中藥對大鼠腦缺血再灌注損傷細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究進(jìn)展

鄧文祥，潘繼興，黃惠勇*

（湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長沙410208）

腦血管疾病一直嚴(yán)重危害人類健康，其中腦缺血再灌注損傷（cerebral ischemia reperfusion injury，CIRI） 的病理生理過程在這一疾病及其相應(yīng)的治療過程中發(fā)揮著重要的作用。 近年來國內(nèi)外的研究顯示細(xì)胞凋亡與CIRI 的關(guān)系密切，現(xiàn)將有關(guān)凋亡機(jī)制以及中藥及其有效成分對抗CIRI 細(xì)胞凋亡研究綜述如下。

1 CIRI 神經(jīng)元細(xì)胞凋亡相關(guān)機(jī)制

CIRI 細(xì)胞凋亡的發(fā)生與凋亡基因的表達(dá)以及許多內(nèi)外因素的調(diào)節(jié)有關(guān)[1]，可能涉及如下幾個方面。

1.1 大量氧自由基產(chǎn)生

氧自由基主要來源于線粒體，缺血后線粒體產(chǎn)生氧自由基的刺激因素包括低氧、谷氨酸興奮性中毒、Ca2+超載等，另外再灌也是氧自由基增高的原因之一，因再灌后O2-產(chǎn)生顯著增加。腦缺血發(fā)生后，產(chǎn)生大量的氧自由基以及內(nèi)源性抗氧化劑失活導(dǎo)致神經(jīng)元的氧化性損傷，卒中后凋亡的觸發(fā)分子——高毒性分子過氧亞硝酸鹽，由增加的O2-與NO 相互作用形成。 研究表明，及時清除腦缺血后產(chǎn)生的氧自由基不僅可以通過下調(diào)核轉(zhuǎn)錄因子-κB (NF-κB)和原癌基因C-myc 的表達(dá)，同時還能降低海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的損傷以及DNA 的斷裂從而減少凋亡發(fā)生[2-4]。

1.2 鈣超載

現(xiàn)已認(rèn)為， 細(xì)胞內(nèi)Ca2+超載是缺血性神經(jīng)元損傷的共同途徑，Ca2+超載時， 大量的Ca2+內(nèi)流引起線粒體膜損傷，對細(xì)胞氧化還原反應(yīng)、滲透壓、pH 值、細(xì)胞內(nèi)信號的維持都有重要的影響；Ca2+超載可促進(jìn)膜磷脂分解；在膜磷脂分解過程中產(chǎn)生的游離脂肪酸、前列腺素、白三烯、溶血磷脂等細(xì)胞有害物質(zhì)，降低脂質(zhì)膜流動性，同時增高脂質(zhì)膜的通透性，導(dǎo)致細(xì)胞腫脹； 同時鈣依賴蛋白酶被激活，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)無害的黃嘌呤脫氫酶轉(zhuǎn)變?yōu)橛泻Φ狞S嘌呤氧化酶，生成大量氧自由基；Ca2+超載時，釋放到細(xì)胞外間隙的興奮性氨基酸可造成細(xì)胞毒性[5]。

1.3 線粒體損傷

線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)凋亡是哺乳動物細(xì)胞凋亡的途徑之一， 線粒體引起細(xì)胞凋亡可能與以下3種機(jī)制相關(guān)：（1）破壞電子傳遞、氧化磷酸化和ATP產(chǎn)生；（2） 線粒體的線粒體膜通透性轉(zhuǎn)換孔（MPTP）在各種促細(xì)胞凋亡信號作用下開放，導(dǎo)致線粒體跨膜電位崩解，呼吸鏈解耦聯(lián)，線粒體基質(zhì)滲透壓升高，內(nèi)膜腫脹；（3）細(xì)胞色素C、凋亡誘導(dǎo)因子等促凋亡因子的釋放，細(xì)胞色素C 進(jìn)入胞漿與胞漿內(nèi)凋亡蛋白酶激活因子1 及三磷酸脫氧腺苷結(jié)合引發(fā)含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（Caspase）級聯(lián)反應(yīng)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[6-8]。

