不同方案消除血脂對生化測定干擾的研究

甄廣懷，周玉萍，陳達(dá)富(廣東省臺(tái)山市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 529200)

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不同方案消除血脂對生化測定干擾的研究

甄廣懷，周玉萍，陳達(dá)富(廣東省臺(tái)山市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 529200)

目的 探討高速離心法、稀釋法、乙醚萃取法消除血脂干擾的效果，為消除血脂對生化檢測的干擾提供參考。方法 收集100例血脂標(biāo)本，將標(biāo)本分為4份，每組25份，其中3組分別給予高速離心法、稀釋法、乙醚萃取法處理，另1組原血漿檢測。比較處理前后各組間的差異，并對高速離心法、稀釋法、乙醚萃取法組采用方差分析。結(jié)果 3種方法對Ca2+、尿酸(UA)、肌酐(Cr)、血糖(GLU)、清蛋白(ALB)、總蛋白(TP)、直接膽紅素(DBIL)、總膽紅素(TBIL)、淀粉酶(AMY)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)、羥丁酸脫氫酶(HBDH)、乳酸脫氫酶(LDH)、谷氨?；D(zhuǎn)移酶(γGT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)檢測值處理前后，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，檢測值由高到低依次為血清原液檢測、離子水稀釋法、低溫高速離心法、乙醚萃取法。結(jié)論 乙醚萃取法對蛋白質(zhì)類檢測項(xiàng)目影響明顯，離子水稀釋法受其影響最低，在臨床工作中3種方法可聯(lián)合使用。

高脂血癥； 生化測定； 干擾

高脂血癥是由于脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)或代謝異常使血漿中一種或幾種脂質(zhì)高于正常水平，多表現(xiàn)為三酰甘油水平、血漿中膽固醇升高。近年來，隨著人們生活水平的提高，高脂血癥的發(fā)病率呈歷年增高的趨勢，其中70%的高脂血癥患者為高三酰甘油的患者，當(dāng)血清三酰甘油濃度大于3.0 mmol/L時(shí)，血清會(huì)呈現(xiàn)不同程度的渾濁，若處理不及時(shí)，則會(huì)干擾生化指標(biāo)的測定，特別是臨床注射脂肪乳和高脂血清患者，其血清受到大量乳糜微粒的影響嚴(yán)重影響測定結(jié)果[1]。高血脂嚴(yán)重影響臨床安全，對檢驗(yàn)結(jié)果的影響較為明顯，因此確保檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的安全性和可靠性是擺在臨床檢驗(yàn)醫(yī)務(wù)人員面前的重要課題。目前高速離心法、稀釋法、乙醚萃取法是消除脂血影響的主要方法，本文旨在比較3種不同方案在消除血脂干擾中的作用，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年3月至2014年6月本院住院或門診患者的生化檢驗(yàn)標(biāo)本100例，采用生化干燥管靜脈采血4.0 mL，三酰甘油檢測結(jié)果在3.2～28.5 mmol/L，患者疾病情況為急性胰腺炎7例、醫(yī)源性輸注6例、腎病綜合征17例、原發(fā)性高脂血癥31例、糖尿病39例。

1.2 儀器與試劑 高速離心機(jī)(上海安享TGL-16R高速臺(tái)式冷凍離心機(jī))，低速離心機(jī)(長沙英泰TD5B離心機(jī))，離子測定(日本常光電解質(zhì)分析儀)，自動(dòng)生化分析儀(OLYMPUS AU2700)。試劑主要有尿酸(UA)、血糖(GLU)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、清蛋白(ALB)、總蛋白(TP)、直接膽紅素(DBIL)、總膽紅素(TBIL)、淀粉酶(AMY)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)、羥丁酸脫氫酶(HBDH)、乳酸脫氫酶(LDH)、谷氨?；D(zhuǎn)移酶(γGT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、Cl-、K+、Na+、Ca2+、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)。質(zhì)控品(英國朗道)，Ca2+、UA、BUN、TP、ALB、TBIL、DBIL、AMY(廣州科方)；GLU(寧波美康)；Cr、CK、CK-MB、HBDH、LDH(滴寶)；γGT、AST、ALT(寧波普瑞柏)，K+、Na+、Cl-(廣州貝立)。校準(zhǔn)品為相應(yīng)公司的復(fù)合校準(zhǔn)品，純水機(jī)(杭州天創(chuàng)TCHS-RO/250K)。

