短暫性腦缺血發(fā)作患者血清HIF-1α、VEGF 的表達(dá)及與ABCD2 評分的相關(guān)性

李運(yùn)剛，李建軍，周雪梅

短暫性腦缺血發(fā)作(transient ischemia attack，TIA)是因各種原因?qū)е骂i動脈或椎基底動脈系統(tǒng)局灶性缺血引發(fā)的短暫性、可逆性神經(jīng)功能障礙。ABCD2 評分是一種簡單、有效地預(yù)測TIA 患者短期腦梗死發(fā)生概率的方法［1，2］。由于該評分僅包括年齡、血壓、主要癥狀及持續(xù)時間等臨床資料，未涉及相關(guān)實驗室檢測指標(biāo)，使其存在一定主觀性。因此，探索TIA 特異性的生物指標(biāo)，分析其與ABCD2 評分系統(tǒng)的相關(guān)性，對綜合評估TIA 患者預(yù)后及腦梗死發(fā)生風(fēng)險十分必要。低氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia-inducible factor-1，HIF-1α)是低氧誘導(dǎo)因子家族中最先發(fā)現(xiàn)的蛋白因子，腦組織低氧時，HIF-1α 表達(dá)顯著增加［3，4］。HIF-1α 主要通過調(diào)控下游靶基因參與潛在的腦保護(hù)作用。血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是HIF-1α 的靶基因之一，是血管生成的關(guān)鍵性生物活性因子，可以通過促進(jìn)血管再生、增加缺血腦組織的血流量發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用［5，6］。但關(guān)于TIA 患者血清HIF-1α 及VEGF 的表達(dá)及與ABCD2 評分的關(guān)系尚未見報道。據(jù)此，本文分析TIA 患者血清HIF-1α 及VEGF 表達(dá)的水平，探討其與不同等級ABCD2 評分的關(guān)系，為TIA 患者的病情監(jiān)測與評估提供新的途徑與方法。

1 資料與方法

1.1 研究對象 收集2013 年11 月-2014 年12 月在我院神經(jīng)內(nèi)科住院并經(jīng)頭部MRI、CT、頸動脈血管彩色多普勒超聲等檢查確診為TIA 的患者72 例，其中男43 例，女29 例，平均年齡(62.43 ±12.32)歲。所有患者均符合全國第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會議修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且均排除經(jīng)頭部MRI 或CT 證實為新發(fā)梗死病灶或為顱內(nèi)出血、感染、占位等其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病。TIA 組患者入院后計算ABCD2 評分，并進(jìn)行危險分級。評分標(biāo)準(zhǔn)［1，2］:(1)年齡≥60 歲，1 分;(2)TIA 發(fā)生后首次測量血壓的收縮壓≥140 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)或舒張壓≥90 mmHg，1 分;(3)單側(cè)肢體無力，2 分;言語障礙而不伴單側(cè)肢體無力，1 分;(4)TIA 癥狀持續(xù)時間≥60 min，2 分;持續(xù)時間為10～59 min，1 分;(5)糖尿病病史或入院后確診為糖尿病，1 分。根據(jù)ABCD2 評分將TIA 組患者分為低危亞組(0～3 分)39例和高危亞組(4～7 分)33 例。低危亞組與高危亞組年齡、性別、吸煙、飲酒、并發(fā)高血壓、糖尿病、冠心病等差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P ＞0.05)。對照組40例，其中男28 例，女12 例，平均年齡(61.56 ±12.46)歲，均為同期在我院體檢中心的查體者。TIA 患者與對照組性別、年齡、并發(fā)高血壓、糖尿病、冠心病等比較差異無顯著性(P ＞0.05)。

1.2 檢測方法 所有入選研究對象均空腹過夜后采集靜脈血3～5 ml，血標(biāo)本以3500 r/min 離心5 min，分離血清，-70℃保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附法統(tǒng)一測定血清HIF-1α 及VEGF 水平。人HIF-1α、VEGF 試劑盒購自上海將來生物制品公司。具體操作步驟嚴(yán)格按照說明書。所有血液標(biāo)本均在本人知情同意條件下獲得，并得到醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會批準(zhǔn)許可。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 用SPSS 17.0 軟件進(jìn)行，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示，組間比較采用t檢驗。運(yùn)用線性相關(guān)統(tǒng)計學(xué)方法進(jìn)行相關(guān)性分析，以P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TIA 組與健康對照組血清HIF-1α、VEGF水平的比較 與健康人對照組比較，TIA 患者血清HIF-1α、VEGF 水平［(457.87 ±99.68)、(876.32 ±297.45)pg/ml］明顯高于健康對照組［(160.46 ±76.28)、(313.64 ±218.47)pg/ml］，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P ＜0.01)。

2.2 TIA 患者低危亞組和高危亞組血清HIF-1α、VEGF 水平的比較 TIA 患者高危亞組血清HIF-1α、VEGF 水平［(582.69 ±139.52)、(1037.32±348.75)pg/ml］明顯高于低危亞組［(363.82 ±98.85)、(709.37 ±289.83)pg/ml］，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理差異顯著(P ＜0.01)。

