• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    阿托伐他汀預(yù)處理對(duì)缺血再灌注小鼠心肌微血管內(nèi)皮屏障的保護(hù)作用*

    2015-03-08 06:14:01趙世杰齊國(guó)先史立業(yè)盧彥昭
    微循環(huán)學(xué)雜志 2015年4期
    關(guān)鍵詞:阿托伐他汀小鼠

    趙世杰 齊國(guó)先 田 文 史立業(yè) 陳 玲 盧彥昭

    阿托伐他汀預(yù)處理對(duì)缺血再灌注小鼠心肌微血管內(nèi)皮屏障的保護(hù)作用*

    趙世杰齊國(guó)先#田文史立業(yè)陳玲盧彥昭

    【摘要】目的:探討阿托伐他汀預(yù)處理對(duì)缺血再灌注小鼠心肌微血管血流灌注和滲透性的作用及其機(jī)制。方法:60只昆明小鼠隨機(jī)分為6組:假手術(shù)組(C組)、缺血組(I組)、再灌注組(I/R組)、再灌注前2h阿托伐他汀10mg/kg灌胃組(A102組)、再灌注前2h阿托伐他汀20mg/kg灌胃組(A202組)、再灌注前2h阿托伐他汀20mg/kg灌胃+再灌注前15min L-NAME(N-硝基-L-精氨酸甲酯)15mg/kg尾靜脈注射組(AL202組),每組均10只小鼠。于光鏡下結(jié)扎冠脈制備心肌缺血再灌注模型,以活體冷凍技術(shù)(IVCT)摘取心臟,其中5只小鼠心臟行冷凍置換、石蠟包埋,之后切片行HE染色及Albumin免疫組織化學(xué)染色,并對(duì)間質(zhì)中的Albumin免疫組織化學(xué)染色強(qiáng)度進(jìn)行半定量分析;另5只小鼠采用 Western Blotting檢測(cè)心肌組織內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)、黏附連接蛋白VE-cadherin和緊密連接蛋白Claudin-5的表達(dá)水平。 結(jié)果:與I組及I/R組相比,A202組小鼠心肌細(xì)胞界限較清晰,降落傘型紅細(xì)胞的頂端指向血流方向,Albumin無(wú)明顯向間質(zhì)等部位滲漏。A102組鏡下所見與A202組類似,但微血管內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)量、形態(tài)及心肌細(xì)胞界限清晰度等不及A202組,Albumin向間質(zhì)滲漏。AL202組可見心肌細(xì)胞腫脹,微血管內(nèi)紅細(xì)胞減少、缺如,但微循環(huán)血流灌注好于I/R組,Albumin滲漏少于I/R組。與I組和I/R組對(duì)比,A202組和A102組心肌組織中eNOS蛋白表達(dá)均明顯升高(P<0.01),尤以A202組最為明顯(P<0.05)。與A202組相比,AL202組eNOS蛋白表達(dá)降低(P<0.05),且與I/R組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與C組相比,I組和I/R組VE-cadherin蛋白和Claudin-5蛋白表達(dá)顯著降低(P<0.05),而A102和A202組VE-cadherin蛋白和Claudin-5蛋白表達(dá)較I組和I/R組明顯升高(P<0.05),尤以A202組升高最為明顯(P<0.05)。AL202組VE-cadherin及Claudin-5蛋白水平較I/R組升高(P<0.05)。結(jié)論:再灌注前短時(shí)間內(nèi)大劑量阿托伐他汀預(yù)處理可改善缺血再灌注心肌微循環(huán)血流灌注及微血管滲透性,其機(jī)制可能不完全依賴于eNOS/NO途徑。

    【關(guān)鍵詞】阿托伐他?。蝗毖俟嘧?;微循環(huán);血管滲透性;活體冷凍技術(shù);小鼠

    The Protective Effect of Atorvastatin on Microvascular Barrier in Myocardial Ischemia Reperfusion Injury*

    ZHAO Shi-jie, QI Guo-xian#, TIAN Wen, SHI Li-ye, CHEN Ling, LU Yan-zhao

    Department of Geriatric Cardiology, The First Affiliated Hospital of China Medical University, Shenyang 110001, China;#Corresponding author

    【Abstract】Objective: To explore the effect and the probably mechanism of atorvastatin pretreatment before ischemia-reperfusion on epicardial microvascular blood flow and microvascular permeability. Method: 60 mice divided into 6 groups randomly: sham-operated group(C), ischemia group(I), ischemia-reperfusion group(I/R), atorvastatin 10mg/kg gavage 2h before reperfusion group(A102), atorvastatin 20mg/kg gavage 2h before reperfusion group(A202), atorvastatin 20mg/kg gavage 2h before reperfusion+L-NAME 15mg/kg tail vein injection 15min before reperfusion group(AL202). The myocardial ischemia reperfusion model was prepared under light microscopy. IVCT

    [作者單位]中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院老年心血管內(nèi)科, 沈陽(yáng)110001;#通訊作者,Tel:024-83282300;E-mail:qigx2002@medmail.com.cn