1.3 方法 以3 000 r/min離心10 min后得到100份血脂標(biāo)本的原血漿，將標(biāo)本分為4組，每組25份，分別給予低溫高速離心法、離子水稀釋法、乙醚萃取法處理，另1組原血漿檢測。乙醚萃取法：乙醚與分離血清1∶1混合，震蕩0.5 min后置于室內(nèi)5 min，采用離心機(jī)以3 500 r/min離心5 min，并將乙醚下層清亮血清吸取后測定；低溫高速離心法：以15 000～16 000 r/min離心20 min后將乳糜微粒層分離出來，測定下層清液；離子水稀釋法：檢測外觀澄清的標(biāo)本血清各項(xiàng)生化指標(biāo)，然后將血清加入三酰甘油10個(gè)濃度梯隊(duì)后繼續(xù)檢測，確定整個(gè)過程中三酰甘油的影響和干擾，最佳稀釋濃度的確定參照干擾實(shí)驗(yàn)，對25個(gè)標(biāo)本稀釋至最佳濃度后進(jìn)行生化指標(biāo)檢測，所有測定均在室內(nèi)質(zhì)控在控下進(jìn)行，具體參照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)EP7-A2文件。

2 結(jié) 果

采用3種不同方式處理后的血脂血清及血清原液在全自動(dòng)生化分析儀上的檢測結(jié)果顯示，3種處理方法處理前后對K+、Na+、Cl-和BUN的檢測差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；對Ca2+、UA、Cr、Glu、ALB、TP、DBIL、TBIL、AMY、CK-MB、CK、HBDH、LDH、γGT、AST、ALT檢測值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，檢測值由高到低依次為血清原液檢測、離子水稀釋法、低溫高速離心法、乙醚萃取法。見表1。

表1 不同處理方法對13項(xiàng)生化指標(biāo)檢測的干擾比較±s)

續(xù)表1 不同處理方法對13項(xiàng)生化指標(biāo)檢測的干擾比較±s)

注：與血漿原液比較，&P<0.05。

3 討 論

隨著人們生活結(jié)構(gòu)方式的轉(zhuǎn)變，糖尿病血脂代謝紊亂、高脂血癥的患者逐漸增加，臨床檢驗(yàn)中高脂血標(biāo)本是導(dǎo)致臨床檢驗(yàn)最常見的干擾原因。為降低和消除脂血帶來的干擾，減少檢測報(bào)告結(jié)果對臨床醫(yī)生的誤導(dǎo)，必須了解脂血干擾檢驗(yàn)的機(jī)制。對于重度脂質(zhì)渾濁，血中大量的乳糜微粒對生化分析儀的入射光產(chǎn)生散射，從而產(chǎn)生嚴(yán)重干擾，同時(shí)，乳糜微粒會(huì)占去血清體積也使測定產(chǎn)生偏差，輕度的脂質(zhì)渾濁，可通過儀器檢測、雙試劑參數(shù)設(shè)置基本消除脂質(zhì)對常規(guī)生化項(xiàng)目的干擾[2-3]。光散射、不可溶物質(zhì)等是高血脂對生化項(xiàng)目產(chǎn)生干擾的主要機(jī)制。

