祖若玉 徐凌霞 楊敏 管曉琴 蔡亞蘭 李燕
(揚子江藥業(yè)集團質量管理部,江蘇 泰州 225321)
RP-HPLC測定地佐辛的含量
祖若玉 徐凌霞 楊敏 管曉琴 蔡亞蘭 李燕
(揚子江藥業(yè)集團質量管理部,江蘇 泰州 225321)
目的:建立地佐辛含量測定的反相高效液相色譜法(RP-HPLC)。方法:色譜柱為SHIMADZV VP-ODS(250 mm× 4.6 mm;5μm),流動相為乙腈-三乙胺溶液(20∶80),檢測波長:281 nm,流速:1.0 m L/min,柱溫:30℃,進樣量:20μL。結果:地佐辛在0.05~ 0.30 mg/m L范圍內線性關系良好,r=1.000 0;平均回收率為100.2%(RSD=1.0%)。結論:該法操作簡便、結果準確,可以用于地佐辛的定量分析。
反相高效液相色譜法;地佐辛;含量測定
地佐辛是一種新型強效阿片類鎮(zhèn)痛藥,用于緩解術后和癌癥等引起的中重度疼痛,與非甾體類消炎藥聯(lián)合應用于大手術后止痛,有良好的應用前景。本文參考原國家食品藥品監(jiān)督管理局YBH09172006(試行)質量標準和《中國藥典》[1]對測定地佐辛含量的方法進行了研究及各項驗證,結果表明反相高效液相色譜法(RP-HPLC)可以簡便、準確地測定地佐辛的含量。
Agilent1260型高效液相色譜儀,G1314B可變波長紫外檢測器,Chemstation化學工作站,梅特勒-托利多(Mettler-Toledo)XS205型電子天平,梅特勒-托利多(Mettler-Toledo)MP220型酸度計。地佐辛對照品(來源:原中國藥品生物制品檢定所,批號:171262-200901,含量:100%),乙腈為色譜純,其他制劑為分析純。地佐辛(批號:11100711,11101111,11101311,11102511,11110311,11110611)。
2.1 色譜條件
色譜柱:SHIMADZV VP-ODS(250 mm× 4.6 mm;5μm),流動相:乙腈-三乙胺溶液(取1 000 m L水,加2.5 m L三乙胺,用稀磷酸(1→5)調節(jié) pH至 3.2)(20∶80),流速:1.0 m L/min,檢測波長:281 nm,柱溫:30℃,進樣量:20μL。
2.2 對照品溶液的制備
取地佐辛對照品約20mg,精密稱定,置100m L的量瓶中,加流動相溶解并稀釋至刻度,搖勻,制成每1 m L中約含0.2 mg的溶液,即得。
2.3 供試品溶液的制備
取本品約20 mg,精密稱定,置100 m L的量瓶中,加流動相溶解并稀釋至刻度,搖勻,制成每1 m L中約含0.2 mg的溶液,即得。
2.4 專屬性試驗
按上述色譜條件,取對照品溶液、樣品溶液和溶劑各20μL,分別注入液相色譜儀。樣品溶液色譜圖中,在與對照品色譜圖相應的位置上,有相同色譜峰,保留時間均為16.95分鐘,而溶劑在此保留時間處無干擾。見圖1。
2.5 線性關系
取地佐辛對照品約20 mg,精密稱定,加流動相分別配制成含地佐辛濃度約為0.05,0.10,0.15,0.20,0.25,0.30 mg/m L的溶液,按上述色譜條件進行檢測分析,記錄峰面積,以峰面積(Y)為縱坐標,濃度(μg/m L)為橫坐標,進行線性回歸,繪制標準曲線,得地佐辛的回歸方程為:
Y=10 044.787 76X+2.469 21(r=1.000 0),
結果表明地佐辛在0.05~ 0.30 mg/m L范圍內線性良好。
2.6 精密度試驗
取地佐辛對照品溶液(0.201 4 mg/m L),進樣體積:20μL,重復進樣 6次,結果地佐辛峰面積RSD為0.1%。
2.7 重復性試驗
取地佐辛(批號:11100711)6份,按照“2.3”項下方法制備供試品溶液,按上述色譜條件進行測定。結果地佐辛的含量為100.14%(RSD=0.5%)。
2.8 穩(wěn)定性試驗
取“2.7”項下的供試品溶液1份,在室溫下放置,在不同時間段(0,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12 h)分別進樣測定,測得地佐辛峰面積的RSD為0.1%,說明供試品溶液在12小時內穩(wěn)定。
2.9 回收率試驗