    本文2015-08-20收到,2015-09-29修回

    followed by freeze-substitution fixation was used to prepare the heart sample of half of the mice in each group, and then stained with hematoxylin-eosine (HE) and albumin antibody for light microscopy observation. The heart samples of another half of each group were prepared for the expression test of eNOS, VE-cadherin and Claudin-5 by Western Blotting. Results: Compared with I and I/R group, A202 group showed the structure of microenvironment was more clear, the apiculus of parachute-shape erythrocytes directed the orientation of blood flow, and less leakage of albumin in the blood vessel. A102 group showed a similar effect, but less than A202 group. In AL202 group, the slices showed myocardial microvascular slightly narrow and myocardial cell swelling, but the blood flow and leakage of plasma albumin is still less than I/R group. Compared with I and I/R group, the expression level of eNOS in A202 and A102 group were significantly increased (P<0.01), especially in A202 group (P<0.05).Compared with A202 group, the expression level of eNOS in AL202 group reduced significantly (P<0.05), and there was no statistically significant difference with I/R group (P>0.05).Compared with C group, the expression level of VE-cadherin and Claudin-5 significantly reduced (P<0.05). Meanwhile, compared with I and I/R group, the expression level of VE-cadherin and Claudin-5 increased significantly in A102 and A202 group (P<0.05), especially in A202 group (P<0.05). Furthermore, compared with I/R group, the expression level of VE-cadherin and Claudin-5 were also increased in AL202 group (P<0.05). Conclusion: High dose atorvastatin pretreatment 2h before reperfusion can significantly improve the blood flow state and the plasma albumin leakage in microvascular, and the mechanism may related to the protection effect of atorvastatin on microvascular endothelial cell junction proteins such as VE-cadherin and Claudin-5, which probably does not totally depend on the eNOS/NO pathway.

    【Key words】Atorvastatin; Ischemia reperfusion; Microcirculation; Microvascular permeability; In vivo cryotechnique (IVCT); Mice

    缺血再灌注損傷(Ischemic Reperfusion Injury,IRI)是困擾臨床的重大難題。心臟再灌注過(guò)程中,冠脈血管內(nèi)皮屏障受損、滲透性增加是損傷的主要始動(dòng)因素,而病理性的微血管滲透性增加主要由內(nèi)皮細(xì)胞間緊密連接和黏附連接處的細(xì)胞間黏附分子來(lái)調(diào)節(jié)[1]。近年來(lái),一系列研究證實(shí)他汀類藥物可能直接保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞間緊密連接及黏附連接組分,從而在內(nèi)皮屏障調(diào)節(jié)中起關(guān)鍵作用[2]。然而,目前大部分使用他汀類藥物防治IRI的研究都是在缺血或再灌注前12h或數(shù)天給予他汀類藥物治療[4],這種給藥方式在急性心肌梗死的再灌注治療中仍有很大的局限性。有研究[4]表明,在心臟移植過(guò)程中,于移植前2h給予供體他汀類藥物口服,可以有效防止心肌再灌注時(shí)微血管內(nèi)皮細(xì)胞的滲透性增加和無(wú)復(fù)流現(xiàn)象。本研究應(yīng)用活體冷凍技術(shù)(In Vivo Cryotechnique,IVCT),觀察再灌注前2h采用阿托伐他汀預(yù)處理對(duì)缺血再灌注小鼠心肌心外膜下微血管血流狀態(tài)及滲透性的影響,探討阿托伐他汀對(duì)微血管內(nèi)皮屏障的保護(hù)作用及機(jī)制。

    1材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

    60只清潔級(jí)昆明小鼠由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,動(dòng)物許可證號(hào):SCXK(遼)2013-0001,雄性,鼠齡5-6w,體重25-30g,普通鼠飼料喂養(yǎng),自由飲水。隨機(jī)分為6組:假手術(shù)組(C組)、缺血組(I組)、再灌注組(I/R組)、再灌注前2h阿托伐他汀10mg/kg灌胃組(A102組)、再灌注前2h阿托伐他汀20mg/kg灌胃組(A202組)、再灌注前2h阿托伐他汀20mg/kg灌胃+再灌注前15min L-NAME(N-硝基-L-精氨酸甲酯)15mg/kg尾靜脈注射組(AL202組)。每組均10只小鼠。

    1.2 主要藥物、試劑和儀器

    阿托伐他汀片(Pfizer,美國(guó));兔源性抗eNOS抗體(Thermo,美國(guó));兔源性抗Claudin-5抗體(Santa Cruz,美國(guó));山羊源性抗VE-Cadherin抗體(Santa Cruz,美國(guó));超純水系統(tǒng)(NW10LVF,Heal Force,香港);小動(dòng)物呼吸機(jī)(HX-100E,成都泰盟科技有限公司);多導(dǎo)生理記錄儀(PowerLab15T,AD Instrument,澳大利亞);光學(xué)顯微鏡(SMZ-168,Olympus,日本);電子天平(PB303,METTLER TOLEDO,瑞士);電泳儀(BIO-RAD,Model250/2.5,瑞典);冷凍離心機(jī)(Sorvall Super T21,Thermo,美國(guó));超聲細(xì)胞破碎機(jī)(Dr.HIELSCHER,德國(guó))。

    1.3 小鼠心肌缺血再灌注模型的建立[5]

    戊巴比妥鈉100mg/kg腹腔麻醉,氣管插管,接小動(dòng)物呼吸機(jī),四肢連接生理記錄儀,胸骨左緣第三肋間開胸,逐層分離暴露心臟,在左心耳與肺動(dòng)脈圓

    錐間,冠狀動(dòng)脈起始點(diǎn)下方2-3mm處,用6-0帶針線穿線,穿線后墊一乳膠圈,結(jié)扎冠狀動(dòng)脈前降支。生理記錄儀觀察到小鼠心電圖ST段抬高即可確認(rèn)心肌梗死模型制備成功[6]。再灌注時(shí)連同乳膠圈一并剪開結(jié)扎線,解除阻斷血流。

