普通光學(xué)顯微鏡在形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的使用與管理

摘要：普通光學(xué)顯微鏡（以下簡(jiǎn)稱顯微鏡）在醫(yī)學(xué)形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中具有舉足輕重的作用， 如何正確使用和妥善管理顯微鏡至關(guān)重要。本文試從顯微鏡的使用以及管理角度加以討論，總結(jié)了使顯微鏡更好為實(shí)驗(yàn)教學(xué)服務(wù)的方法。

關(guān)鍵詞：實(shí)驗(yàn)教學(xué)；顯微鏡；正確使用；維護(hù)管理

醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)中，手工操作是學(xué)生在醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)中需要掌握的最基本的技術(shù)操作，也是基礎(chǔ)教學(xué)中的基礎(chǔ)訓(xùn)練技能。而顯微鏡恰是此項(xiàng)技能訓(xùn)練中最通用最實(shí)用的儀器設(shè)備之一，也是在醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程中形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)任務(wù)過程中必須掌握的訓(xùn)練技能。醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課形態(tài)學(xué)主要包括組織胚胎學(xué)、病理解剖學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和病原生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)，在這些課程的實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中無(wú)一不是頻繁的使用顯微鏡，所以只有正確的使用和妥善保管好顯微鏡，才能發(fā)揮它的功能， 延長(zhǎng)它的使用率，使之更好地為實(shí)驗(yàn)教學(xué)服務(wù)。

1顯微鏡使用的正確方法

1.1顯微鏡玻片標(biāo)本的制備方法和觀察方法 普通光學(xué)顯微鏡在醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，最常用且必不可少的儀器。在教學(xué)過程中，除了正確引導(dǎo)學(xué)生了解顯微鏡的構(gòu)造和原理，同時(shí)更重要的是引導(dǎo)學(xué)生對(duì)使用的顯微鏡玻片標(biāo)本制備方法如組織切片、涂片、封片及組織印片的掌握。在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中學(xué)生對(duì)玻片標(biāo)本常常混淆，不能完全掌握分清所觀察的標(biāo)本是組織切片、涂片、封片還是組織印片的能力，從而不能找到顯微鏡的正確的觀察方法。這就要求教師在課堂上應(yīng)該為學(xué)生明確講解所使用每一種玻片標(biāo)本的制備方法，并告訴學(xué)生在觀察不同玻片標(biāo)本時(shí)如何正確使用顯微鏡的方法。舉例來(lái)說，病理解剖學(xué)和組織胚胎學(xué)所觀察的玻片標(biāo)本多是組織切片，標(biāo)本的厚度是均一的，觀察這樣的玻片標(biāo)本基本是在一個(gè)焦距下即可，而寄生蟲學(xué)的蟲卵標(biāo)本多是涂片，蟲卵是一個(gè)立體結(jié)構(gòu)，若想觀察清楚蟲卵各個(gè)結(jié)構(gòu)必須不斷調(diào)節(jié)顯微鏡的焦距，只有科學(xué)管理其使用過程才能達(dá)到最佳的觀察效果。

1.2染色標(biāo)本與不染色標(biāo)本的觀察方法 學(xué)生使用顯微鏡觀察的玻片標(biāo)本設(shè)有兩種標(biāo)本：一種是染色標(biāo)本，另外一種是不染色標(biāo)本，在觀察這兩種標(biāo)本時(shí)所需光線有強(qiáng)弱之分。教師應(yīng)該讓學(xué)生在課堂上能夠正確認(rèn)識(shí)和熟練使用普通光學(xué)顯微鏡的光線調(diào)節(jié)裝置來(lái)觀察兩種不同標(biāo)本，以達(dá)到最佳清晰效果。

在觀察標(biāo)本時(shí)，根據(jù)不同標(biāo)本的對(duì)光線的要求，隨時(shí)調(diào)節(jié)反光鏡（電光源除外）、集光器和光圈（也稱虹彩），可以達(dá)到最佳的觀察效果。光線調(diào)節(jié)裝置屬于普通光學(xué)顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)[1]，但正是這最基本的結(jié)構(gòu)也是最容易被忽略的。在顯微鏡下觀察標(biāo)本時(shí)合適的光線尤為重要。

