM4000電子顯微鏡（Leica）、圖象分析軟件Image-Pro Plus 5.0、UV1102分光光度計(jì)（上海天美）、Odyssey紅外熒光掃描成像系統(tǒng)（eBioscience）。

1.2 動(dòng)物分組及訓(xùn)練方案

32只小鼠在本實(shí)驗(yàn)中心動(dòng)物房適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，然后隨機(jī)分為4組，即假手術(shù)安靜組（S組，n = 8）、去卵巢安靜組（O組，n=8）、去卵巢上坡跑組（U組，n = 8）、去卵巢下坡跑組（D組，n=8）。動(dòng)物以1%戊巴比妥鈉（0.1 g/kg）經(jīng)腹腔麻醉后， 剪除長(zhǎng)毛， 分別在脊柱兩側(cè)切開背肌1 cm切口，假手術(shù)安靜組小鼠行去卵巢假手術(shù)，僅去除卵巢周圍少量脂肪組織，其余3組小鼠均摘除卵巢，用可吸收的羊腸線縫合傷口，在傷口外涂少量紅霉素軟膏。

假手術(shù)安靜組和去卵巢安靜組在籠中正常飼養(yǎng)，不進(jìn)行任何訓(xùn)練， 去卵巢上坡跑組和去卵巢下坡跑組于去卵巢手術(shù)后7天開始訓(xùn)練，訓(xùn)練方案與本實(shí)驗(yàn)室前期小鼠上、下坡跑臺(tái)訓(xùn)練方案一致[9，10]（表1）：

1.3 取材

于運(yùn)動(dòng)組小鼠最后一次訓(xùn)練結(jié)束24 h后，摘眼球取血處死小鼠。 取其左側(cè)股骨，投于4%多聚甲醛溶液中固定，待做石蠟切片，進(jìn)行骨組織TRAP染色。 取其兩側(cè)肱骨、脛骨和右側(cè)股骨，放入PBS中，以備對(duì)骨髓細(xì)胞進(jìn)行破骨細(xì)胞分化誘導(dǎo)培養(yǎng)，待測(cè)破骨細(xì)胞分化過(guò)程中NFκB信號(hào)通路p65、p-p65、IκBα和p-IκBα的蛋白表達(dá)。

1.4 測(cè)試方法

1.4.1 股骨抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色及計(jì)量

脫鈣及包埋：將小鼠左側(cè)股骨在4%PFA溶液中4℃冰箱過(guò)夜，第2天4%PFA換液1次。 24小時(shí)后，將組織投入10%EDTA溶液脫鈣1周。1周后10%EDTA換液1次，繼續(xù)脫鈣1周。雙蒸水清洗后將組織投入PBS，室溫靜置2～3小時(shí)。 梯度酒精脫水，二甲苯透明，浸蠟，包埋。

TRAP染色：5 μm厚度切片，展片，撈片，烤片，二甲苯脫臘，梯度酒精水化，雙蒸水清洗。 配制TRAP染色固定液和染液，加入固定液，室溫固定30 s。雙蒸水清洗后加入染液，37℃水浴中染色4小時(shí)。 用雙蒸水清洗，封片保存。

表1 運(yùn)動(dòng)組小鼠訓(xùn)練方案

拍片及計(jì)量：Leica DM4000電子顯微鏡拍照，用Image-Pro Plus 5.0圖像分析軟件統(tǒng)計(jì)股骨骨骺部位TRAP陽(yáng)性染色區(qū)域的平均光密度值 （average optical density，AOD） 和平均陽(yáng)性染色面積百分比（average positive staining area percentage，APSAP）。

1.4.2 破骨細(xì)胞原代培養(yǎng)及NF-κB信號(hào)通路蛋白檢測(cè)

