茜草根中蒽醌成分超聲提取的工藝研究

王春蘭，周 婷，祁 宇

（吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院，吉林 吉林132101）

中藥茜草（Rubia cordifolia L.）系茜草科茜草屬植物，主要分布在東北、華北、西北和四川及西藏等地。茜草化學(xué)成分研究表明以蒽醌及其苷類化合物為主，還含有萘醌類、萜類、己肽類、多糖類等其他化學(xué)成分[1]，具有涼血止血、活血祛瘀等功效。具有蒽醌母核的化合物是抗腫瘤藥物研究的重要資源[2]。試驗以不同濃度乙醇為提取溶劑，采用超聲波方法進(jìn)行提取，以茜草中蒽醌提取率為指標(biāo)，篩選最優(yōu)提取工藝條件。

1 材料與方法

1.1 儀器和材料

超聲波清洗機(jī)（KQ-100TDB 昆山市超聲儀器有限公司），UV-752N 紫外可見分光光度計（上海成光儀器）。1,8 二羥基蒽醌對照品（批號為2016/12，北京博奧拓達(dá)科技有限公司，AR），茜草根（產(chǎn)地為陜西），無水乙醇（天津市永大化學(xué)試劑有限公司，AR）。

1.2 試驗方法

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精密稱取105℃干燥2 h 的1,8-二羥基蒽醌10.00 mg，用乙醇溶解，定容至100 mL，作為標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密吸取上述溶液0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL 各2 份，分別置于10 mL 容量瓶中，一份加0.5%醋酸鎂乙醇溶液稀釋至刻度，另一份用乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻。前者置于樣品池中，后者置于參比池中，于520 nm 處測定各溶液的吸收值[4]。

1.2.2 樣品中蒽醌類成分的測定

茜草樣品提取的方法為：茜草根經(jīng)過粉碎過40 目篩后，再用超聲方法提取、過濾，乙醇定容后，待測。分別吸取2 份樣品溶液各1 mL，加入0.6 g 醋酸鎂乙醇溶液定容10 mL，另一份加入乙醇定容，前者置樣品池，后者置參比池中，搖勻后在520 nm 波長處測定吸光度值。

1.2.3 超聲法提取條件的選擇

通過考察乙醇濃度、乙醇用量、超聲時間等因素對提取率的影響，在此基礎(chǔ)上進(jìn)行正交試驗。

1.2.4 正交試驗方案設(shè)計

試驗選用L9（34）正交表設(shè)計，正交試驗的因素和水平具體見表1。

表1 L9（34）正交試驗的因素與水平設(shè)置

1.3 試驗數(shù)據(jù)分析

正交試驗數(shù)據(jù)處理選用極差分析法（即為R 法）和方差分析法（即為SPSS 法）。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素試驗

考察了超聲提取時間、溶劑用量、乙醇濃度和超聲功率對蒽醌成分提取的影響。

稱取茜草根粉1.0 g，以70%乙醇為超聲提取溶劑，選用不同的提取時間，乙醇用量均為8 mL。從圖1 中可知，總蒽醌的提取率隨超聲時間的延長而增大，當(dāng)提取時間達(dá)到20 min 后再延長提取時間，提取率增加不大，說明在20 min 內(nèi)提取較完全。

圖1 不同超聲時間對蒽醌提取率的影響

稱取茜草根粉1.0 g，以70%乙醇為超聲提取溶劑，超聲時間均為20 min，考察溶劑用量對提取率的影響。從圖2 中可知，蒽醌提取率隨乙醇溶劑用量的增加呈增加趨勢，但增加幅度減緩，乙醇用量太大會增加提取成本，因此選取10 mL 的溶劑用量。

圖2 不同料液比的提取效果對蒽醌提取率的影響

精密量取茜草根粉1.0 g，乙醇用量10 mL，超聲提取時間均為20 min，考察乙醇濃度對提取率的影響。從圖3 中可知，乙醇濃度在60%到70%左右，提取率較高，乙醇濃度太高或太低，提取率降低。所以選擇70%的乙醇為超聲提取溶劑。

2.2 正交試驗

對正交試驗結(jié)果進(jìn)行組合尋優(yōu)，得出最佳組合為A2B3C2，極差最大為RA（0.845），RB和RC分別為0.303 和0.243，說明乙醇濃度是影響超聲提取效率的主要因素，其次為溶劑用量，超聲時間的影響最小。

由表2 看出，第4 號A2B1C2和第6 號A2B3C1兩組合的提取率也較高，乙醇濃度一致為70%，乙醇濃度影響大，B 和C 相互補(bǔ)充，影響較小。因此將A2B3C2選為最優(yōu)組合。

圖3 不同乙醇濃度的對蒽醌提取效果率的影響

表2 超聲提取蒽醌成分L9（34）正交試驗結(jié)果

2.3 驗證試驗

精密稱取茜草粉10.00 g，按照正交試驗確定的最佳工藝A2B3C2進(jìn)行試驗，同樣以蒽醌提取率為指標(biāo)，3 次提取率分別為1.276%、1.258%和1.263%，平均1.266%。

4 結(jié)論

通過選用1,8 二羥基蒽醌為標(biāo)品，紫外分光光度法測定，考察乙醇濃度、超聲時間和溶劑用量等因素對茜草中總蒽醌提取率的影響。經(jīng)正交試驗，得出超聲波法提取茜草中蒽醌提取率的影響因素順序是乙醇濃度＞溶劑用量＞提取時間；篩選得到最佳工藝條件是：乙醇濃度70%，料液比為10，超聲時間20 min，該條件下茜草中蒽醌提取率可達(dá)1.266%。研究可為開發(fā)利用茜草根中蒽醌類資源提供依據(jù)。

[1]王素賢，華會明，吳立軍.茜草中新蒽醌苷的結(jié)構(gòu)鑒定[J].沈陽藥學(xué)院學(xué)報，1991，8（3）：211.

[2]姚思泰.當(dāng)代抑制腫瘤的藥物蒽環(huán)類[J].國外醫(yī)學(xué)-藥學(xué)分冊，1987，5（6）：344.

[3]譚朝陽,尤昭玲.茜草提取工藝的研究[J].中草藥，2004，（4）：399-401.

[4]衛(wèi)亞麗，梁 芳，湯洪敏等.中藥茜草中總蒽醌含量的測定[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（8）：51-53.