白芷煮散顆粒與傳統(tǒng)飲片煎出效果的對比研究

張婧，宋英，曹蕾，楊紅梅

白芷煮散顆粒與傳統(tǒng)飲片煎出效果的對比研究

張婧1，宋英1，曹蕾2，楊紅梅2

目的：通過對白芷煮散顆粒與白芷傳統(tǒng)飲片的煎出質(zhì)量的對比，為中藥新劑型的研究提供一定的科學(xué)依據(jù)。方法：以白芷煮散顆粒與傳統(tǒng)飲片在不同時間所含歐前胡素的含量以及干膏收率為指標(biāo)，比較白芷煮散顆粒與傳統(tǒng)飲片的煎出效果。結(jié)果：白芷煮散顆粒的溶出效果明顯高于傳統(tǒng)飲片。結(jié)論：白芷煮散顆粒相對于傳統(tǒng)飲片有很大優(yōu)勢，值得進(jìn)一步研究。

白芷；煮散顆粒；對比研究

白芷為傘形科植物白芷Angelica dahurica (Fisch. ex Hoffm.) Benth.et Hook.f.或杭白芷Angelica dahurica (Fisch.ex Hoffm.)Benth.et Hook.f.var.formosana (Boiss.)Shan et Yuan的干燥根。其味辛，性溫。歸胃、大腸、肺經(jīng)。具有解表散寒，祛風(fēng)止痛，宣通鼻竅，燥濕止帶，消腫排膿等功效，臨床用于感冒頭痛，眉棱骨痛，鼻塞流涕，鼻鼽，鼻淵，牙痛，帶下，瘡瘍腫痛等癥[1]。其有效成分主要為香豆素類化合物，如氧化前胡素、歐前胡素、異歐前胡素等，揮發(fā)油成分及微量元素[2]。

煮散顆粒是以傳統(tǒng)的“中藥煮散”理論為基礎(chǔ)，結(jié)合現(xiàn)代制劑技術(shù)開發(fā)出的只改變藥材粉碎粒度等物理狀態(tài)而形成的中藥新型飲片，它彌補了傳統(tǒng)中藥飲片的許多不足，具有煎煮時間短、有效成分煎出效果好、質(zhì)量可控、隨證靈活的特點[3]。本文通過對白芷煮散顆粒與傳統(tǒng)飲片的煎出效果進(jìn)行對比研究，為白芷煮散顆粒這一新型的中藥飲片形式的進(jìn)一步研究及應(yīng)用提供實驗性數(shù)據(jù)。

1 實驗材料

實驗所用儀器包括：HP 1100高效液相色譜儀（配有紫外檢測器、自動進(jìn)樣器、四元梯度泵、在線脫氣裝置，美國惠普公司），Agilent Chem Station色譜工作站（美國Agilent 公司）；依利特C18色譜柱（Hypersil BDS，150×4.6mm，5μm ，大連依利特分析儀器有限公司）；JA2003上海電子天平（上海精科天平）；BP211D分析天平（十萬分之一型，德國賽多利斯公司）；101A-3干燥箱（上海市實驗儀器總廠）； 永欣TW-2000W可調(diào)溫電爐（郫縣永結(jié)電器總廠）；電熱恒溫水浴鍋（雙列八孔，北京市永光明醫(yī)療儀器廠）。

實驗所用藥材包括：白芷煮散顆粒（實驗室自制，批次：1、2、3）；白芷傳統(tǒng)飲片（購于四川新荷花中藥飲片股份有限公司，批號：1004172）。

實驗室所用試藥包括：歐前胡素（購于中國藥品生物制品檢定所，批號：110826-201013）；色譜甲醇（美國天地公司）；水為超純水（實驗室自制）；其他試劑均為分析純。

2 方法

2.1 兩種飲片樣品溶液的制備

2.1.1 傳統(tǒng)飲片樣品溶液的制備 分別精密稱取白芷傳統(tǒng)飲片10 g，共8份，加入10倍量水，浸泡30分鐘，取4份樣品分別煎煮5分鐘、10分鐘、20分鐘、30分鐘，濾過，濾液定容至250ml，備用。另4份樣品，先煎煮30分鐘，濾過，收集濾液備用，再將濾渣加入10倍量水，分別煎煮5分鐘、10分鐘、20分鐘、30分鐘，濾過，合并兩次濾液，定容至250mL，備用。