破骨細(xì)胞原代培養(yǎng)及NF-κB信號(hào)通路蛋白的制備： 骨髓造血干細(xì)胞的搜集方法同本實(shí)驗(yàn)室的前期研究文獻(xiàn)相同[11]，之后將干細(xì)胞接種于6孔板，密度為每孔6×105個(gè)細(xì)胞，加入10 ng/ml的M-CSF培養(yǎng)2天，干細(xì)胞逐漸分化為破骨細(xì)胞前體， 然后加入10 ng/ml 的RANKL 刺激15分鐘，搜集細(xì)胞蛋白。經(jīng)0.05%胰蛋白酶消化后用預(yù)冷的PBS漂洗3次，加入450 μl裂解液，細(xì)胞刮棒刮出細(xì)胞裂解物， 在超聲細(xì)胞破碎儀中以最大強(qiáng)度超聲4次，每次15～30 s，在每次超聲步驟之間將樣品轉(zhuǎn)置水浴中15 s，加入Laemmli 樣品緩沖液混勻。100 ℃水浴3分鐘，10000 g離心10分鐘，取出上清液，將其移入另一潔凈試管中，將所得的蛋白質(zhì)樣品于-20 ℃存放待測(cè)。

Western blot 測(cè)定破骨細(xì)胞前體NF-κB信號(hào)蛋白表達(dá)： BCA法測(cè)定蛋白總濃度，SDS-PAGE凝膠電泳，轉(zhuǎn)膜，麗春紅染色，晾干后根據(jù)蛋白質(zhì)maker標(biāo)志和目的蛋白的分子量剪膜。 5%的脫脂牛奶封閉后進(jìn)行抗體孵育，一抗和熒光二抗?jié)舛染鶠?∶2000。 Odyssey熒光掃描及測(cè)試，將膜放在odyssey熒光凝膠成像系統(tǒng)掃描、拍照，并用odyssey凝膠圖像處理系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，以待測(cè)蛋白與內(nèi)參蛋白的平均密度之比作為待測(cè)蛋白的相對(duì)表達(dá)水平。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理

各檢測(cè)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用SPSS12.0 軟件進(jìn)行方差分析，以P ＜0.05為差異顯著性標(biāo)準(zhǔn)，以P ＜0.01 為差異非常顯著性標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 股骨骨骺TRAP 染色計(jì)量

成熟的破骨細(xì)胞分泌破骨細(xì)胞特異性酶——抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP），經(jīng)TRAP染色后破骨細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)呈紅色陽(yáng)性染色。從圖1和圖2可以看出，呈紅色陽(yáng)性染色的破骨細(xì)胞多分布于骨骺、 骺板以及干骺端的骨吸收陷窩內(nèi)，沿骨吸收陷窩邊緣排列，以骺板部位的破骨細(xì)胞最為密集， 另外在皮質(zhì)骨的外表面也分布有大量紅色陽(yáng)性染色的破骨細(xì)胞。

由表2可知， 去卵巢安靜組股骨TRAP陽(yáng)性染色區(qū)域的AOD和APSAP均較假手術(shù)安靜組顯著升高（P＜0.01）；與去卵巢安靜組相比，兩運(yùn)動(dòng)組股骨TRAP陽(yáng)性染色區(qū)域的AOD和APSAP均顯著降低（P ＜0.01，P ＜0.05）； 兩運(yùn)動(dòng)組之間相比較， 去卵巢下坡跑組股骨TRAP陽(yáng)性染色區(qū)域的AOD和APSAP均較去卵巢上坡跑組顯著降低（P ＜0.01）。

圖1 股骨TRAP染色整體圖

表2 股骨骨骺TRAP染色計(jì)量

2.2 破骨細(xì)胞前體IκBα和p-IκBα蛋白表達(dá)

如圖3所示：各組小鼠破骨細(xì)胞前體IκBα蛋白相對(duì)表達(dá)量無(wú)顯著性差異， 而p-IκBα蛋白相對(duì)表達(dá)量組間差異顯著。 去卵巢安靜組p-IκBα蛋白相對(duì)表達(dá)量顯著高于假手術(shù)安靜組（P ＜0.01）；兩運(yùn)動(dòng)組p-IκBα蛋白相對(duì)表達(dá)量顯著低于去卵巢安靜組（P ＜0.01）；而兩運(yùn)動(dòng)組相比較， 去卵巢下坡跑組p-IκBα蛋白相對(duì)表達(dá)量顯著低于去卵巢上坡跑組（P ＜0.01）。

