運(yùn)輸應(yīng)激對(duì)比格犬血常規(guī)及生化指標(biāo)的影響

王鑫蕾，吳小彥，王新維，鄧干臻＊

（1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，湖北武漢 430070；2.湖北省黃梅縣畜牧局，湖北黃梅 436500）

應(yīng)激是機(jī)體受到體內(nèi)外非特異的有害因子的刺激所表現(xiàn)的防御反應(yīng)。適當(dāng)?shù)膽?yīng)激可以使動(dòng)物逐漸適應(yīng)環(huán)境，增強(qiáng)其免疫機(jī)能，從而提高其生產(chǎn)性能。然而，過度的應(yīng)激不僅影響動(dòng)物生產(chǎn)性能，而且會(huì)誘發(fā)多種疾病，甚至死亡，給養(yǎng)殖業(yè)帶來具大的經(jīng)濟(jì)損失［1］。運(yùn)輸應(yīng)激可以使動(dòng)物在運(yùn)輸過程中呼吸加快、心跳加速、體溫上升，精神先高度興奮不安，后呈抑制狀態(tài)，同時(shí)采食量和免疫力下降，運(yùn)輸應(yīng)激不僅影響動(dòng)物的機(jī)體功能，嚴(yán)重的還會(huì)造成動(dòng)物的疾病甚至死亡［2］。強(qiáng)烈的寒冷刺激會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物的生產(chǎn)性能降低，疾病易感性增強(qiáng)，還可改變機(jī)體的抗氧化功能，誘發(fā)氧化脅迫，導(dǎo)致自由基增多，對(duì)機(jī)體造成損傷，嚴(yán)重的直接導(dǎo)致死亡［3］。通常急性冷應(yīng)激時(shí)機(jī)體呈現(xiàn)免疫抑制；而慢性冷應(yīng)激呈現(xiàn)免疫增強(qiáng)；重度冷應(yīng)激導(dǎo)致機(jī)體免疫下降；溫和冷應(yīng)激導(dǎo)致機(jī)體免疫增強(qiáng)［4］。Carroll J A 等［5］研究結(jié)果表明，生長(zhǎng)豬在遭受冷應(yīng)激后（5℃）其采食量會(huì)提高，顯著高于20℃時(shí)，日增重降低。另外，飼養(yǎng)環(huán)境的改變也會(huì)造成應(yīng)激，是動(dòng)物在轉(zhuǎn)群后對(duì)新的環(huán)境和新的伙伴不適應(yīng)而產(chǎn)生的，容易造成咬斗，抵抗力下降。而且犬對(duì)飼料有很強(qiáng)的選擇性和喜好性，形成了固定的飲食習(xí)慣且較難改變。除此之外，圈舍的環(huán)境、斷奶、捕捉、噪音、剪毛、采血和拉網(wǎng)等也是不可忽視的應(yīng)激。這些應(yīng)激都會(huì)在不同程度上影響動(dòng)物的生產(chǎn)性能，有些應(yīng)激不易察覺，但已經(jīng)在生產(chǎn)上造成了一定的經(jīng)濟(jì)損失［6］。

動(dòng)物經(jīng)轉(zhuǎn)群、捕捉、運(yùn)輸后需要一個(gè)適應(yīng)期，即適應(yīng)性飼養(yǎng)，以期恢復(fù)至正常的生理狀態(tài)［7］。本試驗(yàn)通過監(jiān)測(cè)因運(yùn)輸伴隨的捕捉、寒冷和飼養(yǎng)管理?xiàng)l件改變而導(dǎo)致的多重應(yīng)激下，比格犬的生理生化指標(biāo)，探討多重應(yīng)激犬適應(yīng)性飼養(yǎng)周期，進(jìn)一步論證1周適應(yīng)性飼養(yǎng)的合理性，為相關(guān)研究提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)用動(dòng)物 30只健康比格犬，購(gòu)自廣東某犬場(chǎng)，性別不限，體重11kg～18.5kg，年齡5歲～6歲。出場(chǎng)前臨床檢查未見異常，犬瘟熱檢查均為陰性。