2.3 TIA 患者血清HIF-1α、VEGF 水平與ABCD2 評分的關(guān)系 相關(guān)性分析表明，TIA 患者血清HIF-1α、VEGF 水平與ABCD2 評分成正相關(guān)(r=0.675，0.593，P 均＜0.01)。

3 討論

HIF-1α 是低氧誘導(dǎo)因子家族中最先發(fā)現(xiàn)的蛋白因子，組織低氧時，HIF-1α 表達(dá)顯著增加。HIF-1α 是蛋白HIF-1 亞基，受細(xì)胞內(nèi)氧分壓精細(xì)調(diào)節(jié)，因此HIF-1α 的含量能精確反映細(xì)胞內(nèi)氧分壓水平。HIF-1α 主要通過調(diào)控下游靶基因參與潛在的腦保護(hù)作用，可能和啟動低氧誘導(dǎo)下游元素基因的轉(zhuǎn)錄有關(guān)，其中就與促紅細(xì)胞生成素(EPO)和VEGF、血紅素氧化酶-1(HO-1)、轉(zhuǎn)鐵蛋白、一氧化氮合成酶(NOS)和 集 中 糖 酵 解 酶 基 因 的 活 化 有 關(guān)［3，7］。VEGF 是HIF-1α 的靶基因之一，是血管生成的關(guān)鍵性生物活性因子，可以通過促進(jìn)血管再生、增加缺血腦組織的血流量發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。HIF-1α 不僅能促進(jìn)VEGF 的轉(zhuǎn)錄活性，還能增加VEGF mRNA的穩(wěn)定性。由于HIF-1α 在正常腦組織不表達(dá)，當(dāng)腦缺血時機(jī)體通過上調(diào)HIF-1α 的表達(dá)來實現(xiàn)自我保護(hù)，而HIF-1α 是對缺氧缺血刺激反應(yīng)的基因，可作為腦組織對缺血缺氧反應(yīng)的重要信號來調(diào)控VEGF的表達(dá)。

研究表明HIF-1α、VEGF 顯著減少腦梗死體積、修復(fù)和保護(hù)缺血半暗帶神經(jīng)元，在缺血性腦血管病中起到神經(jīng)保護(hù)作用［3，4］。在TIA 患者中關(guān)于血清HIF-1α 及VEGF 水平表達(dá)的研究較少。本研究發(fā)現(xiàn)TIA 組患者血清HIF-1α、VEGF 水平明顯高于健康對照組，差異顯著(P ＜0.01)。ABCD2 評分＞3分組的血清HIF-1α、VEGF 水平高于ABCD2 評分≤3 分組，并且TIA 患者血清HIF-1α、VEGF 水平與ABCD2 評分呈現(xiàn)正相關(guān)。TIA 發(fā)作時腦組織處于急性缺血缺氧狀態(tài)，為適應(yīng)腦部的缺血缺氧，HIF-1α 表達(dá)明顯增加，同時HIF-1α 水平顯著升高時作用于VEGF 基因，并且HIF-1α 可加強(qiáng)VEGF 的mRNA 的穩(wěn)定性從而VEGF 表達(dá)明顯上升。ABCD2 評分簡單、易行，能較為全面、科學(xué)地評估TIA 患者發(fā)生腦梗死的風(fēng)險。因此通過檢測TIA 患者血清HIF-1α、VEGF 水平的變化，可以預(yù)估TIA 患者發(fā)生腦梗死的風(fēng)險。文獻(xiàn)報道［3，7］，HIF-1α 很可能在腦缺血耐受中發(fā)揮了重要作用，目前認(rèn)為，HIF-1α 主要通過調(diào)控下游靶基因參與腦缺血的產(chǎn)生保護(hù)作用。VEGF 是HIF-1α 的靶基因之一，是血管生成的關(guān)鍵性生物活性因子，可以通過促進(jìn)血管再生、增加缺血腦組織的血流量發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。HIF-1α可能是適應(yīng)腦缺血缺氧而產(chǎn)生的缺血預(yù)適應(yīng)的標(biāo)志物，起到腦保護(hù)性作用。在低氧狀態(tài)下，HIF-1α 可激活促紅細(xì)胞生成素(EPO)、VEGF、糖酵解酶等多種基因的轉(zhuǎn)錄，增加供氧，使機(jī)體耐受缺氧。在短暫性腦缺血預(yù)處理誘導(dǎo)的腦缺血耐受大鼠腦組織中發(fā)現(xiàn)，VEGF 水平明顯增高，提示VEGF 對腦缺血耐受的產(chǎn)生具有重要作用［8，9］。但由于HIF-1α 基因調(diào)節(jié)的下游因子種類繁多，功能復(fù)雜，具體是通過哪些信號通路產(chǎn)生保護(hù)作用，仍有待于研究。

綜上所述，HIF-1α 在機(jī)體缺氧條件下發(fā)生的病理生理反應(yīng)起核心調(diào)控作用，本研究發(fā)現(xiàn)TIA 患者血清HIF-1α 水平升高，可通過作用于VEGF 及其受體使其表達(dá)上調(diào)，血清HIF-1α、VEGF 水平與ABCD2 評分密切相關(guān)，可能成為評估TIA 患者病情風(fēng)險的實驗室指標(biāo)。

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