2 單味中藥及其提取物抗大鼠CIRI 細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展

2.1 補(bǔ)虛類

黃芪為臨床上常治療腦缺血疾病的藥物，Huang XP 等[9-10]發(fā)現(xiàn)黃芪注射液可以抑制大鼠CIRI 模型缺血區(qū)氨基末端激酶3 (JNK3)mRNA 和蛋白質(zhì)的表達(dá)，以及磷酸化細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)，磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)的表達(dá)，從而抑制JNK 信號傳導(dǎo)通路的活化，改善細(xì)胞能量代謝，抑制凋亡的線粒體途徑。 劉莎莎等[11]發(fā)現(xiàn)黃芪注射液可抑制大鼠CIRI 模型海馬神經(jīng)元凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3 的表達(dá)，且6 mL/kg 效果最佳。劉瑞等[12]發(fā)現(xiàn)黃芪注射液還可抑制大鼠CIRI 模型海馬神經(jīng)元凋亡蛋白酶激活因子1 蛋白表達(dá)。 許亮等[13-14]發(fā)現(xiàn)黃芪甲苷（AST）具有減輕大鼠CIRI 模型半暗帶區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的作用， 且AST 40 mg/kg 對神經(jīng)元保護(hù)效果最佳，其機(jī)制可能與增加腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)及VEGF 受體的表達(dá)有關(guān)。 王瑩等[15]發(fā)現(xiàn)黃芪皂苷Ⅳ聯(lián)合骨髓基質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）移植可明顯抑制CIRI 大鼠神經(jīng)元細(xì)胞凋亡，其機(jī)制可能與黃芪皂苷Ⅳ促進(jìn)BMSCs上調(diào)Livin 蛋白表達(dá)，下調(diào)Caspase-9 蛋白的表達(dá)有關(guān)，從而可知黃芪可通過抑制促凋亡蛋白與基因的表達(dá)，以及相關(guān)凋亡信號的傳導(dǎo)，上調(diào)神經(jīng)保護(hù)因子的表達(dá)。

于利等[16]發(fā)現(xiàn)人參皂苷Rg1可下調(diào)大鼠CIRI模型大腦皮層多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1、Caspase-3 的表達(dá)，減輕腦細(xì)胞凋亡。 He B 等[17]研究發(fā)現(xiàn)人參皂苷Rg3的神經(jīng)保護(hù)作用與抗大鼠CIRI 模型細(xì)胞凋亡作用與其下調(diào)海馬CA1 區(qū)鈣蛋白酶I和Caspase-3 的表達(dá)有關(guān)。Yan BY 等[18]實驗發(fā)現(xiàn)淫羊藿次苷可以下調(diào)大鼠CIRI 模型海馬CA1 區(qū)的Bax 和Caspase-3 蛋白表達(dá)， 上調(diào)Bcl-2 的表達(dá)，減少海馬TUNEL 陽性神經(jīng)元數(shù)和神經(jīng)元的損傷。

以上結(jié)果表明，補(bǔ)虛類藥中以補(bǔ)氣藥治療CIRI細(xì)胞凋亡為主，中風(fēng)時以“瘀”證為主要癥候，“補(bǔ)氣”對大鼠CIRI 模型具有明顯的療效，益氣可以治瘀，符合中醫(yī)“氣為血之帥”的理論。

2.2 活血化瘀類

川芎為治療頭痛要藥。 川芎的主要化學(xué)成分包括：川芎嗪、川芎內(nèi)酯等。 趙秋振等[19]研究發(fā)現(xiàn)川芎嗪可抑制大鼠CIRI 模型凋亡相關(guān)蛋白Caspase-12表達(dá)，調(diào)節(jié)Bcl-2 和Bax 的比值。 王昀[20]發(fā)現(xiàn)川芎嗪可下調(diào)大鼠CIRI 模型海馬神經(jīng)元Bax mRNA 表達(dá)，抑制c-jun 傳導(dǎo)通路，抑制氧化應(yīng)激。Hu Y 等[21]發(fā)現(xiàn)川芎內(nèi)酯可顯著提高大鼠CIRI 模型皮質(zhì)和海馬組織的Bcl-2/Bax 比值，抑制Caspase-3 的表達(dá)和裂解Caspase-9。 這些結(jié)果表明，川芎的神經(jīng)保護(hù)作用與其抗氧化和抗凋亡的特性有關(guān)，其抗凋亡機(jī)制可能與抑制凋亡蛋白因子有關(guān)。