1.1.2 試驗(yàn)犬運(yùn)輸 冬季（11月26日）犬只經(jīng)犬籠裝載于貨車上，運(yùn)抵火車站，經(jīng)火車從廣州轉(zhuǎn)運(yùn)至武漢，再經(jīng)貨車轉(zhuǎn)運(yùn)至新的飼養(yǎng)場(chǎng)所，共歷時(shí)20h左右，兩地溫差20℃以上（廣東23℃～25℃，武漢接近0℃）。

1.1.3 飼養(yǎng)管理 犬只在廣東采取舍養(yǎng)，來武漢后采取籠養(yǎng)，較小的飼養(yǎng)空間造成動(dòng)物活動(dòng)受限和靜臥時(shí)間增加［8］；在廣東以自制犬食為主，輔以犬糧；來武漢后改為完全犬糧飼養(yǎng)。

1.2 方法

1.2.1 血常規(guī)和血液生化指標(biāo)檢測(cè) 運(yùn)輸?shù)?天上午試驗(yàn)犬運(yùn)達(dá)武漢，立即對(duì)犬只進(jìn)行采血。從犬的前肢橈靜脈采血3mL，并加入適量抗凝劑抗凝，進(jìn)行血常規(guī)檢測(cè)（全自動(dòng)獸用血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀）。余血緩慢推入5mL離心管內(nèi)，經(jīng)37℃水浴15min后3 000r／min離心15min，用移液槍吸取上清液至另一離心管中，用全自動(dòng)生化分析儀做生化檢測(cè)。經(jīng)過1周的適應(yīng)性飼養(yǎng)，再次對(duì)試驗(yàn)犬進(jìn)行采血，然后同樣做血常規(guī)和生化檢查。對(duì)于犬而言，采集血液比較困難，獲取樣本的同時(shí)也造成了一定程度的應(yīng)激，可能導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果的偏差［9］。

1.2.2 臨床癥狀監(jiān)測(cè) 試驗(yàn)前犬的體溫、呼吸和脈搏數(shù)因犬只驚恐而未測(cè)定。試驗(yàn)過程中對(duì)犬的精神、飲食欲、大小便、眼鼻分泌物狀況、噴嚏、咳嗽等每天進(jìn)行監(jiān)測(cè)并記錄。試驗(yàn)后測(cè)定犬的體溫、呼吸、脈搏，并觀察犬的臨床表現(xiàn)。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)分析 對(duì)試驗(yàn)所獲得數(shù)據(jù)進(jìn)行單因子方差分析和成對(duì)二樣本均值分析，P＜0.01為差異極顯著，P＜0.05為差異顯著，P＞0.05為差異不顯著。結(jié)果均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果

2.1 臨床癥狀

犬應(yīng)激的主要表現(xiàn)，即精神沉郁或嗜睡、可視黏膜潮紅、食欲減退、飲欲異常、腹瀉、鼻鏡干燥、流鼻涕、流眼淚、打噴嚏、咳嗽等。適應(yīng)性飼養(yǎng)前所有犬具有上述癥狀中的至少一項(xiàng)。對(duì)發(fā)生應(yīng)激的犬，給予安靜的環(huán)境，使其充分休息，并給予充足的飲水和犬糧，犬應(yīng)激癥狀逐漸改善。經(jīng)過7d的適應(yīng)性飼養(yǎng)犬的精神狀態(tài)良好，飲食欲正常，并且沒有噴嚏、流鼻涕、咳嗽等呼吸系統(tǒng)癥狀，犬的體溫、呼吸、脈搏數(shù)也均在正常值范圍內(nèi)。

2.2 血常規(guī)檢查結(jié)果

血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果見表1。由表1可見，適應(yīng)性飼養(yǎng)前 WBC顯著高于適應(yīng)性飼養(yǎng)后（P＜0.05），RBC、HGB、HCT極顯著高于適應(yīng)性飼養(yǎng)后（P＜0.01）；LYM%、GRAN%、MID%、PLT適應(yīng)性飼養(yǎng)前后無顯著性差異（P＞0.05）。