病理解剖學(xué)和組織胚胎學(xué)的玻片標(biāo)本一般為染色標(biāo)本，可在同一強(qiáng)弱的光線下完成標(biāo)本的觀察，而醫(yī)學(xué)微生物學(xué)和人體寄生蟲學(xué)中所觀察的標(biāo)本既有染色標(biāo)本也有不染色標(biāo)本（活體標(biāo)本），在觀察不同標(biāo)本時(shí)需要適當(dāng)調(diào)節(jié)光線，以便觀察到清晰的效果。

在實(shí)驗(yàn)過程中教師需要向?qū)W生講解觀察不同染色標(biāo)本應(yīng)該注意的問題，如觀察不染色標(biāo)本時(shí)用弱光，集光器要降低光圈縮小，觀察染色標(biāo)本時(shí)用強(qiáng)光，集光器要升高光圈放大，在相同的光源條件下，低倍鏡下的視野亮，高倍鏡下的視野暗，在進(jìn)行物鏡轉(zhuǎn)換時(shí)也要注意光線的調(diào)節(jié)。做到每一節(jié)實(shí)驗(yàn)課中都強(qiáng)化學(xué)生隨時(shí)調(diào)節(jié)光線的意識(shí)，逐漸養(yǎng)成正確使用光線調(diào)節(jié)習(xí)慣。

1.3油鏡頭的正確使用方法 普通光學(xué)顯微鏡有放大倍數(shù)為100倍的油鏡頭，為了增加照明亮度使鏡頭焦距縮短直徑很小所需光照強(qiáng)度最大提高顯微鏡的分辨率，常用于觀察細(xì)菌和寄生蟲的原蟲。在教學(xué)過程中，教師應(yīng)該讓學(xué)生了解油鏡頭的原理，在同樣的光線下，油鏡的視野會(huì)暗一些，所以在使用油鏡頭觀察標(biāo)本時(shí)，將顯微鏡的光線調(diào)至最亮才能達(dá)到最佳的觀察效果。此外，觀察標(biāo)本過程中，調(diào)節(jié)顯微鏡焦距的細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)要緩慢進(jìn)行，轉(zhuǎn)不動(dòng)時(shí)不要硬轉(zhuǎn)，否則容易毀壞標(biāo)本。

1.4顯微鏡鏡頭的正確使用順序 顯微鏡使用過程中，需要通過物鏡的轉(zhuǎn)換進(jìn)行樣本的觀察。物鏡中低倍鏡的視野大，利于尋找觀察目標(biāo)，適宜觀察材料的整體結(jié)構(gòu)。高倍鏡放大倍數(shù)大，分辨率高，但所看到的面積小，即視野小[2]，適宜觀察局部細(xì)節(jié)。

因此，在實(shí)驗(yàn)過程中，教師要明確告訴學(xué)生在尋找觀察標(biāo)本時(shí)，按照一定程序要由低倍鏡→高倍鏡→再到油鏡來(lái)使用。先用低倍鏡找到所觀察的標(biāo)本部位移到視野中心，將標(biāo)本調(diào)節(jié)清晰再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察細(xì)節(jié)，在此強(qiáng)調(diào)由低倍鏡轉(zhuǎn)換高倍鏡，防止鏡頭碰撞玻片，從顯微鏡側(cè)面注視著，慢慢地轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器使高倍鏡頭對(duì)準(zhǔn)通光孔，高倍鏡放大倍數(shù)高，看到材料的厚度就越薄，低倍鏡如果調(diào)換高倍鏡后，若視野亮度不夠圖像不太清楚，可上升聚光器和開大光圈觀察清晰的圖像。

1.5觀察鏡下標(biāo)本的習(xí)慣 為了使學(xué)生對(duì)每一份觀察樣本都不出現(xiàn)漏檢，就要求學(xué)生對(duì)每一份樣本按照一定的順序進(jìn)行觀察，做到使每一個(gè)觀察視野之間既不重疊也不間斷，此做法尤其對(duì)于需要準(zhǔn)確計(jì)數(shù)的標(biāo)本更重要。