圖2 股骨骨骺TRAP 染色圖250×

2.3 破骨細(xì)胞前體p65和p-p65蛋白表達(dá)

如圖4所示： 各組小鼠破骨細(xì)胞前體p65蛋白相對(duì)表達(dá)量無(wú)顯著性差異，而p-p65蛋白相對(duì)表達(dá)量組間差異顯著。去卵巢安靜組p-p65蛋白相對(duì)表達(dá)量顯著高于假手術(shù)安靜組（P ＜0.01）；兩運(yùn)動(dòng)組p-p65蛋白相對(duì)表達(dá)量顯著低于去卵巢安靜組（P ＜0.01）；而兩運(yùn)動(dòng)組相比較，去卵巢下坡跑組p-p65蛋白相對(duì)表達(dá)量顯著低于去卵巢上坡跑組（P ＜0.05）。

3 討論

3.1 上、下坡跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)對(duì)去卵巢小鼠骨組織TRAP的影響

骨重建是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程， 其主要與破骨細(xì)胞及成骨細(xì)胞的代謝過(guò)程有關(guān)， 涉及到破骨細(xì)胞作用的骨吸收和緊隨其后的成骨細(xì)胞作用的骨形成[5]。婦女絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥就是由于絕經(jīng)后雌激素迅速下降引起破骨細(xì)胞大量生成及活化導(dǎo)致的[12]。TRAP屬于溶酶體酶，它包括多種同工酶，主要存在于骨、前列腺、血小板、紅細(xì)胞和脾臟等。 TRAP各種同工酶具有不同的屬性，如骨的同工酶具有抵抗L（+）-酒石酸鹽抑制的作用，而前列腺的同工酶可被有機(jī)酸所抑制。 TRAP屬于酸性磷酸酶的第5類同工酶[13]。 TRAP具有5a和5b兩個(gè)亞型，后者由破骨細(xì)胞特異性釋放[6]。破骨細(xì)胞在骨吸收過(guò)程中特異性釋放TRAP，因此，骨組織中TRAP的分泌及表達(dá)量可以間接反映破骨細(xì)胞生成及活化情況，TRAP是一個(gè)有價(jià)值的骨吸收標(biāo)志物[14]。 血清中的TRAP檢測(cè)比較簡(jiǎn)便，既可以用動(dòng)態(tài)方法測(cè)定其活性（根據(jù)對(duì)酒石酸鹽抵抗的程度）， 也可以應(yīng)用TRAP的抗體直接進(jìn)行免疫測(cè)定。 但是，血液循環(huán)中的TRAP也來(lái)源于其它非骨組織細(xì)胞，如巨噬細(xì)胞等[15]。 雖然有部分資料已表明，血清中的TRAP可用于評(píng)估骨吸收狀態(tài)， 但目前對(duì)TRAP是否可在骨質(zhì)疏松中作為評(píng)價(jià)骨吸收的標(biāo)志物仍未見大量研究。 其主要原因?yàn)檠錞RAP并不具有很強(qiáng)的骨組織特異性，以及標(biāo)本冰凍后不穩(wěn)定；此外，血中的多種酶抑制劑影響了TRAP的敏感性[16]。 本研究采用骨組織TRAP染色方法直接檢測(cè)局部骨組織TRAP的表達(dá)及分布，彌補(bǔ)了血清TRAP檢測(cè)方法對(duì)骨組織特異性不高的缺點(diǎn)， 能夠較準(zhǔn)確地反映骨組織中破骨細(xì)胞特異性標(biāo)志酶TRAP的表達(dá)量，從而間接反映局部骨組織破骨細(xì)胞的生成及活化情況。

圖3 各組小鼠破骨細(xì)胞前體IκBα和p-IκBα蛋白表達(dá)

圖4 各組小鼠破骨細(xì)胞前體p65和p-p65蛋白表達(dá)