2.3 臨床生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果

臨床生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果見表2。適應(yīng)性飼養(yǎng)前ALT、LDH、CREA、CK 高于適應(yīng)性飼養(yǎng)后（P＜0.05），ALB、BUN、ALP 低于適應(yīng)性飼養(yǎng)后（P＜0.01），GLU 低于適應(yīng)性飼養(yǎng)后（P＜0.05），AST、TP、T-bil在適應(yīng)性飼養(yǎng)前后差異不顯著（P＞0.05）。

表1 血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果Table 1 The blood routine test results

3 討論

適應(yīng)后犬只 WBC、RBC、HGB、HCT總體呈減少趨勢(shì)，其他血常規(guī)指標(biāo)總體變化不大，說明應(yīng)激對(duì)紅細(xì)胞、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積和白細(xì)胞指標(biāo)都造成了顯著的影響。血液中的白細(xì)胞能夠吞噬異物產(chǎn)生抗體，在機(jī)體損傷治愈、抵御病原的入侵和對(duì)疾病的免疫方面起著重要的作用。本次試驗(yàn)中WBC在應(yīng)激后明顯增加，表明機(jī)體為了抵御外界環(huán)境的不良刺激，采取了一種防衛(wèi)反應(yīng)［10］。

應(yīng)激導(dǎo)致動(dòng)物血清中ALT、CK、LDH的活性有不同程度的升高。劇烈運(yùn)動(dòng)后、肌肉損傷或肌肉疲勞時(shí)，血液中血清肌酸激酶和乳酸脫氫酶含量增加，且血清肌酸激酶是肌細(xì)胞特異酶，血清肌酸激酶活性顯著升高表明肌細(xì)胞的膜系統(tǒng)受損［11］，同時(shí)脂質(zhì)離子通道微環(huán)境破壞，大量Ca2＋涌入細(xì)胞漿和線粒體內(nèi)，觸發(fā)肌肉收縮甚至震顫［12］。Mota R D 等［13］研究表明，豬經(jīng)過8h或16h的運(yùn)輸后，血液中的Ca2＋會(huì)顯著升高；谷丙轉(zhuǎn)氨酶主要存在于肝臟組織中，ALT的升高說明多重應(yīng)激對(duì)肝臟造成了一定程度的損傷；血糖降低提示機(jī)體對(duì)能量物質(zhì)需求增加；BUN和CREA升高增減是運(yùn)輸過程中脫水導(dǎo)致的。血液生化指標(biāo)是反映動(dòng)物機(jī)體生理狀況的重要指標(biāo)［14］，上述血常規(guī)和臨床生化指標(biāo)的變化表明，在多重應(yīng)激刺激下動(dòng)物機(jī)體為了抵御外界應(yīng)激刺激，血液某些酶活性發(fā)生較大變化，從而使機(jī)體發(fā)揮調(diào)節(jié)能力，達(dá)到穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)。

表2 血液生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果Table 2 Detection results of blood biochemistry indexes

動(dòng)物在進(jìn)入一個(gè)新環(huán)境后，通過自行調(diào)整可以更好的適應(yīng)環(huán)境。在適應(yīng)性飼養(yǎng)期間要隨時(shí)觀察動(dòng)物的身體健康狀況，觀察動(dòng)物是否有疾病。這是一個(gè)緩沖期，不可對(duì)動(dòng)物匆匆忙忙去做試驗(yàn)。準(zhǔn)備好充足的飲水和食物，注意環(huán)境溫度和濕度的調(diào)節(jié)，保持圈舍通風(fēng)良好，努力使之適應(yīng)新環(huán)境；時(shí)刻觀察動(dòng)物是否有飲食異常、腹瀉、咳嗽、被毛蓬亂和活動(dòng)異常等現(xiàn)象；并且要將動(dòng)物進(jìn)行隔離，不能接觸實(shí)驗(yàn)室原來飼養(yǎng)的其他動(dòng)物。一旦發(fā)現(xiàn)動(dòng)物異常，應(yīng)立即進(jìn)行隔離飼養(yǎng)，并找出原因。環(huán)境、溫度、飼養(yǎng)和管理等諸多因素都會(huì)導(dǎo)致應(yīng)激的發(fā)生，所以在飼養(yǎng)過程中應(yīng)注重應(yīng)激的預(yù)防，減輕應(yīng)激反應(yīng)的發(fā)生，首先要消滅應(yīng)激原，其次是提高動(dòng)物機(jī)體的抗應(yīng)激能力。