目前有關(guān)研究文獻(xiàn)認(rèn)為去脂劑、低溫泠凝法、磷鎢酸鎂PEG沉淀法、乙醚萃取法、高速離心法等是消除脂血的主要方法[4]。本文對離子水稀釋法、乙醚萃取法、低溫高速離心法3種方法進(jìn)行了比較，結(jié)果認(rèn)為BUN、Cl-、Na+、K+受脂血的影響較小，3種方法之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。但實(shí)際臨床檢驗(yàn)工作中，使用離子選擇電極檢測的Cl-、Na+、K+等指標(biāo)，血脂將在電極表面沉積，從而影響電極壽命和測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此對嚴(yán)重脂血進(jìn)行處理仍是必要且具備一定意義的。高血脂對蛋白質(zhì)類的檢測指標(biāo)影響較大，3種方法未處理與處理后檢測比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其檢測值由高到低依次為血清原液檢測、離子水稀釋法、低溫高速離心法、乙醚萃取法。一般認(rèn)為試劑中的成分將改變測定的原反應(yīng)體系，影響測定結(jié)果，乙醚是一種有機(jī)溶劑，可導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性，對反應(yīng)體系有影響，因此在使用乙醚抽提樣本時(shí)，很容易導(dǎo)致蛋白質(zhì)酶類變性，導(dǎo)致檢測結(jié)果的真實(shí)性、可靠性降低，另外乙醚抽提在對非蛋白氮化合物、無機(jī)離子、糖類樣本時(shí)也存在干擾現(xiàn)象[5]。稀釋法則改變了反應(yīng)體系，其檢查結(jié)果誤差受到稀釋倍數(shù)的影響，且稀釋后乳糜微粒依然存在于反應(yīng)體系中，并沒有徹底消除檢測光的散射干擾，因此不能完全去除脂質(zhì)渾濁的影響。高速離心法在分離血清中的效果不理想，且部分項(xiàng)目離心后同樣受影響[6-7]。總之，在臨床檢驗(yàn)工作中，高血脂是難以避免的，上述各種方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，因此在實(shí)際工作中，可聯(lián)合應(yīng)用多種檢驗(yàn)方法，提高檢驗(yàn)報(bào)告的準(zhǔn)確性。

[1]彭華，戴盛明.高脂血標(biāo)本對臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目的干擾及消除[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010,31(10):1140-1142.

[2]朱征，丁顯平，楊敏，等.高脂血對臨床生化測定影響及處理方法的臨床研究[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2012,33(20):2533-2534.

[3]唐忠志，翁少凡，彭森，等.高溫運(yùn)動(dòng)對成年男性血液生化指標(biāo)及HSP72表達(dá)的影響[J].華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)英德文版,2008,28(5):504-507.

[4]李有強(qiáng)，龍海峰，張?jiān)蒲?，?自動(dòng)生化分析儀法與目測法檢測血清指數(shù)的一致性分析[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2012,28(3):482-484.

[6]胥華猛.3種方法消除脂血對生化測定干擾的對比研究[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(14):1813-1814.

[7]馮健.高脂血癥對部分生化項(xiàng)目測定結(jié)果的影響[J].實(shí)用醫(yī)技雜志,2012,19(11):1179-1180.

Study of different schemes for eliminating influence of blood lipid on biochemical detection

ZHENGuang-huai,ZHOUYu-ping,CHENDa-fu

(TaishanMunicipalPeople′sHospital,Taishan,Guangdong529200,China)

Objective To investigate the effects of high-speed centrifugation,dilution and ether extraction methods in eliminating the blood lipid interference to provide reference for eliminating this interference.Methods 100 cases of lipid samples,the specimens were divided into 4 parts,1 part of each group,three groups were given high-speed centrifugation,dilution and ether extraction methods,and another group was detected as the original plasma.The differences before and after processing were compared among groups.The high-speed centrifugation,dilution and ether extraction methods adopted the variance analysis.Results Ca2+,UA,Cr,GLU,ALB,TP,DBIL,TBIL,AMY,CK-MB,CK,HBDH,LDH,γGT,AST and ALT values detected by 3 kinds of method had statistically significant differences between before and after processing (P<0.05).The detection value in descending order of serum dope testing,deionized water dilution,low-speed centrifugation,ether extraction.Conclusion The ether extraction method significantly affects the protein detection items,the influence of ionized water dilution is minimum,three kinds of method can be combined for use in clinical work.

hyperlipidemia; biochemical measurement; interference

甄廣懷，男，副主任技師，本科，主要從事臨床生化檢驗(yàn)方面的研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.16.044

A

1672-9455(2015)16-2406-02

2015-02-20

2015-05-15)