    1.4 各組小鼠處理方法

    C組:以6-0帶針線由冠脈下穿過(guò),不結(jié)扎;I組:結(jié)扎冠脈30min;I/R組:結(jié)扎冠脈30min,再灌注1h;A202組及A102組:再灌注前2h予阿托伐他汀20mg/kg或10mg/kg灌胃,結(jié)扎冠脈30min,再灌注1h;AL202組:再灌注前2h予阿托伐他汀20mg/kg灌胃,結(jié)扎冠脈15min(即再灌注前15min)時(shí)予L-NAME 15mg/kg尾靜脈注射,至結(jié)扎冠脈30min后再灌注1h。均以IVCT技術(shù)摘取心臟,其中5只小鼠心臟行冷凍置換、石蠟包埋,之后切片,行蘇木素-伊紅(HE)染色及Albumin免疫組織化學(xué)染色;另5只小鼠心肌組織采用 Western Blotting檢測(cè)內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)、黏附連接蛋白(VE-cadherin)和緊密連接蛋白-5(Claudin-5)的表達(dá)水平。

    1.5 IVCT與冷凍置換

    將預(yù)先在液態(tài)氮(-196℃)中預(yù)冷的異戊烷-丙烷制成的冷凍劑(-193℃)直接傾倒在小鼠跳動(dòng)的心臟組織表面,然后將小鼠迅速移到液態(tài)氮中。在液態(tài)氮中分離心臟組織后將心臟移到由干冰丙酮制冷的含2%多聚甲醛的丙酮溶液中(-80℃)進(jìn)行冷凍至少48h,之后分別在-30℃、-10℃、4℃和室溫下放置2h。純丙酮脫水3次,每次1h。二甲苯透明,低溫石蠟(50-52℃)溫箱(60℃)過(guò)夜,混合蠟(56-58℃石蠟與低溫石蠟按3∶1混合)孵育6h后包埋。

    1.6 HE染色

    將上述包埋的心臟組織切片(厚3μm),常規(guī)去石蠟后行HE染色,于顯微鏡下觀察心肌微血管(約5μm)內(nèi)紅細(xì)胞灌注情況。

    1.7 心肌間質(zhì)Albumin水平檢測(cè)

    采用免疫組化染色法。將上述石蠟切片常規(guī)去石蠟后用0.3%過(guò)氧化氫溶液去除內(nèi)源性過(guò)氧化酶活性,之后用5%魚精蛋白封閉,一抗(1∶100)4℃過(guò)夜,二抗(1∶1 000)室溫孵育1h,ABC-DAB顯色5min,0.04%鋨酸處理1min,以降低背景,增加顯色對(duì)比效果。顯微鏡下觀察,拍照。每只小鼠隨機(jī)抽取5張顯微照片(每組共25張),觀察記錄心肌間質(zhì)內(nèi)Albumin染色強(qiáng)度,分為5級(jí):陰性(-),弱陽(yáng)性(±),陽(yáng)性(+),中強(qiáng)度陽(yáng)性(2+),強(qiáng)陽(yáng)性(3+)。結(jié)果分別來(lái)自3名觀察者。Albumin陽(yáng)性呈棕黃色。

    1.8 心肌組織蛋白表達(dá)的檢測(cè)

    采用Western Blotting。取-80℃凍存的各組心肌組織,參考文獻(xiàn)[7]方法配制細(xì)胞裂解液,提取胞漿總蛋白,按BCA蛋白含量測(cè)定試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行蛋白定量,SDS-PAGE后蛋白轉(zhuǎn)印于PVDF膜,一抗孵育:分別加入兔源性抗eNOS抗體(1∶500)、抗Claudin-5抗體(1∶200)及山羊源性抗VE-Cadherin抗體(1∶100);4℃封閉過(guò)夜,洗膜后二抗孵育:加入羊抗兔二抗,驢抗山羊二抗(1∶500),室溫孵育1h。洗膜后于暗室中行ECL顯色。用凝膠圖像處理系統(tǒng)(Gel-Pro-Analyzer軟件)分析目標(biāo)條帶和β-actin條帶的光密度值,用兩者比值表示其相對(duì)表達(dá)量。

    1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    2結(jié)果

    2.1 各組小鼠心肌血流灌注情況比較

    顯微鏡下,C組可見大量具有方向性和流動(dòng)狀態(tài)的降落傘樣紅細(xì)胞保存在心肌細(xì)胞間的各級(jí)血管內(nèi),心肌細(xì)胞界限清晰。I組和I/R組血管內(nèi)紅細(xì)胞形態(tài)不一,或破碎,部分血管內(nèi)紅細(xì)胞明顯減少或缺如,心肌細(xì)胞腫脹,界限模糊。與I/R組相比,A202組心肌細(xì)胞界限較清晰,降落傘樣紅細(xì)胞的頂端指向血流方向。A102組鏡下所見與A202組類似,但微血管內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)量、形態(tài)及心肌細(xì)胞界限等不及A202組。AL202組可見心肌細(xì)胞腫脹,微血管內(nèi)紅細(xì)胞減少、缺如,存在少量破碎紅細(xì)胞,但微血管血流灌注情況仍優(yōu)于I/R組。見圖1。

    2.2 各組小鼠心肌血管滲透性比較

    免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示,C組Albumin主要分布于微血管內(nèi),間質(zhì)、閏盤等處僅有少量分布。I組和I/R組微血管與心肌細(xì)胞界限模糊,結(jié)構(gòu)破壞,Albumin向心肌間質(zhì)滲出。與I/R組相比,A202組微血管、心肌細(xì)胞等各結(jié)構(gòu)間界限清晰,Albumin主要分布于微血管內(nèi),向心肌間質(zhì)等滲漏不明顯。A102組與A202組類似,但微血管、心肌細(xì)胞等各結(jié)構(gòu)間界限清晰程度稍差,Albumin向心肌間質(zhì)的滲漏稍多。AL202組心肌細(xì)胞腫脹,各結(jié)構(gòu)間界限模糊,Albumin向心肌間質(zhì)內(nèi)滲漏明顯增多,但仍少于I/R組。見圖2。各組Albumin免疫組織化學(xué)染色強(qiáng)度的統(tǒng)計(jì)學(xué)比較結(jié)果見表1。

