左旋氨氯地平聯(lián)合纈沙坦對血管內(nèi)皮的保護作用

崔逢文，司道遠，楊濟寧，楊萍

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左旋氨氯地平聯(lián)合纈沙坦對血管內(nèi)皮的保護作用

崔逢文，司道遠，楊濟寧，楊萍

目的探討左旋氨氯地平與纈沙坦聯(lián)合應(yīng)用對血管內(nèi)皮保護作用的影響。方法納入共30只實驗大鼠，分為五組；其中24只自發(fā)性高血壓大鼠（SHR），隨機分為左旋氨氯地平治療組（A組），纈沙坦治療組（B組），左旋氨氯地平+纈沙坦治療組（C組）及空白對照組（D組），每組6只；6只魏-凱二氏大鼠（WKY）設(shè)為正常對照組（E組）。藥物治療及觀察8周后測量無創(chuàng)血壓及左室射血分數(shù)的變化。處死大鼠，分離心肌組織，計算全心重量/體重（HW/BW）、左室重量/體重（LVW/BW）；提取血漿，ELISA方法測定內(nèi)皮型一氧化氮合酶（eNOS）、超氧化物歧化酶（SOD）、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）、白介素-6（IL-6)、腫瘤壞死因子-α（THF-α）。結(jié)果A、B、C與D組相比，A、B、C三組大鼠血漿NADPH、IL-6、THF-α、HW/BW 、LVW/BW明顯下降，SOD、eNOS明顯升高，其中C組變化更為顯著（177.3±3.8、5.1±0.8、47.9±3.1、83.9±3.9、127.0±9.7、5.2±0.4、3.3 ±0.2），提示兩種藥物聯(lián)合具有交互作用；血壓前后比較A、B、C三組均不同程度的下降，D組升高明顯；左室射血分數(shù)差值水平的比較，A、B、C三組的變化無臨床意義，D組下降明顯。結(jié)論左旋氨氯地平、纈沙坦都具有良好的血管內(nèi)皮保護作用；兩者聯(lián)合在血管內(nèi)皮的保護上具有協(xié)同作用。

高血壓；血管內(nèi)皮；左旋氨氯地平；纈沙坦；大鼠

高血壓病作為常見疾病，發(fā)病機制尚不完全清楚，其病理生理過程涉及交感神經(jīng)系統(tǒng)，腎素-血管緊張素系統(tǒng)，血管內(nèi)皮炎性改變等[1,2]。氧化應(yīng)激在高血壓中導(dǎo)致血管收縮，炎癥反應(yīng)，內(nèi)皮細胞受損，平滑肌增殖、肥大等靶器官損害。血管舒張過程中內(nèi)皮同血管平滑肌一樣，起重要作用，內(nèi)皮功能障礙被認為是高血壓的后果，同時也伴隨著高血壓的進展[3]。內(nèi)皮功能障礙是血管內(nèi)皮細胞的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變。其中一氧化氮生物利用度下降是重要的原因之一[4]。左旋氨氯地平和纈沙坦都是臨床上應(yīng)用廣泛的降壓藥物，具有較好的降血壓及內(nèi)皮保護功能。本文的宗旨在觀察左旋氨氯地平和纈沙坦對自發(fā)性高血壓大鼠聯(lián)合用藥后降血壓、保護血管內(nèi)皮的協(xié)同效果，并探討其可能的作用機制。

1 材料和方法

1.1 實驗動物SHR大鼠24只（雌、雄各12只），WKY大鼠6只（雌、雄各3只），北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供，體重190～220 g之間。

李霞是在含沙射影地指責景花廠挖大發(fā)廠的人。我有點心虛。我想起阿花的狡辯之詞，便有了底氣。我不卑不亢地說，李課長說得對，到底是自由競爭還是在惡意獵取，誰說了都不算，如果有空，勞課長大駕去景花廠看看便知道了。我站了起來，比畫著雙手說，大廠有大廠的強勢，小廠有小廠的優(yōu)越，人才流動完全取決于員工的就業(yè)取向，決不是可以人為逆轉(zhuǎn)的。李課長既然提到了自由競爭，我不妨說句實話，大發(fā)廠的優(yōu)勢在于工資待遇高，景花廠的優(yōu)勢在于工作環(huán)境好，團隊精神強。如果景花廠沒有優(yōu)勢，即使用繩子捆住員工的手腳，他們還是要跑的。