《本草便讀》中記載：“丹參，功同四物，能祛瘀以生新，善療風(fēng)而散結(jié)，性平和而走血”。 丹參主要活性成分包括：丹參酮IIA、丹參酚酸B 等。 Zhou HZ等[22]發(fā)現(xiàn)丹參可減少沙鼠CIRI 模型海馬神經(jīng)元凋亡數(shù)目，其機(jī)制可能與提高Bcl-2 的表達(dá)有關(guān)。丹參酮IIA可促進(jìn)大鼠CIRI 模型脊髓中熱休克蛋白70和Bcl-2 蛋白以及Caspase-3 的表達(dá)， 抑制Bax 蛋白的表達(dá)， 而丹參酚酸B 可以抑制大鼠CIRI 模型Caspase-3 的活化以及抑制磷脂酰肌醇3-激酶（PI3-K）通路，從而減少神經(jīng)細(xì)胞凋亡[23-25]。 Ye KP等[26]研究發(fā)現(xiàn)姜黃素能顯著下調(diào)自發(fā)性高血壓大鼠CIRI 模型海馬區(qū)c-Jun 和c-Fos 蛋白表達(dá)， 從而抑制c-Jun 氨基末端激酶（JNK）信號通路。

2.3 止血類

《本草新編》記載：“三七根，止血之神藥也，無論上中下之血，凡有外越者，一味獨用亦效，加入補(bǔ)血補(bǔ)氣藥之中則更神”， 三七的主要有效成分為三七總皂苷。 王瓊等[27]發(fā)現(xiàn)三七總皂苷能夠上調(diào)大鼠CIRI 模型腦組織中抑制凋亡蛋白XIAP 的表達(dá)和下調(diào)促凋亡蛋白Smac 的表達(dá)。唐映紅等[28]發(fā)現(xiàn)三七總皂苷能抑制大鼠CIRI 模型腦組織中神經(jīng)元凋亡信號通路JNK 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白的激活。 劉英吉[29]發(fā)現(xiàn)三七總皂苷能上調(diào)大鼠CIRI 模型腦組織中Bcl-2 和Bax 蛋白的表達(dá)和線粒體膜電位， 抑制線粒體凋亡途徑， 另外三七總皂苷能下調(diào)Caspase-1 的 表 達(dá)[30]。 Meng X 等[31]發(fā) 現(xiàn) 三 七 皂 苷R1對大鼠CIRI 模型神經(jīng)保護(hù)機(jī)制涉及通過雌激素受體依賴性激活絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶（Akt）／轉(zhuǎn)錄因子NF-E2 相關(guān)因子2 通路，從而抑制還原型輔酶Ⅱ氧化酶的激活和線粒體功能障礙。

2.4 解表類

葛根素是葛根中提取的異黃酮類化合物，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于急性腦梗死的治療。 劉必旺等[32]發(fā)現(xiàn)葛根素可以抑制大鼠CIRI 模型腦組織中促凋亡因子如Caspase-3 和膠質(zhì)纖維酸性蛋白的表達(dá)， 上調(diào)BDNF 星形膠質(zhì)細(xì)胞的表達(dá)， 以及激活PI3-K/Akt信號通路，從而減少神經(jīng)細(xì)胞凋亡。王軍等[33]研究發(fā)現(xiàn)生姜水能明顯降低大鼠CIRI 模型海馬TUNEL、Caspase-3、Bax 和Bcl-2 陽性細(xì)胞數(shù)， 升高Bcl-2/Bax 的比值。

從上可知，目前大多數(shù)實驗依然停留在中藥某些成分和∕或在CIRI 某個病理環(huán)節(jié)上的藥理作用，并未充分運用中醫(yī)理論指導(dǎo)臨床用藥。

