脂肪乳對生化項目檢測的影響分析

摘要：目的 在血清中人為加入不同濃度的脂肪乳，觀察其對常規(guī)生化檢驗項目結(jié)果的影響。方法 收集100例TG<2.26 mmol/L的健康體檢混合血清，取0.9 mL的混合血清加上0.1 mL的蒸餾水做對照組；0.9 mL的混合血清分別加上稀釋后不同濃度的脂肪乳做測量組。結(jié)果 當(dāng)混合脂肪乳的血清的TG濃度達到2.76時對TP、CKMB開始有正干擾，對HDL開始有負干擾；當(dāng)TG繼續(xù)上升到4.07時，開始對Glu、TC、HBDH有正干擾，對Cr、TB開始有負干擾；當(dāng)TG繼續(xù)上升到6.53時，開始對ALT、AST、Alb有正干擾，對Apoa1、Apob有負干擾；當(dāng)TG繼續(xù)上升到11.95時，對DB、Lp（a）、LDL有負干擾，對Alb有正干擾；當(dāng)TG繼續(xù)上升時，導(dǎo)致大部分指標(biāo)無法測出；脂肪乳對ALP、LDH、CHE、ADA、BUN、K、NA、CL、CO2無明顯的干擾。用高速離心15000 rpm 15 min混合了脂肪乳的血清，取下清測生化指標(biāo)，與對照組無明顯差異。結(jié)論 在實際工作中遇到脂濁標(biāo)本時，當(dāng)TG>2.26時對一些生化的指標(biāo)檢測有干擾，可以采取高速離心取下清測，以得到真值。

關(guān)鍵詞：脂濁；脂肪乳；生化指標(biāo)

在臨床工作中，我們經(jīng)常會遇到脂濁樣本。脂濁對生化檢驗結(jié)果造成的誤差不容忽視。為了加強檢驗質(zhì)量的控制有必要對脂濁在測定生化項目時的影響加以分析。本實驗用人為方法加入脂肪乳，以控制脂肪的濃度，觀察其對常規(guī)生化檢測項目的影響。

1資料與方法

1.1一般資料 DB、TG試劑來源于日本和光， ALT、CHE、LDL-C試劑上海豐匯， ALP北京柏定，TBA寧波美康， ADA浙江康特， GGT、LDH、UA、CK、CKMB、AMS、Bun上海德賽，以上都是雙試劑測定。ApoA1、ApoB來源于上海豐匯，免疫比濁法；AST、CO2上海豐匯，單試劑；TP北京柏定，終點法測定； LP（a）寧波美康，膠乳濁度法； GLU（GOD-POD法）、HBDH北京利德曼；TC德國AUTEC；HDL-C上海景源。脂肪乳華瑞制藥公司。采用OlympusAU5400自動生化分析儀器。

1.2方法 取當(dāng)天健康者體檢標(biāo)本中TG<2.26 mmol/L的血清作為測量用的混合血清。脂肪乳分別用蒸餾水1∶1，1∶2，1∶4，1∶8，1∶16，1∶32，1∶64，1∶128，1∶256，1∶512做倍比稀釋。取0.9 mL的混合血清加0.1ml的蒸餾水做對照組；0.9 mL的混合血清分別加入上述稀釋后不同濃度的脂肪乳做第一測量組；將混合了脂肪乳的血清用15000 rpm 15 min高速離心后取下清做第二測量組。

2結(jié)果

脂肪乳高速離心前后對常規(guī)生化檢測項目影響。脂肪乳對常規(guī)生化檢測項目影響各不相同，見表1。當(dāng)混合脂肪乳的血清的TG濃度達到2.76時對TP、CKMB開始有正干擾，對HDL開始有負干擾；當(dāng)TG繼續(xù)上升到4.07時，開始對Glu、TC、HBDH有正干擾，對Cr、TB開始有負干擾；當(dāng)TG繼續(xù)上升到6.53時，開始對Alb、ALT、AST有正干擾，對ApoA1、ApoB有負干擾；當(dāng)TG繼續(xù)上升到11.95時，對DB、Lp（a）、LDL有負干擾；當(dāng)TG繼續(xù)上升時，導(dǎo)致大部分指標(biāo)無法測出，對TBA、AMS有正干擾，對GGT、UA、CK有負干擾；脂肪乳對ALP、LDH、CHE、ADA、BUN、K、Na、Cl、CO2無明顯的干擾。當(dāng)高速離心后，15000 rpm 15 min離心后取下清測生化指標(biāo)，可以觀察到與對照組基本一致。

