上海市寶山區(qū)2株疑似霍亂弧菌的鑒定及分析

沈雋卿等

霍亂是由O1群和O139群霍亂弧菌引起的急性腸道傳染病，是發(fā)病急、傳播快、波及面廣、危害嚴(yán)重的甲類傳染病。解放前，我國(guó)的霍亂主要由O1群古典生物型引起，1961年我國(guó)廣東省首次出現(xiàn)El Tor生物型霍亂流行1993年，在新疆局部地區(qū)發(fā)生O139血清霍亂。上海市寶山區(qū)從1962年開始流行霍亂，當(dāng)年本地人口病例數(shù)59人，發(fā)病率為12/10萬(wàn)；1978—1981年為發(fā)病高峰期，1980年發(fā)病率最高為15/10萬(wàn)；1994年有1次大爆發(fā)，病例數(shù)達(dá)到109人，隔年病例數(shù)即下降至12人；1996—2004年，處于霍亂低發(fā)時(shí)期，偶有散發(fā)病例，共檢出10例陽(yáng)性；2005—2011年無(wú)本地病例檢出；2012年5月檢出1株O139群霍亂弧菌。同我國(guó)近10年來(lái)的霍亂流行特點(diǎn)基本符合，多為小范圍的爆發(fā)流行及散發(fā)，多數(shù)爆發(fā)為衛(wèi)生條件較差的聚餐活動(dòng)引起，同時(shí)出現(xiàn)了以稻葉型為高發(fā)流行優(yōu)勢(shì)菌的發(fā)展趨向和低發(fā)水平時(shí)O139霍亂病例所占比例較高的特點(diǎn)。

1材料與方法

1.1樣品來(lái)源

2012年5月，于淞南社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心腸道門診腹瀉病人肛拭樣品中，檢測(cè)到1株O139群霍亂弧菌（編號(hào)為BS-25）；2012年7月，華山醫(yī)院寶山分院送檢鑒定1株未知群的霍亂弧菌（編號(hào)為7933）。

1.4病例基本情況

BS-25株的患者為寶山區(qū)淞南街道居民，女。2012年 5月1日至崇明縣參加喜宴聚餐，除此之外無(wú)其他聚餐活動(dòng)和不潔飲食史，并將從酒席上帶回的剩余油爆蝦放入冰箱中冷藏，5月5日晚取出油爆蝦加熱后食用，5月6日發(fā)病。大便性狀為黃色糊狀便，無(wú)腹痛、無(wú)嘔吐、無(wú)發(fā)熱等其他癥狀。

7933株的患者為寶山區(qū)水產(chǎn)路某小區(qū)居民，女，入院做闌尾手術(shù)。2012年7月29日采集闌尾滲出液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室病原學(xué)檢測(cè)時(shí)檢出，臨床使用頭孢類抗生素后炎癥好轉(zhuǎn)。

3討論

3.1霍亂弧菌的鑒別

3.1.1菌落形態(tài)O139群霍亂弧菌在雙洗平板上半透明、扁平、黑心不明顯，與O1群霍亂弧菌黑心較明顯不同。O77群疑似霍亂弧菌在雙洗平板上半透明、扁平、黑心明顯。O139群霍亂弧菌在弧菌顯色培養(yǎng)基上中間略有凹陷、中間藍(lán)色，邊緣透明，O77群疑似霍亂弧菌在弧菌顯色培養(yǎng)基上菌落微凸、中間藍(lán)綠色，邊緣透明，但不明顯，菌落比較大。

3.1.2生化結(jié)果2例霍亂弧菌利用甘露糖、蔗糖、阿拉伯糖、淀粉結(jié)果都為“-、+、-、+”，氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性。BS-25株山梨醇遲發(fā)酵，表明是流行株，有毒力，和毒力基因試驗(yàn)結(jié)果符合。7933株山梨醇快發(fā)酵，表明不是流行株。

3.1.3常規(guī)熒光定量PCR結(jié)果和毒力基因檢測(cè)兩者常規(guī)PCR檢測(cè)霍亂弧菌核酸都為陽(yáng)性，這與血清凝集試驗(yàn)結(jié)果符合，都屬于霍亂弧菌屬。O139群霍亂弧菌ctx、zot、ace、tcp 4種常見毒力基因的核酸檢測(cè)都為陽(yáng)性，與以上流行株結(jié)果相符合。有研究發(fā)現(xiàn)，霍亂流行時(shí)期的O139群霍亂弧菌感染者分離株檢測(cè)的毒力相關(guān)基因?yàn)殛?yáng)性，將毒力相關(guān)基因分型用于判斷和區(qū)分O139群霍亂弧菌的流行株與非流行株也是可行的＼[5＼]。而O77群霍亂弧菌毒力基因檢測(cè)都為陰性，表明無(wú)毒力，與非流行株的結(jié)果相符合。

