人體軟組織推斷年齡的研究進(jìn)展

摘要：年齡推斷一直是法醫(yī)學(xué)實(shí)踐中需要解決的重要問(wèn)題之一。本文綜述了人體軟組織推斷年齡的研究進(jìn)展，重點(diǎn)闡述了根據(jù)人體軟組織形態(tài)結(jié)構(gòu)、軟組織內(nèi)生化物質(zhì)改變進(jìn)行年齡推斷，并對(duì)人體軟組織推斷年齡在法醫(yī)學(xué)實(shí)踐中的應(yīng)用前景進(jìn)行了展望。

關(guān)鍵詞：年齡推斷；法醫(yī)學(xué)；軟組織

在法醫(yī)學(xué)實(shí)踐中，經(jīng)常遇到無(wú)名尸體和碎尸案件，對(duì)其進(jìn)行年齡推斷是個(gè)人識(shí)別和同一認(rèn)定的重要證據(jù)之一。目前，根據(jù)骨骼、牙齒等人體硬組織的形態(tài)學(xué)參數(shù)或組織內(nèi)生化物質(zhì)改變的相關(guān)信息進(jìn)行分析，可以推斷出較為準(zhǔn)確的個(gè)體年齡信息，但遇到碎尸案件中僅存留的部分軟組織，將如何推斷其年齡是法醫(yī)學(xué)需要解決的重要難題之一。近年來(lái)，分子生物學(xué)的快速發(fā)展和高科技技術(shù)在法醫(yī)學(xué)中的廣泛應(yīng)用，為人體軟組織進(jìn)行年齡推斷提供了新的思路和方法，本文現(xiàn)對(duì)近年來(lái)根據(jù)人體軟組織進(jìn)行年齡推斷的各類研究進(jìn)行綜述，供廣大法醫(yī)工作者在實(shí)踐中進(jìn)行參考。

1 根據(jù)人體軟組織形態(tài)結(jié)構(gòu)推斷年齡

1.1皮膚表面形態(tài)與年齡相關(guān)性 皮膚是人體的一面鏡子，可以直接反映出個(gè)體的健康和年齡狀況。日本學(xué)者寺西范年[1]根據(jù)同一體表不同部位的皮膚組織的平行帶值和網(wǎng)突起值的變化進(jìn)行研究，得出胸部的皮膚平行帶值隨個(gè)體年齡的增大而增大，而網(wǎng)突起值隨個(gè)體年齡的增大而減小，其他19個(gè)部位的皮膚無(wú)此規(guī)律性。國(guó)內(nèi)劉英姿等[2]對(duì)103例年齡段在0～79歲非正常死亡尸體不同部位的皮膚組織樣本（排除有皮膚病、燒死、溺死、腐敗尸體及過(guò)度干燥尸體的皮膚組織樣本）進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)人體的不同部位皮膚表皮厚度不一，隨著年齡的變化，表皮厚度也會(huì)相應(yīng)變化，年齡越大表皮越??；人體基底膜、釘突值和乳突皮膚面積與個(gè)體年齡的變化呈負(fù)相關(guān)性。

1.2皮膚紋理與年齡相關(guān)性 計(jì)算機(jī)技術(shù)及圖像處理技術(shù)的廣泛應(yīng)用，通過(guò)皮膚紋理與年齡相關(guān)性的研究越來(lái)越多，此方法具有無(wú)損傷、無(wú)輻射、檢測(cè)年齡范圍大等優(yōu)點(diǎn)，有望成為年齡推斷的常規(guī)方法之一。彭洪洪等[3]通過(guò)皮膚紋理特征的皮膚分類算法研究，發(fā)現(xiàn)皮膚紋理隨著年齡的增長(zhǎng)而變深變粗，節(jié)點(diǎn)數(shù)在人到中年之后變少變稀疏；通過(guò)皮膚紋理的深淺、節(jié)點(diǎn)數(shù)及紋理粗細(xì)等主要特征，進(jìn)行少年組、青年組、中年組的分類研究，正確率達(dá)到了96.7%。賀向前等[4]根據(jù)\"皮膚表面紋理中隱藏年齡信息\"的理論出發(fā)，建立基于皮膚紋理圖像的年齡評(píng)估系統(tǒng)，此法擺脫了傳統(tǒng)運(yùn)用骨骼檢測(cè)年齡的習(xí)慣，為法醫(yī)學(xué)實(shí)踐中年齡推斷提供了新的檢測(cè)方法。

1.3其他軟組織形態(tài)結(jié)構(gòu)與年齡相關(guān)性 除皮膚外，其他軟組織形態(tài)結(jié)構(gòu)與年齡相關(guān)性的研究也取得了一定進(jìn)展。羅斌等[5]應(yīng)用計(jì)算機(jī)顯微圖像分析系統(tǒng)，通過(guò)人體心臟傳導(dǎo)系統(tǒng)竇房結(jié)（SAN）主、間質(zhì)形態(tài)學(xué)改變與年齡的相關(guān)性研究，發(fā)現(xiàn)SAN主、間質(zhì)形態(tài)學(xué)改變與年齡之間呈現(xiàn)增齡性生理變化。Pilin等[6]通過(guò)特殊圖像處理系統(tǒng)對(duì)椎間盤、肌腱、肋軟骨等軟組織顏色改變與年齡相關(guān)性研究，發(fā)現(xiàn)肋軟骨組織顏色與年齡的相關(guān)性最明顯，椎間盤和肌腱組織顏色與年齡的相關(guān)性不明顯，可能與這些軟組織中蛋白多糖含量有關(guān)。日本學(xué)者山口洋[7]通過(guò)對(duì)正常人角膜內(nèi)皮細(xì)胞密度與年齡相關(guān)性研究，發(fā)現(xiàn)角膜內(nèi)皮細(xì)胞密度與年齡呈負(fù)相關(guān)，并通過(guò)實(shí)踐用于年齡的推斷。

