HPLC法測(cè)定二辛歸蒼通竅丸中阿魏酸的含量

朱會(huì)建

（河南省商丘市第一人民醫(yī)院藥劑科，商丘476000）

HPLC法測(cè)定二辛歸蒼通竅丸中阿魏酸的含量

朱會(huì)建

（河南省商丘市第一人民醫(yī)院藥劑科，商丘476000）

目的建立二辛歸蒼通竅丸中阿魏酸的含量測(cè)定方法。方法采用HPLC法，色譜條件為：色譜柱：Eclipse XDB-C18；流動(dòng)相：甲醇-1%醋酸（30∶70）；流速：1.0ml·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)：321nm。結(jié)果阿魏酸進(jìn)樣量在0.04004～0.4004μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9996），平均回收率為98.36%，RSD=1.13%（n=6）。結(jié)論本方法操作簡(jiǎn)便，專屬性強(qiáng)，結(jié)果準(zhǔn)確，可用于二辛歸蒼通竅丸的質(zhì)量控制。

阿魏酸；高效液相色譜法；二辛歸蒼通竅丸；川芎

二辛歸蒼通竅丸，是由辛夷花、川芎、細(xì)辛、蒼耳子等藥材加工制成的復(fù)方制劑，具有辛芳開(kāi)竅、活血止痛之功效，主治鼻竇炎、上額竇炎。原標(biāo)準(zhǔn)中僅有顯微鑒別，沒(méi)有定量指標(biāo)，本文以方中君藥川芎的有效成分阿魏酸為指標(biāo)，建立了二辛歸蒼通竅丸中阿魏酸的高效液相測(cè)定方法，操作簡(jiǎn)便、省時(shí)、準(zhǔn)確，可作為二辛歸蒼通竅丸的質(zhì)量控制方法。

1 儀器與試藥

Agilent 1260型高效液相色譜儀，AUW-220D電子分析天平，5210DT超聲處理器；阿魏酸對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110773-200611）；乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件色譜柱：Eclipse XDB-C18色譜柱（4.6m150mm，5um）；流動(dòng)相：甲醇-1%醋酸溶液（30∶70）為流動(dòng)相；流速1.0ml·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)321nm；進(jìn)樣量10μl。

2.2 線性關(guān)系考察取阿魏酸對(duì)照品約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加70%甲醇適量，振搖使完全溶解后，稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml置25 ml量瓶中，加70%甲醇至刻度，搖勻。按照“2.1”項(xiàng)色譜條件，分別進(jìn)樣2、5、8、10、12、14、16、18、20μl，記錄阿魏酸峰面積值，以峰面積積分值（Y）對(duì)對(duì)照品進(jìn)樣量（X）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：Y=3719.2X+106.34r=0.9996。結(jié)果表明，阿魏酸對(duì)照品進(jìn)樣量在0.04004～0.4004μg范圍內(nèi)與峰面積值呈良好的線性關(guān)系。

2.3 對(duì)照品溶液的制備取阿魏酸對(duì)照品約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加70%甲醇適量，振搖使完全溶解后，稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置25ml量瓶中，加70%甲醇至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

2.4 供試品溶液及陰性對(duì)照溶液的制備取本品約4.0g，研細(xì)，精密稱定，置25ml量瓶中，加入70%甲醇適量，超聲處理30分鐘，放冷，加70%甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。另取缺川芎的其他味藥按處方工藝制成陰性制劑，按上述方法制備陰性對(duì)照溶液。

2.5 干擾試驗(yàn)取上述3種溶液，按照上述色譜條件，分別注入高效液相色譜儀，進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，結(jié)果表明供試品溶液在與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，有相應(yīng)的色譜峰，而陰性對(duì)照溶液在此保留時(shí)間無(wú)干擾。色譜圖見(jiàn)圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.6 精密度試驗(yàn)取同一對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，每次10μl，記錄峰面積，RSD=1.12%（n=5），表明精密度良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一對(duì)照品溶液，分別在0、1、2、3、4、5、6h進(jìn)樣測(cè)定，RSD=1.03%，供試品溶液在6小時(shí)內(nèi)峰面積基本穩(wěn)定。

