電針對酒精性周圍神經(jīng)病大鼠NGFmRNA受體的表達(dá)

摘要：目的 通過酒精自由飲建立慢性酒精中毒性大鼠周圍神經(jīng)病變模型，從細(xì)胞分子生物學(xué)等不同層面探討電針對慢性酒精中毒型周圍神經(jīng)病的作用機(jī)制，為針灸治療慢性酒精中毒性周圍神經(jīng)病的臨床應(yīng)用提供新的理論依據(jù)。方法 成年雄性WISTAR大鼠50只，體重200～250 g，隨機(jī)分成5組，慢性酒精中毒模型組10只，彌可保對照組10只，電針組10只，針刺組10只，空白對照組10只。結(jié)果 正常坐骨神經(jīng)的NGFmRNA表達(dá)量極低，酒精中毒損傷后坐骨神經(jīng)NGFmRNA表達(dá)明顯增高；2～4 w NGFmRNA的表達(dá)出現(xiàn)一輕度回落趨勢，但4 w后又繼續(xù)升高。針刺治療后，治療組的NGFmRNA表達(dá)較模型組均有不同程度升高，其中電針組升高幅度最為明顯，始終處于高水平。結(jié)論 電針可升高酒精中毒性大鼠坐骨神經(jīng)中NGFmRNA的含量

關(guān)鍵詞：電針；慢性酒精中毒性周圍神經(jīng)??；NGFmRNA

1資料與方法

1.1一般資料 成年雄性WISTAR大鼠50只，體重200～250 g，隨機(jī)分成5組，空白對照組10只，慢性酒精中毒模型組10只，彌可保組10只，電針組10只，普針組10只。

1.2方法 彌可保組300 μg/Kg/d，注射于下肢肌肉，左右腿交替以利于吸收，共治療8 w；電針組取雙側(cè)脾俞、腎俞、后三里、環(huán)跳、三陰交、太溪，進(jìn)針后接KWD-808II脈沖電療儀，腎俞、足三里接一對導(dǎo)線，采用疏密波，電流量以大鼠肢體肌肉輕度收縮為度，留針20分針，1次/2 d，共治療8 w；普針組除不接電麻儀外余處置同電針組；正常對照組和模型組每日肌肉注射等量的生理鹽水。

1.3取材 治療后2，4，8 w取治療組大鼠神經(jīng)損傷部位遠(yuǎn)側(cè)坐骨神經(jīng)干0.6 cm，迅速置入4%多聚甲醛溶液固定。另取其他各組大鼠10只，取其右側(cè)坐骨神經(jīng)相應(yīng)部位神經(jīng)干，作為正常神經(jīng)標(biāo)本，用以檢測正常神經(jīng)NGFmRNA。標(biāo)本經(jīng)4%多聚甲醛溶液固定24 h后，脫水，石蠟包埋。常規(guī)石蠟切片，厚度為4 um。載玻片需要經(jīng)過高溫火活RBA酶，APES鍍膜。切片置4℃冰箱保存。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 用SPSS 13.0軟件包統(tǒng)計(jì)處理，各組數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組均數(shù)之間的比較應(yīng)用方差分析，兩兩比較應(yīng)用q檢驗(yàn)。等級資料組間比較應(yīng)用秩和檢驗(yàn)。檢驗(yàn)的顯著水平為P<0.05。

2結(jié)果

2.1治療前后坐骨神經(jīng)NGFmRNA表達(dá)，針刺治療后，治療組的NGFmRNA表達(dá)較模烈組均有不同程度升高，其中電針組升高幅度最為明顯，始終處于高水平，見表1。

2.2治療后坐骨神經(jīng)NGFmRNA表達(dá)的時(shí)相變化，模型組在觀察期內(nèi)基本無明顯變化，而針刺治療后NGFmRNA表達(dá)均明顯升高，其中電針組升高最為明顯，升高的速度明顯高于其他治療組，見圖1。

圖1 治療后坐骨神經(jīng)NGFmRNA表達(dá)的時(shí)相變化

3討論

從發(fā)病的臨床表現(xiàn)來看，本病應(yīng)屬中醫(yī)\"血痹\"范疇，長期嗜酒傷及脾胃則氣虛；酒熱灼爍，日久陰津干涸，絡(luò)脈失于濡養(yǎng)，四肢麻木無力，而成本病。足三里調(diào)補(bǔ)脾胃；腎俞、三陰交、太溪益腎滋陰，補(bǔ)益氣血，共奏益氣生津，養(yǎng)陰通絡(luò)之功。電針刺法是用電針器輸出脈沖電流，通過毫針作用于人體經(jīng)絡(luò)穴位以治療疾病的一種方法，是毫針的刺激與電的生理效應(yīng)的結(jié)合，電針的應(yīng)用與\"行針\"機(jī)制相同，是一種穩(wěn)定的刺激，加強(qiáng)了針灸疏通經(jīng)絡(luò)氣血的作用。

本病的主要病理改變?yōu)橹車窠?jīng)軸突變性、脫髓鞘和神經(jīng)纖維缺失。神經(jīng)生長因子（NGF）屬于神經(jīng)營養(yǎng)家族，對感覺神經(jīng)和交感神經(jīng)的存活、分化、生長、成熟和凋亡等均起著重要的作用，被認(rèn)為有促進(jìn)周圍神經(jīng)損傷修復(fù)的功能，目前的研究認(rèn)為，NGF通過兩種受體其作用，即神經(jīng)生長因子低親和力受體（P75），和神經(jīng)生長因子高親和力受體（TrkA），神經(jīng)生長因子就是通過這兩種跨膜糖蛋白受體的介導(dǎo)而發(fā)揮其生物學(xué)功能，NGF與兩種受體結(jié)合后，可激活促凋亡的轉(zhuǎn)錄因子NF-kβ，也可以引起鞘磷脂水解成神經(jīng)酰胺，提高-Jun氨基末端激酶（JUN）的活力，最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。因此，本實(shí)驗(yàn)課通過酶聯(lián)免疫手段和方法來研究電針對神經(jīng)生長因子表達(dá)的影響來探討其治療機(jī)理。本研究治療組的NGFmRNA表達(dá)均有不同程度的增長，其中電針的NGFmRNA表達(dá)最強(qiáng)，說明電針對促進(jìn)周圍神經(jīng)損傷再生的效果最佳。這可能是由于電針可興奮構(gòu)成運(yùn)動神經(jīng)干的工、II和III類纖維，其療效更為明顯，這也可能是位電針促進(jìn)周圍神經(jīng)再生的形態(tài)學(xué)機(jī)制之一。

編輯/肖慧