溶血現(xiàn)象對臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的影響研究

摘要：目的 研究分析溶血現(xiàn)象對臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的影響。方法 選取我院2012年6月～2013年6月進(jìn)行常規(guī)體檢的70例志愿者，每位志愿者均抽取5ml靜脈血，然后分別注入到A1-A70、B1-B70共計(jì)140個試管當(dāng)中，將A1-A70試管內(nèi)的靜脈血?dú)w入到正常組，在室溫下進(jìn)行自然分離、規(guī)范離心。將B1-B70試管內(nèi)的靜脈血?dú)w入到對照組，進(jìn)行人工溶血、規(guī)范離心。對兩組血清標(biāo)本進(jìn)行生化檢驗(yàn)，觀察比較兩組臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目結(jié)果存在的差異。結(jié)果 兩組K+（鉀離子）、CHOL（總膽固醇）、LDH（乳酸脫氫酶）、ALT（谷丙轉(zhuǎn)氨酶）、AST（谷草轉(zhuǎn)氨酶）、ALP（堿性磷酸酶）結(jié)果比較，P<0.05具有顯著性差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩組GLU（葡萄糖）、UA（血尿酸）、Cr（肌酐）、BUN（尿素氮）、TG（三酰甘油）結(jié)果比較，無顯著性差異，P>0.05，具有可比性。結(jié)論 溶血現(xiàn)象對臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目中K+（鉀離子）、CHOL（總膽固醇）、LDH（乳酸脫氫酶）、ALT（谷丙轉(zhuǎn)氨酶）、AST（谷草轉(zhuǎn)氨酶）、ALP（堿性磷酸酶）的影響較明顯，因此臨床對血液標(biāo)本進(jìn)行采集、存儲、檢驗(yàn)需要規(guī)范操作，防止溶血現(xiàn)象發(fā)生，以提高臨床生化檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)度。

關(guān)鍵詞：溶血現(xiàn)象；臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目；影響研究

溶血現(xiàn)象指的是因真空采血過程中負(fù)壓過大、血清離心分離時轉(zhuǎn)速過高、水浴箱的溫度過高等多種因素的影響，導(dǎo)致紅細(xì)胞發(fā)生破裂，使紅細(xì)胞中的血紅蛋白逸出的一種現(xiàn)象[1]。血樣標(biāo)本出現(xiàn)溶血現(xiàn)象屬于臨床生化檢驗(yàn)中較為常見的一種干預(yù)檢驗(yàn)結(jié)果的因素，可將血樣標(biāo)本出現(xiàn)溶血現(xiàn)象分為體外溶血和體內(nèi)溶血兩種，其中體外溶血是指因強(qiáng)力機(jī)械性震動、水浴溫度過高、突然低溫冷凍（零下20℃～25℃）、突然化凍、抽血過程中負(fù)壓較大等物理因素，血樣接觸到表面活性劑等化學(xué)因素，遺傳病所致紅細(xì)胞的脆性增加等代謝因素導(dǎo)致的溶血。體內(nèi)溶血是指因大血管手術(shù)后、人工心臟瓣膜等物理因素，惡性瘧疾等化學(xué)因素，藥物毒性反應(yīng)因素導(dǎo)致的溶血。臨床血液生化檢驗(yàn)中隨著真空管采血的廣泛應(yīng)用，致使血樣標(biāo)本溶血現(xiàn)象的發(fā)生率也越來越高。血樣標(biāo)本溶血現(xiàn)象破壞了紅細(xì)胞、血小板、白細(xì)胞等細(xì)胞，并將細(xì)胞內(nèi)的某些成分釋放而出，對臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的結(jié)果造成了嚴(yán)重影響[2]。本文旨在研究分析溶血現(xiàn)象對臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的影響，以期為提高臨床生化檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)度和準(zhǔn)確性提供參考，具體報(bào)告如下：