    表1 各組心肌間質(zhì)Albumin染色強(qiáng)度比較

    注:與C組比較,1)P<0.05;與I組和I/R組比較,2)P<0.05

    2.3 各組小鼠心肌組織eNOS、VE-cadherin、Claudin-5蛋白表達(dá)

    2.3.1eNOS蛋白表達(dá):I組和I/R組與C組比較,eNOS表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),A202組和A102組與I組和I/R組比較,eNOS表達(dá)均明顯升高(P<0.01),A202組升高更明顯(P<0.05)。AL202組與A202組比較,eNOS表達(dá)降低(P<0.05),且與I/R組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見圖3。

    2.3.2VE-cadherin蛋白表達(dá):與C組相比,I組和I/R組VE-cadherin蛋白表達(dá)顯著降低(P<0.05)。A102和A202組VE-cadherin蛋白表達(dá)較I組和I/R組明顯升高(P<0.05),A202組升高更明顯(P<0.05)。AL202組VE-cadherin蛋白水平較I/R組升高(P<0.05)。見圖4。

    注:與I組和I/R組比較,*P<0.01;與A102組比較,

    2.3.3Claudin-5蛋白表達(dá):與C組相比,I組和I/R組Claudin-5蛋白表達(dá)顯著降低(P<0.05)。A102和A202組Claudin-5蛋白表達(dá)較I組和I/R組明顯升高(P<0.05),A202組升高更明顯(P<0.05)。AL202組Claudin-5表達(dá)較I/R組升高(P<0.05)。見圖5。

    [本文圖1、圖2見封2]

    3討論

    IRI是指組織、器官供血中斷一定時(shí)間后再恢復(fù)血供時(shí),組織器官功能障礙和結(jié)構(gòu)損傷反而進(jìn)一步加重的現(xiàn)象,是臨床亟待解決的關(guān)鍵問(wèn)題之一。再灌注過(guò)程中,冠脈血管內(nèi)皮屏障受損、滲透性增加是構(gòu)成IRI病理生理過(guò)程的基礎(chǔ),并可導(dǎo)致微血管受壓、血管痙攣、血栓形成等一系列病理過(guò)程[8]。本文結(jié)果顯示,I組和I/R組小鼠心肌血管內(nèi)紅細(xì)胞形態(tài)紊亂、破碎,部分區(qū)域紅細(xì)胞明顯減少或缺如,血管和心肌界限明顯模糊,結(jié)構(gòu)破壞,Albumin向心肌間質(zhì)明顯滲出。而A102組和A202組血管內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)量較I/R明顯增加,形態(tài)較I/R組明顯改善,微血管和心肌細(xì)胞界限清晰,Albumin向間質(zhì)滲漏不明顯,尤以A202組作用更顯著,表明再灌注前2h給予小鼠阿托伐他汀20mg/kg灌胃可明顯改善缺血再灌注心肌微循環(huán)的血流狀態(tài)及微血管滲透性,且效果優(yōu)于10mg/kg,進(jìn)一步證實(shí)了再灌注前短時(shí)間大劑量他汀類藥物強(qiáng)化治療的額外獲益。

    注:與C組比較,*P<0.05;與I/R組比較,#P<0.05;

    注:與C組比較,*P<0.05;與I/R組比較,#P<0.05;

    構(gòu)成血管內(nèi)皮屏障的連接結(jié)構(gòu)中,黏附連接主要由黏附連接蛋白Cadherin及Catenin組成,其中Cadherin的作用更為關(guān)鍵[9]。緊密連接則主要由緊密連接蛋白Occludins及Claudins等組成,既往研究報(bào)道Occludin缺失并不顯著影響緊密連接的形態(tài)及內(nèi)皮屏障功能[10],因而Claudin-5在調(diào)節(jié)緊密連接組成及血腦屏障功能中起重要作用[11],且可能是雌激素保護(hù)心血管內(nèi)皮屏障新的作用靶點(diǎn)[12]。而本研究結(jié)果顯示,阿托伐他汀預(yù)處理可明顯改善缺血再灌注引起的心肌微血管滲透性增加,改善內(nèi)皮細(xì)胞間黏附連接蛋白VE-cadherin和緊密連接蛋白Claudin-5的表達(dá),且該作用不可能被L-NAME所完全消除,進(jìn)一步證實(shí)阿托伐他汀對(duì)缺血再灌注過(guò)程中細(xì)胞間連接蛋白的保護(hù)作用,而且該保護(hù)作用并非既往研究認(rèn)為的完全通過(guò)eNOS/NO途徑實(shí)現(xiàn)[13],其具體機(jī)制可能與他汀類藥物對(duì)微血管中RhoA(一種小GTP酶)/Rho激酶通路活性的抑制作用相關(guān)[14]。

    傳統(tǒng)組織制備方法因血液組分丟失及可溶性血清蛋白移位等問(wèn)題易致微環(huán)境內(nèi)的人工假象,故檢測(cè)心臟IRI微血管滲透性多需通過(guò)尾靜脈注射伊文斯藍(lán)等染色劑,觀察其在心臟大體標(biāo)本中的滲出來(lái)完成。本研究應(yīng)用IVCT技術(shù)實(shí)現(xiàn)了活體狀態(tài)下于微循環(huán)水平直接評(píng)估血流狀態(tài)及微血管滲透性的變化,具備良好的可信性。

    綜上,本研究證實(shí)再灌注前短時(shí)間內(nèi)大劑量阿托伐他汀強(qiáng)化治療可明顯改善缺血再灌注心肌微循環(huán)血流狀態(tài),降低微血管滲透性,并可增加內(nèi)皮細(xì)胞間連接蛋白VE-cadherin、Claudin-5等的表達(dá),其機(jī)制不完全依賴于eNOS/NO途徑。

    ?