2.1.2 煮散顆粒樣品溶液的制備 分別精密稱取白芷煮散顆粒10 g，共8份，加25倍量的水，同法制備白芷煮散顆粒樣品溶液。

2.2 兩種飲片不同時間點歐前胡素的含量測定

2.2.1 色譜條件 參照《中國藥典》2010年版“白芷”項下歐前胡素含量測定的色譜條件[1]為：填充劑：十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相：甲醇-水（55：45）；流速：1.0 ml．min-1；檢測波長：300 nm，柱溫：25 ℃；進(jìn)樣量：10 μl 。理論塔板數(shù)按歐前胡素計應(yīng)不低于3000。

2.2.2 對照品溶液的制備 取歐前胡素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成1 ml含10 μg的溶液，即得。

2.2.3 方法學(xué)考察

（1）線性范圍的考察 精密稱取歐前胡素對照品適量，加流動相制得對照品溶液濃度0.009088 mg．ml-1。精密量取歐前胡素對照品溶液1 μl、3 μl、10 μl、20 μl、30 μl分別進(jìn)樣分析。以歐前胡素色譜峰峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對照品含量（X）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出回歸方程Y=1854.9X-1.4656，R=1.0000。計算表明，歐前胡素含量在0.1144～1.1440 μg范圍內(nèi)線性良好。

（2）精密度試驗 精密吸取歐前胡素對照品溶液10μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，測定歐前胡素色譜峰峰面積，計算RSD。結(jié)果表明，RSD為0. 88%，儀器精密度良好。

（3）穩(wěn)定性試驗 取樣品供試液，于0小時、2小時、4小時、6小時、8小時，分別進(jìn)樣10 μl，記錄歐前胡素的峰面積值，計算RSD。結(jié)果表明，RSD為1. 53%，歐前胡素在室溫放置8 h是穩(wěn)定的。

（4）重復(fù)性試驗 按以上樣品處理方法對同一批樣品分別制備供試品溶液6份，分別進(jìn)樣10 μl，記錄歐前胡素色譜峰峰面積。試驗結(jié)果表明，RSD為0.62%，該方法重復(fù)性良好。

（5）加樣回收率試驗 精密量取已知含量的樣品制備溶液10 ml（0.007527 mg．ml-1），共6份，分別精密加入對照品溶液（0.006816 mg．ml-1）3 ml，按供試品制備方法及色譜條件，測定含量，計算回收率。 結(jié)果表明，歐前胡素的回收率平均值為100.12%，回收率在95%～105%之間，RSD=2.69%，該方法的加樣回收率較好。

（6）不同樣品溶液歐前胡素含量的測定 將上述各樣品溶液搖勻，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液作為含量測定供試液。精密吸取傳統(tǒng)飲片供試液30 μl、煮散顆粒供試液15 μl，注入液相色譜儀，記錄峰面積值，代入回歸方程，計算歐前胡素含量，試驗結(jié)果見表1。

表1 不同時間點歐前胡素含量測定結(jié)果

2.3 不同時間點干膏率的測定

分別精密吸取上述供試品溶液傳統(tǒng)飲片25 ml，煮散顆粒15 ml，置于恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3小時，置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，試驗結(jié)果見表2。

表2 不同時間點干膏收率測定結(jié)果表

30+20 18.44 72.73 30+30 19.12 73.18

3 結(jié)果

根據(jù)不同時間點白芷煮散顆粒與傳統(tǒng)飲片的歐前胡素含量與干膏收率繪制出兩種飲片溶出曲線的比較結(jié)果，見圖1、圖2。

圖1 白芷傳統(tǒng)飲片與煮散顆粒溶出曲線比較結(jié)果（歐前胡素）

圖2 白芷傳統(tǒng)飲片與煮散顆粒溶出曲線比較結(jié)果（干膏收率）

由圖1可知，白芷煮散顆粒5～10 min時含量較高，由于歐前胡素對熱不穩(wěn)定[4]，隨煎煮時間的增加，歐前胡素的含量逐漸減少。而傳統(tǒng)飲片溶出較慢，隨時間增加，含量也增加，但煮散顆粒的總體含量要高于傳統(tǒng)飲片。由圖2可知，白芷煮散顆粒和傳統(tǒng)飲片的干膏率都隨時間的增加而增加，煮散顆粒明顯高于傳統(tǒng)飲片。