1資料與方法

1.1一般資料 選取我院2012年6月～2013年6月進(jìn)行常規(guī)體檢的70例志愿者，其中男性志愿者36例，女性志愿者34例。年齡18歲～55歲，平均年齡為（38.0±9.8）歲。每位志愿者均抽取5ml靜脈血，然后分別注入到A1-A70、B1-B70共計(jì)140個試管當(dāng)中，將A1-A70試管內(nèi)的靜脈血?dú)w入到正常組，在室溫下進(jìn)行自然分離，靜置30min后，放入轉(zhuǎn)速為1200轉(zhuǎn)/min的離心機(jī)內(nèi)，進(jìn)行10min規(guī)范離心，然后將血清分離，取血清標(biāo)本1ml待檢。將B1-B70試管內(nèi)的靜脈血?dú)w入到對照組，進(jìn)行人工溶血后，放入轉(zhuǎn)速為1200轉(zhuǎn)/min的離心機(jī)內(nèi)，進(jìn)行10min規(guī)范離心，然后將血清分離，取血清標(biāo)本1ml待檢。

1.2方法 對兩組血清標(biāo)本進(jìn)行生化檢驗(yàn)，使用電解質(zhì)分析儀對兩組血清標(biāo)本的K+（鉀離子）的濃度進(jìn)行檢驗(yàn)，使用全自動生化分析儀對兩組血清標(biāo)本的GLU（葡萄糖）、UA（血尿酸）、Cr（肌酐）、BUN（尿素氮）、TG（三酰甘油）、CHOL（總膽固醇）、LDH（乳酸脫氫酶）、ALT（谷丙轉(zhuǎn)氨酶）、AST（谷草轉(zhuǎn)氨酶）、ALP（堿性磷酸酶）等生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的濃度進(jìn)行檢驗(yàn)，詳細(xì)記錄兩組各項(xiàng)生化檢驗(yàn)項(xiàng)目結(jié)果，生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的結(jié)果取平均值，觀察比較兩組臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目結(jié)果存在的差異。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)結(jié)果采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析處理，計(jì)數(shù)資料用（ x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，以P<0.05為具有明顯差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

兩組血清標(biāo)本臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的結(jié)果比較，見表1。

由表1可見，兩組K+（鉀離子）、CHOL（總膽固醇）、LDH（乳酸脫氫酶）、ALT（谷丙轉(zhuǎn)氨酶）、AST（谷草轉(zhuǎn)氨酶）、ALP（堿性磷酸酶）結(jié)果比較，P<0.05具有顯著性差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩組GLU（葡萄糖）、UA（血尿酸）、Cr（肌酐）、BUN（尿素氮）、TG（三酰甘油）結(jié)果比較，無顯著性差異，P>0.05，具有可比性。

