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    Galileo全自動血型儀在血站血型檢測中的應用

    2017-11-16 06:35:54姜蓓蓓徐志華周軍兵耿雪芹
    臨床輸血與檢驗 2017年5期
    關鍵詞:血站血型全自動

    姜蓓蓓 徐志華 周軍兵 耿雪芹

    Galileo全自動血型儀在血站血型檢測中的應用

    姜蓓蓓 徐志華 周軍兵 耿雪芹

    目的 評價Galileo全自動血型儀在批量檢測ABO和RH血型中的應用價值。方法 應用Galileo全自動血型儀檢測無償獻血者標本,統(tǒng)計ABO、RH血型的首次判讀情況,并對正反定型不一致從凝塊、重度溶血、重度脂血等干擾因素角度進行分析。結果 全自動血型儀對129 569例標本ABO 血型判讀正確率為99.86%,對RH血型判讀正確率達99.98%。凝塊、重度溶血脂血標本均對儀器加樣有干擾,影響結果判讀;對抗體反應弱及正反定型不一致的標本,需手工復查、判讀結果。結論 全自動血型儀具有自動化、規(guī)范化、標準化、批量化等優(yōu)點,能有效減少人為誤差,可以發(fā)現(xiàn)亞型及鹽水不規(guī)則抗體。

    Galileo全自動血型儀 血站 血型檢測

    我國《獻血者健康檢查要求》(GB18467-2011)中規(guī)定,血站必須對獻血者血液標本進行ABO及RH血型檢測。血型鑒定常用方法有平板法和試管法,缺點是操作、結果判定需要人工參與,在標本量大時缺點尤為明顯。輸血技術的發(fā)展必然對血站實驗室檢測提出快速、準確和標準化、規(guī)范化、自動化的要求。為此,我國很多血液中心和血站相繼采用全自動血型儀進行血型檢測工作[1-3],本站應用美國美德聲科學技術公司的Galileo全自動血型儀對獻血者進行ABO、RH血型檢測及不規(guī)則鹽水抗體篩查?,F(xiàn)對血型儀的檢測結果及影響因素進行統(tǒng)計分析,報告如下。

    材料與方法

    1 標本來源 鹽城市中心血站于2013年1月~2015年12月收集無償獻血標本共129 569例,每份標本留樣5 ml,乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝。

    2 儀器與耗材 Galileo全自動化血型儀;江蘇康健公司生產(chǎn)的96孔的U型微孔板;IMMUCOR公司生產(chǎn)的磁性攪拌球,富友Fu-Ro100L純水機。

    3 試劑 單克隆抗-A、抗-B血清(上海血液生物醫(yī)藥有限公司,批號20120814、20121020、20130510等);RhD(IgM)血型定型試劑(美德聲科學技術公司,批號NDMG06303;上海血液生物醫(yī)藥有限公司,批號20131105、20140129、20140523等);A1、B、O紅細胞(上海血液生物醫(yī)藥有限公司,批號20125339、20135303、20135307等);血型鑒定及不規(guī)則抗體篩查質控品(北京金豪制藥有限責任有限公司,批號20141103、20141215、20150201等)。

    4 檢測流程

    4.1 微板布局:每個標本作6孔檢測,依次是抗-A、抗-B、抗-D、Ac、Bc、Oc,每塊板檢測16個標本。準備生理鹽水,抗-A、抗-B血清,RhD抗血清,A1細胞、B細胞、O細胞,紅細胞試劑瓶中加入一顆磁珠確保細胞處于均勻懸浮狀態(tài)。

    4.2 進樣與檢測:將標本放入樣本架進樣(血型質控置于專用質控架上加樣)開始檢測。流程依次為:①加樣針依次吸208 μl生理鹽水(不加入板孔中,中間有空氣柱隔開),吸標本血清50 μl加入反定型及鹽水抗體篩查孔中,吸取2 ul標本紅細胞與208 μl生理鹽水,儀器自動稀釋,加入正定型孔中。②吸取抗-A、抗-B、抗-D各10 μl,A1c、Bc、Oc試劑紅細胞各12 μl加入相應各孔中。加樣結束后通過自動傳送帶進行標本傳送,并進行孵育、離心、振蕩等步驟,應用CCD成像分析系統(tǒng)對每塊板的每個反應孔掃描,作圖像分析和電腦數(shù)據(jù)處理和判定。

    4.3 結果判讀及臨界閾值(Threshold configure Tc)設置:正定型及Rh:不凝(Tc<27)、可疑(Tc為27~70)、凝集(4+)(Tc>70);反定型及Oc:不凝(Tc<2 5)、可疑(Tc為25~28)、凝集(正常)(Tc>28)。對儀器無法判讀的標本,分析原因并用手工復檢血型或STAR加樣、酶標儀檢測,無法判定的標本送血型室進一步采用血型血清學試驗確認。

