• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    北京官?gòu)d水庫(kù)水體甲狀腺激素干擾效應(yīng)檢測(cè)及特征

    2014-05-13 03:04:16任姝娟李沫蕊王亞飛北京師范大學(xué)水科學(xué)研究院地下水污染控制與修復(fù)教育部工程研究中心北京100875
    中國(guó)環(huán)境科學(xué) 2014年7期
    關(guān)鍵詞:官?gòu)d水庫(kù)水樣酵母

    李 劍,任姝娟,李沫蕊,王亞飛 (北京師范大學(xué)水科學(xué)研究院,地下水污染控制與修復(fù)教育部工程研究中心,北京 100875)

    北京官?gòu)d水庫(kù)水體甲狀腺激素干擾效應(yīng)檢測(cè)及特征

    李 劍*,任姝娟,李沫蕊,王亞飛 (北京師范大學(xué)水科學(xué)研究院,地下水污染控制與修復(fù)教育部工程研究中心,北京 100875)

    應(yīng)用重組人甲狀腺激素受體(hTR)基因酵母快速測(cè)試方法,檢測(cè)北京官?gòu)d水庫(kù)水體類/抗甲狀腺激素干擾效應(yīng),并分析其地理分布、季節(jié)分布特征以及水體甲狀腺激素干擾化合物(TDCs)組成特征.結(jié)果表明:官?gòu)d水庫(kù)水體檢出了顯著的抗甲狀腺激素干擾效應(yīng),與其它研究區(qū)域相比,效應(yīng)處于較低到中等水平;入庫(kù)河流對(duì)庫(kù)區(qū)水質(zhì)產(chǎn)生顯著影響,且入庫(kù)河流水質(zhì)受季節(jié)影響顯著,因此,庫(kù)區(qū)水體不同季節(jié)甲狀腺激素干擾水平存在差異;C18固相萃取柱對(duì)抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)的去除率在61.9%~92.3%,表明官?gòu)d水庫(kù)水體中的甲狀腺激素抑制活性物質(zhì)多集中在有機(jī)組分,加入30mg/L的EDTA后TR抑制活性顯著降低,表明官?gòu)d水庫(kù)水體中TDCs除有機(jī)化合物外可能還包含重金屬類無(wú)機(jī)化合物.

    重組基因酵母;甲狀腺激素干擾化合物;官?gòu)d水庫(kù);甲狀腺激素干擾效應(yīng)

    一些環(huán)境化合物具有潛在的甲狀腺激素干擾活性,如酚類化合物、農(nóng)藥、持久性有機(jī)污染物、溴代阻燃劑等[1].這些具有甲狀腺激素干擾活性的化合物通常被稱為甲狀腺激素干擾物(TDCs),TDCs已成為繼環(huán)境雌激素之后最重要的一類內(nèi)分泌干擾物[2].研究證實(shí),TDCs能夠伴隨人類生產(chǎn)、生活活動(dòng)進(jìn)入環(huán)境水體,對(duì)人類健康和生態(tài)安全造成重大威脅.

    環(huán)境水樣TDCs檢測(cè)方法通常包括生物測(cè)試方法和化學(xué)分析方法兩大類[3].生物測(cè)試的結(jié)果不僅能夠反映環(huán)境樣品中TDCs的濃度水平,而且能夠表征 TDCs的效應(yīng)特征.其中,重組甲狀腺激素受體(TR)基因酵母法是檢測(cè)環(huán)境水樣TDCs的一種重要的生物測(cè)試方法,具有穩(wěn)定、經(jīng)濟(jì)、高效的特點(diǎn),且通過(guò)該方法能夠檢測(cè)出水體類/抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)[4].環(huán)境水樣通常都要經(jīng)過(guò)復(fù)雜的前處理后才能進(jìn)行分析測(cè)定.環(huán)境水樣 TDCs檢測(cè)時(shí)通常采用的前處理方法包括液液萃取、固相萃取、微波萃取等[5].環(huán)境水樣前處理通常需要消耗大量有機(jī)溶劑,危害環(huán)境,且操作時(shí)間較長(zhǎng);而且前處理方法在富集、濃縮的過(guò)程中也可能造成環(huán)境中未知 TDCs的損失,因此測(cè)試結(jié)果不能反映環(huán)境水樣甲狀腺激素干擾的真實(shí)情況.因此,本實(shí)驗(yàn)室開(kāi)發(fā)出一套無(wú)需復(fù)雜樣品前處理的環(huán)境水樣甲狀腺激素干擾效應(yīng)重組基因酵母體外快速測(cè)試方法,已證實(shí)能夠應(yīng)用于環(huán)境水樣類/抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)的檢測(cè)[6].

    環(huán)境水樣中的 TDCs按照性質(zhì)的不同,可分為有機(jī)類和無(wú)機(jī)類.有機(jī) TDCs的研究是目前的熱點(diǎn),水環(huán)境中已發(fā)現(xiàn)的有機(jī)TDCs種類繁多.對(duì)于無(wú)機(jī)TDCs的研究較少,Boas等僅報(bào)道高氯酸鹽具有甲狀腺激素干擾活性[1].早期的研究證實(shí),重金屬離子Zn2+、Cu2+、Cd2+也具有抑制甲狀腺激素三碘甲狀腺原氨酸T3和TR結(jié)合的活性[7];特別是 Zn2+,生物學(xué)研究已經(jīng)證實(shí)該元素對(duì)于調(diào)節(jié) TR介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)錄具有至關(guān)重要的作用[8].但是,目前對(duì)于環(huán)境水樣的研究多集中于有機(jī)組分甲狀腺激素干擾效應(yīng)的檢測(cè)[9-10],鮮見(jiàn)水體無(wú)機(jī)組分干擾效應(yīng)的報(bào)道.

    因此,本研究選擇北京官?gòu)d水庫(kù)水體作為研究對(duì)象,分枯/豐水期分別采集水樣,采用重組基因酵母快速測(cè)試方法,考察北京官?gòu)d水庫(kù)水體甲狀腺激素干擾效應(yīng)水平及其季節(jié)、地理分布特征.水樣經(jīng)C18柱固相萃取、EDTA處理后分別考察類/抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)變化,分析有機(jī)組分、無(wú)機(jī)組分對(duì)水體甲狀腺激素干擾效應(yīng)的貢獻(xiàn),初步探討水體TDCs的組成特征.