取已知含量的地佐辛9份,分別加入精密稱定的約 0.4,0.5,0.6 mg的地佐辛對照品溶液各3份,混勻,按上述色譜條件分別進樣 20μL,測得峰面積值,計算回收率,結果見表1。
2.10 樣品含量測定
2.1 0.1按本方法檢測選不同批號(6批)的地佐辛,按照 “2.3”項下方法制備供試品溶液,按上述色譜條件進行測定,并按外標法計算樣品中地佐辛的含量,結果見表2。
2.1 0.2按原質量標準檢測取地佐辛約0.2 g,精密稱定,加冰醋酸20 m L溶解后,加結晶紫指示液1滴,用高氯酸滴定液(0.1 mol/L)滴定至溶液顯藍色,并將滴定結果用空白試驗校正。每1 m L高氯酸滴定液 (0.1 mol/L)相當于 24.54 mg的C16H23NO。計算地佐辛的含量,結果見表3。
圖1 HPLC圖譜
表1 地佐辛回收率試驗結果
表2 6批樣品地佐辛含量檢測結果 (%)
表3 6批樣品按原質量標準地佐辛含量檢測結果(%)
3.1 由2.10項可看出,按本方法檢測所得的結果與按原質量標準檢測所得的結果可比。
3.2 作者分別選取了不同比例的流動相,不同廠家和規(guī)格的色譜柱進行對比分析,并根據(jù)原國家食品藥品監(jiān)督管理局 YBH09172006(試行)有關物質檢測項下規(guī)定,選擇了最佳色譜條件色譜柱為SHIMADZV VP-ODS(250 mm×4.6 mm;5μm),流動相為乙腈-三乙胺溶液(20∶80),流速:1.0m L/min,柱溫:30℃,檢測波長:281 nm。
上述色譜條件下,RP-HPLC測定地佐辛的含量線性關系良好,精密度高,穩(wěn)定性好,準確可靠,可以用于地佐辛的定量分析。
[1] 國家藥典委員會.中國藥典2010年版(二部)[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010.
Content Determ ination of Dezocine by RP-HPLC
Zu Ruoyu,Xu Lingxia,Yang M in,Guan Xiaoqin,Cai Yalan,Li Yan (Quality Management Department of Yangtze River Pharmacy Group,Jiangsu Taizhou 225321,China)
Objective:To establish a method for the content determination of dezocine by reversed phase high-performance liquid chromatography(RP-HPLC)method.Methods:SHIMADZV VP-ODS(250 mm×4.6 mm;5μm)column was used w ith the mobile phase of acetonitrile three triethylam ine solution(20∶80), the detection wavelength was at 281 nm, the flow rate was 1 m L/m in,the column temperature was at 30℃,and the sample size was 20μL.Results:A good linear relationship of dezocine was w ithin the range of 0.05~ 0.30 mg/m L(r= 1.000 0),the average recovery rate was 100.2% (RSD=1.0%).Conclusion:The method is simple and accurate,and can be used for quantitative analysis of dezocine.
RP-HPLC;Dezocine;Determ ination of Content
10.3969/j.issn.1672-5433.2015.01.007
2014-07-28)
祖若玉,女,工程師,主管藥師。研究方向:藥物分析及標準研究。E-mail:648167921@qq.com