    趙世杰(1982—),男,滿族,博士,主治醫(yī)師,從事冠心病的臨床防治研究

    參考文獻(xiàn)

    1Wallez Y, Huber P. Endothelial adherens and tight junctions in vascular homeostasis, inflammation and angiogenesis[J]. Biochim Biophys Acta,2008,1 778(3):794-809.

    2Haidari M, Zhang W, Chen Z, et al. Atorvastatin preserves the integrity of endothelial adherens junctions byinhibiting vascular endothelial cadherin tyrosine phosphorylation[J]. Exp Cell Res, 2012, 318(14): 1 673-1 684.

    3Iliodromitis EK, Andreadou I, Prokovas E, et al. Simvastatin in contrast to postconditioning reduces infarct size in hyperlipidemic rabbits: possible role of oxidative/nitrosative stress attenuation[J]. Basic Res Cardiol,2010,105(2):193-203.

    4Tuuminen R, Syrjala S, Krebs R, et al. Donor simvastatin treatment abolishes rat cardiac allograft ischemia/reperfusion injury and chronic rejection through microvascular protection[J]. Circulation,2011,124(10):1 138-1 150.

    5Ke Q, Yang Y, Rana JS, et al. Embryonic stem cells cultured in biodegradable scaffold repair infarcted myocardium in mice[J]. Sheng Li Xue Bao,2005,57(6):673-681.

    6Shi L, Li Z, Zhai X, et al. Application of "in vivo cryotechnique" to morphological and immunohistochemical analyses of living mouse subepicardial microcirculation under various pathological conditions[J]. Appl Immunohistochem Mol Morphol,2012,20(3):304-317.

    7Hori H, Sasaoka T, Ishihara H, et al. Association of SH2-containing inositol phosphatase 2 with the insulin resistance of diabetic db/db mice[J]. Diabetes,2002,51(8):2 387-2 394.

    8Schmauss D, Weis M. Cardiac allograft vasculopathy: recent developments[J]. Circulation,2008,117(16):2 131-2 141.

    9Potter MD, Barbero S, Cheresh DA. Tyrosine phosphorylation of VE-cadherin prevents binding of p120 and beta-catenin and maintains the cellular mesenchymal state[J]. J Biol Chem,2005,280(36):31 906-31 912.

    10Furuse M. Knockout animals and natural mutations as experimental and diagnostic tool for studying tight junction functions in vivo[J]. Biochim Biophys Acta,2009,1 788(4):813-819.

    11Morofuji Y, Nakagawa S, So G, et al. Pitavastatin strengthens the barrier integrity in primary cultures of rat brain endothelial cells[J]. Cell Mol Neurobiol,2010,30(5):727-735.

    12Burek M, Arias-Loza PA, Roewer N, et al. Claudin-5 as a novel estrogen target in vascular endothelium[J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol,2010,30(2):298-304.

    13Balakumar P, Kathuria S, Taneja G, et al. Is targeting eNOS a key mechanistic insight of cardiovascular defensive potentials of statins?[J]. J Mol Cell Cardiol,2012,52(1):83-92.

    14Liu PY, Liu YW, Lin LJ, et al. Evidence for statin pleiotropy in humans: differential effects of statins and ezetimibe on rho-associated coiled-coil containing protein kinase activity, endothelial function, and inflammation[J]. Circulation,2009,119(1):131-138.

    作者簡(jiǎn)介:本文第一

    *[基金項(xiàng)目]國(guó)家自然科學(xué)青年基金項(xiàng)目(81200083);教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室課題(KF201312)

