甲潑尼龍對(duì)復(fù)發(fā)緩解型多發(fā)性硬化患者白細(xì)胞介素23和白細(xì)胞介素17水平的影響

李嵐欣，徐世成

(巴中市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，四川 巴中 636000)

甲潑尼龍對(duì)復(fù)發(fā)緩解型多發(fā)性硬化患者白細(xì)胞介素23和白細(xì)胞介素17水平的影響

李嵐欣※，徐世成

(巴中市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，四川 巴中 636000)

摘要：目的研究甲潑尼龍對(duì)復(fù)發(fā)緩解型多發(fā)性硬化白細(xì)胞介素(IL)23、IL-17水平的影響。方法選擇2011年2月至2013年12月巴中市中心醫(yī)院收治的32例復(fù)發(fā)緩解型多發(fā)性硬化(RRMS)患者作為觀察組，給予甲潑尼龍針1.0 g/次,靜脈滴注3 d，1次/d；3 d后減量為0.5 g/次靜脈滴注4 d，1次/d；4 d后改為口服潑尼松片60 mg/d，漸遞減(口服3 d后減量為40 mg/d)，維持1～3個(gè)月內(nèi)停服。同期選擇30例體檢健康人作為對(duì)照組。檢測(cè)觀察組治療前、治療后及對(duì)照組血清、腦脊液IL-23、IL-17等指標(biāo)，并進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果觀察組治療前血清IL-23、IL-17水平為(688±90) ng/L、(88±10) ng/L,治療后血清IL-23、IL-17水平為(399±56) ng/L、(49±6) ng/L，對(duì)照組血清IL-23、IL-17水平為(93±10) ng/L、(18±3) ng/L，觀察組治療后血清IL-23、IL-17水平顯著低于治療前，但治療前后均顯著高于對(duì)照組(均P<0.01)。觀察組治療前腦脊液IL-23、IL-17水平為(765±68) ng/L、(90±10) ng/L，治療后腦脊液IL-23、IL-17水平為(321±19) ng/L、(49±6) ng/L，對(duì)照組腦脊液IL-23、IL-17水平為(86±8) ng/L、(18±3) ng/L，觀察組治療后腦脊液IL-23、IL-17水平顯著低于治療前，但仍顯著高于對(duì)照組(均P<0.01)。觀察組治療前血清IL-23和IL-17呈正相關(guān)(r=0.402，P=0.039)；腦脊液血清IL-23和IL-17呈正相關(guān)(r=0.516，P=0.004)。結(jié)論RRMS患者血清、腦脊液IL-23、IL-17水平呈現(xiàn)高表達(dá)。甲潑尼龍治療可降低RRMS血清、腦脊液IL-23、IL-17水平。

關(guān)鍵詞：多發(fā)性硬化；甲潑尼龍；白細(xì)胞介素23；白細(xì)胞介素17

多發(fā)性硬化(multiple sclerosis,MS)是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，與自身免疫相關(guān)[1]。研究顯示，白細(xì)胞介素(interleukin,IL)相關(guān)炎性因子在MS發(fā)病中起重要作用，其中IL-17、IL-23可引發(fā)免疫反應(yīng)導(dǎo)致MS的發(fā)病[2]。復(fù)發(fā)緩解型MS(relapsing remitting MS,RRMS)是MS的常見(jiàn)類(lèi)型，也與自身免疫有關(guān)[3-7]。IL-17、IL-23等炎性因子在MS發(fā)病機(jī)制方面的研究較多，但有關(guān)兩者在RRMS發(fā)病中作用的國(guó)內(nèi)研究較少。另一方面，糖皮質(zhì)激素治療對(duì)MS有一定的影響，但激素治療后對(duì)IL-17、IL-23水平影響方面的國(guó)內(nèi)研究鮮見(jiàn)。本研究通過(guò)檢測(cè)免疫治療前后RRMS患者血清、腦脊液IL-17、IL-23水平，旨在探討激素治療對(duì)RRMS患者IL-17、IL-23水平的影響。報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料選擇2011年2月至2013年12月在巴中市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科診治的32例RRMS患者作為觀察組，均符合RRMS診斷標(biāo)準(zhǔn)：擴(kuò)展殘疾狀況評(píng)分量表評(píng)分1.5～8.0分，治療后癥狀明顯減輕，評(píng)分減少>1分[3]。排除假性復(fù)發(fā)；近3個(gè)月接受免疫療法；合并其他免疫相關(guān)疾??；合并顱內(nèi)外感染患者。觀察組男11例、女21例，年齡18~58歲，平均(35.6±4.2)歲，病程4個(gè)月至6年，平均(26.9±2.4)個(gè)月，復(fù)發(fā)2~7次，平均(3.2±0.9)次。選擇同期在本院體檢的健康人作為對(duì)照組，男9例、女21例，年齡18~56歲，平均(36.2±4.6)歲。兩組性別、年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2方法患者于治療前采肘靜脈血5 mL和腰椎穿刺抽取腦脊液3 mL，離心半徑8 cm,4000 r/min離心5 min，取上清液分裝，-80 ℃保存，對(duì)照組于體檢時(shí)以相同方法采集。給予觀察組患者甲潑尼龍針劑(廠(chǎng)家：法瑪西亞普；規(guī)格：4 mg×30片；批號(hào)：20080284)1.0 g靜脈滴注，每日1次；3 d后減量為0.5 g靜脈滴注，每日1次；4 d后改為口服潑尼松片(廠(chǎng)家：浙江仙琚制藥股份有限公司；規(guī)格：5 mg/片；批號(hào)：20000648)60 mg/d，漸遞減(3 d后減量為40 mg/d)，維持1～3個(gè)月停服；同時(shí)加用保護(hù)胃藥物、補(bǔ)鈣補(bǔ)鉀治療[3]?？诜娔崴善委?周后再次采肘靜脈血5 mL和腰椎穿刺抽取腦脊液3 mL，同樣方法保存待測(cè)[3]。