3討論

3.1干擾機制

3.1.1目前很多生化項目都是用比色、比濁等分析方法進行測定的，而脂濁對光線有一定的散射作用，因此脂濁血清的樣本空白吸光度值會升高，從而對吸光度產(chǎn)生正向干擾[1]。主要是由于懸浮在樣品中的極低密度脂蛋白（VLDL）引起所致。TP波長為546 nm。脂肪乳對其從1∶64開始有正干擾，原因是濁度對波長的干擾。Glu主波長520 nm，副波長600 nm。脂肪乳對其從1∶8開始是正干擾，原因是濁度在主波長520 nm左右處增加了吸光度。TC主波長505 nm，副波長700 nm。脂肪乳對其從1∶8開始是正干擾，原因是濁度在主波長505 nm左右處增加了吸光度。HBDH波長為340 nm，脂肪乳對其是正干擾，原因為脂肪乳在340 nm處有較高的吸光度。ALT、AST波長為340 nm，脂肪乳對其是正干擾，原因為脂肪乳在340 nm處有較高的吸光度。白蛋白的測定方法是BCG法，脂濁增加了色源物質(zhì)的干擾，對其造成正干擾。TBA主波長405 nm，負波長660 nm；AMS主波長405 nm。脂肪乳對二者均造成正干擾，原因是脂肪乳在主波長處增加了吸光度。

3.1.2血清中水分被不溶性的脂濁微粒所取代，因此除甘油三酯等少數(shù)項目以外，脂濁可以使大多數(shù)血清成分產(chǎn)生負誤差[2]。HDL-C波長為600 nm。脂肪乳對其從1∶16開始是負干擾，原因是濁度在600nm處未對吸光度造成干擾，而對其他波長造成干擾，造成對其為負干擾[3]。肌酐的測定方法受許多特異\"色源\"物質(zhì)的干擾，血清中的水分被不溶性的脂濁微粒所取代，對其造成負干擾。TB的測定方法是重氮法、DB的測定方法是釩酸氧化酶法，主波長是450 nm，負波長是546 nm，脂肪乳對其是負干擾，原因是二者主、副波長相距較小，濁度對二者的影響相似，甚至對副波長的影響更大。

3.1.3脂濁血清由于血清粘度加大及脂濁微粒的屏蔽效應(yīng)，可以減少抗原抗體結(jié)合的機率，從而對免疫比濁法產(chǎn)生一定的影響[4]。血清載脂蛋白A1、B是免疫投射比濁法，波長為340 nm。脂肪乳度其是負干擾，原因是脂肪乳與試劑中的抗體結(jié)合形成沉淀，降低了抗體的含量。脂濁血清由于血清粘度加大及脂濁微粒的屏蔽效應(yīng)，可以減少抗原抗體結(jié)合的機率，從而對免疫比濁法產(chǎn)生負影響。脂蛋白（a）的測定方法是膠乳濁度法，主波長為600 nm，反應(yīng)方向為向上。脂濁對光線有一定的散射作用，因此脂濁血清的樣本空白吸光度值會升高，導(dǎo)致本底吸光度過高，從而對吸光度產(chǎn)生負向干擾[1]。LDL主波長506 nm，副波長700 nm。脂濁對其是負干擾，其原因是脂濁對光線有一定的散射作用，因此脂濁血清的樣本空白吸光度值會升高，導(dǎo)致本底吸光度過高，從而對吸光度產(chǎn)生負向擾。

3.1.4脂濁使分析物分布呈非均一性，因此測定過程中的隨機誤差加大。在臨床過程中遇到脂濁嚴(yán)CKMB的測定方法是速率法，波長為340 nm。脂肪乳對其從1∶16開始是正干擾，原因為濁度在340 nm處增加了吸光度，對其造成正干擾。但是CK的方法也是速率法，波長也為340 nm，本次試驗中對CK造成了負干擾，其原因是脂濁使分析物分布呈非均一性，因此測定過程中的隨機誤差加大。

3.1.5由于電解質(zhì)的測定原理是電極法，故脂肪乳對K、Na、Cl沒有影響。

3.2消除方法

3.2.1中度脂濁的血清（TG<2.26 mmol/l），我們常常不需要對其進行特殊處理。

3.2.2對于重度脂濁血清（TG>2.26 mmol/l），由于樣本的本底吸光度過高，必須對樣本進行預(yù)處理[2]。具體方法有如下幾種：生理鹽水稀釋法；醚抽提法；靜置實驗；高速離心法；在本次試驗中已得到驗證，高速離心后能有效去除干擾。VITROS干化學(xué)分析儀利用特殊的多層薄膜技術(shù)，因其測試條有過濾功能，對于有些脂血標(biāo)本的測定很有用[5]。

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編輯/肖慧