    [中圖分類號(hào)]R541.4

    [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

    [文章編號(hào)]1005-1740(2015)04-0001-06

    doi:10.3969/j.issn.1005-1740.2015.04.001

    微循環(huán)學(xué)雜志,2015,25(4):1-6

    ? 2015 CHINESE JOURNAL OF MICROCIRCULATION

    猜你喜歡
    阿托伐他汀小鼠
    小鼠大腦中的“冬眠開關(guān)”
    米小鼠和它的伙伴們
    急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者采用阿托伐他汀治療的效果與藥理解析
    阿托伐他汀聯(lián)合曲美他嗪治療冠心病臨床分析
    瑞舒伐他汀與阿托伐他汀治療冠心病的臨床效果對(duì)比分析
    阿托伐他汀對(duì)老年急性心肌梗死患者經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療后心肌損傷的保護(hù)作用分析
    今日健康(2016年12期)2016-11-17 12:06:09
    阿托伐他汀、輔酶Q10聯(lián)合應(yīng)用治療冠心病早期心功能減退
    今日健康(2016年12期)2016-11-17 11:46:28
    觀察不同劑量阿托伐他汀治療腦梗死的臨床效果
    Avp-iCre轉(zhuǎn)基因小鼠的鑒定
    加味四逆湯對(duì)Con A肝損傷小鼠細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用
    精品人妻在线不人妻| 中文亚洲av片在线观看爽| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 精品久久久久久成人av| 精品日产1卡2卡| 成人亚洲精品av一区二区 | 亚洲av成人一区二区三| 黄色怎么调成土黄色| 精品国产乱子伦一区二区三区| 看免费av毛片| 91老司机精品| 日本三级黄在线观看| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 伦理电影免费视频| av天堂久久9| 亚洲男人的天堂狠狠| av网站在线播放免费| 久久久国产一区二区| 大码成人一级视频| 性欧美人与动物交配| 女人精品久久久久毛片| 欧美中文日本在线观看视频| 性欧美人与动物交配| 久久久久国产一级毛片高清牌| 嫁个100分男人电影在线观看| 91国产中文字幕| 国产精华一区二区三区| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 在线看a的网站| av网站免费在线观看视频| a级毛片在线看网站| 夜夜爽天天搞| 亚洲黑人精品在线| 亚洲五月天丁香| 久久精品成人免费网站| a在线观看视频网站| 欧美色视频一区免费| 真人一进一出gif抽搐免费| 一级作爱视频免费观看| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 久久久久九九精品影院| 麻豆av在线久日| 青草久久国产| 麻豆国产av国片精品| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产成人精品久久二区二区91| 最近最新中文字幕大全免费视频| www.www免费av| 欧美日韩一级在线毛片| 欧美色视频一区免费| 99久久国产精品久久久| 人人妻人人澡人人看| 91国产中文字幕| 日本wwww免费看| 夜夜夜夜夜久久久久| 精品日产1卡2卡| 制服人妻中文乱码| 免费观看精品视频网站| 国产精品野战在线观看 | 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 51午夜福利影视在线观看| 日韩人妻精品一区2区三区| 欧美乱妇无乱码| bbb黄色大片| 91精品国产国语对白视频| 中文字幕精品免费在线观看视频| 欧美日韩精品网址| 欧美亚洲日本最大视频资源| 91字幕亚洲| 日本五十路高清| 欧美在线黄色| 黄片小视频在线播放| 久久香蕉国产精品| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 欧美激情高清一区二区三区| 日韩av在线大香蕉| 91国产中文字幕| 精品一区二区三区四区五区乱码| 亚洲avbb在线观看| 黄色怎么调成土黄色| 91在线观看av| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 手机成人av网站| 精品久久久精品久久久| 又黄又爽又免费观看的视频| 亚洲欧美激情在线| 12—13女人毛片做爰片一| av天堂在线播放| 亚洲第一av免费看| 99热只有精品国产| 日本免费a在线| 黄片大片在线免费观看| 69精品国产乱码久久久| 久久草成人影院| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 丰满迷人的少妇在线观看| 亚洲中文日韩欧美视频| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 国产精品一区二区在线不卡| 一级毛片精品| 又黄又粗又硬又大视频| 黄色成人免费大全| 18禁观看日本| 日本 av在线| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产亚洲精品久久久久5区| 亚洲五月婷婷丁香| 性欧美人与动物交配| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 美女福利国产在线| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 日韩欧美国产一区二区入口| 久久狼人影院| 国产精品一区二区三区四区久久 | 这个男人来自地球电影免费观看| 国产精品偷伦视频观看了| 国产亚洲欧美98| 午夜成年电影在线免费观看| 一级毛片高清免费大全| 成年版毛片免费区| 欧美亚洲日本最大视频资源| 亚洲国产看品久久| 亚洲第一青青草原| 露出奶头的视频| 在线观看午夜福利视频| 久久这里只有精品19| 欧美中文综合在线视频| 国产精品野战在线观看 | 亚洲五月天丁香| 国产麻豆69| 国产单亲对白刺激| 日韩大尺度精品在线看网址 | 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 欧美日本亚洲视频在线播放| 精品国产美女av久久久久小说| 亚洲中文av在线| а√天堂www在线а√下载| 一区在线观看完整版| 国产精品亚洲av一区麻豆| 最近最新中文字幕大全电影3 | 天堂√8在线中文| а√天堂www在线а√下载| 日韩有码中文字幕| 日韩欧美在线二视频| 久久 成人 亚洲| 激情在线观看视频在线高清| 激情视频va一区二区三区| 最好的美女福利视频网| 午夜福利,免费看| 性色av乱码一区二区三区2| 高清毛片免费观看视频网站 | 久久久久久久久中文| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 一进一出抽搐gif免费好疼 | 国产97色在线日韩免费| 国产人伦9x9x在线观看| 热re99久久国产66热| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 久久人人97超碰香蕉20202| 午夜a级毛片| www.999成人在线观看| 免费人成视频x8x8入口观看| 操出白浆在线播放| www.