其他學生陸續(xù)舉手發(fā)言，舉例說明，汽車勻速行駛時路程隨時間的變化，購買蘋果時總價隨著數(shù)量的變化，都是勻速變化。

1.2 實驗試劑及藥品苯磺酸左旋氨氯地平（施惠達，2.5 mg/片，施慧達藥業(yè)集團有限公司）；纈沙坦膠囊（代文，80 mg/片，北京諾華制藥有限公司）；內(nèi)皮型一氧化氮合酶（eNOS）、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）、B型腦鈉肽（BNP）、白介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（THF-α） ELISA試劑盒，都購自美國ADL公司。

1.3 實驗器材臺式離心機，電子天平，酶標檢測儀，恒溫水箱，Phillips HD7多普勒彩超儀，ZS-Z無創(chuàng)尾動脈血壓測量儀，DJ動物潔凈飼養(yǎng)柜等。

B組（SHR、6只）：纈沙坦，100 mg/（kg·d）；

1.5 觀察指標

1.4 分組及給藥24只SHR大鼠，分為4組，6只WKY為1組。給藥時間為8周，8周后將大鼠麻醉處死，取心肌組織用于計算心臟體重/體重（mg/ g）及左室重量/體重（mg/g）。具體分組方案及給藥如下：

C組（SHR、6只）：苯磺酸左旋氨氯地平，2.5mg/（kg·d）+ 纈沙坦，50 mg/（kg·d）；

“先服務(wù)好月嫂，才能服務(wù)好客戶”是菩提果獨特的服務(wù)理念，在菩提果內(nèi)部的KEEP賦能體系中包括知識賦能（Knowledge）、效率賦能（Efficiency）、情感賦能（Emotion）、模式賦能（Pattern），通過KEEP賦能體系給好月嫂提供幫助，讓更多家庭受益！

D組（SHR、6只）：生理鹽水，1 ml/（kg·d）；

首先，傳播與翻譯涉及相似的要素。哈羅德·拉斯韋爾（Harold Dwight Lasswell）在傳播學奠基之作《社會傳播的結(jié)構(gòu)與功能》中提出著名的5W傳播模式：誰（who），說什么（what），通過什么渠道（in which channel），對誰說（to whom），產(chǎn)生什么效果（with what effect）。由此可見，傳播涉及的要素包括：傳播主體、傳播內(nèi)容、傳播媒介、傳播對象和傳播效果。而翻譯涉及的要素則主要包括：作者、原作、譯者、譯作和譯入語讀者。

[17]Jerry Norman.A preliminary report on the dialects of Mintung.Monumenta Serica 1977-1988 33.

A組（SHR、6只）：苯磺酸左旋氨氯地平，5mg/（kg·d）；

1.5.4用ELISA法檢測血漿SOD、eNOS、NADPH、IL-6、THF-α水平，具體操作方法根據(jù)試劑盒提供說明書執(zhí)行。

E組（WKY、6只）：生理鹽水，1 ml/（kg·d）。

1.5.2 心臟左室射血分數(shù)（LVEF）應(yīng)用Phillips HD7多普勒彩超儀。于實驗起始和治療第8周測量LVEF值。具體方法為將大鼠固定與模具上，乙醚麻醉，清理體毛備皮，應(yīng)用彩超儀及動物彩超探頭，以M型法測量心功能，記錄LVEF值。

1.5.3 心肌重構(gòu)指標（HW/BW，LVW/BW）：將大鼠麻醉后稱取體重（BW），處死后取心臟后稱全心重量（HW），分離左心室并稱取重量（LVW），并計算全心肥厚指數(shù)（HW/BW）及左心室肥厚指數(shù)（LVW/BW）。

1.5.1 大鼠血壓的變化測量大鼠尾動脈收縮壓（SBP）。應(yīng)用ZS-Z無創(chuàng)尾動脈血壓測量儀測定大鼠治療前血壓，至第8周測量大鼠尾動脈收縮壓。具體方法：以5只大鼠為一組，分別放入固定籠中，置于血壓測量儀中，尾部穿過連接換能器的測壓尾套，36.5℃預(yù)熱15～20 min，待大鼠平靜，尾動脈充分擴張至信號強度達標時加壓，至脈搏消失、緩慢放氣至脈搏恢復(fù)，感知信號變化，得到收縮壓數(shù)值，重復(fù)3次取平均值記錄。

1.6 統(tǒng)計方法實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（± s）表示，用SPSS19.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，組間的交互性比較，計量指標用單因素方差分析及析因設(shè)計方差分析檢驗法。P＜0.05表示有統(tǒng)計學差異，P＜0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 血壓和左室射血分數(shù)變化各組大鼠經(jīng)過不同治療后SBP下降，其中C組下降較A、B組顯著（P＜0.01），與E組相比無統(tǒng)計學差異。LVEF在A、B、C三組間未見統(tǒng)計學差異，D組數(shù)值與A、B、C、E四組差異性顯著（P＜0.01）（表1）。