    1 實(shí)驗(yàn)部分

    1.1 樣品采集

    2012年5月和9月分別對(duì)北京官?gòu)d水庫(kù)水樣進(jìn)行采集,采樣點(diǎn)如圖1所示.每個(gè)樣點(diǎn)采集水樣 2.5L,以清潔玻璃瓶盛裝;采集后 24h內(nèi)采用0.7μm玻璃纖維濾膜(Millipore,美國(guó))過(guò)濾去除懸浮顆粒物,收集過(guò)濾水樣0.5L用于改進(jìn)后的重組基因酵母方法快速測(cè)試.2L水樣經(jīng)C18柱(500mg, Waters,美國(guó))固相萃取后收集柱后樣品 1L,其中0.5L用于快速生物測(cè)試,0.5L添加30mg/LEDTA后用于快速生物測(cè)試.

    圖1 官?gòu)d水庫(kù)采樣點(diǎn)示意Fig.1 Sampling sites in the Guanting Reservoir

    1.2 重組基因酵母體外快速測(cè)試

    重組TR基因酵母由中國(guó)科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心環(huán)境水質(zhì)學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供.改進(jìn)后的重組基因酵母快速測(cè)試方法參考文獻(xiàn)[6]進(jìn)行,可簡(jiǎn)單描述為:選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的酵母細(xì)胞,調(diào)節(jié)細(xì)胞密度使得 600nm處的吸光度 OD600nm值為0.75.5mL酵母細(xì)胞 1000g離心 5min(Sigma Laborzentrifugen 2K15,德國(guó)),棄去上清,加入4.5mL待測(cè)水樣及0.5mL 10×SD/-Leu/-Trp培養(yǎng)基;檢測(cè)水樣抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)時(shí)添加12.5μL 10-4mol/L T3(Sigma,美國(guó)).30℃振蕩培養(yǎng)(130r/min,HZQ-Q,中國(guó))2h后,200μL溶液轉(zhuǎn)移到96孔板中,測(cè)定 600nm處的吸光度值(TECAN GENios A-5002,澳大利亞),每個(gè)樣品設(shè)4個(gè)平行.每孔吸取 100μL溶液加入新的 96孔板中,加入100μL 反應(yīng)緩沖液(Tropix, Bedford, MA, USA)30

    ℃,800r/min,反應(yīng) 1h,酶標(biāo)儀測(cè)定發(fā)光值(TECAN GENios A-5002,Austria).

    1.3 數(shù)據(jù)表征

    β-半乳糖苷酶活性值的計(jì)算參考文獻(xiàn)[9].水樣類/抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)分別采用相對(duì)百分誘導(dǎo)活性P和相對(duì)百分抑制活性I表征,計(jì)算公式如下:

    式中:u為環(huán)境水樣檢測(cè)的 β-半乳糖苷酶活性值;umax為T3在最大誘導(dǎo)效應(yīng)濃度(2.5×10-7mol/L)誘導(dǎo)的β-半乳糖苷酶活性值.根據(jù)I值和抗甲狀腺激素標(biāo)準(zhǔn)化合物鹽酸胺碘酮(AH)的劑量-效應(yīng)關(guān)系,參考文獻(xiàn)報(bào)道方法計(jì)算水樣AH當(dāng)量[6,9].

    1.4 質(zhì)量控制和質(zhì)量保證

    為保證整個(gè)樣品前處理過(guò)程的可靠性,在樣品前處理過(guò)程中添加空白樣品(Mili-Q超純水),并同步進(jìn)行生物毒性測(cè)試,對(duì)整個(gè)試驗(yàn)流程進(jìn)行監(jiān)控,保證生物測(cè)試實(shí)驗(yàn)的可靠性[6].樣品平行測(cè)定3次,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中嚴(yán)格添加陽(yáng)/陰性對(duì)照并保證標(biāo)準(zhǔn)曲線的日校正.具體步驟如下:

    檢測(cè)環(huán)境水樣時(shí),每組樣品均添加陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照.陰性對(duì)照均采用 Mili-Q超純水;類甲狀腺激素干擾效應(yīng)檢測(cè)時(shí)陽(yáng)性對(duì)照選擇濃度為2.5×10-7mol/L T3溶液(溶解到Mili-Q超純水中);抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)檢測(cè)時(shí)陽(yáng)性對(duì)照選擇2.5×10-7mol/L T3+10-7mol/L AH溶液(溶解到Mili-Q超純水中).

    標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行日校正.基于陽(yáng)性對(duì)照誘導(dǎo)/抑制酵母細(xì)胞酶活性的劑量-效應(yīng)關(guān)系曲線,選取曲線線性部分 2~4個(gè)陽(yáng)性對(duì)照濃度對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行日校正.

    為了去除環(huán)境樣品急性毒性(主要考慮對(duì)酵母的細(xì)胞毒性)對(duì)誘導(dǎo)/抑制酶活性的影響,添加酵母細(xì)胞急性毒性試驗(yàn).測(cè)定600nm處的吸光度,表征酵母細(xì)胞密度,與空白對(duì)照相判斷是否存在顯著差異,具有急性毒性的樣品不計(jì)算其誘導(dǎo)/抑制酶活性[11].

    添加樣品回收率試驗(yàn).對(duì)于類甲狀腺激素干擾效應(yīng)檢測(cè),環(huán)境水樣中添加 2.5×10-7mol/L T3,回收率的計(jì)算公式為(加標(biāo)樣品 T3當(dāng)量-未加標(biāo)樣品 T3當(dāng)量)/2.5×10-7mol/L.對(duì)于抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)檢測(cè),環(huán)境水樣中添加2.5×10-7mol/L T3及 10-7mol/L AH,回收率的計(jì)算公式為:(加標(biāo)樣品AH當(dāng)量-未加標(biāo)樣品AH當(dāng)量)/10-7mol/L.回收率測(cè)試結(jié)果大于 125%或小于 65%時(shí),數(shù)據(jù)不可用[11].

    2 結(jié)果與討論

    2.1 官?gòu)d水庫(kù)水樣類/抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)采用快速測(cè)試方法對(duì)2012年5月和9月采集的官?gòu)d水庫(kù)水樣類/抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)進(jìn)行檢測(cè),所有測(cè)試樣品均未檢出顯著的酵母細(xì)胞急性毒性,實(shí)驗(yàn)空白控制較好,樣品回收率為65.0%~119.9%,平均回收率為90.1%.測(cè)試結(jié)果如圖2所示,5月和9月水樣均未檢出顯著的類甲狀腺激素干擾效應(yīng),誘導(dǎo)酶活性值與空白對(duì)照相比未有顯著差異(P<0.05),表明官?gòu)d水庫(kù)水體中未有類甲狀腺激素干擾物或類甲狀腺激素干擾物的量低于本方法檢測(cè)限.測(cè)試結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道類似,Li 等[12]對(duì)北京飲用水源地及飲用水不同處理工藝出水樣品檢測(cè)時(shí)也未發(fā)現(xiàn)明顯的TR誘導(dǎo)活性;Li 等[9]也報(bào)道廣州污水處理廠不同工藝出水不具有類甲狀腺激素干擾效應(yīng).