在實(shí)驗(yàn)課過程中，發(fā)現(xiàn)有些學(xué)生在觀察玻片標(biāo)本時(shí)，上下左右很隨便地移動(dòng)標(biāo)本進(jìn)行觀察，這樣做不利于全面地對(duì)整份標(biāo)本進(jìn)行觀察，從而造成容易漏檢的現(xiàn)象。因此，教師在授課過程中，一定要灌輸學(xué)生對(duì)整份標(biāo)本在觀察時(shí)，按照一定的順序進(jìn)行觀察，從而養(yǎng)成良好的檢驗(yàn)習(xí)慣，對(duì)日后的工作也是有益無(wú)害。

2顯微鏡的維護(hù)與妥善管理

顯微鏡是一種精密且貴重的儀器， 必須有妥善的維護(hù)和管理方案。

2.1維護(hù)方案 必須熟練掌握并嚴(yán)格執(zhí)行使用規(guī)程。①在取送顯微鏡一定要握住彎臂，另一手拖住鏡座，顯微鏡不能傾斜，讓受力均勻，拿穩(wěn)顯微鏡。以免目鏡從鏡筒上端滑出。取送顯微鏡要輕拿輕放。②使用顯微鏡時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程，切忌在桌面上推移顯微鏡，避免顯微鏡與桌面間的摩擦振動(dòng)引起的精密部件脫落或損壞；注意電源開關(guān)不要短時(shí)頻繁開關(guān)，使用間歇要注意調(diào)低明亮度，延長(zhǎng)燈泡的使用壽命；告訴學(xué)生不得隨意拆卸顯微鏡上的零件和顯微鏡鏡頭，以免磨損。③顯微鏡使用完畢后，取下標(biāo)本片經(jīng)聚光器降下，再將物鏡轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)成\"八\"字形，轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使之下降，以免接物鏡與聚光器相碰。檢查電源是否關(guān)掉，油是否擦凈，注意保持顯微鏡的干燥、清潔，避免灰塵、水及化學(xué)試劑的玷污。最后套上顯微鏡外罩后放回實(shí)驗(yàn)臺(tái)下的暗柜里。

2.2管理方案 ①顯微鏡應(yīng)建立帳、卡、號(hào)一致。嚴(yán)把入庫(kù)關(guān)，了解顯微鏡的性能，正確進(jìn)行維護(hù)，對(duì)新購(gòu)置的顯微鏡進(jìn)行逐臺(tái)檢查、清點(diǎn)、登記帳，建立檔案（帳、卡、號(hào)）并存入電腦。每臺(tái)顯微鏡都有詳細(xì)的編號(hào)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都有對(duì)應(yīng)的使用記錄本。②建立責(zé)任制。本校醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程班級(jí)較多，頻繁使用顯微鏡的實(shí)驗(yàn)課程多，顯微鏡的使用頻率很高，實(shí)驗(yàn)室采用專人專用的辦法，我校學(xué)生用的顯微鏡是固定在8個(gè)實(shí)驗(yàn)室，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室配置30臺(tái)。上課前由帶教老師安排學(xué)生就座，指定顯微鏡與使用人員一一對(duì)應(yīng)，并交代學(xué)生顯微鏡的使用與維護(hù)，每次用完后填寫儀器使用記錄。顯微鏡是否管理好，責(zé)任到位，哪個(gè)環(huán)節(jié)出問題，責(zé)任人是誰(shuí)，一清二楚。 這樣顯微鏡可以得到較好的管理，實(shí)驗(yàn)課就能做到井然有序。

參考文獻(xiàn)：

[1]陶瑜，郭向明，李浩然.光學(xué)顯微鏡 的電源及機(jī)械系統(tǒng)[J].現(xiàn)代醫(yī)學(xué)儀器與應(yīng)用，2003，15（1）：26-27.

[2]曾順良.實(shí)驗(yàn)教學(xué)中學(xué)生使用顯微 鏡存在問題的分析及對(duì)策[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)教育，2006，13（2）：25-26.編輯/申磊