對于本超高層建筑項目，同時作業(yè)的單元眾多、專業(yè)間頻繁交叉工作多，各專業(yè)及施工區(qū)域間的協(xié)同和搭接是關(guān)鍵。BIM技術(shù)以工作面為管理對象，自動統(tǒng)計各專業(yè)在同一時間點同一工作面的所有施工活動，以進行后續(xù)決策管理，如本工程地下室結(jié)構(gòu)施工階段流水劃分如圖22。

2.2 治療后各組比較對血漿SOD、eNOS、NADPH、IL-6、THF-α水平HW/BW和LVW/BW的影響。由于E組WKY大鼠對實驗結(jié)論無影響，將A、B、C、D四組比較并進行統(tǒng)計學分析。C組在各項指標中均表現(xiàn)出交互作用（表2）。

3 討論

目前對降壓方案的選擇上，降壓的幅度已不再是唯一的指標，降壓平穩(wěn)性及更多的靶器官保護作用都成為方案選擇的重要考量。藥物聯(lián)合方案不僅能發(fā)揮每個藥物各自的降壓優(yōu)勢，在機制上起到互補，同時能對不良反映進行相互抵消。鈣離子拮抗劑與血管緊張素受體阻滯劑的聯(lián)合用藥方案在降壓達標性和靶器官保護的有效性上，較單一藥物方案具有明確優(yōu)勢。左旋氨氯地平是我國自主產(chǎn)權(quán)的第三代鈣離子拮抗劑，纈沙坦在上世紀90年代即經(jīng)過美國FDA批準的高選擇性血管緊張素受體阻滯劑，兩者都是臨床上市多年，證據(jù)充足的降壓藥物，具有較好的降壓效果及血管內(nèi)皮保護功能。然而左旋氨氯地平+纈沙坦，尤其是兩者聯(lián)合后對血管內(nèi)皮作用的研究目前報道極少。通過對兩種藥物聯(lián)合對血管內(nèi)皮功能影響的深入研究，補充了聯(lián)合用藥理論基礎(chǔ)上的實驗數(shù)據(jù)，也為臨床用藥方案的選擇提供依據(jù)。

表2 左旋氨氯地平和纈沙坦對各項指標的影響

鈣離子拮抗劑（CCB）與血管緊張素受體阻滯劑（ARB）聯(lián)合用藥較單一藥物具有明確的優(yōu)勢[5]。①血壓波動性大能夠通過血管內(nèi)皮損傷，激活炎癥反應(yīng)，促進細胞凋亡引起心肌重構(gòu)等靶器官損害[6]，降壓平穩(wěn)性也是評價降壓藥物的標準之一。氨氯地平與纈沙坦的組合被證實能夠有效的降低血壓及控制血壓變異性（BPV）[7]，且較單獨應(yīng)用氨氯地平效果更好。左旋氨氯地平同樣有對BPV的調(diào)節(jié)作用[8]。②心率加快也是高血壓患者心血管事件的獨立危險因素。鈣離子拮抗劑能夠擴張血管，引起交感神經(jīng)興奮，使心率反射性加快。過快的心率將使動脈血管壁及血管內(nèi)皮承擔更多的沖擊損傷。ARB通過阻斷血管緊張素II生成的經(jīng)典血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（ACE）途徑和非經(jīng)典ACE途徑，減少腎上腺素釋放，降低了交感神經(jīng)張力，從而降低心率。③CCB對血管的擴張以外周細小動脈為主，可能出現(xiàn)足踝部水腫的副作用。雖然左旋氨氯地平副作用的發(fā)生率較其他CCB藥物明顯降低，但仍有出現(xiàn)水腫的負面報道[10]。ARB可擴張外周靜脈血管，增加外周血回流，促進局部血液循環(huán)，減少水腫的發(fā)生[11]。④纈沙坦與左旋氨氯地平都具有良好的抗炎、抗氧化作用：纈沙坦通過阻斷血管緊張素1型受體（AT-1），從而抑制單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）的表達[12]；還能夠通過抑制p22phox的表達減少胞內(nèi)活性氧簇（ROS）水平，進而抑制內(nèi)皮細胞血凝素樣氧化型低密度脂蛋白內(nèi)皮受體（LOX-1） mRNA轉(zhuǎn)錄和蛋白表達[13]。無論是氨氯地平還是左旋氨氯地平，對人內(nèi)皮細胞的炎性因子MCP-1表達的抑制表現(xiàn)一致[14,15]。實驗中左旋氨氯地平和纈沙坦組NADPH 、SOD、 IL-6、THF-α的抑制作用明顯，對炎癥因子的抑制，聯(lián)合用藥組上述標記物的下降更為明顯。⑤對于一氧化氮活性的調(diào)節(jié)，兩種藥物通過激肽系統(tǒng)表現(xiàn)出協(xié)同性：纈沙坦能夠抑制AT1受體、增強血管緊張素2型受體（AT-2）和Ang（1-7）-Mas系統(tǒng)的表達，使之與緩激肽β2受體結(jié)合增強，最終提高NO的水平[16-18]。氨氯地平促進NO的釋放被證實是緩激肽β2受體介導(dǎo)的[19]，其左旋手性結(jié)構(gòu)-左旋氨氯地平對血管內(nèi)皮的保護也是通過促進NO的生成及釋放[20]。雖然左旋氨氯地平?jīng)]有相應(yīng)的右旋結(jié)構(gòu)體，但有研究認為[21]左旋氨氯地平與氨氯地平在血管保護方面并沒有顯著差異。