    圖2 官?gòu)d水庫(kù)水樣類甲狀腺激素干擾效應(yīng)Fig.2 Agonistic thyroid receptor activities of water from Guanting Reservoir

    采用快速測(cè)試方法對(duì)官?gòu)d水庫(kù)水樣抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)進(jìn)行檢測(cè),測(cè)試結(jié)果如圖3所示.除空白對(duì)照外,在官?gòu)d水庫(kù)8個(gè)采樣點(diǎn),5月及9月樣品中均檢測(cè)出抗甲狀腺激素干擾效應(yīng),效應(yīng)水平采用AH當(dāng)量進(jìn)行表征[9].2012年5月官?gòu)d水庫(kù)水樣 AH 當(dāng)量濃度水平在(21.2±1.6)~(313.9±28.8)μg/L;9月官?gòu)d水庫(kù)水樣 AH當(dāng)量濃度范圍在(21.0±1.0)~(2147.2±48.1)μg/L.將官?gòu)d水庫(kù)水樣抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)水平與文獻(xiàn)報(bào)道值比較發(fā)現(xiàn),官?gòu)d庫(kù)區(qū)水體中抗甲狀腺激素干擾物濃度處于較低到中等污染水平(表1).

    圖3 官?gòu)d水庫(kù)水樣抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)Fig.3 Antagonistic thyroid receptor activities of water from Guanting Reservoir

    2.2 官?gòu)d水庫(kù)水樣抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)分布特征

    2012年5月官?gòu)d水庫(kù)水樣抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)AH當(dāng)量濃度較高值出現(xiàn)在采樣點(diǎn)GR1、GR2和 GR5,當(dāng)量濃度分別為:(313.9±28.8)、(113.0±4.1)和(188.0±19.6)μg/L;庫(kù)區(qū)內(nèi)其他采樣點(diǎn) AH當(dāng)量濃度值在(21.2±1.6)~(47.2±4.7)μg/L,遠(yuǎn)低于上述3個(gè)采樣點(diǎn).其中GR1采自永定河8號(hào)橋,反映入庫(kù)前永定河的水質(zhì)狀況;GR5采自永定河入庫(kù)口,GR2采自媯水河入庫(kù)口.永定河和媯水河是官?gòu)d水庫(kù)的兩條主要入庫(kù)河流,永定河 8號(hào)橋、永定河入庫(kù)口、媯水河入庫(kù)口水樣抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)遠(yuǎn)高于官?gòu)d庫(kù)區(qū)其他幾個(gè)采樣點(diǎn)的效應(yīng)值,表明庫(kù)區(qū)抗甲狀腺激素干擾物可能來(lái)自于永定河、媯水河的輸入.康躍惠等[13]研究了北京官?gòu)d水庫(kù)-永定河水系水體中持久性有機(jī)氯農(nóng)藥污染,也得出了類似的結(jié)論,認(rèn)為官?gòu)d庫(kù)區(qū)水體中有機(jī)氯農(nóng)藥來(lái)自永定河、媯水河的輸入.

    2012年9月官?gòu)d水庫(kù)水樣AH當(dāng)量濃度較高值出現(xiàn)在采樣點(diǎn)GR1、GR5和GR6,當(dāng)量濃度分別為:(2147.2±48.1)、(564.3±43.7)和(198.2± 14.8)μg/L.GR6采自永庫(kù)區(qū),靠近永定河入庫(kù)口.與 5月采集的樣品比較發(fā)現(xiàn),9月來(lái)自永定河輸入的抗甲狀腺激素干擾物的濃度明顯增加,永定河8號(hào)橋檢測(cè)到的AH當(dāng)量濃度值是5月的6.8倍,且該類物質(zhì)輸入濃度的增加,不僅影響到永定河入庫(kù)口的水質(zhì),對(duì)于下游永庫(kù)區(qū)的水質(zhì)也產(chǎn)生了顯著的影響.9月由于媯水河出現(xiàn)斷流,媯水河入庫(kù)口水質(zhì)恢復(fù),與庫(kù)區(qū)其他樣點(diǎn)相比抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)無(wú)顯著性差異.整個(gè)媯庫(kù)區(qū)的 AH當(dāng)量濃度值與5月相比略有降低.由此可見(jiàn),由于入庫(kù)河流水量、水質(zhì)受季節(jié)影響顯著,官?gòu)d水庫(kù)庫(kù)區(qū)水體抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)也呈現(xiàn)一定的季節(jié)變化規(guī)律.

    表1 水樣抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)當(dāng)量濃度比較Table 1 The antagonistic thyroid receptor activities of water samples collected in different area

    綜合5月和9月采集樣品的測(cè)試結(jié)果表明,永定河是官?gòu)d水庫(kù)抗甲狀腺激素干擾物的重要輸入源,對(duì)官?gòu)d水庫(kù)水體水質(zhì)影響較大,應(yīng)該引起重視.調(diào)查發(fā)現(xiàn),官?gòu)d水庫(kù)永定河上游的張家口宣化農(nóng)藥廠、懷來(lái)縣城的長(zhǎng)城化工廠、洋河工業(yè)區(qū)的廢水排放以及生活污染排放可能是永定河污染的重要來(lái)源.

    2.3 官?gòu)d水庫(kù)水樣抗甲狀腺激素干擾物組成特征

    本文借鑒USEPA建立的廢水TIE的方法初步探索官?gòu)d水庫(kù)水體TDCs的組成特征.TIE方法進(jìn)行毒性鑒定的范圍涵蓋了氨氮、重金屬離子等無(wú)機(jī)物和各類有機(jī)物[16].本文參考該鑒定方法,其中氨氮類化合物根據(jù)之前的文獻(xiàn)報(bào)道及本實(shí)驗(yàn)室的測(cè)試數(shù)據(jù)均證實(shí)該類化合物不具有TR的干擾活性(數(shù)據(jù)未列出),因此,重點(diǎn)考察水體中的重金屬類無(wú)機(jī)化合物和有機(jī)化合物對(duì)毒性的貢獻(xiàn).