3.1.4藥敏試驗(yàn)結(jié)果BS-25株有多重耐藥的現(xiàn)象，7933株對(duì)利福平中度敏感，提示這種抗菌藥物有耐藥的趨向，對(duì)其余的抗菌藥物則均為敏感。

3.2加強(qiáng)監(jiān)測(cè)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)疫情

雖然非O1、O139群的霍亂弧菌通常不引起嚴(yán)重的腹瀉，且未列入法定傳染病，但是這類細(xì)菌在自然界中普遍存在，有時(shí)對(duì)人們的健康也造成了一定的危害，需要引起重視。而本株O139群霍亂弧菌的檢出，說(shuō)明我區(qū)仍然有霍亂發(fā)病及流行的潛在危險(xiǎn)，而且我區(qū)地處長(zhǎng)江入海口，海水和淡水交匯處，應(yīng)做好各種水源中霍亂弧菌的監(jiān)測(cè)。患者大多是通過(guò)被污染的食品而感染，因此，必須搞好城鎮(zhèn)衛(wèi)生，加強(qiáng)疫情監(jiān)測(cè)。本次疫情發(fā)生后，我區(qū)疾病預(yù)防控制中心立即組織對(duì)全區(qū)醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)進(jìn)行了霍亂弧菌知識(shí)及檢測(cè)的業(yè)務(wù)培訓(xùn)，并加強(qiáng)對(duì)醫(yī)療機(jī)構(gòu)的日常指導(dǎo)和質(zhì)控，及時(shí)掌握流行動(dòng)向。

4參考文獻(xiàn)

[1]羅朝成，謝一俊，張靜.霍亂流行態(tài)勢(shì)及我國(guó)霍亂防控中存在的問題＼[J＼].傳染病信息，2008，21（3）：153-154.

[2]燕勇，羅建勇，朱心強(qiáng)，等.霍亂及霍亂弧菌檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展＼[J＼].上海預(yù)防醫(yī)學(xué)，2012，24（8）：459-462.

[3]Singh DV， Sree Renjini Isac，Colwell RR. Development of a hexaplex PCR assay for rapid detection of virulence and regulatory genes in vibrio cholerae and vibrio mimicus＼[J＼]. J Clin Microbiol，2002，40（11）：4321-4324.

[4]古文鵬，伏曉慶，楊建斌，等.2011年云南省中緬邊境地區(qū)三起霍亂疫情菌株分子分型研究＼[J＼].中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2012，46（6）：573-574.

[5]詹鑾峰，王曉萍，郭維植，等.霍亂弧菌毒力相關(guān)基因檢測(cè)分析＼[J＼].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2008，18（9）：1727-1728.

霍亂是由O1群和O139群霍亂弧菌引起的急性腸道傳染病，是發(fā)病急、傳播快、波及面廣、危害嚴(yán)重的甲類傳染病。解放前，我國(guó)的霍亂主要由O1群古典生物型引起，1961年我國(guó)廣東省首次出現(xiàn)El Tor生物型霍亂流行1993年，在新疆局部地區(qū)發(fā)生O139血清霍亂。上海市寶山區(qū)從1962年開始流行霍亂，當(dāng)年本地人口病例數(shù)59人，發(fā)病率為12/10萬(wàn)；1978—1981年為發(fā)病高峰期，1980年發(fā)病率最高為15/10萬(wàn)；1994年有1次大爆發(fā)，病例數(shù)達(dá)到109人，隔年病例數(shù)即下降至12人；1996—2004年，處于霍亂低發(fā)時(shí)期，偶有散發(fā)病例，共檢出10例陽(yáng)性；2005—2011年無(wú)本地病例檢出；2012年5月檢出1株O139群霍亂弧菌。同我國(guó)近10年來(lái)的霍亂流行特點(diǎn)基本符合，多為小范圍的爆發(fā)流行及散發(fā)，多數(shù)爆發(fā)為衛(wèi)生條件較差的聚餐活動(dòng)引起，同時(shí)出現(xiàn)了以稻葉型為高發(fā)流行優(yōu)勢(shì)菌的發(fā)展趨向和低發(fā)水平時(shí)O139霍亂病例所占比例較高的特點(diǎn)。