本次實驗中治療組eNOS水平的上調(diào)以及聯(lián)合用藥組更優(yōu)的效果，再次證實了藥物對NO釋放的影響；而多組炎癥指標結(jié)果的降低，同樣驗證了聯(lián)合用藥對氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)的抑制。證實了左旋氨氯地平和纈沙坦聯(lián)合用藥在血管內(nèi)皮保護方面確實具有協(xié)同作用，為今后進一步的研究提出了部分理論依據(jù)。由于實驗的規(guī)模及條件所限，BPV、心率及足踝部水腫等指標并未納入檢測范圍，令實驗仍具有一定的局限性，但不能否認藥物聯(lián)合降壓的優(yōu)越性。關(guān)于左旋氨氯地平與纈沙坦聯(lián)合的最佳配比劑量以及氨氯地平與之的差異性有待于進一步探索；而這兩種藥物聯(lián)合應(yīng)用的實際效果，也有待于大規(guī)模的臨床實驗的證實。綜上所述，左旋氨氯地平、纈沙坦都具有良好的血管內(nèi)皮保護作用。左旋氨氯地平聯(lián)合纈沙坦方案對于血管內(nèi)皮保護優(yōu)于單一用藥，有協(xié)同作用。

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Protective effect of levamlodipine combining valsartan on vascular endothelial function

CUI Feng-wen, SI Dao-yuan, YANG Ji-ning, YANG Ping. Department of Cardiology, China-Japan Union Hospital, Jilin University, Changchun 130033, China.

YANG Ping, E-mail:pyang@jlu.edu.cn

ObjectiveTo discuss the protective effect of levamlodipine combining valsartan on vascular endothelial function.MethodsTest rats (n=24, with spontaneous hypertension) were divided into 5 groups: group A treated with levamlodipine, group B treated with valsartan, group C treated with levamlodipine combining valsartan, and group D (blank control group, each n=6), and other WKY rats (n=6) were chosen as group E (normal group). After treating and observing for 8 w, the changes of non-invasive blood pressure (NBP) and LVEF were observed. The ratio of heart weight to body weight (HW/BW), left ventricular weight to body weight (LVW/BW) were calculated after executed rats for separating myocardial tissue. The levels of endothelial nitric oxide synthase (eNOS), superoxide dismutase (SOD), reduced nicotinamide adenine dinucleotidephosphate (NADPH), interleukin-6 (L-6) and tumor necrosis factor-α (THF-α) were detected by using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).ResultsThe levels of NADPH, IL-6, THF-α, HW/BW and LVW/BW decreased significantly, and levels of SOD and eNOS increased significantly in group A, group B and group C compared with group D, and these changes were more significant in group C (177.3±3.8, 5.1±0.8, 47.9±3.1, 83.9±3.9, 127.0±9.7, 5.2±0.4, 3.3±0.2), which indicated that levamlodipine and valsartan had an interactive effect. NBP decreased in group A, group B and group C in varying degrees, and increased significantly in group D. LVEF had no significant changes in group A, group B and group C but decreased significantly in group D.ConclusionLevamlodipine and valsartan all have protective effects on vascular endothelial function, and they have an interactive effect when they are combined in clinical application.

Hypertension; Vascular endothelial; Levamlodipine; Valsartan; Rats

R544.1

A

1674-4055(2015)03-0396-04

2015-02-12）

（責任編輯：張靈）

130033 長春，吉林大學中日聯(lián)誼醫(yī)院心內(nèi)科

楊萍,E-mail:pyang@jlu.edu.cn

10.3969/j.1674-4055.2015.03.35