1.3指標(biāo)檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)血清和腦脊液IL-23、IL-17水平， 試劑盒(生產(chǎn)批號(hào); H333M3MY)購(gòu)自上海杰美基因醫(yī)藥科技有限公司。采用WE scanmk-2全自動(dòng)酶標(biāo)儀(芬蘭雷勃公司)，嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作[3]。

2結(jié)果

2.1血清、腦脊液IL-23、IL-17水平比較觀察組治療前血清、腦脊液中IL-23、IL-17水平均顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，觀察組治療后血清、腦脊液中IL-23、IL-17水平均較治療前顯著降低(P<0.01)。觀察組治療后血清、腦脊液中IL-23、IL-17水平仍顯著高于對(duì)照組(P<0.01)。見(jiàn)表1、表2。

觀察組：復(fù)發(fā)緩解型多發(fā)性硬化患者；對(duì)照組：健康人；IL：白細(xì)胞介素

表2兩組受試者腦脊液IL-23、IL-17水平比較

觀察組：復(fù)發(fā)緩解型多發(fā)性硬化患者；對(duì)照組：健康人；IL：白細(xì)胞介素

2.2觀察組治療前血清、腦脊液IL-23和IL-17水平相關(guān)性分析觀察組治療前血清IL-23和IL-17水平呈正相關(guān)(r=0.402，P=0.039)；腦脊液血清IL-23和IL-17水平呈正相關(guān)(r=0.516，P=0.004)。

3討論

RRMS是種自身免疫性疾病，Th17細(xì)胞在其發(fā)病中起重要作用[8]。IL-17、IL-23主要由Th17細(xì)胞產(chǎn)生或分化，因此研究IL-17、IL-23等炎性因子在RRMS發(fā)病中的作用及免疫治療對(duì)其水平的影響，可以為探究RRMS發(fā)病原因、治療方案提供研究依據(jù)。

IL-17是Th17細(xì)胞產(chǎn)生的早期炎性因子，在炎癥反應(yīng)中起重要作用，具有一定的生物學(xué)活性。大量研究[9-11]顯示，IL-17水平與MS的發(fā)病密切相關(guān)。Khalili等[1]報(bào)道MS患者血清IL-17水平明顯呈高表達(dá)，且血清IL-17水平與MS的臨床癥狀及病情嚴(yán)重度關(guān)系密切。Waid等[2]也發(fā)現(xiàn)，MS患者腦脊液IL-17水平明顯升高。國(guó)外近期有研究[6]發(fā)現(xiàn)，RRMS患者血清IL-17水平明顯上升。Calabresi等[5]報(bào)道RRMS患者腦脊液IL-17水平呈高表達(dá)。本研究通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)RRMS患者血清和腦脊液IL-17水平，結(jié)果顯示，RRMS患者免疫治療前血清、腦脊液IL-17水平明顯高于健康人，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[12-13]，提示IL-17水平與RRMS也關(guān)系密切。IL-17可通過(guò)表達(dá)特異性趨化因子和調(diào)節(jié)一氧化氮等因子的表達(dá)參與炎癥和免疫反應(yīng)。本研究結(jié)果顯示，通過(guò)抑制IL-17水平的表達(dá)治療RRMS可能是難治性MS的新的治療思路之一。

IL-23在炎癥反應(yīng)中起重要作用。國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)，IL-23水平與MS的發(fā)病關(guān)系密切[1]。Calabresi等[5]報(bào)道MS患者血清、腦脊液IL-23水平明顯呈高表達(dá)，且IL-23水平與MS的臨床癥狀及病情嚴(yán)重度關(guān)系密切。Hidaka等[9]報(bào)道RRMS患者血清IL-23水平可高表達(dá)。本研究結(jié)果顯示，RRMS患者免疫治療前血清、腦脊液IL-23水平明顯高于健康人，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[14-15]，提示IL-23水平與RRMS關(guān)系密切。IL-23可通過(guò)促進(jìn)T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的表達(dá)調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，其可誘導(dǎo)激活相關(guān)炎性因子致MS發(fā)病，在MS的進(jìn)展中起重要作用。臨床中可嘗試通過(guò)調(diào)節(jié)IL-23水平治療RRMS。