2 根據(jù)軟組織內(nèi)生化物質(zhì)改變推斷年齡

2.1 人體晚期糖化終末產(chǎn)物與年齡相關(guān)性 晚期糖化終末產(chǎn)物（advanced glycation end products， AGEs）是還原糖和其它含A-羰基復(fù)合物與蛋白質(zhì)、脂類和核酸等生物大分子的氨基發(fā)生非酶促反應(yīng)形成的結(jié)構(gòu)多樣的不可逆的聚合物[8]。AGEs多見(jiàn)于人體含半衰期長(zhǎng)的蛋白的組織中，一旦形成，機(jī)體很難清除并 隨著增齡增長(zhǎng)而在組織中逐漸積累。因此，可以檢測(cè)人體軟組織內(nèi)AGEs的表達(dá)進(jìn)行年齡推斷。Sato等[9]通過(guò)免疫組化法檢測(cè)尸體海馬組織錐體神經(jīng)元內(nèi)AGEs的表達(dá)與年齡相關(guān)性研究，并建立回歸方程，為個(gè)體年齡推斷提供了新的思路，但因人體組織內(nèi)AGEs表達(dá)量受多種疾?。ㄈ缣悄虿?、終末期腎病等）和激素影響等缺點(diǎn)，使得AGEs在法醫(yī)學(xué)實(shí)踐中推斷年齡應(yīng)用受限。

2.2 端粒與年齡相關(guān)性 端粒（telomere）是真核細(xì)胞染色體末端一段特殊結(jié)構(gòu)，由端粒DNA和端粒結(jié)合蛋白構(gòu)成。人類端粒DNA為串聯(lián)重復(fù)序列5-TTAGGG-3，長(zhǎng)約5～15kb，高度保守序列，不具有編碼蛋白質(zhì)的功能，但具有保護(hù)染色體末端的完整性的功能。由于DNA末端復(fù)制的不完全性，使得每一次細(xì)胞分裂，正常人體細(xì)胞內(nèi)端粒DNA將會(huì)縮短50～100kb，并隨著個(gè)體年齡的增長(zhǎng)，端粒DNA長(zhǎng)度逐漸變短，并且這一理論人體軟組織中被眾多實(shí)驗(yàn)證實(shí)：Lindsey等[10]研究證實(shí)了皮膚組織內(nèi)端粒DNA長(zhǎng)度隨年齡的增加而縮短；Melk等[11]研究證實(shí)了腎臟組織內(nèi)端粒DNA長(zhǎng)度隨年齡的增加而縮短；Tsuji[12]等通過(guò)檢測(cè)外周血單核細(xì)胞端粒末端限制性片斷（TRF）平均長(zhǎng)度與年齡變相關(guān)性研究，并建立了TRF隨年齡變化的相關(guān)回歸方程，同樣證實(shí)了TRF平均長(zhǎng)度隨年齡的增加而縮短。隨著端粒研究的不斷深入和完善，在分子水平上推斷年齡將會(huì)在法醫(yī)學(xué)實(shí)踐中成為現(xiàn)實(shí)。

2.3 線粒體DNA與年齡相關(guān)性 線粒體DNA（mitochondrial DNA， mtDNA）是細(xì)胞核外DNA，呈雙鏈、環(huán)狀，大小為16596bp，mtDNA缺乏內(nèi)含子和組蛋白保護(hù)，又缺乏核DNA復(fù)制的校讀和修復(fù)系統(tǒng)，致使復(fù)制錯(cuò)賠率極高，且極易受氧自由基的損害，其氧化損傷率是核DNA的16倍[13]。mtDNA損傷常見(jiàn)為片段缺失、單堿基損傷及小片段重復(fù)，大量研究表明mtDNA損傷與年齡呈正相關(guān)性：Wei等研究發(fā)現(xiàn)mtDNA片段缺失與個(gè)體年齡呈顯著相關(guān)性[14]；Tengan等研究發(fā)現(xiàn)mtDNA小片段重復(fù)（D環(huán)區(qū)重復(fù)）的發(fā)生率與年齡增長(zhǎng)具有相關(guān)性，而與線粒體疾病無(wú)關(guān)[15]。同時(shí)，mtDNA存在組織異質(zhì)性，根據(jù)mtDNA推斷個(gè)體年齡時(shí)需要各組織的大量統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，以及需要排除各種線粒體引起的疾病干擾，方能在法醫(yī)學(xué)實(shí)踐中推廣應(yīng)用。

3 展望

目前，在法醫(yī)學(xué)實(shí)踐中，大部分法醫(yī)工作者一般通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察，借助牙齒、骨骼等硬組織進(jìn)行年齡推斷，根據(jù)軟組織推斷年齡還處于研究階段，應(yīng)用于實(shí)踐中還不夠成熟，仍有很多問(wèn)題需要解決，如檢測(cè)指標(biāo)易受地域環(huán)境、遺傳、疾病等因素的影響，并且在不同人群、個(gè)體及器官間軟組織存在著差異。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展和多學(xué)科技術(shù)的交叉應(yīng)用，一些軟組織內(nèi)與年齡有關(guān)的生化物質(zhì)已成為法醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)，如竇房結(jié)突觸素、GABA、mRNA、microRNA等，將會(huì)為軟組織推斷年齡提供新的思路和方法。

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編輯/蘇小梅