3 中藥復(fù)方抗大鼠CIRI 細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展

3.1 補(bǔ)陽還五湯

Wang HW 等[34]提出補(bǔ)陽還五湯在大鼠CIRI模型腦損傷的神經(jīng)保護(hù)作用可能依賴于多種靶分子或基因調(diào)控，其機(jī)制可能與抑制炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡和血管生成有關(guān)。 孫立倩等[35]研究發(fā)現(xiàn)補(bǔ)陽還五湯對大鼠CIRI 模型神經(jīng)細(xì)胞凋亡的抑制作用，可能與其抑制大鼠CIRI 腦組織中絲裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)磷酸化、COX2 蛋白表達(dá)有關(guān)。 有學(xué)者提出[36-37]補(bǔ)陽還五湯抑制大鼠CIRI模型中JAK2/STAT3 信號通路以及p38MAPK 信號通路的激活可能也是其抗凋亡機(jī)制之一。

3.2 黃連解毒湯

Zhang Q 等[38]研究發(fā)現(xiàn)黃連解毒湯預(yù)處理能夠減輕大鼠CIRI 模型神經(jīng)元凋亡，其機(jī)制可能是通過激活PI3K/Akt 信號通路和上調(diào)HIF-1α 的表達(dá)。 龍建飛等[39]通過觀察黃連解毒湯對大鼠CIRI 模型半暗帶神經(jīng)元，DNA 修復(fù)酶 PARP 及凋亡蛋白Caspase-3 表達(dá)的影響，發(fā)現(xiàn)其抗神經(jīng)元細(xì)胞凋亡機(jī)制與抑制Caspase-3 的表達(dá)活性，降低NeuN、PARP 的過度表達(dá)有關(guān)。 付曉春等[40]通過探討黃連解毒湯對大鼠CIRI 模型神經(jīng)細(xì)胞凋亡的保護(hù)機(jī)制與抑制Caspase-3 的表達(dá)有關(guān)。

3.3 小續(xù)命湯

小續(xù)命湯是臨床治療中風(fēng)的常用方劑，Zhu XH 等[41]研究發(fā)現(xiàn)小續(xù)命湯對大鼠CIRI 模型具有抗細(xì)胞凋亡的作用， 其機(jī)制可能與上調(diào)Bcl-2 蛋白的表達(dá)，從而抑制Caspase-3 蛋白的激活有關(guān)。王月華等[42]通過探討小續(xù)命湯有效成分對慢性大鼠CIRI 模型線粒體的保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)小續(xù)命湯減輕細(xì)胞凋亡的機(jī)制與其改善線粒體的損傷有關(guān)。

3.4 血府逐瘀湯

血府逐瘀湯臨床上常用于心腦血管等疾病的治療。孫寒靜等[43]實驗表明，血府逐瘀湯具有減少大鼠CIRI 模型神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的作用，與其減輕脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，降低丙二醛的含量，提高體內(nèi)抗氧化酶超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化物酶的活性表達(dá)，從而降低自由基的產(chǎn)生有關(guān)。 高紅莉等[44]研究表明，血府逐瘀湯對大鼠CIRI 模型損傷的保護(hù)作用機(jī)制，與其下調(diào)缺血大腦皮層的Bax、Caspase mRNA 的表達(dá)， 上調(diào)Bcl-2 mRNA 的表達(dá)有關(guān)。

3.5 丹龍醒腦方

丹龍醒腦方是臨床治療缺血性卒中的有效復(fù)方，全方由丹參、三七、遠(yuǎn)志、石菖蒲、地龍、淫羊藿、菟絲子等組成，其功效為活血化瘀、通利經(jīng)絡(luò)。 周小青等[45]通過研究發(fā)現(xiàn)丹龍醒腦方抗大鼠CIRI 模型神經(jīng)細(xì)胞凋亡機(jī)制與其上調(diào)Bcl-2 的表達(dá)， 降低Bax 的表達(dá)有關(guān)。何倩等[46-47]研究發(fā)現(xiàn)丹龍醒腦片減少大鼠CIRI 模型細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制可能與其下調(diào)腦缺血再灌注后海馬區(qū)腫瘤壞死因子-α(TNF-α)表達(dá)以及抑制由缺血再灌注損傷誘導(dǎo)的凋亡蛋白Fas/FasL 的表達(dá)有關(guān)。

從而可知，中藥復(fù)方對CIRI 大鼠神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的研究主要集中在凋亡相關(guān)蛋白因子，如Bcl-2、Bax、caspase 蛋白的表達(dá)， 以及相關(guān)凋亡途徑的抑制，同時減輕缺血后的氧化應(yīng)激反應(yīng)。