2.8 加樣回收率試驗(yàn)稱取6份已測(cè)得阿魏酸含量的供試品（含量為0.01122mg／g），每份約2.0g，精密稱定，置25ml量瓶中，另分別精密加入對(duì)照品溶液（濃度為0.02202mg／ml）1.00ml，制備成供試品溶液，分別測(cè)定阿魏酸的含量，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.9 樣品測(cè)定取3批樣品，按“2.4”項(xiàng)下方法制備供試液，各進(jìn)樣10μl，按外標(biāo)法計(jì)算阿魏酸的含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

表2 3批樣品中阿魏酸的含量（n，%）

3 討論

阿魏酸是川芎的有效成分，本文建立的高效液相色譜法測(cè)定阿魏酸的含量，該方法操作簡(jiǎn)便，雜質(zhì)對(duì)測(cè)定無(wú)干擾，重復(fù)性好，對(duì)控制該制劑的內(nèi)在質(zhì)量具有重要意義。

本文參考有關(guān)文獻(xiàn)［1-2］，針對(duì)本制劑的制備工藝及輔料的特性和影響因素，通過(guò)試驗(yàn)證明，超聲處理30分鐘提取較為完全，且操作簡(jiǎn)便快捷，故采用超聲提取。

［1］張秀麗.HPLC法測(cè)定川芎中阿魏酸的含量［J］.中國(guó)藥事，2009，23（5）：469-471.

［2］潘瑩.HPLC法同時(shí)測(cè)定通脈顆粒中丹參素、阿魏酸和葛根素的含量［J］.中國(guó)藥房，2011，22（4）：377-378.

醫(yī)書(shū)常見(jiàn)典故拾萃

上池、窺垣：喻指醫(yī)術(shù)高明?！妒酚洝け怡o倉(cāng)公列傳》記載，扁鵲少時(shí)為人舍長(zhǎng)，舍客長(zhǎng)桑君常謹(jǐn)遇之，出入十余年，乃呼扁鵲私坐，間與語(yǔ)曰：“我有禁方，年老，欲傳與公，公毋泄?！北怡o曰：“敬諾。”乃出其懷中藥予扁鵲：“飲是以上池之水三十日，當(dāng)知物矣?！薄怡o以其言，飲藥三十日，視見(jiàn)垣一方人。以此視病，盡見(jiàn)五臟癥結(jié)，特以診脈為名耳。后遂以“上池”“窺垣”以喻醫(yī)術(shù)高明。以此命名者有明代馬時(shí)可的《上池雜說(shuō)》，清代陳養(yǎng)晦的《傷寒五法》附《傷寒論》，康熙六年刊本又名《窺垣秘術(shù)》。

和緩：喻指良醫(yī)。醫(yī)和、醫(yī)緩，為春秋時(shí)秦國(guó)兩個(gè)名醫(yī)，后人常并稱之為“和緩”。如晉摯虞《疾愈賦》曰：“講和緩之余論，尋越人之遺方。”故以和緩喻良醫(yī)。以此命名者，如清代全子久《和緩醫(yī)風(fēng)》。

——國(guó)家中醫(yī)藥管理局網(wǎng)站

De te r mina tion o f Fe r ulic a cid in Er xin Guic an g Ton g qiao Pill b y HPLC

Zhu Huijian
(Pharmacy Department,Shangqiu First People's Hospital,Shangqiu,Henan Province,476000,China)

ObjectiveTo set up a method to determine Ferulic acid in Erwin Guicang Tongqiao pill.Methodhe content of ferulic acid vas determined bx HPLC.The chromatographic sxstem consisted of C18column，using methanol-1%Acetic acid solution（30∶70）as mobile phase.The content was detected at a waveleng of 321 nm，the flow rate was 1.0ml·min-1.ResultsThe ferulic acid had a good Linear relation in the range of 0.04004～0.4004μg（r=0.9996），the average recoverx vas 98.36%and RSD=1.13%（n= 6）.ConolusionThe established method vas simple，sensitive and accurate.It could be used for qualitx control of Erwin Guicang Tongqiao pill.

Ferulic acid；HPLC；Erwin Guicang Tongqiao pill；Chuanwiong

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.02.106

：1672-2779（2014）-02-0158-02

??蘇 玲 本文校對(duì)：劉曉云

2013-10-17）