腦脊液和血清HIV病毒載量的相關(guān)性研究

摘要：目的 評價HIV患者艾滋病期腦脊液與外周血病毒載量的相關(guān)性。探討HIV感染后不同疾病階段患者的腦脊液病理改變。方法 選取HIV感染者116例。根據(jù)艾滋病患者血清中病毒載量，將研究對象按血清病毒載量分為HIV高、中、低病毒載量三組，以方差分析進行統(tǒng)計。結(jié)果 隨著疾病的進展，HIV感染后進入艾滋病期后，高病毒載量患者腦脊液HIV病毒載量與低、中組均存在差異。結(jié)論 HIV感染后，患者腦脊液中出現(xiàn)病理改變并與血清病毒載量的高低有關(guān)， 腦脊液中HIV病毒載量即是這種改變的具體體現(xiàn)。

關(guān)鍵詞：HIV；獲得性免疫缺陷綜合征；CD4淋巴細胞計數(shù)；HIV病毒載量

HIV主要存在于感染者和患者的血液、精液、陰道分泌物、胸腹水、腦脊液和乳汁中[1]。本研究擬通過對艾滋病期患者血清病毒載量和腦積液病毒載量的相關(guān)性比較，探討抗病毒治療有效和抗病毒治療失敗患者腦脊液病毒載量的關(guān)系，以期為有效抗病毒治療可減少腦脊液相關(guān)并發(fā)癥提供依據(jù)。

1資料與方法

1.1一般資料 選取成都市公共衛(wèi)生臨床醫(yī)療中心2014年1月～7月在我院住院的艾滋病患者共116例，年齡1月～64歲，平均（38.9歲）。CD4+T淋巴細胞計數(shù)平均值84.11/。其中，血清病毒載量<500IU/ml為低病毒載量組（1組），血清病毒載量500IU/ml～100000IU/ml為中病毒載量組（2組），血清病毒載量>100000IU/ml為高病毒載量組（3組）。

1.2主要儀器和試劑 以美國BD公司（FACS Calibur）流式細胞儀、行HIV感染者全血CD4+T淋巴細胞計數(shù)，以凱杰公司全自動核酸提取儀QIAcube檢測血清和腦脊液HIV病毒載量。

1.3方法

1.3.1全血CD4+T淋巴細胞計數(shù) 取入20ul抗體加入到TruCount管中，用反向加樣法在TruCount管中加入50uL充分混勻的抗凝全血，渦旋混勻，室溫（20～25℃）避光放置15min。加入500ul FACS溶血素，渦旋混勻，室溫（20～25℃）避光放置15min，用MultiSET軟件獲取15000個細胞進行檢測。

1.3.2血清和腦脊液病毒載量檢測 取140ul待測樣本和對照品到EP管中，放入樣本架相應(yīng)位置。清空廢物箱，添加提取柱、吸頭和工作液，啟動HIV-RNA程序自動提取核酸， 配套使用凱杰人類免疫缺陷病毒（HIV-1）核酸定量反應(yīng)體系進行擴增，用實時熒光定量PCR儀ABI7500檢測血清和腦脊液中的病毒含量。同批次做強陽性對照、臨界陽性對照和陰性對照，檢測限為500～107IU/ml。

2結(jié)果

2.1血清HIV低病毒載量組，共22例。其中，有1例患者腦脊液HIV病毒載量出現(xiàn)陽性，此結(jié)果有待進一步證實。血清HIV中病毒載量組，共25例，腦脊液HIV病毒載量陽性16例，陰性9例，陽性率 64.0%。血清HIV中病毒載量組，共69例，腦脊液HIV病毒載量陽性62例，陰性7例，陽性率 89.9%。

2.2在116例艾滋病期患者中，血清病毒含量出現(xiàn)升高的為94例，占總數(shù)的81.0%。腦脊液出現(xiàn)陽性結(jié)果76例，占總數(shù)的 65.5%。

2.3對1，2，3組數(shù)據(jù)進行方差分析，結(jié)果，見表1，表2。

經(jīng)單因素方差分析3組腦脊液Vlog值存在統(tǒng)計學(xué)差異，F(xiàn)=34.785，P<0.001.經(jīng)LSD檢測發(fā)現(xiàn)各組均數(shù)均存在統(tǒng)計學(xué)差異。

3討論

艾滋病自1981年在美國發(fā)現(xiàn)以來，很快在全球肆虐[2]。1985年艾滋病傳人我國，截止到 2012 年 10 月底，全國累計報告艾滋病病毒感染者和患者 492 191例，存活的感染者和患者 383 285 例[3]。HIV感染人體后，出現(xiàn)CD4+T淋巴細胞進行性減少。CD4+/CD8+比值倒置，細胞免疫功能受損。目前常用的CD4+T淋巴細胞亞群檢測方法為流式細胞術(shù)，可直接獲得CD4+T淋巴細胞數(shù)絕對值。CD4+T淋巴細胞計數(shù)的臨床意義是：了解機體的免疫狀態(tài)和病程進展，確定疾病分期和治療時機，判斷治療效果和HIV感染者的臨床合并癥。參照2001年制定的《HIV/AIDS診斷標準及處理原則》中華人民共和國國家標準（試行），將艾滋病的全過程分為急性期、無癥狀期和艾滋病期[4]。

患者進入艾滋病期后，CD4+淋巴細胞計數(shù)明顯下降，多<200ul，HIV血清病毒含量明顯升高[5]。本研究認為，血清低病毒載量組為抗病毒治療成功組，腦脊液HIV病毒載量與抗病毒治療不成功或者失敗組是存在統(tǒng)計學(xué)差異的，血清病毒載量維持在較低水平與較高水平，腦脊液HIV病毒載量之間也存在顯著差異。HAART治療有效可減少腦脊液中HIV病毒載量，對減少HIV相關(guān)的發(fā)病率和病死率是有益的。

HIV感染后，艾滋病患者中青年人會出現(xiàn)癡呆，并伴有中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變，是否這些病變由腦脊液中HIV病毒引起還需要進一步研究。本次研究中有一例患者，血清病毒含量陰性而在腦脊液中出現(xiàn)了高HIV病毒載量，需從結(jié)果的可靠性和臨床表現(xiàn)作進一步驗證。

總之，本研究提示HIV感染是一個漸變的病理過程，在血清病毒含量高時侵襲血腦屏障機會增加，腦脊液中HIV病毒載量即是這種改變的具體體現(xiàn)。維持機體內(nèi)低病毒含量對延緩腦脊液中出現(xiàn)病理改變有積極的作用。

參考文獻：

[1]中華醫(yī)學(xué)會感染病學(xué)分會艾滋病學(xué)組.艾滋病診療指南（2011版）[J].中華傳染病雜志，2011，29：629-639.

[2]中華醫(yī)學(xué)會感染病學(xué)分會艾滋病學(xué)組.艾滋病診療指南[J].中華傳染病雜志，2006，24：133-144.

[3]李昊雪，濤波，楊虹.HIV實驗室檢測技術(shù)研究進展[J].醫(yī)學(xué)動物防制 2013，29：1353

[4]國家技術(shù)監(jiān)督局.中華人民共和國國家標準：HIV/AIDS診斷標準及處理原則（試行）[J].2001.

編輯/申磊