4 問題與展望

綜上所述，中藥單體及其復(fù)方在抗大鼠CIRI 神經(jīng)元細(xì)胞凋亡方面發(fā)揮重要作用，但仍然存在著一些問題。 首先，現(xiàn)階段的研究局限于以單味中藥的功效為出發(fā)點，探討其有效成分對CIRI 細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用，以西醫(yī)疾病為基礎(chǔ)建立的動物模型不能充分體現(xiàn)中醫(yī)的辨證論治。 再者，由于中藥有效成分的復(fù)雜性，大多數(shù)實驗依然停留在中藥某些成分和/或在某個病理環(huán)節(jié)上的藥理作用， 中藥多層次、多途徑、多環(huán)節(jié)、多靶點綜合干預(yù)的特點未能體現(xiàn)。最后， 中藥復(fù)方研究報道與中醫(yī)辨證論治結(jié)合較少，方劑是中醫(yī)臨床治療疾病的重要手段，是在辨證、立法的基礎(chǔ)上選藥配伍而成的，脫離辨證施治對中醫(yī)研究意義有限。

中醫(yī)證候動物模型的研制尚處于探索階段，對動物模型的辨證論治并不理想，脫離臨床實際。 因此，依托中醫(yī)理論的指導(dǎo)，運用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)建立行業(yè)認(rèn)可的造模方法和模型評價體系，包括中醫(yī)理論指導(dǎo)下復(fù)制病證結(jié)合的神經(jīng)細(xì)胞凋亡模型的建立，是解決問題的關(guān)鍵。

[1]汪 瑩，許棟明，王 文，等.腦缺血再灌注后神經(jīng)細(xì)胞凋亡機(jī)制及藥物保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J]. 中國康復(fù)理論與實踐，2010，16(12)：1 140-1 143.

[2]Loh KP，Huang SH，De Silva R，et al. Oxidative stress：apoptosis in neuronal injury [J]. Curr Alzheimer Res，2006，3(4)：327-337.

[3]Sugawara T，Noshita N，Lewen A，et al. Overexpression of copper/zinc superoxide dismutase in transgenic rats protects vulnerable neurons against ischemic damage by blocking the mitochondrial pathway of caspase activation [J]. Neuroscience，2002，22(1)：209-217.

[4]Szeto HH. Mitochondria-targeted cytoprotective peptides for ischemia reperfusion injury [J]. Antioxid Redox Signal，2008，10(3)：601-619.

[5]王紅梅，賀永貴，伊紅麗，等.腦缺血再灌注損傷發(fā)生機(jī)制及治療進(jìn)展[J]. 河北聯(lián)合大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)，2014(2)：186-188.

[6]Hong SJ，Dawson TM，Dawson VL. Nuclear and mitochondrial conversations in cell death：PARP -1 and AIF signaling [J].Trends Pharmacol Sci，2004，25(5)：259-264.

[7]Love S. Apoptosis and brain ischaemia [J]. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry，2003，27(2)：267-282.

[8]Lindholm D，Eriksson O，Korhonen L. Mitochondrial proteins in neuronal degeneration [J]. Biochem Biophys Res Commun，2004，321(4)：753-758.

[9]Huang XP，Tan H，Chen BY，et al. Astragalus extract alleviates nerve injury after cerebral ischemia by improving energy metabolism and inhibiting apoptosis [J]. Biol Pharm Bull，2012，35(4)：449-454.

[10]Wu YY，Wu WY，Gong HL，et al. Astragalosides attenuate learning and memory impairment in rats following ischemia reperfusion injury [J]. Mol Med Rep，2014，9(4)：1 319-1 324.

[11]劉莎莎，高維娟，錢 濤，等.黃芪注射液腹腔注射腦缺血再灌注模型大鼠海馬組織神經(jīng)元凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表達(dá)[J].中國組織工程研究，2012，16(20)：3 747-3 750.

[12]劉 瑞，高維娟，錢 濤，等.黃芪注射液對腦缺血再灌注大鼠海馬神經(jīng)元形態(tài)學(xué)和Apaf-1 表達(dá)的影響[J]. 天津醫(yī)藥，2013，41(12)：1 177-1 179，1 236.