1材料與方法

1.1樣品來(lái)源

2012年5月，于淞南社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心腸道門診腹瀉病人肛拭樣品中，檢測(cè)到1株O139群霍亂弧菌（編號(hào)為BS-25）；2012年7月，華山醫(yī)院寶山分院送檢鑒定1株未知群的霍亂弧菌（編號(hào)為7933）。

1.4病例基本情況

BS-25株的患者為寶山區(qū)淞南街道居民，女。2012年 5月1日至崇明縣參加喜宴聚餐，除此之外無(wú)其他聚餐活動(dòng)和不潔飲食史，并將從酒席上帶回的剩余油爆蝦放入冰箱中冷藏，5月5日晚取出油爆蝦加熱后食用，5月6日發(fā)病。大便性狀為黃色糊狀便，無(wú)腹痛、無(wú)嘔吐、無(wú)發(fā)熱等其他癥狀。

7933株的患者為寶山區(qū)水產(chǎn)路某小區(qū)居民，女，入院做闌尾手術(shù)。2012年7月29日采集闌尾滲出液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室病原學(xué)檢測(cè)時(shí)檢出，臨床使用頭孢類抗生素后炎癥好轉(zhuǎn)。

3討論

3.1霍亂弧菌的鑒別

3.1.1菌落形態(tài)O139群霍亂弧菌在雙洗平板上半透明、扁平、黑心不明顯，與O1群霍亂弧菌黑心較明顯不同。O77群疑似霍亂弧菌在雙洗平板上半透明、扁平、黑心明顯。O139群霍亂弧菌在弧菌顯色培養(yǎng)基上中間略有凹陷、中間藍(lán)色，邊緣透明，O77群疑似霍亂弧菌在弧菌顯色培養(yǎng)基上菌落微凸、中間藍(lán)綠色，邊緣透明，但不明顯，菌落比較大。

3.1.2生化結(jié)果2例霍亂弧菌利用甘露糖、蔗糖、阿拉伯糖、淀粉結(jié)果都為“-、+、-、+”，氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性。BS-25株山梨醇遲發(fā)酵，表明是流行株，有毒力，和毒力基因試驗(yàn)結(jié)果符合。7933株山梨醇快發(fā)酵，表明不是流行株。

3.1.3常規(guī)熒光定量PCR結(jié)果和毒力基因檢測(cè)兩者常規(guī)PCR檢測(cè)霍亂弧菌核酸都為陽(yáng)性，這與血清凝集試驗(yàn)結(jié)果符合，都屬于霍亂弧菌屬。O139群霍亂弧菌ctx、zot、ace、tcp 4種常見毒力基因的核酸檢測(cè)都為陽(yáng)性，與以上流行株結(jié)果相符合。有研究發(fā)現(xiàn)，霍亂流行時(shí)期的O139群霍亂弧菌感染者分離株檢測(cè)的毒力相關(guān)基因?yàn)殛?yáng)性，將毒力相關(guān)基因分型用于判斷和區(qū)分O139群霍亂弧菌的流行株與非流行株也是可行的＼[5＼]。而O77群霍亂弧菌毒力基因檢測(cè)都為陰性，表明無(wú)毒力，與非流行株的結(jié)果相符合。

3.1.4藥敏試驗(yàn)結(jié)果BS-25株有多重耐藥的現(xiàn)象，7933株對(duì)利福平中度敏感，提示這種抗菌藥物有耐藥的趨向，對(duì)其余的抗菌藥物則均為敏感。

3.2加強(qiáng)監(jiān)測(cè)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)疫情

雖然非O1、O139群的霍亂弧菌通常不引起嚴(yán)重的腹瀉，且未列入法定傳染病，但是這類細(xì)菌在自然界中普遍存在，有時(shí)對(duì)人們的健康也造成了一定的危害，需要引起重視。而本株O139群霍亂弧菌的檢出，說(shuō)明我區(qū)仍然有霍亂發(fā)病及流行的潛在危險(xiǎn)，而且我區(qū)地處長(zhǎng)江入?？?，海水和淡水交匯處，應(yīng)做好各種水源中霍亂弧菌的監(jiān)測(cè)。患者大多是通過(guò)被污染的食品而感染，因此，必須搞好城鎮(zhèn)衛(wèi)生，加強(qiáng)疫情監(jiān)測(cè)。本次疫情發(fā)生后，我區(qū)疾病預(yù)防控制中心立即組織對(duì)全區(qū)醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)進(jìn)行了霍亂弧菌知識(shí)及檢測(cè)的業(yè)務(wù)培訓(xùn)，并加強(qiáng)對(duì)醫(yī)療機(jī)構(gòu)的日常指導(dǎo)和質(zhì)控，及時(shí)掌握流行動(dòng)向。

4參考文獻(xiàn)

[1]羅朝成，謝一俊，張靜.霍亂流行態(tài)勢(shì)及我國(guó)霍亂防控中存在的問題＼[J＼].傳染病信息，2008，21（3）：153-154.