    圖4 固相萃取(SPE)、添加EDTA對(duì)官?gòu)d水庫(kù)水樣抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)的影響Fig.4 Antagonistic thyroid receptor (TR) activities of the original water, residual water after the solid-phase extraction (SPE) and the treatment water after addition the EDTA

    選擇2012年5月采集水樣,采用固相萃取方法(SPE),選用C18固相萃取柱對(duì)水體中的非極性有機(jī)組分進(jìn)行富集,考察水樣萃取前后甲狀腺激素干擾效應(yīng)的改變.測(cè)試結(jié)果表明萃取后的水樣仍未檢出顯著的類甲狀腺激素干擾效應(yīng)(數(shù)據(jù)未列出).但是,萃取后水樣的抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)顯著降低(如圖 4);C18固相萃取柱對(duì)水樣抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)的去除率在 61.9%~92.3%,表明官?gòu)d水庫(kù)水體中的抗甲狀腺激素干擾化合物多為有機(jī)化合物,集中在有機(jī)組分中.Boas等[1]報(bào)道證實(shí)目前已篩選出大量具有抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)的有機(jī)化合物,比較典型的有多氯聯(lián)苯、溴代阻燃劑、鄰苯二甲酸酯等.Li等[10]及Shi等[14]對(duì)我國(guó)飲用水源水甲狀腺激素干擾效應(yīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn),鄰苯二甲酸酯是水體主要的抗甲狀腺激素干擾物.

    樣點(diǎn)GR1、GR2和GR5經(jīng)萃取后的抑制效率與空白對(duì)照之間存在顯著性差異(P<0.05),表明C18固相萃取柱不能完全去除水體中的抗甲狀腺激素干擾物;官?gòu)d水庫(kù)水樣中除有機(jī)化合物外可能存在其他的抗甲狀腺激素干擾物.因此,向測(cè)試體系中加入30mg/L的EDTA(實(shí)驗(yàn)證實(shí)該濃度對(duì)測(cè)試體系酶活性無(wú)影響,數(shù)據(jù)未列出),去除水樣中的重金屬離子,觀察水樣干擾效應(yīng)的變化.測(cè)試結(jié)果如圖4,加入EDTA后水樣GR1、GR2和GR5抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)明顯降低,與空白對(duì)照相比無(wú)顯著差異,由此可初步推斷,官?gòu)d水庫(kù)水樣中抗甲狀腺激素干擾物除有機(jī)化合物外可能包含重金屬類無(wú)機(jī)化合物.Surks等[7]報(bào)道證實(shí)重金屬離子Zn2+、Cu2+、Cd2+能夠抑制甲狀腺激素T3和TR結(jié)合,特別是Zn2+在1μmol/L時(shí)即表現(xiàn)出顯著的抑制活性,添加重金屬螯合劑EDTA后能夠終止重金屬離子的抑制活性,促進(jìn)甲狀腺激素誘導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)錄.

    3 結(jié)論

    3.1 官?gòu)d水庫(kù)水體未檢出類甲狀腺激素干擾效應(yīng),但是具有抗甲狀腺激素干擾效應(yīng),與文獻(xiàn)報(bào)道相比,干擾效應(yīng)處于較低到中等水平.

    3.2 入庫(kù)河流對(duì)官?gòu)d水庫(kù)庫(kù)區(qū)水體抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)影響顯著,且入庫(kù)河流水質(zhì)、水量受季節(jié)影響,因此,庫(kù)區(qū)水體不同季節(jié)甲狀腺激素干擾水平也存在差異;庫(kù)區(qū)水體甲狀腺激素干擾效應(yīng)水平雖然相對(duì)較低,但是存在新的污染輸入,如果恢復(fù)為北京的飲用水源地,則應(yīng)該引起重視.

    3.3 官?gòu)d水庫(kù)水體中具有抗甲狀腺激素干擾效應(yīng)的化合物除了有機(jī)化合物外,一些無(wú)機(jī)組分如重金屬離子等,也可能產(chǎn)生甲狀腺激素的干擾作用;由此可見(jiàn),僅僅研究環(huán)境樣品有機(jī)組分的甲狀腺激素干擾效應(yīng),不能反應(yīng)環(huán)境樣品對(duì)甲狀腺系統(tǒng)干擾的真實(shí)水平.

    [1] Boas M, Feldt-Rasmussen U, Skakkebaek N E, et al. Environmental chemicals and thyroid function [J]. European Journal of Endocrinology, 2006,154(5):599-611.

    [2] 周景明,秦占芬,叢 琳,等.多氯聯(lián)苯內(nèi)分泌干擾作用及機(jī)理研究進(jìn)展 [J]. 科學(xué)通報(bào), 2004,49(1):34-39.

    [3] 李 劍,馬 梅,王子健.環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的作用機(jī)理及其生物檢測(cè)方法 [J]. 環(huán)境監(jiān)控與預(yù)警, 2010,2(3):18-25.

    [4] 李 劍,任姝娟,馬 梅,等.改進(jìn)型重組基因酵母 TR-GRIP1檢測(cè)化合物甲狀腺激素干擾活性 [J]. 環(huán)境科學(xué)研究, 2011, 24(10):1172-1177.

    [5] 王曉峰.環(huán)境水樣前處理技術(shù)的探討 [J]. 黑龍江環(huán)境通報(bào), 2011,35(3):49-51.

    [6] Li J, Ren S, Han S, et al. A yeast bioassay for direct measurementof thyroid hormone disrupting effects in water without sample extraction, concentration, or sterilization [J]. Chemosphere, 2014,100:139-145.

    [7] Surks M, Ramirez I, Shapiro L, et al. Effect of zinc(II) and other divalent cations on binding of 3,5,3’-triiodo-L-thyronine to nuclear receptors from cultured GC cells [J]. The Journal of Biological Chemistry, 1989,264(17):9820-9826.

    [8] Freake H C, Govoni K E, Guda K, et al. Actions and Interactions of Thyroid Hormone and Zinc Status in Growing Rats [J]. Journal of Nutrition, 2011,131(4):1135-1141.

    [9] Li J, Wang Z J, Ma M, et al. Analysis of environmental endocrine disrupting activities using recombinant yeast assay in wastewater treatment plant effluents [J]. Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology, 2010,84:529-535.

    [10] Li N, Ma M, Rao K F, et al. In vitro thyroid disrupting effects of organic extracts from WWTPs in Beijing [J]. Journal of Environmental Sciences-China, 2011,23(4):671-675.

