ELISA檢測(cè)室內(nèi)質(zhì)控失控原因分析及處理

摘要：目的 探討ELISA檢測(cè)室內(nèi)質(zhì)控失控的原因分析及處理措施。方法 統(tǒng)計(jì)和分析ELISA檢測(cè)2010～2012年室內(nèi)質(zhì)控失控原因及處理結(jié)果。結(jié)果 在9658次試驗(yàn)中，共發(fā)生室內(nèi)質(zhì)控失控80次，比例為0.83%，失控原因分別為：試劑原因18次；質(zhì)控品原因20次；人為原因15次；儀器原因18；環(huán)境原因4次；其他原因5次。結(jié)論 通過(guò)分析，ELISA檢測(cè)室內(nèi)質(zhì)控失控的原因以試劑、質(zhì)控品、儀器設(shè)備、人為因素為主，為減少失控的發(fā)生應(yīng)提高工作人員的責(zé)任心，加強(qiáng)人員培訓(xùn)，嚴(yán)格執(zhí)行SOP文件，增強(qiáng)關(guān)鍵點(diǎn)的控制，同時(shí)加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室的硬件建設(shè)，使檢測(cè)結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。

關(guān)鍵詞：ELISA；室內(nèi)質(zhì)控；失控

臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理的第一要素是選擇和執(zhí)行適當(dāng)?shù)氖覂?nèi)質(zhì)量控制（Internal quality control，IQC）程序，例如依據(jù)測(cè)定項(xiàng)目的質(zhì)量要求和方法特點(diǎn)選擇統(tǒng)計(jì)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)、控制規(guī)則和質(zhì)控品的數(shù)目，并嚴(yán)格執(zhí)行IQC程序以提高IQC的質(zhì)量[1]。筆者通過(guò)對(duì)室內(nèi)質(zhì)控中的失控情況處理及失控原因和處理方法作一探討。

1 資料與方法

1.1試劑 HBsAg 、抗-HCV、抗-HIV、梅毒抗體，用ELISA法，試劑盒由北京萬(wàn)泰生物技術(shù)有限公司提供。所有試劑均通過(guò)中國(guó)藥品生物制品檢定所批批檢，并在有效期內(nèi)使用。質(zhì)控品由北京康徹思坦提供。

1.2儀器 TECAN酶標(biāo)儀、TECAN洗板機(jī)、孵育箱、10-300ul微量移液器。

1.3質(zhì)控品使用前確認(rèn) 新批號(hào)質(zhì)控品購(gòu)入后，應(yīng)在使用前進(jìn)行對(duì)應(yīng)項(xiàng)目的使用前確認(rèn)。使用新批號(hào)質(zhì)控品平行檢測(cè)24孔，其中各孔S/CO值應(yīng)>1，S/CO均值在1.5～4，批內(nèi)CV%≤15%，即為有效。

1.4質(zhì)控圖的制作方法 采用Levey-Jennings質(zhì)控圖法[2]。每次試驗(yàn)前，將質(zhì)控品從冰箱取出，平衡至室溫狀態(tài)，隨同常規(guī)標(biāo)本一起檢測(cè)，連續(xù)測(cè)定20次，以20次質(zhì)控血清的結(jié)果為依據(jù)，計(jì)算出平均值（x） 和標(biāo)準(zhǔn)差（s），繪制Levey-Jennings質(zhì)控圖。

1.5室內(nèi)質(zhì)控判斷標(biāo)準(zhǔn) 試劑盒自帶的陰陽(yáng)性對(duì)照檢測(cè)結(jié)果符合試劑盒要求，室內(nèi)質(zhì)控品S/CO值應(yīng)>1，12s判斷為\"告警\"、 22s、R4s 、41s、10X、10T判斷為\"失控\"。

2 結(jié)果

2.1試劑因素引起的失控原因 ①不同批號(hào)試劑混用；②試劑保存不當(dāng)，失效；③試劑過(guò)期。

2.2質(zhì)控品引起的失控原因 ①質(zhì)控品保存不當(dāng)造成污染、變質(zhì)；②質(zhì)控品密封不好，水分揮發(fā)；③質(zhì)控品開(kāi)啟時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或反復(fù)凍融使效價(jià)降低；④質(zhì)控品批號(hào)不一致：⑤質(zhì)控品過(guò)期。