本研究結(jié)果顯示： 小鼠去卵巢后骨組織破骨細(xì)胞特異性酶TRAP大量生成，顯示去卵巢手術(shù)可引起小鼠骨組織破骨細(xì)胞的大量分化和活化， 從而使骨吸收作用大大增強(qiáng)，增加骨質(zhì)疏松風(fēng)險(xiǎn)。而跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)可以顯著降低骨組織破骨細(xì)胞特異性酶TRAP生成，這說(shuō)明跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)有效地抑制了去卵巢后小鼠骨組織中破骨細(xì)胞的大量生成及活化，從而有效阻止了骨吸收。該結(jié)果和本實(shí)驗(yàn)室的前期研究結(jié)果相吻合， 本實(shí)驗(yàn)室的前期研究結(jié)果[9]顯示，跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)能夠顯著阻止小鼠去卵巢后骨密度和骨結(jié)構(gòu)出現(xiàn)的退行性變化， 從而有效防止骨質(zhì)疏松的發(fā)生，且體現(xiàn)出運(yùn)動(dòng)方式的差異性，即下坡跑效果優(yōu)于上坡跑。

3.2 上、下坡跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)對(duì)去卵巢小鼠破骨細(xì)胞分化NFκB通路的影響

在破骨細(xì)胞的分化和活化過(guò)程中，OPG-RANKLRANK系統(tǒng)起著至關(guān)重要的作用[17]。RANKL和破骨細(xì)胞前體細(xì)胞膜上的RANK結(jié)合后， 通過(guò)連接蛋白TRAFs（TRAF2、TRAF5、TRAF6，其中主要是TRAF6），激活下游多種信號(hào)分子， 引起一系列信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)反應(yīng)和細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)[18]。 目前發(fā)現(xiàn)破骨細(xì)胞內(nèi)與RANK相關(guān)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路主要有：NF-κB信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路、Ca2+/CN/NFAT信號(hào)通路、PI3K/Akt信號(hào)通路和蛋白激酶C信號(hào)通路等[19]。 其中，NF-κB信號(hào)通路是破骨細(xì)胞分化和活化最重要的一條通路， 研究表明NF-κB1和NFκB2雙突變鼠缺少TRAP陽(yáng)性破骨細(xì)胞[7，8]。 NF-κB屬于NFκB/Rel家族，是一種重要的轉(zhuǎn)錄因子，RANKL的信號(hào)經(jīng)RANK 傳 遞 給TRAF6，TRAF6 通 過(guò)NIK （NF-κB inducible kinase）和IKK（the IκB kinase）活化NF-κB。哺乳動(dòng)物表達(dá)兩類共5個(gè)Rel（NF-κB）蛋白[20]。 第1類蛋白包括RelA（P65）、C- Rel和RelB，這類蛋白作為成熟的產(chǎn)物合成， 不需要進(jìn)一步蛋白酶解。 第2類蛋白包括NF-κB1 和NF-κB2，這類蛋白首先合成大的前體p105和p100，然后經(jīng)過(guò)蛋白水解，最終分別成為成熟的p50和p52 NF-κB蛋白。 在細(xì)胞靜息狀態(tài)時(shí)，RelA或c-Rel和NF-κB組成的二聚體通過(guò)與IκB抑制蛋白結(jié)合而被保留在細(xì)胞質(zhì)中， 最常見的形式為p50-p65-IκBα或p50-p65-IκBβ[21]。 在信號(hào)通路激活時(shí)，IκBα被IκB激酶（IKK）磷酸化，進(jìn)而被泛素降解，從而使NF-κB二聚體與κBα脫離，脫離了κBα的NF-κB二聚體被激活，迅速進(jìn)入細(xì)胞核并與相應(yīng)靶基因的啟動(dòng)子結(jié)合， 通過(guò)啟動(dòng)和調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄來(lái)調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞的分化、 功能和凋亡[22，23]。

