吉祥草新鮮根莖化學(xué)成分研究

王玉婷 郭志勇 鄒 坤

（三峽大學(xué) 生物與制藥學(xué)院 天然產(chǎn)物研究與利用湖北省重點實驗室，湖北 宜昌 443002）

吉祥草［Reineckia carnea（Andr.）Kunth］是百合科吉祥草屬植物，又名觀音草、小葉萬年青、玉帶草等［1］，主要分布在華東、西南等地，為我國苗族常用中草藥［2］.吉祥草全草入藥，具有清肺止咳、接骨、解毒利咽等功效，常用于治療慢性支氣管炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及跌打損傷等［3］.現(xiàn)代研究表明吉祥草中化學(xué)成分除甾體類、黃酮類外還含有萜類、木脂素類等［4］.課題組在前期研究中從吉祥草根莖分離到3個甾體化合物及2個黃酮［5］，在此基礎(chǔ)上繼續(xù)開展了吉祥草的化學(xué)成分研究，先后分離得到4個化合物，經(jīng)鑒定分別為（25S）-22，3-dihydroxy-5β-furost-3β，26-diol-26-O-β-D-glucopyranoside（1）、26-O-β-D-glucopyranosylfurosta-ne-3β，26-diol-3-O-β-D-glucopyranoside（2）、1-O-（6-O-α-L-rhamnopyra-nosyl-β-D-glucopyranosyl）-2-hydroxy-4-allylbenzene（3）、落葉松樹脂醇-9-O-β-D-吡喃型葡萄糖苷（4），化合物1～4均為首次從該屬植物中分離得到.

1 儀器和試劑

Waters 1525EF高效液相色譜儀，美國 Waters公司；DIONEX Ultimate 3000高效液相色譜儀，美國戴安液相色譜有限公司；半制備色譜柱Ultimate?AQ-C18（10×250mm，10μm），分析型色譜柱 Ultimate? AQ-C18（4.6×250mm，5μm）；Bruker-ARX-400核磁共振光譜儀，瑞士Bruker公司；正相色譜硅膠，煙臺化學(xué)工業(yè)研究所；反相硅膠為進(jìn)口YMC RPC18；薄層色譜硅膠，青島海洋化工有限公司；高效液相用乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純.

實驗用吉祥草采自湖北長陽樂園，經(jīng)三峽大學(xué)生物與制藥學(xué)院楊進(jìn)副教授鑒定為吉祥草（Reineckia carnea Kunth），植物標(biāo)本保存于三峽大學(xué)天然產(chǎn)物研究與利用湖北省重點實驗室.

2 方法與結(jié)果

2.1 提取與分離

將吉祥草新鮮根莖切碎（35kg），用95%的工業(yè)酒精冷浸提取3次.合并提取液，濃縮成浸膏后用水懸浮，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到各部位浸膏重分別為10g，241g，605g.取正丁醇部位浸膏460g，用D-101大孔樹脂初步分離，乙醇-水梯度洗脫，得30%、60%、90%乙醇洗脫部位.60%乙醇洗脫部位（80g）經(jīng)反相柱層析得到90個流份（Fr.1-90），F(xiàn)r.55、61、84經(jīng)高效液相（乙腈／水體系）制備，最終得到化合物1～4其結(jié)構(gòu)見圖1.

圖1 化合物1～4結(jié)構(gòu)式

2.2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色粉末，mp 240～243℃，分子式C33H56O9.ESI-MS m／z：619［M＋Na］＋.1H-NMR（C5D5N-d5，400MHz）：δ0.99（3H，d，J＝8.0Hz，27-CH3），0.90（3H，s，18-CH3），0.91（3H，s，19-CH3）和1.33（3H，d，J＝8.0Hz，21-CH3）；13C NMR（C5D5N-d5，100MHz）：δ29.3（C-1），27.2（C-2），75.3（C-3），37.2（C-4），40.7（C-5），26.3（C-6），26.4（C-7），31.8（C-8），35.6（C-9），39.5（C-10），21.4（C-11），40.4（C-12），41.1（C-13），56.4（C-14），32.4（C-15），81.2（C-16），64.0（C-17），16.8（C-18），19.5（C-19），42.1（C-20），16.5（C-21），110.7（C-22），34.2（C-23），28.4（C-24），34.5（C-25），75.4（C-26），17.5（C-27），105.2（glc，C-1′），74.5（glc，C-2′），78.6（glc，C-3′），71.7（glc，C-4′），78.5（glc，C-5′），62.9（glc，C-6′）.波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［6］報道中的（25S）-22，3-dihydroxy-5β-furost-3β，26-diol-26-O-β-D-glucopyranoside一致.故鑒定化合物1為（25S）-22，3-dihydroxy-5β-furost-3β，26-diol-26-O-β-D-glucopyranoside，為首次從吉祥草中分離得到.