    [11] Colosi JC, Kney A D. A yeast estrogen screen without extraction provides fast, reliable measures of estrogenic activity [J]. Environmental Toxicology and Chemistry, 2011,30(10):2261-2269.

    [12] Li N, Wang D H, Zhou Y, et al. Dibutyl phthalate contributes to the thyroid receptor antagonistic activity in drinking water processes [J]. Environmental Science and Technology, 2010, 44(17):6863-6868.

    [13] 康躍惠,劉培斌,王子健,等.北京官?gòu)d水庫(kù)-永定河水系水體中持久性有機(jī)氯農(nóng)藥污染 [J]. 湖泊科學(xué), 2003,15(2):125-132.

    [14] Shi W, Zhang F X, Hu G J, et al. Thyroid hormone disrupting activities associated with phthalate esters in water sources from Yangtze River Delta [J]. Environment International, 2012,42: 117-123.

    [15] Shi W, Wang X Y, Hu G J, et al. Bioanalytical and instrumental analysis of thyroid hormone disrupting compounds in water sources along the Yangtze River [J]. Environmental Pollution, 2011,159(2):441-448.

    [16] 趙建亮,方怡向,應(yīng)光國(guó).工業(yè)廢水毒性鑒定評(píng)價(jià)方法體系的建議及其應(yīng)用示例 [J]. 生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào), 2011,20(3):549-559.

    聯(lián)合國(guó)環(huán)境規(guī)劃署為環(huán)境保護(hù)部部長(zhǎng)周生賢頒發(fā)“環(huán)境政策與領(lǐng)導(dǎo)貢獻(xiàn)獎(jiǎng)”

    首屆聯(lián)合國(guó)環(huán)境大會(huì)高級(jí)別會(huì)議2014年6月26日在肯尼亞內(nèi)羅畢開(kāi)幕.會(huì)議期間,聯(lián)合國(guó)授權(quán)聯(lián)合國(guó)副秘書(shū)長(zhǎng)兼環(huán)境規(guī)劃署(以下簡(jiǎn)稱“環(huán)境署”)執(zhí)行主任施泰納向周生賢頒發(fā)“環(huán)境政策與領(lǐng)導(dǎo)貢獻(xiàn)獎(jiǎng)”.

    施泰納高度贊賞中國(guó)政府在防治污染、發(fā)展經(jīng)濟(jì)和保護(hù)生態(tài)環(huán)境方面所做的努力.他表示,作為世界上最大的發(fā)展中國(guó)家,中國(guó)積極推進(jìn)綠色經(jīng)濟(jì)和生態(tài)文明,踐行綠色發(fā)展、低碳發(fā)展和循環(huán)發(fā)展,在治理環(huán)境污染,特別是大氣、水、土壤污染防治,以及防止環(huán)境退化方面做出了巨大努力.中國(guó)還積極參與和推動(dòng)國(guó)際環(huán)境治理及南南合作,中國(guó)在這些方面所取得的成就為世界所矚目.為表彰周生賢部長(zhǎng)在推動(dòng)中國(guó)環(huán)境保護(hù)事業(yè)和推進(jìn)全球可持續(xù)發(fā)展進(jìn)程中所發(fā)揮的杰出領(lǐng)導(dǎo)作用,聯(lián)合國(guó)授權(quán)環(huán)境署向周生賢部長(zhǎng)頒發(fā)此獎(jiǎng)項(xiàng).

    周生賢表示,這一獎(jiǎng)項(xiàng)不僅是對(duì)其個(gè)人和環(huán)境保護(hù)部的莫大鼓勵(lì),也是對(duì)中國(guó)政府為保護(hù)環(huán)境、發(fā)展綠色經(jīng)濟(jì)、推動(dòng)全球可持續(xù)發(fā)展所做工作的充分肯定,榮譽(yù)屬于國(guó)家和人民.中國(guó)政府歷來(lái)高度重視環(huán)境保護(hù),把環(huán)境保護(hù)確立為基本國(guó)策.近年來(lái),更是把環(huán)境保護(hù)擺上更加突出的戰(zhàn)略位置,站在推進(jìn)國(guó)家生態(tài)環(huán)境治理體系和治理能力現(xiàn)代化的高度,著力構(gòu)建推進(jìn)生態(tài)文明建設(shè)和環(huán)境保護(hù)的四梁八柱,各項(xiàng)工作取得積極進(jìn)展.但是,中國(guó)在發(fā)展中不平衡、不協(xié)調(diào)、不可持續(xù)問(wèn)題依然突出,中國(guó)的環(huán)境保護(hù)工作仍然任重而道遠(yuǎn).中國(guó)愿繼續(xù)加強(qiáng)與環(huán)境署的合作,與世界各國(guó)一道,共享發(fā)展機(jī)遇,共迎環(huán)境挑戰(zhàn),共同建設(shè)人與自然和諧發(fā)展的地球家園

    摘自《中國(guó)環(huán)境報(bào)》

    2014-06-27

    Thyroid disrupting effects characterization of water from Guanting Reservoir, Beijing, China.

    LI Jian*, REN

    Shu-juan, LI Mo-rui, WANG Ya-fei (Engineering Research Center of Groundwater Pollution Control and Remediation, Ministry of Education, College of Water Sciences, Beijing Normal University, Beijing 100875, China). China Environmental Science, 2014,34(7):1884~1889

    A rapid recombinant human thyroid hormone receptor (hTR) gene yeast bioassay was used to evaluate the thyroid disrupting effects in the water from the Guanting Reservoir (GR), Beijing, China. Furthermore, the geographic and seasonal distribution, and thyroid disrupting chemicals (TDCs) composition characteristics of water were analysed. The results revealed that water samples had TR antagonistic activities. The Guanting Reservoir water displayed a low to moderate effect on thyroid hormone signalling, which was impacted by the input river. The effects of the input river were significantly affected by season, so the effects of reservoir water were temporally variable. A solid phase extraction by C18cartridges was used to separate the organic extracts, which eliminated 61.9%~92.3% antagonistic activities, suggesting the organic extracts may play a major role in the TR disruption effect of the water. After addition of EDTA (30mg/L) to the residual water samples, the antagonistic activities decreased significantly, showing the metals might contribute to the TR antagonistic activity.

    recombinant gene yeast;thyroid disrupting chemicals;Guanting Reservoir;thyroid disrupting effects

    X703.5

    A

    1000-6923(2014)07-1884-06

    李 劍(1980-),女,重慶人,副教授,博士,主要從事水生態(tài)毒理學(xué)研究.發(fā)表論文40余篇.