[13]許 亮. 黃芪甲苷預(yù)處理對腦缺血再灌注后半暗帶神經(jīng)細(xì)胞及PBRs 的影響[D].濟(jì)南：山東大學(xué)，2012.

[14]許 亮，陳春富.黃芪甲苷對大鼠腦缺血再灌注后神經(jīng)元的保護(hù)作用[J].臨床神經(jīng)病學(xué)雜志，2011，24(3)：198-201.

[15]王 瑩，李文媛，楊春壯.黃芪皂甙Ⅳ聯(lián)合BMSCs 移植對大鼠腦缺血再灌注海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡及Livin、Caspase-9 蛋白的影響[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2011，9(8)：979-982.

[16]于 利，劉 霞，包翠芬.人參皂苷Rg1 對腦缺血再灌注大鼠大腦細(xì)胞死亡方式的影響[J]. 中國臨床解剖學(xué)雜志，2013，31(5)：555-559.

[17]He B，Chen P，Yang J，et al. Neuroprotective effect of 20(R)-ginsenoside Rg (3) against transient focal cerebral ischemia in rats [J]. Neurosci Lett，2012，526(2)：106-111.

[18]Yan BY，Pan CS，Mao XW，et al. Icariside II improves cerebral microcirculatory disturbance and alleviates hippocampal injury in gerbils after ischemia-reperfusion [J]. Brain Res，2014，1573(2014)：63-73.

[19]趙秋振，劉玉利，張 輝，等.川芎嗪對大鼠腦缺血再灌注海馬神經(jīng)元Bax mRNA 表達(dá)的影響[J]. 時珍國醫(yī)國藥，2011，22(2)：435-436.

[20]王 昀.川芎嗪抗缺血再灌注損傷作用與JNK 信號通路的相關(guān)性分析[D].廣州：廣州中醫(yī)藥大學(xué)，2012.

[21]Hu Y，Duan M，Liang S，et al. Senkyunolide I protects rat brain against focal cerebral ischemia-reperfusion injury by upregulating p-Erk1/2，Nrf2/HO-1 and inhibiting caspase 3 [J].Brain Res，2015，1605(2015)：39-48.

[22]周宏珍，呂田明，申 鵬，等.神經(jīng)生長因子與丹參對腦缺血再灌注海馬神經(jīng)元的保護(hù)作用[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2011，31（6）：965-969.

[23]Zhang L，Gan W，An G. Influence of Tanshinone IIa on heat shock protein 70，Bcl-2 and Bax expression in rats with spinal ischemia/reperfusion injury [J]. Neural Regen Res，2012，7(36)：2 882-2 888.

[24]羅 浩，周 軍，楊鳳真，等. 丹參酮ⅡA 對腦缺血-再灌注損傷大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡及Caspase-3 蛋白表達(dá)的影響[J]. 中藥材，2013. 36(05)：793-796.

[25]Zhang J，Lu W，Lei Q，et al. Salvianolate increases heat shock protein expression in a cerebral ischemia -reperfusion injury model [J]. Neural Regen Res，2013，8(25)：2 327-2 335.

[26]Ye KP，Chen CR，Zheng JW，et al. Effect of curcumine on the nuclear pathway of JNK during hippocampal ischemia/reperfusion injury in SHR [J]. Zhongguo Ying Yong Sheng Li Xue Za Zhi，2010，26(4)：416-420.

[27]王 瓊，孫 湛，買買提祖農(nóng)·買蘇爾，等.三七總皂苷對大鼠腦缺血再灌注損傷后腦組織的凋亡抑制作用[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2013，13(15)：2 804-2 808，2 861.

[28]唐映紅，黃小平，譚 華，等.三七總皂苷對腦缺血再灌注后神經(jīng)元凋亡及凋亡線粒體途徑和c-Jun 氨基末端激酶表達(dá)的影響[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2010，16(16)：129-132，136.

[29]劉英吉.三七總皂苷對缺血損傷神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用研究[D].吉林：吉林大學(xué)，2013.

[30]Li H1，Deng CQ，Chen BY，et al. Total saponins of Panax Notoginsengmodulate the expression of caspases and attenuate apoptosis in rats following focal cerebral ischemia-reperfusion[J]. J Ethnopharmacol，2009，121(3)：412-418.