化合物2：白色粉末，mp 310～313℃，分子式C39H66O14.ESI-MS m／z：781［M＋Na］＋.1H NMR（C5D5N-d5，400MHz）：δ1.05（3H，d，J＝8.0Hz，27-CH3），0.92（3H，s，18-CH3），0.92（3H，s，19-CH3）和1.33（3H，d，J＝8.0Hz，21-CH3）；13C NMR（C5D5N-d5，100MHz）：δ28.9（C-1），28.7（C-2），75.3（C-3），36.7（C-4），40.7（C-5），26.2（C-6），26.4（C-7），32.7（C-8），35.2（C-9），39.7（C-10），21.8（C-11），40.4（C-12），41.1（C-13），56.4（C-14），32.4（C-15），81.1（C-16），64.0（C-17），16.9（C-18），19.2（C-19），43.1（C-20），16.5（C-21），110.7（C-22），37.2（C-23），28.4（C-24），34.5（C-25），75.4（C-26），17.5（C-27），105.2（glc，C-1′），74.2（glc，C-2′），78.6（glc，C-3′），71.7（glc，C-4′），78.5（glc，C-5′），62.8（glc，C-6′），102.3（glc，C-1″），74.0（glc，C-2″），78.6（glc，C-3″），71.7（glc，C-4″），78.5（glc，C-5″），62.8（glc，C-6″）.波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7］報道中的26-O-β-D-glucopyranosylfurostane-3β， 26-diol-3-O-β-D-glucopyranoside一致.故鑒定化合物2為26-O-β-D-glucopyranosylfurostane-3β，26-diol-3-O-β-D-glucopyranoside，為首次從吉祥草屬植物中分離得到.

化合物3：淡黃色粉末，mp 209～212℃，分子式C21H30O11.ESI-MS m／z：481［M＋Na］＋.1H-NMR（DMSO-d6，400MHz）顯示有2個糖端基氫信號，分別為δ4.56（1H，d，J＝8.0Hz）和4.58（1H，d，J＝1.5Hz），還有1個甲基質(zhì)子信號δ1.12（3H，s），推斷其含有α-L-rhamnopyranosyl單元.13C NMR（DMSO-d6，100MHz）：δ143.7（C-1），147.0（C-2），116.0（C-3），134.7（C-4），119.0（C-5），117.1（C-6），38.9（C-7），137.9（C-8），115.4（C-9），102.9（glc，C-1′），75.8（glc，C-2′），75.6（glc，C-3′），70.1（glc，C-4′），73.3（glc，C-5′），66.7（glc，C-6′），100.7（rha，C-1″），70.7（rha，C-2″），70.5（rha，C-3″），71.9（rha，C-4″），68.4（rha，C-5″），17.8（rha，C-6″）.波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］報道中的1-O-（6-O-α-L-rhamnopyranosylβ-D-glucopyranosyl）-2-hydroxy-4-allylbenzene一致.

3 討 論

吉祥草的傳統(tǒng)提取方法多為乙醇加熱回流提取，而溫度過高可能會改變吉祥草中化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)，因此，本實驗采用乙醇室溫冷浸提取，盡可能減少對其所含化學(xué)成分的影響.

本實驗從吉祥草新鮮根莖乙醇提取物的正丁醇故鑒定化合物3為1-O-（6-O-α-L-rhamnopyranosylβ-D-glucopyranosyl）-2-hydroxy-4-allyl benzene.化合物3為首次從吉祥草屬植物中分離得到.

化合物4：淡黃色粉末，mp 226～228℃，分子式C26H34O11.ESI-MS m／z：545［M＋Na］＋.1H NMR（DMSO-d6，400MHz）：δ2.33（1H，d，J＝7.1Hz，8-H），2.36（1H，m，7′-H），2.87（1H，m，7′-H），2.62（1H，m，8′-H），3.62（1H，m，9-H），3.81（1H，m，9-H），3.56（1H，m，9′-H），3.88（1H，m，9′-H），3.74（6H，d，J＝3.4Hz，-OCH3），4.63（1H，d，J＝7.1Hz，7-H），4.17（1H，d，J＝7.8Hz，glc-1），6.60（1H，d，J＝1.7Hz，6′-H），6.65（1H，br s，5′-H），6.77（1H，d，J＝1.8Hz，2′-H），6.70（1H，br s，6-H），6.86（1H，br s，2-H），6.91（1H，br s，5-H）；13C NMR（DMSO-d6，100MHz）：δ134.1（C-1），110.2（C-2），147.5（C-3），145.7（C-4），115.0（C-5），118.4（C-6），81.5（C-7），50.2（C-8），66.4（C-9），131.7（C-1′），112.8（C-2′），147.4（C-3′），144.5（C-4′），115.3（C-5′），120.9（C-6′），32.3（C-7′），42.2（C-8′），71.6（C-9′），55.5（3-OCH3），55.5（3′-OCH3），103.2（glc，C-1″），73.5（glc，C-2″），76.9（glc，C-3″），70.0（glc，C-4″），76.7（glc，C-5″），61.0（glc，C-6″）.其NMR譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］中落葉松樹脂醇-9-O-β-D-吡喃型葡萄糖苷的數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定化合物4為落葉松樹脂醇-9-O-β-D-吡喃型葡萄糖苷，為首次從吉祥草中分離得到.部位分離到4個單體化合物，通過理化性質(zhì)和波譜解析等方法鑒定為2個甾體皂苷和2個苯丙素類化合物，且這4個化合物均為首次從該植物中分離得到.

雖然對吉祥草已有相關(guān)的化學(xué)成分研究報道，但數(shù)量有限.以上研究結(jié)果進(jìn)一步闡明了吉祥草中所含的化學(xué)成分，為以后對其化學(xué)成分及相關(guān)藥理活性的研究奠定了基礎(chǔ).

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