[2]燕勇，羅建勇，朱心強(qiáng)，等.霍亂及霍亂弧菌檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展＼[J＼].上海預(yù)防醫(yī)學(xué)，2012，24（8）：459-462.

[3]Singh DV， Sree Renjini Isac，Colwell RR. Development of a hexaplex PCR assay for rapid detection of virulence and regulatory genes in vibrio cholerae and vibrio mimicus＼[J＼]. J Clin Microbiol，2002，40（11）：4321-4324.

[4]古文鵬，伏曉慶，楊建斌，等.2011年云南省中緬邊境地區(qū)三起霍亂疫情菌株分子分型研究＼[J＼].中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2012，46（6）：573-574.

[5]詹鑾峰，王曉萍，郭維植，等.霍亂弧菌毒力相關(guān)基因檢測(cè)分析＼[J＼].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2008，18（9）：1727-1728.

霍亂是由O1群和O139群霍亂弧菌引起的急性腸道傳染病，是發(fā)病急、傳播快、波及面廣、危害嚴(yán)重的甲類傳染病。解放前，我國(guó)的霍亂主要由O1群古典生物型引起，1961年我國(guó)廣東省首次出現(xiàn)El Tor生物型霍亂流行1993年，在新疆局部地區(qū)發(fā)生O139血清霍亂。上海市寶山區(qū)從1962年開始流行霍亂，當(dāng)年本地人口病例數(shù)59人，發(fā)病率為12/10萬(wàn)；1978—1981年為發(fā)病高峰期，1980年發(fā)病率最高為15/10萬(wàn)；1994年有1次大爆發(fā)，病例數(shù)達(dá)到109人，隔年病例數(shù)即下降至12人；1996—2004年，處于霍亂低發(fā)時(shí)期，偶有散發(fā)病例，共檢出10例陽(yáng)性；2005—2011年無(wú)本地病例檢出；2012年5月檢出1株O139群霍亂弧菌。同我國(guó)近10年來(lái)的霍亂流行特點(diǎn)基本符合，多為小范圍的爆發(fā)流行及散發(fā)，多數(shù)爆發(fā)為衛(wèi)生條件較差的聚餐活動(dòng)引起，同時(shí)出現(xiàn)了以稻葉型為高發(fā)流行優(yōu)勢(shì)菌的發(fā)展趨向和低發(fā)水平時(shí)O139霍亂病例所占比例較高的特點(diǎn)。

1材料與方法

1.1樣品來(lái)源

2012年5月，于淞南社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心腸道門診腹瀉病人肛拭樣品中，檢測(cè)到1株O139群霍亂弧菌（編號(hào)為BS-25）；2012年7月，華山醫(yī)院寶山分院送檢鑒定1株未知群的霍亂弧菌（編號(hào)為7933）。

1.4病例基本情況

BS-25株的患者為寶山區(qū)淞南街道居民，女。2012年 5月1日至崇明縣參加喜宴聚餐，除此之外無(wú)其他聚餐活動(dòng)和不潔飲食史，并將從酒席上帶回的剩余油爆蝦放入冰箱中冷藏，5月5日晚取出油爆蝦加熱后食用，5月6日發(fā)病。大便性狀為黃色糊狀便，無(wú)腹痛、無(wú)嘔吐、無(wú)發(fā)熱等其他癥狀。

7933株的患者為寶山區(qū)水產(chǎn)路某小區(qū)居民，女，入院做闌尾手術(shù)。2012年7月29日采集闌尾滲出液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室病原學(xué)檢測(cè)時(shí)檢出，臨床使用頭孢類抗生素后炎癥好轉(zhuǎn)。