    結 果

    全自動血型儀檢測結果及影響因素分析見表1~3。

    表1 ABO血型檢測結果統(tǒng)計

    表2 RH血型檢測結果統(tǒng)計

    表3 影響血型儀檢測判讀因素

    討 論

    應用全自動血型儀共檢測129 569例樣本,ABO血型判讀正確129 385例,首次判讀正確率達99.86%(>99%),與文獻報道一致[4,5]。ABO血型有184例經(jīng)血型儀無法判定最終結果,分析原因有以下幾方面:①正反定型不符標本25例,其中18例反定型Ac、Bc反應弱,4例獻血者血漿中抗-A、抗-B效價較弱,并發(fā)現(xiàn)3例B亞型(其中1例確證為稀有的Bhm血型,另2例未能明確定型);②28例單純Oc凝集,其中檢出3例不規(guī)則鹽水抗體抗-M,2例抗-Lea,2例抗-P1,其余21例均為無特異性冷抗體;③重度溶血21例,因溶血導致紅細胞表面抗原較弱,引起正定型無法判讀;④嚴重脂血標本23例,皆因血漿重度乳糜引起反定型無法準確判讀;⑤87例凝塊標本,導致血型儀正定型無法正確加樣。

    從表2可以看出,Rh血型一次準確定型129 542例,首次判讀正確率達99.98%(>99%),與文獻報道一致[4,5]。RH血型有27例無法正確判讀,其中6例RH血型無法判讀,21例初篩RhD(–)經(jīng)進一步確證為陽性,與抗-D凝集弱,導致血型儀判讀結果落在可疑區(qū)間,分析原因可能與不同批號抗-D(IgM)效價有關。

    根據(jù)全自動血型儀檢測中遇到的問題,作者總結出以下幾個解決方案:①標本質量是影響實驗結果的重要因素,在標本留樣、運輸、保存、處理等環(huán)節(jié)應嚴格執(zhí)行操作規(guī)程;②有凝塊的標本,先用竹簽剔除標本中凝塊,再檢測血型;③在標本接收過程認真核對,如發(fā)現(xiàn)有未抗凝完全的標本及時處理,避免血型的二次檢測,也減少血型儀加樣針堵塞的可能;④重度溶血標本,可采取剪血辮檢測;⑤重度脂血標本,在成像掃描讀取反定型結果時會有干擾,可采取人工判讀;⑥微板在使用前,應仔細檢查有無裂痕、灰塵、透光性,在放入板架時要仔細檢查是否卡到位置,這直接影響后續(xù)實驗是否中斷;⑦每天根據(jù)標本數(shù)準備足夠量試劑,檢查試劑液面是否有氣泡,氣泡會影響加樣準確性;⑧ABO血球要加入磁珠,可以保證實驗運行過程血球一直處于均勻的懸浮狀態(tài),否則血球加樣不準會直接導致反定型無法判讀[6];⑨因RhD試劑效價相對較高,程序多加了鹽水清洗步驟防止殘留RhD試劑,這樣避免了對后續(xù)反應孔的干擾[7];⑩要保證高精密儀器獲得高精確的檢測結果,完備的維護是必不可少的,除外表灰塵的擦拭,血型儀每天、每周、每月應做定期維護,除此,還需要定期進行加樣臂加潤滑油、加樣管道浸泡等。

    全自動血型儀實現(xiàn)了血型檢測的全自動化,使得血型檢測的操作更標準、規(guī)范和簡便化,結果直觀可靠、成像圖清晰易判斷,更易發(fā)現(xiàn)亞型及鹽水不規(guī)則抗體,同時提高了工作效率,減輕了人員負擔,降低了人為主觀因素的影響。同時微機化管理可長期保存,便于備查及資料統(tǒng)計,具有很好的溯源性。

    1 陳顯,劉洲君,朱紹汶,等.全自動血型儀在血型檢測中的應用[J].臨床輸血與檢驗,2014,16(3):250-252.

    2 靳冰,蔣學兵,劉慧珠等.STARIet IVD全自動血型儀在交叉配血中的應用評價[J].臨床輸血與檢驗,2015,17(6):504-506.

    3 王敏,王保龍,姚萍,等. 全自動血型儀在輸血前檢查中的應用[J].臨床輸血與檢驗,2011,13(2):123-125.

    4 胡寧克,陸歡平.全自動血型儀在血型檢測中的應用及無法判讀結果的原因分析[J].臨床輸血與檢驗,2015,17(6):539-540.

    5 李敏芳,劉峰.采用全自動血型儀正反定型不一致的原因分析及對策[J].臨床輸血與檢驗,2013,15(1):54-56.

    6 許婷婷,何明嫡,趙磊,等.Galileo全自動血型儀在血站的應用[J]. 國際檢驗醫(yī)學雜志,2014,35(4):484-485.

    7 石紹川,劉東,李軍,等.PK7300全自動血型分析儀測定ABO血型抗體效價的初步研究[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2014,11(22):3131-3136.

    R457.1

    A

    1671-2587(2017)05-0515-03

    10.3969/j.issn.1671-2587.2017.05.033

    224005 江蘇省鹽城市中心血站

    姜蓓蓓(1 98 2–)女,江蘇鹽城人,主管技師,學士,主要從事血液檢測與臨床輸血工作,(Tel)18662059923(E-mail)18662059923@163.com。

    2017-01-05)

    (本文編輯:王敏)

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