在本研究中，與假手術(shù)安靜組相比，去卵巢安靜組小鼠破骨細(xì)胞前體p-p65和p-IκBα蛋白表達(dá)顯著增加，而p65和IκBα蛋白表達(dá)則未見顯著性變化。這說(shuō)明小鼠去卵巢后，由于雌激素迅速減少，通過(guò)RANKL途徑和其他途徑激活了NIK和IKK， 使IκBα磷酸化程度提高，從而激活了破骨細(xì)胞分化的NF-κB信號(hào)通路， 促進(jìn)破骨細(xì)胞分化，造成高轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)疏松。但去卵巢安靜組小鼠破骨細(xì)胞前體p65和IκBα蛋白表達(dá)并未比假手術(shù)安靜組增加， 說(shuō)明雌激素的迅速下降雖不能使NF-κB信號(hào)通路的p65和IκBα蛋白表達(dá)增加，但可以通過(guò)NIK和IKK使上述蛋白發(fā)生磷酸化而激活NF-κB信號(hào)通路。與去卵巢安靜組相比， 兩跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)組小鼠破骨細(xì)胞前體p-p65和p-IκBα蛋白表達(dá)顯著下降，而p65和IκBα蛋白表達(dá)變化無(wú)顯著性差異。 這說(shuō)明，跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)可以通過(guò)抑制破骨細(xì)胞分化的NF-κB信號(hào)通路而影響骨代謝，使破骨細(xì)胞的生成得到有效抑制，從而減緩骨吸收速度。兩跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)組之間相比較， 去卵巢下坡跑組對(duì)破骨細(xì)胞前體p-p65和p-IκBα蛋白表達(dá)的抑制效果更明顯，且兩組具有顯著性差異。 這說(shuō)明這兩種應(yīng)力方式不同的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)，對(duì)骨代謝造成的影響也不同，下坡跑運(yùn)動(dòng)比上坡跑運(yùn)動(dòng)對(duì)抑制破骨細(xì)胞分化的NF-κB信號(hào)通路更有效。

3.3 上、 下坡跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)對(duì)去卵巢小鼠破骨細(xì)胞分化影響結(jié)果的差異性分析

在本研究中，對(duì)上、下坡跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)兩種運(yùn)動(dòng)方式對(duì)去卵巢小鼠破骨細(xì)胞分化的影響進(jìn)行了對(duì)比研究，盡管結(jié)果顯示兩種運(yùn)動(dòng)方式均能對(duì)去卵巢小鼠破骨細(xì)胞的過(guò)度分化起到有效的抑制作用，然而對(duì)比之下，下坡跑運(yùn)動(dòng)效果顯著優(yōu)于上坡跑運(yùn)動(dòng)。 產(chǎn)生這種運(yùn)動(dòng)方式效果差異的原因， 我們認(rèn)為主要是在兩種運(yùn)動(dòng)方式過(guò)程中，小鼠骨組織，特別是下肢骨組織所受的力學(xué)刺激不同。在運(yùn)動(dòng)過(guò)程中，骨組織除受到骨骼肌收縮對(duì)其產(chǎn)生的牽拉、擠壓和剪切等力學(xué)刺激外，來(lái)自于地面的反作用力對(duì)其的機(jī)械應(yīng)力則是最主要應(yīng)力因素， 而下坡跑運(yùn)動(dòng)過(guò)程中小鼠下肢骨所受到的來(lái)自跑臺(tái)的反作用力明顯大于上坡跑過(guò)程中小鼠下肢骨受到的應(yīng)力，在本實(shí)驗(yàn)室前期發(fā)表的論文中已有對(duì)此結(jié)果的相關(guān)討論[9]。

4 總結(jié)

小鼠去卵巢后骨組織破骨細(xì)胞特異性酶TRAP大量生成， 顯示去卵巢手術(shù)可引起小鼠骨組織破骨細(xì)胞大量分化和活化，從而使骨吸收作用大大增強(qiáng)，增加骨質(zhì)疏松風(fēng)險(xiǎn)。

跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)可通過(guò)抑制破骨細(xì)胞分化過(guò)程中p65和IκBα蛋白的磷酸化而有效抑制破骨細(xì)胞分化的NF-κB信號(hào)通路，從而有效抑制骨吸收作用，且下坡跑效果優(yōu)于上坡跑。

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