    2013-10-10

    國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(41001351);中央高?;究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金資助項(xiàng)目(2012LYB35);高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金資助課題(20100003120024)

    * 責(zé)任作者, 副教授, lijian@bnu.edu.cn

    猜你喜歡
    官?gòu)d水庫(kù)水樣酵母
    我國(guó)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)水樣總α、總β放射性分析方法應(yīng)用中存在的問(wèn)題及應(yīng)對(duì)
    平行水樣分配器在環(huán)境監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用
    綠色科技(2018年24期)2019-01-19 06:36:50
    水樣童年
    官?gòu)d水庫(kù)夏季葉綠素a濃度短時(shí)分布特征
    官?gòu)d水庫(kù)跨界流域管理體制研究
    綠色科技(2017年6期)2017-04-20 10:28:01
    酵母抽提物的研究概況
    酵母魔術(shù)師
    人CyclinD1在畢赤酵母中的表達(dá)
    生物量高的富鋅酵母的開(kāi)發(fā)應(yīng)用
    在線離子交換預(yù)富集–FLAAS測(cè)定環(huán)境水樣中的鉻(Ⅵ)
    激情 狠狠 欧美| 亚洲av.av天堂| 久久99热这里只有精品18| 欧美变态另类bdsm刘玥| 搞女人的毛片| 两个人的视频大全免费| 寂寞人妻少妇视频99o| 全区人妻精品视频| av福利片在线观看| 国产av码专区亚洲av| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 老司机影院毛片| 一区二区三区高清视频在线| 亚洲性久久影院| 日本黄色片子视频| 最近手机中文字幕大全| 免费搜索国产男女视频| 亚洲精品影视一区二区三区av| 一区二区三区免费毛片| 丰满少妇做爰视频| av视频在线观看入口| 亚洲av熟女| 丰满少妇做爰视频| 日韩 亚洲 欧美在线| 最近的中文字幕免费完整| 成人性生交大片免费视频hd| 成人性生交大片免费视频hd| 国产乱来视频区| 午夜久久久久精精品| 在线播放无遮挡| 日韩欧美 国产精品| 我的女老师完整版在线观看| 性色avwww在线观看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 日韩国内少妇激情av| av在线观看视频网站免费| 天堂√8在线中文| 久久国内精品自在自线图片| 成人综合一区亚洲| 成人毛片60女人毛片免费| 亚洲精品色激情综合| 丰满少妇做爰视频| 国产日韩欧美在线精品| 永久免费av网站大全| 爱豆传媒免费全集在线观看| 亚洲欧美清纯卡通| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 亚洲电影在线观看av| 久久99热这里只有精品18| 男女视频在线观看网站免费| 亚洲国产精品国产精品| 寂寞人妻少妇视频99o| 黑人高潮一二区| av国产久精品久网站免费入址| 别揉我奶头 嗯啊视频| 99久久九九国产精品国产免费| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 青春草亚洲视频在线观看| 精品人妻熟女av久视频| 午夜视频国产福利| 村上凉子中文字幕在线| 天美传媒精品一区二区| 晚上一个人看的免费电影| 搞女人的毛片| 精品国产三级普通话版| 一二三四中文在线观看免费高清| 欧美成人免费av一区二区三区| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 91aial.com中文字幕在线观看| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 免费在线观看成人毛片| 天天一区二区日本电影三级| 黄片wwwwww| 日韩av在线大香蕉| 别揉我奶头 嗯啊视频| 在线观看66精品国产| 国产成人91sexporn| videossex国产| 国产乱人偷精品视频| h日本视频在线播放| 国内揄拍国产精品人妻在线| 好男人视频免费观看在线| 免费黄网站久久成人精品| 大香蕉久久网| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 免费av不卡在线播放| 草草在线视频免费看| av卡一久久| 欧美高清性xxxxhd video| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 欧美成人免费av一区二区三区| av在线蜜桃| 亚洲成人av在线免费| 寂寞人妻少妇视频99o| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产爱豆传媒在线观看| 大香蕉久久网| 国产免费又黄又爽又色| 18禁动态无遮挡网站| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 免费看美女性在线毛片视频| 国产精品三级大全| 26uuu在线亚洲综合色| 日本黄色视频三级网站网址| 美女被艹到高潮喷水动态| 永久网站在线| 国产 一区精品| 久久久精品94久久精品| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 观看免费一级毛片| 欧美激情久久久久久爽电影| 午夜福利网站1000一区二区三区| 日韩三级伦理在线观看| 欧美成人一区二区免费高清观看| 中文字幕亚洲精品专区| 99久久九九国产精品国产免费| 国产一区二区在线观看日韩| 精品免费久久久久久久清纯| 亚洲国产色片| 午夜精品一区二区三区免费看| 岛国毛片在线播放| 亚洲国产精品sss在线观看| 国产精品精品国产色婷婷| 午夜老司机福利剧场| 久久久久性生活片| 免费黄网站久久成人精品| 一级毛片aaaaaa免费看小| 九草在线视频观看| 全区人妻精品视频| 日本wwww免费看| 欧美一区二区国产精品久久精品| 日韩成人av中文字幕在线观看| 亚洲精品国产av成人精品| 干丝袜人妻中文字幕| 夜夜爽夜夜爽视频| www.av在线官网国产| 婷婷色麻豆天堂久久 | 欧美色视频一区免费| 亚洲av不卡在线观看| 日韩欧美在线乱码| 大话2 男鬼变身卡| 国产爱豆传媒在线观看| 免费看光身美女| 成人毛片a级毛片在线播放| 美女大奶头视频| 久久久久久大精品| 久久国内精品自在自线图片| 少妇熟女欧美另类| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产又色又爽无遮挡免| 在线天堂最新版资源| 亚洲精品成人久久久久久| 国国产精品蜜臀av免费| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 超碰97精品在线观看| 成人午夜精彩视频在线观看| 高清午夜精品一区二区三区| 国产一区二区在线观看日韩| 久久人人爽人人爽人人片va| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 桃色一区二区三区在线观看| 中文在线观看免费www的网站| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 日韩人妻高清精品专区| 亚洲精品色激情综合| 精品久久久久久久末码| 中文在线观看免费www的网站| 日本黄大片高清| 在线免费观看的www视频| 久久久久九九精品影院| 国产成人午夜福利电影在线观看| 欧美日韩精品成人综合77777| 国产在视频线精品| 国产免费男女视频| 少妇的逼好多水| 麻豆av噜噜一区二区三区| av天堂中文字幕网| 成人漫画全彩无遮挡| 