3討論

3.1霍亂弧菌的鑒別

3.1.1菌落形態(tài)O139群霍亂弧菌在雙洗平板上半透明、扁平、黑心不明顯，與O1群霍亂弧菌黑心較明顯不同。O77群疑似霍亂弧菌在雙洗平板上半透明、扁平、黑心明顯。O139群霍亂弧菌在弧菌顯色培養(yǎng)基上中間略有凹陷、中間藍(lán)色，邊緣透明，O77群疑似霍亂弧菌在弧菌顯色培養(yǎng)基上菌落微凸、中間藍(lán)綠色，邊緣透明，但不明顯，菌落比較大。

3.1.2生化結(jié)果2例霍亂弧菌利用甘露糖、蔗糖、阿拉伯糖、淀粉結(jié)果都為“-、+、-、+”，氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性。BS-25株山梨醇遲發(fā)酵，表明是流行株，有毒力，和毒力基因試驗(yàn)結(jié)果符合。7933株山梨醇快發(fā)酵，表明不是流行株。

3.1.3常規(guī)熒光定量PCR結(jié)果和毒力基因檢測(cè)兩者常規(guī)PCR檢測(cè)霍亂弧菌核酸都為陽(yáng)性，這與血清凝集試驗(yàn)結(jié)果符合，都屬于霍亂弧菌屬。O139群霍亂弧菌ctx、zot、ace、tcp 4種常見毒力基因的核酸檢測(cè)都為陽(yáng)性，與以上流行株結(jié)果相符合。有研究發(fā)現(xiàn)，霍亂流行時(shí)期的O139群霍亂弧菌感染者分離株檢測(cè)的毒力相關(guān)基因?yàn)殛?yáng)性，將毒力相關(guān)基因分型用于判斷和區(qū)分O139群霍亂弧菌的流行株與非流行株也是可行的＼[5＼]。而O77群霍亂弧菌毒力基因檢測(cè)都為陰性，表明無(wú)毒力，與非流行株的結(jié)果相符合。

3.1.4藥敏試驗(yàn)結(jié)果BS-25株有多重耐藥的現(xiàn)象，7933株對(duì)利福平中度敏感，提示這種抗菌藥物有耐藥的趨向，對(duì)其余的抗菌藥物則均為敏感。

3.2加強(qiáng)監(jiān)測(cè)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)疫情

雖然非O1、O139群的霍亂弧菌通常不引起嚴(yán)重的腹瀉，且未列入法定傳染病，但是這類細(xì)菌在自然界中普遍存在，有時(shí)對(duì)人們的健康也造成了一定的危害，需要引起重視。而本株O139群霍亂弧菌的檢出，說(shuō)明我區(qū)仍然有霍亂發(fā)病及流行的潛在危險(xiǎn)，而且我區(qū)地處長(zhǎng)江入?？冢Ｋ偷粎R處，應(yīng)做好各種水源中霍亂弧菌的監(jiān)測(cè)?；颊叽蠖嗍峭ㄟ^(guò)被污染的食品而感染，因此，必須搞好城鎮(zhèn)衛(wèi)生，加強(qiáng)疫情監(jiān)測(cè)。本次疫情發(fā)生后，我區(qū)疾病預(yù)防控制中心立即組織對(duì)全區(qū)醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)進(jìn)行了霍亂弧菌知識(shí)及檢測(cè)的業(yè)務(wù)培訓(xùn)，并加強(qiáng)對(duì)醫(yī)療機(jī)構(gòu)的日常指導(dǎo)和質(zhì)控，及時(shí)掌握流行動(dòng)向。

4參考文獻(xiàn)

[1]羅朝成，謝一俊，張靜.霍亂流行態(tài)勢(shì)及我國(guó)霍亂防控中存在的問題＼[J＼].傳染病信息，2008，21（3）：153-154.

[2]燕勇，羅建勇，朱心強(qiáng)，等.霍亂及霍亂弧菌檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展＼[J＼].上海預(yù)防醫(yī)學(xué)，2012，24（8）：459-462.

[3]Singh DV， Sree Renjini Isac，Colwell RR. Development of a hexaplex PCR assay for rapid detection of virulence and regulatory genes in vibrio cholerae and vibrio mimicus＼[J＼]. J Clin Microbiol，2002，40（11）：4321-4324.

[4]古文鵬，伏曉慶，楊建斌，等.2011年云南省中緬邊境地區(qū)三起霍亂疫情菌株分子分型研究＼[J＼].中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2012，46（6）：573-574.

[5]詹鑾峰，王曉萍，郭維植，等.霍亂弧菌毒力相關(guān)基因檢測(cè)分析＼[J＼].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2008，18（9）：1727-1728.