甲潑尼龍可用于MS的急性發(fā)作，但對(duì)RRMS的治療效果相關(guān)國(guó)內(nèi)研究較少，療效不確切。國(guó)外Khalili等[1]報(bào)道糖皮質(zhì)激素治療可影響RRMS重要炎癥因子的表達(dá)。本研究對(duì)32例RRMS患者進(jìn)行甲潑尼龍治療，治療后檢測(cè)患者血清和腦脊液IL-23和IL-17水平。結(jié)果顯示，激素治療后，患者血清和腦脊液IL-23和IL-17水平均明顯下降。提示甲潑尼龍可通過(guò)抑制IL-23/IL-17等炎性因子的表達(dá)對(duì)RRMS炎癥反應(yīng)起一定的調(diào)節(jié)作用。但治療后血清和腦脊液IL-23、IL-17水平仍然高于健康人，提示IL-23/IL-17等的高表達(dá)可能與MS的復(fù)發(fā)相關(guān)。

本研究對(duì)RRMS患者血清、腦脊液IL-23、IL-17水平進(jìn)行相關(guān)性檢驗(yàn)，結(jié)果顯示，血清、腦脊液IL-23、IL-17水平之間均呈正相關(guān)，提示IL-23和IL-17密切相關(guān)，IL-23/IL-17軸與MS的發(fā)病有關(guān)，因此有必要對(duì)其進(jìn)一步深入研究。

綜上所述，RRMS患者血清、腦脊液IL-23、IL-17水平呈

現(xiàn)高表達(dá)，IL-23、IL-17在RRMS發(fā)病中起重要作用。甲潑尼龍治療RRMS，可抑制血清、腦脊液IL-23、IL-17的表達(dá)。通過(guò)對(duì)IL23/IL-17進(jìn)行深入研究，可為MS的治療提供一種新的思路。

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The Influence of Methylprednisolone on the Level of Interleukin-23,Interleukin-17 of Relapsing-remitting Multiple SclerosisLILan-xin,XUShi-cheng. (DepartmentofInternalMedicine-Neurology,BazhongCentralHospital,Bazhong636000,China)

Abstract:ObjectiveTo study the influence of methyl prednisolone on the level of interleukin(IL)-23,IL-17 of relapsing-remitting multiple sclerosis(RRMS).MethodsA total of 32 RRMS patients in Bazhong Downtown Hospital for diagnosis and treatment from Feb.2011 to Dec.2013 were selected as the observation group,and were treated with intravenous drip methylprednisolone 1.0 g/time,1 time/d for 3 d,after 3 days reduced to 0.5 g/time,1 time/d for 4 d,then prednisone tablets 60 mg/d wad given,gradually cut down(3 days later to 40 mg/d),then kept for 1-3 months.At the same time,30 cases of health check-up were selected as control group.Serum and cerebrospinal fluid(CSF) IL-23,IL-17 indicators of the observation group before and after treatment,and of the controls were detected,and correlation analysis was made.ResultsBefore treatment the serum IL-23 level,IL-17 level of the observation group were (688±90) ng/L,(88±10) ng/L,after treatment the serum IL-23 level,IL-17 level were (399±56) ng/L，(49±6) ng/L，while the serum IL-23 level,IL-17 level of the control group were (93±10) ng/L，(18±3) ng/L，after treatment the serum IL-23 level,IL-17 level of the observation group were significantly lower than before treatment,but both before and after treatment were significantly higher than the control group(all P<0.01).CSF level of IL-23,IL-17 of the observation group before treatment were (765±68) ng/L，(90±10) ng/L,after treatment were (321±19) ng/L，(49±6) ng/L,CSF level of IL-23,IL-17 of the control group were (86±8) ng/L，(18±3) ng/L，CSF level of IL-23,IL-17 of the observation group after treatment were significantly lower than before treatment,but both before and after treatment were significantly higher than the control group(all P<0.01).Serum IL-23 and IL-17 levels of the observation group before treatment were positively correlated(r=0.402，P=0.039); CSF IL -23 and IL-17 levels of the observation groups were positively correlated(r=0.516，P=0.004).ConclusionRRMS patients′serum and CSF IL-23,IL-17 levels present high expression.Methyl prednisolone treatment can inhibit the expression of RRMS IL-23,IL-17 levels in serum and CSF.

Key words:Multiple sclerosis; Methylprednisolone; Interleukin-23; Interleukin-17

收稿日期：2015-01-27修回日期：2015-06-03編輯：相丹峰

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.24.069

中圖分類(lèi)號(hào)：R741

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-2084(2015)24-4604-03