3討論

臨床生化檢驗(yàn)工作中，血液標(biāo)本出現(xiàn)溶血現(xiàn)象是干擾臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目結(jié)果的常見因素，發(fā)生溶血現(xiàn)象即多種因素作用下血液中的紅細(xì)胞發(fā)生破裂，導(dǎo)致紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白逸出的一種現(xiàn)象。發(fā)生溶血現(xiàn)象的原因主要包括真空采血操作過程中的負(fù)壓過大、水浴箱內(nèi)的溫度較高、標(biāo)本進(jìn)行離心分離時的轉(zhuǎn)速過高等[3]。溶血現(xiàn)象在影響血液臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目結(jié)果的首要因素，具體分為兩種情況，即體外溶血和體內(nèi)溶血。溶血現(xiàn)象可發(fā)生在不同環(huán)境、不同環(huán)境。體外機(jī)械性破壞因素主要包括抽血操作過程中負(fù)壓較大、水浴的溫度過高、冷凍、振蕩等因素，體外化學(xué)性溶血因素主要包括表面活性劑接觸因素[4]。體內(nèi)物理類溶血因素主要包括大血管手術(shù)史和人工心臟瓣膜因素，體內(nèi)化學(xué)類溶血因素主要包括惡性瘧疾等因素，以及部分藥物產(chǎn)生的毒性作用也屬于體內(nèi)溶血因素。血液標(biāo)本出現(xiàn)溶血現(xiàn)象和采集血液的方式存在直接聯(lián)系，目前普遍使用真空管的采血方式進(jìn)行采血，也是導(dǎo)致血液標(biāo)本溶血現(xiàn)象發(fā)生率增加的直接原因。體外溶血現(xiàn)象與體內(nèi)溶血現(xiàn)象之間存在一定差異，主要表現(xiàn)為體外溶血現(xiàn)象發(fā)生后，臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目中的K+（鉀離子）、LDH（乳酸脫氫酶）、Hb（血紅蛋白）的濃度均會出現(xiàn)改變。體內(nèi)溶血現(xiàn)象發(fā)生后，臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目中的K+（鉀離子）的濃度不會發(fā)生改變，其余的GLU（葡萄糖）、UA（血尿酸）、Cr（肌酐）、BUN（尿素氮）、TG（三酰甘油）、CHOL（總膽固醇）、LDH（乳酸脫氫酶）、ALT（谷丙轉(zhuǎn)氨酶）、AST（谷草轉(zhuǎn)氨酶）、ALP（堿性磷酸酶）等生化檢驗(yàn)項(xiàng)目均會發(fā)生改變。此外，在臨床生化檢驗(yàn)的操作過程中，如推射血液注射器的力度過大，則會使試管內(nèi)出現(xiàn)大量氣泡，發(fā)生溶血現(xiàn)象[5]。如對各種血液標(biāo)本混均的力度過大，也會發(fā)生溶血現(xiàn)象。如血液標(biāo)本采集時出現(xiàn)進(jìn)針不準(zhǔn)的情況，也會發(fā)生溶血現(xiàn)象。溶血現(xiàn)象影響血液臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目結(jié)果的機(jī)理主要包括以下幾點(diǎn)：①在血液內(nèi)紅細(xì)胞中的血紅蛋白逸出后，可產(chǎn)生過氧化物酶的催化特性和非特異性吸附作用，引起生化檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)誤差。②在血液內(nèi)紅細(xì)胞中的腺苷酶逸出后，可對三磷酸腺苷等肌酸類酸的正常轉(zhuǎn)化酶作用產(chǎn)生直接影響，出現(xiàn)紅細(xì)胞外液反應(yīng)，引起生化檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)誤差。③在血液內(nèi)紅細(xì)胞破裂后，產(chǎn)生稀釋作用，對生化檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響。第四，在血液內(nèi)紅細(xì)胞中的血紅蛋白逸出后，對生化檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生直接影響[6]。