綜上所述，經(jīng)過1周的適應(yīng)性飼養(yǎng)發(fā)現(xiàn)應(yīng)激對(duì)犬所產(chǎn)生的影響基本得到了緩解與改善，各項(xiàng)血常規(guī)和臨床生化指標(biāo)恢復(fù)了正常范圍，并且臨床癥狀也消失，所以1周的適應(yīng)性飼養(yǎng)是合理有效并且是必須的。

［1］吳永魁，胡仲明.動(dòng)物應(yīng)激醫(yī)學(xué)及應(yīng)激的分子調(diào)控機(jī)制［J］.中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2005，25（5）：557-560.

［2］楊保收，金久善，陳 越.畜禽運(yùn)輸應(yīng)激綜合征研究進(jìn)展［J］.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，1999，20（4）：21-25.

［3］劉莉莉，初 芹，徐 青，等.動(dòng)物冷應(yīng)激的研究進(jìn)展［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，40（16）：8937-8940.

［4］邱家祥，米克熱木·沙衣布扎提，趙紅瓊.家禽冷應(yīng)激研究進(jìn)展［J］.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2008，29（3）：96-101.

［5］Carroll J A，Burdick N C，Chase C C，et al.Influence of environment temperature on the physiological，endocrine，and immune responses in livestock exposed to a provocative immune challenge［J］.Domes Anim Endocrinol，2012，43：146-153.

［6］張 強(qiáng)，趙鵬鵬，金學(xué)林，等.圈養(yǎng)珍稀野生動(dòng)物應(yīng)激性疾病及防治［J］.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2011，32（2）：129-133.

［7］王 洋，于 靜，王 巍，等.娟姍牛品種特性及適應(yīng)性飼養(yǎng)研究［J］.奶牛天地，2011（11）：47-48.

［8］Sajjad S，F(xiàn)arooq U，Anwar M，et al.Effect of captive environment on plasma cortisol level and behavioral pattern of bengal tigers（panthera tigris）［J］.Pakistan Vet J，2011，31（3）：195-198.

［9］Sheriff M J，Dantzer B，Delehanty B，et al.Measuring stress in wildlife；techniques for quantifying glucocorticoids［J］.Oecologia，2011，166（4）：869-887.

［10］湯繼順，李立冰，陳 勝，等.運(yùn)輸應(yīng)激對(duì)大別山黃牛的影響［J］.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2013，34（12）：236-240.

［11］李留安，杜改梅，金天明.運(yùn)輸應(yīng)激對(duì)動(dòng)物機(jī)體功能影響的研究進(jìn)展［J］.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2010（9）：40-41.

［12］Kudielka B M，W St S.Human models in acute and chronic stress：assessing determinants of individual hypothalamus-pitu-itary-adrenal axis activity and reactivity［J］.Stress，2010，13（1）：1-14.

［13］Mota R D，Becerril Herrera M，Roldan Santiago P，et al.Effects of long distance transportation and CO2stunning on critical blood values in pigs［J］.Meat Sci，2012，90（4）：893-898.

［14］王棟才，張喜忠，陳劍波，等.西門塔爾太行類群牛血液生理生化指標(biāo)的測(cè)定研究［J］.草食家畜，2012（3）：23-26，30.