由此可得出白芷煮散顆粒的煎出效果明顯大于傳統(tǒng)飲片，相對于傳統(tǒng)飲片有很大優(yōu)勢，值得進(jìn)一步研究。

4 討論

本實驗根據(jù)藥物性質(zhì)和臨床療效，選擇歐前胡素含量和干膏收率為評價指標(biāo)[5～6]，對白芷煮散顆粒不同時間點的溶出曲線進(jìn)行比較。由于歐前胡素是白芷煮散顆粒的主要有效成分，其含量的高低對白芷經(jīng)配伍后的臨床療效影響較大，因此，選擇歐前胡素含量作為評價指標(biāo)之一；干膏收率作為煎煮工藝的參考指標(biāo)，能側(cè)面反映出白芷煮散顆粒固體成分的煎出率。因此選擇二者共同作為白芷煮散顆粒煎出效果的評價指標(biāo)，能很好地反映出白芷的煎出效果。對于二者進(jìn)行綜合加權(quán)評分，可以研究得出白芷煮散顆粒與傳統(tǒng)飲片之間的量效關(guān)系，為煮散顆粒的臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

從實驗中可以看出歐前胡素對熱不穩(wěn)定，會隨煎煮時間的延長含量逐漸降低，本實驗中白芷煮散顆粒的制備工藝只對藥材的物理形態(tài)作了改變，最大限度地保留了藥材原有性狀，減少有效成分在制備過程中的損失。通過對白芷煮散顆粒的煎煮主要影響因素進(jìn)行正交試驗，確定其最佳煎煮工藝：加水量為25倍量水，浸泡時間為20min，煎煮時間為5min。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010版一部[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:97,98.

[2] 何開家,張涵慶.白芷化學(xué)成分及其藥理研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代中藥研究與實踐,2010,22(3):59.

[3] 鄭川.澤瀉煮散顆粒的藥學(xué)研究[D].成都:成都中醫(yī)藥大學(xué),2012:9.

[4] 姚新生.天然藥物化學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2005:112.

[5] 魏玉平,劉俊,顏小林,等.白芷治療頭痛的提取工藝評判指標(biāo)的研究[J].中草藥,2001,32(4):318.

[6] 趙亮,曹紅.白芷有效成分提取工藝的優(yōu)化及其中藥材質(zhì)量研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2011,11(14):2759.

（責(zé)任編輯：胡慧玲）

The contrastive study of decoction effciency between decocted power granule and traditional decoction piece of Radix Angelicae Dahurica

ZHANG Jing1, SONG Ying1, CAO Lei2, YANG Hong-mei2//(1. Teaching Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 610072, Sichuan;2. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 610075, Sichuan)

Objective:To provide scientific basis for the research of new preparation of Chinese traditional medicine by comparing the decoction effciency between decocted powder granule and traditional decoction piece.Method:The determination of imperatorin and dry extract yield in different time points were set as the indexes to compare the extraction effciency of these two forms of pieces.Result:The extraction effciency of decocted power granule of Radix Angelicae Dahurica was signifcantly higher than traditional decoction piece.Conclusion:The decocted power granular of Radix Angelicae Dahurica has great advantages, which is worth of further studies.

Radix angelicae dahurica; decocted power granule; contrastive study

R283

A

1674-926X(2015)04-003-03

四川省科學(xué)技術(shù)廳科技支撐計劃（編號：310931)

1.成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，四川 成都 610072；2.成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川 成都 610075

張婧（1987-），碩士研究生在讀，中藥師，研究方向為中藥制劑Tel:13402820567 Email:linruyuqi@126.com

宋英，學(xué)士，主任藥師，從事中藥學(xué)研究Tel:028-87783735 Email:13839535@qq.com

2014-10-17