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    無糖型黃疸茵陳顆粒的質量標準研究

    2015-03-15 09:09:56楊玉華
    西部中醫(yī)藥 2015年6期
    關鍵詞:茵陳無糖量瓶

    王 帆,孫 巖,楊玉華

    蘭州佛慈制藥股份有限公司,甘肅 蘭州 730046

    黃疸茵陳顆粒由茵陳、黃芩、大黃、甘草4味中藥組成,具有保肝、退黃疸、增強免疫力的功效,臨床用于治療急、慢性黃疸型傳染性肝炎[1]。為了更好地控制該產品的質量,本試驗采用高效液相色譜(HPLC)法測定該制劑中黃芩苷的含量,為該制劑的質量控制提供試驗依據。

    1 儀器與試藥

    1.1 藥物與試劑 黃芩苷(中國藥品生物制品檢定所,批號:110715-200212);黃疸茵陳顆粒(無糖型,蘭州佛慈制藥股份有限公司提供,批號:201301)。甲醇為色譜純,水為純化水,其他試劑均為分析純。

    1.2 試驗儀器 SHIMADZU Prominence高效液相色譜儀;Luna 5u C18100A型色譜柱(美國菲羅門公司);SK250HP型超聲波儀 (上海科導超聲儀器有限公司);SHZ-DШ型循環(huán)水式真空泵 (鞏義市英峪予華儀器廠);XS205型十萬分之一電子天平;UPH-I-10T純化水系統(tǒng)(成都超純科技有限公司)。

    1.3 色譜條件 色譜柱為Phenomenex DDS-C18(5μm,4.6 mm×150 mm),甲醇 -0.7%磷酸溶液 (46∶54),檢測波長為 276 nm,柱溫 30℃,流速1mL/min,理論板數按黃芩苷峰計算不低于3000。

    2 方法與結果

    2.1 對照品溶液的制備 取黃芩苷對照品適量,精密稱定,加甲醇制成每1mL含30μg的溶液,即得。

    2.2 檢測波長的選擇 測波長:據文獻報道[2],黃芩苷在檢測波長280 nm處有最大吸收;經過試驗驗證,認為黃芩苷在276 nm處有最大吸收,且以276 nm作為檢測波長,分離效果較好。

    2.3 供試品溶液的制備 取本品裝量差異項下的內容物,混勻,取2g,精密稱定,加70%乙醇40mL,超聲處理30分鐘,放冷,濾過,濾液置100mL量瓶中,用70%乙醇分次洗滌容器和殘渣,洗液合并濾入同一量瓶中,加70%乙醇稀釋至刻度,搖勻,精密量取2mL,置10mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得。

    2.4 線性關系考察 取黃芩苷對照品(0.1572 mg/mL)溶液,精密量取5.0mL置50mL容量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻。制成黃芩苷為15.72μg/mL的對照品溶液并精密量取2.0,4.0,6.0,8.0mL置10mL容量瓶中,各加甲醇稀釋至刻度,搖勻。再從黃芩苷為15.72μg/mL的對照品溶液中,精密量取 2.0,4.0,6.0,8.0mL置 10mL容量瓶中,各加甲醇稀釋至刻度,搖勻。制得一系列不同濃度的黃芩苷對照品溶液。按上述色譜條件分別進樣,進樣量為10μL,測定峰面積。求得回歸方程為:y=4649416x-6420,R=0.9998。結果表明黃芩苷對照品在0.0314~1.2576μg范圍內呈良好的線性關系。

    2.5 精密度實驗 取黃芩苷對照品溶液(0.01866 mg/mL),連續(xù)進樣5次,每次進樣量10μL。測定峰面積,結果RSD為0.37%,表明本法精密度較好。

    2.6 重復性試驗 按“3.3”項制備方法及色譜條件,取同一批供試品(批次3次),制備6份供試品溶液,分別測定含量,其平均含量為4.5805 mg/g,RSD為2.48%。結果表明該方法重現(xiàn)性良好。

    2.7 穩(wěn)定性實驗 按“3.3”項制備方法及色譜條件,對同一批供試品在不同間隔時間 0、0.5、1、2、3、4、5小時測定 7次,RSD=0.28%。結果表明供試品溶液在5小時內穩(wěn)定。

    2.8 加樣回收實驗 因本品黃芩苷含量較高,為節(jié)省標準品,樣品及溶劑減量加入進行加樣回收率的測定,具體操作如下:取本品裝量差異項下的內容物,混勻,取0.15 g左右,共6份(批次3次,含量:4.5805mg/g),精密稱定,各精密加入濃度為0.1572mg/mL的黃芩苷對照品溶液4 mL,加70%乙醇20mL,超聲處理30分鐘,放冷,濾過,濾液置50mL量瓶中,用70%乙醇分次洗滌容器和殘渣,洗液合并濾入同一量瓶中,加70%乙醇稀釋至刻度,搖勻,精密量取5mL,置10mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得。

    按樣品含量測定項下方法依法測定,計算回收率,結果見表1。

    回收率=[(測出黃芩苷量-樣品中黃芩苷量)/加入黃芩苷量]×100%

    試驗結果表明,本方法具有較好的準確度。

    表1 加樣回收率試驗測定結果

    2.9 樣品中黃芩苷的含量測定 為了確定黃疸茵陳顆粒(無糖型)中黃芩苷的含量限度,按“3.3”項制備方法及色譜條件,對10批黃疸茵陳顆粒(無糖型)樣品進行了黃芩苷的含量測定,結果見表2。

    表2 10批樣品的黃芩苷含量測定結果 mg/袋

    3 討論

    通過對本品的各項檢測,證明在保證《衛(wèi)生部藥品標準-中藥成方制劑》黃疸茵陳顆粒的質量標準的同時,所增加的鑒別項目及含量測定方法也確認可行,從而更好地保證了“黃疸茵陳顆粒(無糖型)”的產品質量。在測試中我們經過試驗驗證后認為黃芩苷在276 nm處有最大吸收,且以276 nm作為檢測波長,分離效果較好。

    [1]中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1991:173.

    [2]國家藥典委員會,中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:85.

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