2.3儀器引起的失控原因 ①移液器未經(jīng)校準(zhǔn)或校準(zhǔn)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；②移液器吸入或排出過(guò)快，造成加樣或加試劑不準(zhǔn)；③洗板不干凈；④酶標(biāo)儀比色不準(zhǔn)確，光源燈能量減弱；⑤比色杯污染。

2.4人為原因 ①試劑擺放位置錯(cuò)誤；②質(zhì)控品擺放位置錯(cuò)誤；③質(zhì)控品錯(cuò)加、漏加、少加；④設(shè)置Cotoff公式錯(cuò)誤，或選擇比色波長(zhǎng)不正確。見(jiàn)表1。

3 討論

失控原因的查找并無(wú)固定模式。一般原則是由易到難，由近到遠(yuǎn)[3]。檢測(cè)人員如發(fā)現(xiàn)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)違背了質(zhì)控規(guī)則，應(yīng)簡(jiǎn)單迅速回顧整個(gè)操作過(guò)程，分析查找最可能發(fā)生誤差的原因，對(duì)于處于\"告警\"的質(zhì)控值可以逐項(xiàng)排查實(shí)驗(yàn)各個(gè)環(huán)節(jié)，若未查找到明顯的告警原因，可以發(fā)出該批次檢測(cè)報(bào)告，并繼續(xù)跟蹤下一批次實(shí)驗(yàn)質(zhì)控，作好相應(yīng)告警記錄。若下一批次實(shí)驗(yàn)質(zhì)控再次出現(xiàn)12s則違背22s規(guī)則，該批次實(shí)驗(yàn)按照失控處理。對(duì)于處于\"失控\"的質(zhì)控值應(yīng)填寫(xiě)失控報(bào)告單，上報(bào)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人，經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)的影響因素會(huì)影響到患者標(biāo)本的檢驗(yàn)結(jié)果，則需同時(shí)重新檢測(cè)質(zhì)控品和患者標(biāo)本。

對(duì)失控原因的分析是發(fā)現(xiàn)誤差來(lái)源的途徑，對(duì)失控的處理方法則是糾正誤差的關(guān)鍵。失控原因主要由試劑、質(zhì)控品、儀器、人為因素引起，因此常規(guī)操作中應(yīng)注意各環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制。由于試劑引起失控的處理方法：①更換或添加試劑時(shí)，檢查有效期，注意不同批號(hào)試劑不能混用；②嚴(yán)格按要求保存試劑，防止試劑變質(zhì)，使用符合要求的蒸餾水配制試劑，嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。由于質(zhì)控品引起失控的處理方法：①每天實(shí)驗(yàn)前，常規(guī)確認(rèn)質(zhì)控品的批號(hào)、效期、種類(lèi)、規(guī)格；②質(zhì)控品不能反復(fù)凍融；③融解后的質(zhì)控品應(yīng)放在2℃～8℃保存，使用應(yīng)≤7d，防止污染。由于儀器設(shè)備引起失控的處理方法：①?lài)?yán)格執(zhí)行儀器設(shè)備的使用及維護(hù)規(guī)程；②經(jīng)大型維修或維護(hù)后的儀器設(shè)備使用前應(yīng)進(jìn)行確認(rèn)，保證性能達(dá)到預(yù)期要求；③儀器設(shè)備應(yīng)定期校準(zhǔn)。由于人為操作因素引起失控的處理方法：①加強(qiáng)考核，提高實(shí)驗(yàn)室人員的工作責(zé)任心；②加強(qiáng)培訓(xùn)，提高工作人員的業(yè)務(wù)素質(zhì)；③設(shè)置Cotoff公式錯(cuò)誤，或選擇比色波長(zhǎng)不正確，未超過(guò)比色時(shí)間，可糾正錯(cuò)誤后重新比色，不必對(duì)質(zhì)控品進(jìn)行復(fù)檢；如果超過(guò)了比色時(shí)間，則應(yīng)重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)（包括質(zhì)控品和患者標(biāo)本）。

參考文獻(xiàn)：

[1]Westgard JO.Internal quality control：planning and implementation strategies[J].Ann Clin Biochem，2003，40（Pt6）：593-611.

[2]Cubie HA，Moore C，Waller M，et al.The development of a quality assurance progrsmme for HPV testing within the UK HNS cervical screening LBC/HPV studies[J].J Clin Virol，2005，33（4）：287-292.

[3]葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第4版，南京：東南大學(xué)出版社，2006：201-202.

編輯/哈濤