熟女人妻精品国产| 国产精品二区激情视频| 99热只有精品国产| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 成年人黄色毛片网站| 久久草成人影院| 精品高清国产在线一区| 激情在线观看视频在线高清| 嫩草影视91久久| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 免费观看精品视频网站| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 日韩欧美三级三区| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 最近最新中文字幕大全免费视频| 女人被狂操c到高潮| 久久国产精品人妻蜜桃| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 一二三四在线观看免费中文在| 亚洲成人免费av在线播放| 精品乱码久久久久久99久播| 大型av网站在线播放| 成人国语在线视频| 9191精品国产免费久久| 国产精品综合久久久久久久免费 | 自线自在国产av| 亚洲av成人av| 亚洲人成电影观看| aaaaa片日本免费| 久久 成人 亚洲| 免费在线观看影片大全网站| 18禁国产床啪视频网站| 久久99一区二区三区| 性欧美人与动物交配| 大码成人一级视频| 99香蕉大伊视频| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲一区二区三区色噜噜 | 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 亚洲激情在线av| 99在线人妻在线中文字幕| 免费搜索国产男女视频| 老司机午夜福利在线观看视频| 精品国产乱子伦一区二区三区| 国产亚洲av高清不卡| av视频免费观看在线观看| 亚洲七黄色美女视频| 成年人黄色毛片网站| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 欧美乱色亚洲激情| ponron亚洲| 日本黄色日本黄色录像| 视频在线观看一区二区三区| 一级片'在线观看视频| 欧美国产精品va在线观看不卡| 自线自在国产av| www.999成人在线观看| 久久久久九九精品影院| 伦理电影免费视频| 欧美激情久久久久久爽电影 | 国产欧美日韩精品亚洲av| 亚洲精品粉嫩美女一区| 在线看a的网站| 女人被狂操c到高潮| 亚洲av片天天在线观看| 久久精品91蜜桃| 一区福利在线观看| 午夜福利在线免费观看网站| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 在线播放国产精品三级| 99国产精品一区二区三区| 国产亚洲精品第一综合不卡| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 欧美性长视频在线观看| 国产野战对白在线观看| 国产一区二区在线av高清观看| 欧美精品一区二区免费开放| 亚洲avbb在线观看| 精品国产乱子伦一区二区三区| 激情在线观看视频在线高清| 国产在线观看jvid| 成在线人永久免费视频| 免费在线观看黄色视频的| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 日韩欧美国产一区二区入口| 亚洲久久久国产精品| 69av精品久久久久久| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 一级毛片精品| 亚洲成人免费电影在线观看| 大型黄色视频在线免费观看| 国产av一区二区精品久久| 国产精品日韩av在线免费观看 | 亚洲av日韩精品久久久久久密| 99国产精品一区二区蜜桃av| 夜夜夜夜夜久久久久| 欧美中文日本在线观看视频| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 欧美最黄视频在线播放免费 | 国产野战对白在线观看| 久久人妻熟女aⅴ| 真人一进一出gif抽搐免费| 最新美女视频免费是黄的| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 国产有黄有色有爽视频| 成人黄色视频免费在线看| 黄色a级毛片大全视频| 不卡av一区二区三区| 三上悠亚av全集在线观看| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 免费在线观看完整版高清| cao死你这个sao货| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 狂野欧美激情性xxxx| 一区二区三区国产精品乱码| 国产高清视频在线播放一区| 欧美av亚洲av综合av国产av| 国产伦人伦偷精品视频| 国产精华一区二区三区| 久久影院123| 欧美国产精品va在线观看不卡| 欧美av亚洲av综合av国产av| av有码第一页| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 在线播放国产精品三级| 亚洲欧美激情在线| 国产不卡一卡二| 美女高潮到喷水免费观看| 99精品久久久久人妻精品| 在线播放国产精品三级| 在线观看66精品国产| 91精品三级在线观看| 在线看a的网站| 国产精品永久免费网站| 亚洲精品成人av观看孕妇| 美女大奶头视频| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲免费av在线视频| 成人永久免费在线观看视频| 欧美+亚洲+日韩+国产| 久久久精品欧美日韩精品| 操出白浆在线播放| 看片在线看免费视频| 999精品在线视频| 日本黄色日本黄色录像| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | av天堂久久9| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 国产一区在线观看成人免费| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲人成电影观看| 午夜成年电影在线免费观看| 欧美久久黑人一区二区| 日韩国内少妇激情av| 亚洲欧美日韩无卡精品| 在线观看午夜福利视频| 久久国产精品人妻蜜桃| 亚洲伊人色综图| 黄色视频,在线免费观看| 国产激情久久老熟女| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 亚洲国产看品久久| 亚洲精品美女久久av网站| 久久久久久久久久久久大奶| 正在播放国产对白刺激| 美女国产高潮福利片在线看| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 又紧又爽又黄一区二区| 久久人人精品亚洲av| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 亚洲国产欧美一区二区综合| 亚洲五月婷婷丁香| 午夜久久久在线观看| 无限看片的www在线观看| 最好的美女福利视频网| 欧美日本中文国产一区发布| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 精品欧美一区二区三区在线| 国产成人免费无遮挡视频| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 国产精品久久久人人做人人爽| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 久久中文字幕一级| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 两人在一起打扑克的视频| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 看片在线看免费视频| 亚洲熟女毛片儿| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 久久中文字幕一级| 老司机午夜十八禁免费视频| 一级毛片高清免费大全| 999久久久精品免费观看国产| 两个人免费观看高清视频| 免费人成视频x8x8入口观看| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲一区二区三区不卡视频| 久久婷婷成人综合色麻豆| 亚洲av美国av| 国产精品 国内视频| 性少妇av在线| 丝袜美足系列| 亚洲精品成人av观看孕妇| 男人舔女人下体高潮全视频| 90打野战视频偷拍视频| 后天国语完整版免费观看| 婷婷丁香在线五月| 搡老岳熟女国产| 久久人妻熟女aⅴ| 亚洲欧美激情综合另类| 9191精品国产免费久久| 国产av在哪里看| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 男人的好看免费观看在线视频 | 午夜影院日韩av| 香蕉丝袜av| √禁漫天堂资源中文www| 亚洲一区中文字幕在线| 天堂动漫精品| 在线观看免费午夜福利视频| 国产1区2区3区精品| 久久人人精品亚洲av| 麻豆av在线久日| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 亚洲少妇的诱惑av| 精品乱码久久久久久99久播| 男人的好看免费观看在线视频 | 高清黄色对白视频在线免费看| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲三区欧美一区| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 