[31]Meng X，Wang M，Wang X，et al. Suppression of NADPH oxidase-and mitochondrion-derived superoxide by Notoginsenoside R1 protects against cerebral ischemia-reperfusion injury through estrogen receptor-dependent activation of Akt/Nrf2 pathways [J].Free Radic Res，2014，48(7)：823-838.

[32]劉必旺，王坤芳，梁志剛，等.乙酰葛根素對腦缺血再灌注后神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制研究[J].中國實驗方劑學(xué)雜志， 2011，17(11)：213-216.

[33]王 軍，于 震，張紅霞，等.生姜對局灶性腦缺血再灌注大鼠皮層神經(jīng)細(xì)胞凋亡及Bcl-2，Baxc，aspase-3 表達(dá)的影響[J].中國中藥雜志，2011，36(19)：2 734-2 736.

[34]Wang HW， Liou KT， Wang YH， et al. Deciphering the neuroprotective mechanisms of Bu-yang Huan-wu decoction by an integrative neurofunctional and genomic approach in ischemic stroke mice[J]. J Ethnopharmacol，2011，138(1)：22-33.

[35]孫立倩，趙雅寧，李建民，等.補(bǔ)陽還五湯對大鼠腦缺血/再灌注后p38MAPK 磷酸化、COX2 表達(dá)的影響[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2010，20(10)：1 450-1 452，1 456.

[36]王凱華， 任 丁， 黃龍堅. 補(bǔ)陽還五湯對大鼠腦缺血再灌注后JAK_2/STAT_3 的影響[J].陜西中醫(yī)，2013，34(8)：1 093-1 096.

[37]劉海娟，趙雅寧，李建民，等.補(bǔ)陽還五湯對腦缺血再灌注沙鼠認(rèn)知功能影響[J].中國公共衛(wèi)生，2011，27(5)：587-589.

[38]Zhang Q，Bian H，Li Y，et al. Preconditioning with the traditional Chinese medicine Huang-Lian-Jie-Du-Tang initiates HIF-1 alpha-dependent neuroprotection against cerebral ischemia in rats [J]. J Ethnopharmacol. 2014，154(2)：443-452.

[39]龍建飛，張 弛，張秋霞，等.黃連解毒湯有效部位對腦缺血大鼠半暗帶神經(jīng)元NeuN、Caspase-3、PAR-P 表達(dá)的影響[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2014，37(02)：90-93，98.

[40]付曉春，徐 哲，何 影，等.黃連解毒湯對大鼠局灶性腦缺血再灌注后的保護(hù)作用及其對caspase-3 表達(dá)的影響[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2009，18(14)：1 598-1 599.

[41]Zhu XH，Li SJ，Hu HH，et al. Neuroprotective effects of Xiao-Xu -Ming decoction against ischemic neuronal injuryin vivoandin vitro [J]. J Ethnopharmacol，2010，127(1)：38-46.

[42]王月華，賀曉麗，李曉秀，等.小續(xù)命湯有效成分組對慢性腦缺血大鼠腦線粒體的保護(hù)作用[J].中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報，2012，10(5)：569-576.

[43]孫寒靜，黎同明，王桂香.血府逐瘀湯對大鼠局灶性腦缺血模型的保護(hù)作用[J].中醫(yī)學(xué)報，2013，28(182)：981-983.

[44]高紅莉，葉文靜，曲曉蘭，等.血府逐瘀湯對大鼠局灶性腦缺血損傷的保護(hù)作用及其作用機(jī)制[J]. 中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2014，34(13)：1 052-1 056.

[45]周小青，危 玲，何軍鋒，等.丹龍醒腦方對老年腎虛血管性癡呆大鼠模型的海馬Bax，Bcl-2 蛋白表達(dá)及神經(jīng)元凋亡的影響[J].中華中醫(yī)藥雜志，2012，27(10)：2 681-2 683.

[46]何 倩，周小青，李新華，等.丹龍醒腦片對老齡大鼠腦缺血再灌注后NF-κB、ICAM-1 表達(dá)的影響[J]. 湖南中醫(yī)雜志，2012，28(5)：141-143.

[47]何 倩，李 花，周小青，等.丹龍醒腦片對大鼠腦缺血再灌注后海馬區(qū)AI 及Fas/FasL、TNF-α 表達(dá)的影響[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2009，29(2)：23-25.