欧美成人午夜免费资源| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 99久久无色码亚洲精品果冻| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 亚洲伊人久久精品综合 | 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 国产精品久久视频播放| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产一区二区在线观看日韩| 免费黄色在线免费观看| 亚洲av二区三区四区| 国产av不卡久久| 女人被狂操c到高潮| 最近中文字幕2019免费版| 久久久久久久午夜电影| 九九爱精品视频在线观看| 寂寞人妻少妇视频99o| 18禁在线播放成人免费| 国产高清三级在线| 亚洲欧美日韩无卡精品| 欧美色视频一区免费| 免费看光身美女| 亚洲av福利一区| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| av在线蜜桃| 两个人视频免费观看高清| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲欧美日韩无卡精品| 国产美女午夜福利| 波野结衣二区三区在线| 精品免费久久久久久久清纯| 日韩欧美在线乱码| 久久久久久伊人网av| 麻豆乱淫一区二区| 插逼视频在线观看| 午夜亚洲福利在线播放| 免费人成在线观看视频色| 少妇人妻一区二区三区视频| 国产成人aa在线观看| 女人久久www免费人成看片 | av福利片在线观看| 日本爱情动作片www.在线观看| 变态另类丝袜制服| 亚洲人成网站在线观看播放| 少妇熟女aⅴ在线视频| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 中文亚洲av片在线观看爽| 成人毛片a级毛片在线播放| 国产一区二区三区av在线| 欧美一区二区国产精品久久精品| 亚洲va在线va天堂va国产| 日本三级黄在线观看| 亚洲国产精品合色在线| av国产免费在线观看| 在线观看美女被高潮喷水网站| 免费观看的影片在线观看| 欧美极品一区二区三区四区| 精品酒店卫生间| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 观看免费一级毛片| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 精华霜和精华液先用哪个| 国产精品嫩草影院av在线观看| 日韩国内少妇激情av| 99在线人妻在线中文字幕| 九九爱精品视频在线观看| 日韩av在线免费看完整版不卡| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产伦在线观看视频一区| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 中文在线观看免费www的网站| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 日本一二三区视频观看| 国产精品99久久久久久久久| 综合色av麻豆| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲无线观看免费| 久久久久久久午夜电影| 精品国内亚洲2022精品成人| 亚州av有码| 国产精品蜜桃在线观看| 久久99精品国语久久久| 国产精品一区www在线观看| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 国产精品精品国产色婷婷| 黄色欧美视频在线观看| 日日撸夜夜添| 国产91av在线免费观看| 国产精品无大码| 麻豆成人午夜福利视频| 欧美最新免费一区二区三区| 日本爱情动作片www.在线观看| 看片在线看免费视频| 免费av毛片视频| 美女高潮的动态| 午夜福利网站1000一区二区三区| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 久久精品国产亚洲av涩爱| 五月玫瑰六月丁香| 中文在线观看免费www的网站| 免费观看a级毛片全部| 国产美女午夜福利| 久久久久久九九精品二区国产| 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲经典国产精华液单| 一级二级三级毛片免费看| 国产免费又黄又爽又色| 日韩制服骚丝袜av| 亚洲人与动物交配视频| 日本免费一区二区三区高清不卡| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 亚洲欧美成人精品一区二区| 91久久精品国产一区二区三区| 精品人妻一区二区三区麻豆| 色综合亚洲欧美另类图片| 色视频www国产| 久久精品91蜜桃| 一二三四中文在线观看免费高清| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲av一区综合| 久久这里有精品视频免费| 国产成人91sexporn| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产av在哪里看| 熟女人妻精品中文字幕| 成人毛片a级毛片在线播放| 能在线免费看毛片的网站| 天天一区二区日本电影三级| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 国产精品电影一区二区三区| 久久人人爽人人爽人人片va| 久久久精品大字幕| 日日撸夜夜添| 亚洲av电影不卡..在线观看| 日本色播在线视频| 成人鲁丝片一二三区免费| 男人舔奶头视频| 99久国产av精品国产电影| 在线观看66精品国产| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 高清视频免费观看一区二区 | 国产黄色视频一区二区在线观看 | 99热这里只有是精品在线观看| 我的老师免费观看完整版| 性色avwww在线观看| 国语自产精品视频在线第100页| 综合色丁香网| 亚洲无线观看免费| 最近视频中文字幕2019在线8| 美女被艹到高潮喷水动态| 国产男人的电影天堂91| 国产高清三级在线| 亚洲美女视频黄频| 精品久久久久久成人av| 男女下面进入的视频免费午夜| 女人被狂操c到高潮| 婷婷色麻豆天堂久久 | 精华霜和精华液先用哪个| 国产精品一二三区在线看| 22中文网久久字幕| 能在线免费观看的黄片| 又粗又爽又猛毛片免费看| 成人av在线播放网站| 午夜福利在线观看免费完整高清在| av国产久精品久网站免费入址| 网址你懂的国产日韩在线| av在线播放精品| 麻豆成人av视频| 偷拍熟女少妇极品色| 久久亚洲国产成人精品v| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 美女被艹到高潮喷水动态| 国产av不卡久久| 亚洲av成人精品一区久久| 国产成人免费观看mmmm| 国产精品永久免费网站| 亚洲av.av天堂| 级片在线观看| 国产精品人妻久久久影院| 老女人水多毛片| 美女国产视频在线观看| 久久久久性生活片| 欧美变态另类bdsm刘玥| 又爽又黄a免费视频| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 日本三级黄在线观看| 欧美日韩综合久久久久久| 99在线人妻在线中文字幕| 最后的刺客免费高清国语| 人人妻人人看人人澡| 少妇丰满av| 春色校园在线视频观看| 99热这里只有是精品50| 日韩av在线免费看完整版不卡| 九九爱精品视频在线观看| 成人毛片a级毛片在线播放| 一夜夜www| 真实男女啪啪啪动态图| 永久免费av网站大全| 狠狠狠狠99中文字幕| 亚洲av不卡在线观看| 日韩欧美 国产精品| 午夜老司机福利剧场| 麻豆一二三区av精品| 国产真实伦视频高清在线观看| 99久久精品国产国产毛片| 赤兔流量卡办理| 在线观看一区二区三区| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 久久久久久久午夜电影| 午夜福利成人在线免费观看| 久久久久久九九精品二区国产| 丝袜美腿在线中文| 淫秽高清视频在线观看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产大屁股一区二区在线视频| 久久久久久九九精品二区国产| 91久久精品国产一区二区成人| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 2021天堂中文幕一二区在线观| 嫩草影院入口| 亚洲国产精品国产精品| 欧美又色又爽又黄视频| 99国产精品一区二区蜜桃av| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 3wmmmm亚洲av在线观看| 一夜夜www| 欧美极品一区二区三区四区| 久久欧美精品欧美久久欧美| 99久久无色码亚洲精品果冻| 日韩一区二区视频免费看| 欧美bdsm另类| 精品人妻熟女av久视频| .