18美女黄网站色大片免费观看| 午夜久久久在线观看| 激情在线观看视频在线高清| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 精品久久久久久久毛片微露脸| 久9热在线精品视频| 丁香六月欧美| 久热这里只有精品99| 欧美日韩视频精品一区| 亚洲色图综合在线观看| 男女午夜视频在线观看| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | xxxhd国产人妻xxx| 精品久久久久久,| 大型av网站在线播放| 日日爽夜夜爽网站| 国产又爽黄色视频| 99在线视频只有这里精品首页| 午夜日韩欧美国产| 欧美日韩av久久| 国产又爽黄色视频| 久久久精品欧美日韩精品| √禁漫天堂资源中文www| 老司机在亚洲福利影院| 久久天堂一区二区三区四区| 99热国产这里只有精品6| 在线观看免费高清a一片| 国产一区在线观看成人免费| 国产av又大| 黑人操中国人逼视频| 亚洲视频免费观看视频| 久久久久久久精品吃奶| 亚洲国产中文字幕在线视频| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 成人免费观看视频高清| av片东京热男人的天堂| 久久国产精品影院| 欧美激情极品国产一区二区三区| 免费在线观看黄色视频的| 亚洲色图综合在线观看| 婷婷精品国产亚洲av在线| 国产精品av久久久久免费| 夫妻午夜视频| 中文亚洲av片在线观看爽| 黄色视频不卡| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 又黄又爽又免费观看的视频| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 国产高清激情床上av| 国产精品免费一区二区三区在线| 天堂动漫精品| 久9热在线精品视频| 一区二区三区国产精品乱码| 一级a爱视频在线免费观看| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 满18在线观看网站| 国产精品 欧美亚洲| 国产精品99久久99久久久不卡| 午夜a级毛片| 亚洲五月天丁香| 亚洲avbb在线观看| 精品人妻1区二区| 最近最新中文字幕大全免费视频| 成年女人毛片免费观看观看9| 国产精品99久久99久久久不卡| 成年人免费黄色播放视频| 中文欧美无线码| 中文字幕高清在线视频| 久久久久亚洲av毛片大全| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 91精品国产国语对白视频| 午夜免费成人在线视频| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 99国产精品一区二区三区| 亚洲少妇的诱惑av| 啦啦啦 在线观看视频| 一级作爱视频免费观看| 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产又爽黄色视频| 两性夫妻黄色片| 国产1区2区3区精品| 在线观看66精品国产| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| xxxhd国产人妻xxx| 久久久国产欧美日韩av| 在线观看免费午夜福利视频| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 国产黄a三级三级三级人| 久久久国产成人精品二区 | 老司机深夜福利视频在线观看| 久久精品人人爽人人爽视色| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 色哟哟哟哟哟哟| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 国产野战对白在线观看| 亚洲五月天丁香| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 久久香蕉激情| 日韩国内少妇激情av| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 高清av免费在线| 色哟哟哟哟哟哟| 久久久久国内视频| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 亚洲中文av在线| 中出人妻视频一区二区| 三上悠亚av全集在线观看| 狠狠狠狠99中文字幕| 欧美人与性动交α欧美软件| 国产91精品成人一区二区三区| 中文字幕人妻熟女乱码| 久久香蕉精品热| 久久久国产精品麻豆| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 岛国在线观看网站| 99国产精品免费福利视频| 99久久国产精品久久久| 一二三四在线观看免费中文在| 黄频高清免费视频| 精品一区二区三区av网在线观看| 在线视频色国产色| 老司机午夜十八禁免费视频| 可以在线观看毛片的网站| av在线播放免费不卡| 少妇的丰满在线观看| 亚洲中文字幕日韩| 精品免费久久久久久久清纯| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 国产高清国产精品国产三级| 一二三四在线观看免费中文在| 51午夜福利影视在线观看| 欧美成人免费av一区二区三区| 久久国产精品影院| 免费高清在线观看日韩| 国产高清videossex| 久久欧美精品欧美久久欧美| 男女之事视频高清在线观看| 最新美女视频免费是黄的| 亚洲 国产 在线| 两性夫妻黄色片| 精品卡一卡二卡四卡免费| 丰满的人妻完整版| 99热国产这里只有精品6| 女性被躁到高潮视频| 亚洲精品粉嫩美女一区| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 亚洲成人精品中文字幕电影 | 99精国产麻豆久久婷婷| 黄色毛片三级朝国网站| 一级a爱片免费观看的视频| 两人在一起打扑克的视频| 悠悠久久av| 真人一进一出gif抽搐免费| 老司机亚洲免费影院| 欧美日本中文国产一区发布| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 新久久久久国产一级毛片| 99久久国产精品久久久| 精品国产亚洲在线| 亚洲中文av在线| 亚洲精品久久午夜乱码| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 欧美日韩一级在线毛片| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲五月天丁香| netflix在线观看网站| 久久天堂一区二区三区四区| 欧美丝袜亚洲另类 | 久久婷婷成人综合色麻豆| 交换朋友夫妻互换小说| 亚洲色图综合在线观看| 国产免费av片在线观看野外av| 久久久国产成人精品二区 | 身体一侧抽搐| 欧美色视频一区免费| 国产精品1区2区在线观看.| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 两个人看的免费小视频| 色在线成人网| 久久久久九九精品影院| 国产成+人综合+亚洲专区| 婷婷六月久久综合丁香| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 日韩人妻精品一区2区三区| 真人做人爱边吃奶动态| 国产免费av片在线观看野外av| 在线观看免费午夜福利视频| 老司机深夜福利视频在线观看| 深夜精品福利| 人妻久久中文字幕网| 夜夜看夜夜爽夜夜摸 | 久久久久久免费高清国产稀缺| 女性生殖器流出的白浆| 高清av免费在线| 三上悠亚av全集在线观看| 香蕉国产在线看| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 久久久水蜜桃国产精品网| 久久性视频一级片| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 免费看十八禁软件| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 亚洲av熟女| 欧美乱码精品一区二区三区| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 咕卡用的链子| videosex国产| 91精品国产国语对白视频| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 窝窝影院91人妻| 欧美日本中文国产一区发布|