臨床感染嗜水氣單胞菌的產(chǎn)酶性和耐藥性分析*

扈會(huì)整 李俊海 張曄婷 任偉娟 文杏 王嬋

臨床感染嗜水氣單胞菌的產(chǎn)酶性和耐藥性分析*

扈會(huì)整 李俊海 張曄婷 任偉娟 文杏 王嬋

目的 了解嗜水氣單胞菌的產(chǎn)酶現(xiàn)狀和耐藥性，為臨床治療嗜水氣單胞菌的感染提供合理用藥的依據(jù)。方法 收集2011～2015年，從臨床感染標(biāo)本中分離出嗜水氣單胞菌50株。常規(guī)藥敏試驗(yàn)采用K-B紙片法，超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）依據(jù)2012年CLSI標(biāo)準(zhǔn)雙紙片確證試驗(yàn)，頭孢菌素酶（AMPC）應(yīng)用三維試驗(yàn)改良法。結(jié)果 感染的50株嗜水氣單胞菌，其中產(chǎn)ESBLs 15株（15/50）、產(chǎn)AMPC 10株（10/50），且對(duì)氨芐西林全部耐藥、對(duì)氨芐西林/舒巴坦鈉耐藥率為94%，對(duì)三、四代頭孢菌素耐藥率達(dá)40%，對(duì)其他藥物保持較高的敏感性。結(jié)論 臨床治療嗜水氣單胞菌引起感染時(shí)，應(yīng)慎用頭孢菌素類(lèi)藥物，根據(jù)藥敏結(jié)果和耐藥表型合理選用藥物，為臨床用藥提供依據(jù)。

嗜水氣單胞菌 藥物敏感性試驗(yàn) AmpC酶 超廣譜β-內(nèi)酰胺酶

嗜水氣單胞為水中的長(zhǎng)居菌，可引起人-獸-魚(yú)感染，人類(lèi)感染主要經(jīng)接觸、食用魚(yú)類(lèi)或獸類(lèi)動(dòng)物及飲用污水。該菌主要分泌細(xì)胞溶素（具有溶血、溶細(xì)胞和腸毒素作用的一種多肽）致病，由aer基因編碼[1]，細(xì)胞毒素主要引起敗血癥，以及傷口、眼、關(guān)節(jié)、腹腔內(nèi)及其他感染[2]，與外傷后傷口接觸污染的水有關(guān)，通常發(fā)生在免疫低下的人群和兒童。為此就2011年1月～2015年12月醫(yī)院分離出的50株嗜水氣單胞菌進(jìn)行分析，為臨床醫(yī)生提供參考。

材料與方法

1 材料 2011年1月～2015年12月從本院臨床各種感染患者標(biāo)本中共分離獲得不重復(fù)的50株嗜水氣單胞菌，質(zhì)控菌株：大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853和產(chǎn)AmpC酶陰溝腸桿菌（均購(gòu)于衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心）。

2 儀器與試劑 VITEK-2全自動(dòng)細(xì)菌藥敏鑒定系統(tǒng)及配套試劑（購(gòu)于法國(guó)生物梅里埃公司）。試劑批號(hào)：GN241339240、GN-AST106359210，培養(yǎng)基：哥倫比亞血瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板購(gòu)于鄭州安圖生物科技有限公司。

3 方法 細(xì)菌鑒定使用法國(guó)生物梅里埃VITEK-2全自動(dòng)細(xì)菌分析儀GN和GN-AST卡，根據(jù)CLSI規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，結(jié)果解釋參照2012年CLSI版標(biāo)準(zhǔn)[3]。超廣譜β-內(nèi)酰胺酶采用酶抑制劑增強(qiáng)確證試驗(yàn)，AmpC酶檢測(cè)采用三維試驗(yàn)法[4]。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用Whonet軟件統(tǒng)計(jì)結(jié)果。

結(jié) 果

1 嗜水氣單胞菌的耐藥情況 嗜水氣單胞菌對(duì)氨芐西林全部耐藥、對(duì)氨芐西林/舒巴坦鈉的耐藥率為94%，對(duì)三、四代頭孢菌素耐藥率高達(dá)40%、檢出的嗜水氣單胞菌耐藥情況見(jiàn)表1。

2 嗜水氣單胞菌的產(chǎn)酶結(jié)果 50株嗜水氣單胞菌中產(chǎn)ESBLs 15株、產(chǎn)AmpC 10株，同時(shí)產(chǎn)兩種酶只有1株。

表1 抗菌藥物的耐藥百分率

討 論

嗜水氣單胞菌是革蘭陰性細(xì)菌，作為一種人-魚(yú)-獸共患的條件致病菌，其主要致病物質(zhì)為溶血毒素和細(xì)胞毒素[3，4]，可引起腹瀉和感染。對(duì)該菌的研究主要涉及農(nóng)業(yè)、漁業(yè)和獸類(lèi)[5-7]，對(duì)人的致病性研究很少。