国产精品久久| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 欧美一级a爱片免费观看看| 婷婷六月久久综合丁香| 观看免费一级毛片| 国国产精品蜜臀av免费| 国产免费男女视频| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 免费观看在线日韩| 热99re8久久精品国产| 国产精品福利在线免费观看| 欧美成人免费av一区二区三区| 久久这里只有精品中国| 国产日韩欧美在线精品| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 最近的中文字幕免费完整| 日韩av在线免费看完整版不卡| 韩国高清视频一区二区三区| 日韩中字成人| av黄色大香蕉| 国产一区二区在线av高清观看| 97超碰精品成人国产| 青青草视频在线视频观看| 九草在线视频观看| 午夜福利视频1000在线观看| 日韩人妻高清精品专区| 久久草成人影院| 亚洲美女视频黄频| 夜夜爽夜夜爽视频| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | av在线播放精品| 老司机影院毛片| 午夜精品在线福利| 国产精品国产三级专区第一集| 婷婷色av中文字幕| 亚洲av成人精品一二三区| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 天堂√8在线中文| 97超碰精品成人国产| 狠狠狠狠99中文字幕| 欧美日韩综合久久久久久| 1024手机看黄色片| 久久99精品国语久久久| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲精品色激情综合| 中文字幕av在线有码专区| 免费大片18禁| 老司机影院毛片| 好男人在线观看高清免费视频| 婷婷色麻豆天堂久久 | 五月玫瑰六月丁香| 国产亚洲精品av在线| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产极品精品免费视频能看的| 在线免费观看不下载黄p国产| 村上凉子中文字幕在线| 精品人妻一区二区三区麻豆| 久久久久久久午夜电影| 岛国毛片在线播放| 日韩亚洲欧美综合| 91aial.com中文字幕在线观看| 直男gayav资源| 一边亲一边摸免费视频| 亚洲,欧美,日韩| 97热精品久久久久久| 国产高潮美女av| 超碰97精品在线观看| www.色视频.com| 秋霞伦理黄片| 久久精品久久精品一区二区三区| 亚洲国产高清在线一区二区三| 免费黄色在线免费观看| 久久久久精品久久久久真实原创| 亚洲三级黄色毛片| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 亚洲成色77777| 亚洲国产精品成人久久小说| 精品人妻视频免费看| 国产大屁股一区二区在线视频| 久久久精品94久久精品| 亚洲色图av天堂| 日本欧美国产在线视频| 91aial.com中文字幕在线观看| 精品久久久久久久久亚洲| 天堂影院成人在线观看| 综合色av麻豆| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲人与动物交配视频| 热99在线观看视频| 国产激情偷乱视频一区二区| 色播亚洲综合网| 寂寞人妻少妇视频99o| 美女高潮的动态| 高清日韩中文字幕在线| 国产成人午夜福利电影在线观看| 亚洲五月天丁香| 在线观看av片永久免费下载| 成年av动漫网址| 一边亲一边摸免费视频| 黄色一级大片看看| av女优亚洲男人天堂| 日本午夜av视频| 国产色爽女视频免费观看| av在线天堂中文字幕| 色网站视频免费| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 国产精品av视频在线免费观看| 国产欧美日韩精品一区二区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 91久久精品电影网| 成年av动漫网址| 国产精品三级大全| 三级经典国产精品| 最近2019中文字幕mv第一页| 婷婷六月久久综合丁香| 午夜免费男女啪啪视频观看| 天天躁日日操中文字幕| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲久久久久久中文字幕| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 成人美女网站在线观看视频| 国产黄a三级三级三级人| 成人鲁丝片一二三区免费| 18禁动态无遮挡网站| 亚洲精品成人久久久久久| 亚洲精品456在线播放app| 精华霜和精华液先用哪个| 欧美成人精品欧美一级黄| 免费观看a级毛片全部| 干丝袜人妻中文字幕| 亚洲精品成人久久久久久| 内地一区二区视频在线| 国产私拍福利视频在线观看| 亚洲人成网站高清观看| 九色成人免费人妻av| 免费一级毛片在线播放高清视频| 日韩强制内射视频| 欧美激情国产日韩精品一区| 91在线精品国自产拍蜜月| 网址你懂的国产日韩在线| 国产精品一及| 亚洲av成人精品一区久久| 床上黄色一级片| 中文字幕av在线有码专区| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 黄色一级大片看看| 能在线免费看毛片的网站| 三级国产精品欧美在线观看| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 天美传媒精品一区二区| 国产成人精品久久久久久| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 床上黄色一级片| 国产精品1区2区在线观看.| 久久久久性生活片| 亚洲精品色激情综合| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲综合色惰| 国产免费男女视频| 亚洲国产精品成人久久小说| 日本wwww免费看| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 日本av手机在线免费观看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 成人性生交大片免费视频hd| 久久99热这里只有精品18| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲国产精品sss在线观看| 免费人成在线观看视频色| 性插视频无遮挡在线免费观看| 国产一级毛片七仙女欲春2| 99热6这里只有精品| 26uuu在线亚洲综合色| 久久久欧美国产精品| 美女cb高潮喷水在线观看| 免费看a级黄色片| 九九爱精品视频在线观看| 国产男人的电影天堂91| 亚洲最大成人中文| 人妻少妇偷人精品九色| 色综合亚洲欧美另类图片| 欧美人与善性xxx| 国产人妻一区二区三区在| 久久久久久伊人网av| 日韩国内少妇激情av| 国产麻豆成人av免费视频| 丰满人妻一区二区三区视频av| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 午夜爱爱视频在线播放| 七月丁香在线播放| 国产精品乱码一区二三区的特点| 午夜激情欧美在线| 日韩三级伦理在线观看| 免费无遮挡裸体视频| 久久精品久久久久久久性| АⅤ资源中文在线天堂|