溶血現(xiàn)象對生化檢驗(yàn)項(xiàng)目結(jié)果的影響程度，血液標(biāo)本發(fā)生溶血現(xiàn)象后，生化檢驗(yàn)項(xiàng)目中蛋白的檢驗(yàn)結(jié)果會最先出現(xiàn)明顯的改變，這與血紅蛋白（Hb）從紅細(xì)胞中釋放存在直接關(guān)系。血液標(biāo)本發(fā)生溶血現(xiàn)象后，LDH（乳酸脫氫酶）的檢驗(yàn)結(jié)果會出現(xiàn)較大改變，這是由于紅細(xì)胞和血小板內(nèi)的LDH（乳酸脫氫酶）含量高出血漿中LDH含量180倍，所以當(dāng)紅細(xì)胞和血小板內(nèi)的物質(zhì)逸出后，LDH（乳酸脫氫酶）的含量會明顯上升。紅細(xì)胞內(nèi)AST（谷草轉(zhuǎn)氨酶）的活性高出血漿內(nèi)AST（谷草轉(zhuǎn)氨酶）的活性30倍，所以當(dāng)紅細(xì)胞內(nèi)AST（谷草轉(zhuǎn)氨酶）逸出后，AST（谷草轉(zhuǎn)氨酶）含量會明顯上升。同時，GGT（谷轉(zhuǎn)氨酶轉(zhuǎn)肽酶）會受到溶血現(xiàn)象的影響，對血紅蛋白（Hb）產(chǎn)生直接的影響。此外，血液標(biāo)本中的K+（鉀離子）與血清紅細(xì)胞中的K+（鉀離子）的含量相差20倍，所以紅細(xì)胞破裂后，K+（鉀離子）進(jìn)入到血清，K+（鉀離子）的含量會明顯上升。據(jù)相關(guān)研究顯示，溶血現(xiàn)象發(fā)生后生化檢驗(yàn)項(xiàng)目中的GLU（葡萄糖）水平下降和血紅蛋白（Hb）直接葡萄糖具有的氧化酶作用無關(guān)。發(fā)生GLU（葡萄糖）水平微弱下降的原因，可能與以下兩方面原因有關(guān)，一方面是紅細(xì)胞破裂后，紅細(xì)胞內(nèi)的液體與濃度極低物質(zhì)進(jìn)入到血清內(nèi)，對血清產(chǎn)生稀釋作用，增加了血清的體積，降低了原來成分的濃度。另一方面是紅細(xì)胞破裂后，可能產(chǎn)生了系列反應(yīng)，對GLU（葡萄糖）水平產(chǎn)生直接影響，但GLU（葡萄糖）水平下降不明顯。另外，血溶現(xiàn)象對UA（血尿酸）、Cr（肌酐）、TG（三酰甘油）水平的影響較小，一方面原因是紅細(xì)胞破裂對血清內(nèi)的UA（血尿酸）、Cr（肌酐）、TG（三酰甘油）水平影響較小，另一方面原因是影響上升指標(biāo)的因素相抵，所以檢驗(yàn)結(jié)果變化不明顯[7]。

血液標(biāo)本臨床生化檢驗(yàn)過程中，要積極、有效、科學(xué)的預(yù)防溶血現(xiàn)象發(fā)生。在采血操作的過程中，要按照規(guī)范流程嚴(yán)格操作，采血器具要進(jìn)行干熱滅菌處理，保持潔凈、干燥。在采血時要對止血帶的松緊度進(jìn)行控制，預(yù)防止血帶過緊、過松出現(xiàn)血氧缺氧、止血不利。在進(jìn)針出現(xiàn)回血后，應(yīng)將注射器的活塞緩慢拔除。將采集到的血液標(biāo)本注入試管的操作要緩慢，防止注入速度過快，出現(xiàn)血泡發(fā)生血細(xì)胞破裂。采集血液標(biāo)本后因在室溫下進(jìn)行自然分離和自然凝集，離心時離心機(jī)的轉(zhuǎn)速應(yīng)控制在1000～12000轉(zhuǎn)/min。嚴(yán)禁將血液標(biāo)本放置在冷凍室，以免出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。嚴(yán)禁將血液標(biāo)本長時間放置，在采集處理后應(yīng)盡快送檢。避免血液標(biāo)本接觸到消毒液、化學(xué)試劑等物質(zhì)，防止溶血現(xiàn)象發(fā)生。如血液標(biāo)本發(fā)生溶血現(xiàn)象，應(yīng)立即查找原因，分析溶血類型，并安排再次進(jìn)行血液標(biāo)本采集。

此外，要求血液標(biāo)本的采集人員、處理人員、檢驗(yàn)人員具有豐富的操作檢驗(yàn)，盡量一次完成血液標(biāo)本采集[8]。

綜上所述，溶血現(xiàn)象對臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目中K+（鉀離子）、CHOL（總膽固醇）、LDH（乳酸脫氫酶）、ALT（谷丙轉(zhuǎn)氨酶）、AST（谷草轉(zhuǎn)氨酶）、ALP（堿性磷酸酶）的影響較明顯，因此臨床對血液標(biāo)本進(jìn)行采集、存儲、檢驗(yàn)需要規(guī)范操作，防止溶血現(xiàn)象發(fā)生，以提高臨床生化檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)度。

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