從本研究產(chǎn)酶情況看，嗜水氣單胞菌產(chǎn)酶情況很?chē)?yán)重，產(chǎn)ESBLs占30%，產(chǎn)AmpC占20%，同時(shí)產(chǎn)兩種酶的占2%，其產(chǎn)酶性是耐藥的主要原因。應(yīng)引起臨床醫(yī)師和感染工作者的高度重視。

從本研究統(tǒng)計(jì)的藥敏結(jié)果來(lái)看，本院分離出的嗜水氣單胞菌對(duì)青霉素、氨芐西林全部耐藥，對(duì)一、二代頭孢類(lèi)藥物耐藥率達(dá)90%以上，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[8]，對(duì)三代頭孢類(lèi)藥物耐藥率達(dá)40%，與文獻(xiàn)報(bào)道不一致[8]，對(duì)四代頭孢類(lèi)藥物耐藥率低于10%，可作為臨床常規(guī)用藥。對(duì)于碳青霉希酶類(lèi)、喹諾酮類(lèi)及氨基糖苷類(lèi)藥物耐藥率小于5%，可作為重癥感染患者臨床治療的首選藥物。

由于嗜水氣單胞菌主要應(yīng)用于漁業(yè)和畜牧業(yè)，但這些行業(yè)廣泛使用阿莫西林、紅霉素等抗生素用于動(dòng)物的疾病預(yù)防，這些用藥在非臨床環(huán)境中的使用，造成臨床耐藥性，與本研究的耐藥率、產(chǎn)酶性較高有一定的關(guān)系。預(yù)防嗜水氣單胞菌的感染應(yīng)積極治療原發(fā)病，嚴(yán)防交叉感染的發(fā)生。為了減少此菌的感染，應(yīng)避免食用帶抗生素的食物;因本菌也存在于瓜果蔬菜中，食用之前要洗凈;一旦發(fā)生流行要立即改水改廁，防止病原菌的進(jìn)一步擴(kuò)散。接觸污水和飲用未煮沸或消毒的水;受污染水接觸傷口應(yīng)及時(shí)清潔消毒，盡量不與患者和有病動(dòng)物接觸。感染者宜飲食清淡衛(wèi)生為主，合理搭配膳食。

1 林萬(wàn)明.PCR技術(shù)操作和應(yīng)用指南[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，1993：178-179.

2 倪語(yǔ)星，尚紅.臨床微生物學(xué)與檢驗(yàn){M}.第4版。北京：人民衛(wèi)生出版社，2007：202.

3 CLSI.Performance standards for Antimicrobial susceptbulity Testing[M].Sisteenth Information Supplenment.2012，32（2）：M07-A920：34-393.

4 周庭銀.臨床微生物學(xué)診斷與圖譜{M}.第3版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2012：56.

5 羅志飛，胡萌.3株嗜水氣單胞菌弱毒株的毒力相關(guān)特性分析[J].中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2012，32（1）：48-57.

6 李春艷，姜巨峰，郭鑫，等.嗜水氣單胞菌對(duì)金鯽血液學(xué)指標(biāo)的影響[J].河北漁業(yè)，2011，8：1-4.

7 周光，周群蘭，謝駿，等.嗜水氣單胞菌流行病學(xué)研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，23（2）：125.

8 圣艷.嗜水氣單胞菌的臨床感染調(diào)查及耐藥性分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2015，12（16）：2460-2462.

Objective To understand the current enzyme production and drug resistance of A.hydrophila forclinical treatment of A.hydrophila infection and to provide the basis for the rational use of antibiotics.Methods Fifty strains of A.hydrophilabacteria were collected from clinical specimens from 2011 to 2015.The routine drug sensitivity test was carried out using the K-B paper method，and the extended-spectrumβ-lactamases（ESBLs） was confirmed by the CLSI standard double disk tests.The AMPC was detected by three-dimensional test.Results Among 50 strains of A.hydrophila，15 strains produced ESBLs and 10 strains produced AMPC.All bacteria showed ampicillin resistance.Ampicillin/sulbactam resistant rate was 94%，and the third and the fourth generation cephalosporin resistant rate was 40% although the other antibiotics remained highly sensitive.Conclusion Clinical treatment of A.hydrophila infection should be careful with cephalosporins so as to improve the efficacy of antibiotics.

A.hydrophila Antimicrobial sensitivity test AmpC enzyme Extended-spectrum β-lactamases

R378 R969.3

A

1671-2587（2017）05-0460-02

Analysis of Enzyme Production and Drug Resistance of A.hydrophila HU Hui-zheng，LI Jun-hai，ZHANG Ye-Ting，et al.No.215 Hospital of Xi'an Medical College，Xi'an

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.05.015

*本課題受陜西省科學(xué)技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（No.2014K11-02-03-09）資助

712000 陜西省核工業(yè)二一五醫(yī)院

扈會(huì)整（1977–），女，副主任檢驗(yàn)師，碩士，主要從事微生物的檢驗(yàn)與研究工作，（Tel）15384509179（E-mail）gj176224042@163.com。

2017-03-15）

（本文編輯：潘健）