補陽還五湯對急性心肌缺血模型大鼠的保護作用

摘要：目的 研究補陽還五湯對急性心肌缺血模型大鼠的保護作用并探討其機制。方法 將大鼠分為空白對照組，模型對照組，陽性對照組（復方丹參滴丸0.135g/kg），補陽還五湯高、中、低劑量組（44g生藥/kg、22g生藥/kg、11g生藥/kg）。連續(xù)灌胃給藥7d，末次給藥1h后灌胃給予垂體后葉素（25u/kg）以造成大鼠急性心肌缺血模型，觀察大鼠各時間點心電圖變化，生化法檢測血清肌酸激酶（CK）和乳酸脫氫酶LDH的活性。結(jié)果 補陽還五湯高、中劑量組大鼠心電圖ST段抬高減少，血清LDH、CK的活性較模型組顯著降低（P<0.01）。結(jié)論 補陽還五湯對大鼠急性血心肌缺血具有保護作用。其機制為抑制模型大鼠心電圖的改變并調(diào)節(jié)酶活性，改善冠脈循環(huán)，保護缺血心肌。

關鍵詞：補陽還五湯；心肌缺血；垂體后葉素；心電圖；血清肌酸激酶；乳酸脫氫酶

心血管疾病主要由心肌需氧與供氧失衡所致，如冠心病就是一種常見的心血管疾病。所以尋找到價廉并且安全可靠的藥物，應用于臨床來防治心肌缺血將具有很大的價值和深遠的意義[1]。據(jù)報道，氣虛血瘀痰阻是缺血性冠心病的主要病因，而補陽還五湯則是益氣活血的代表方，補陽還五湯是通過補氣化瘀來治療冠心病和中風，有研究表明，補陽還五湯能通過抗氧化途徑來改善大鼠的心肌缺血病機[2，3]。本實驗對補陽還五湯的抗心肌缺血作用進行研究，并探討其作用機制，為尋找到安全可靠地藥物提取參考，并為臨床用藥提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1試驗藥物及試劑 垂體后葉素注射液（南京新百藥業(yè)有限公司，批號：130801）；復方丹參滴丸（天津天士力制藥有限公司，國藥準字Z10950111）；黃芪、當歸、川芎、赤芍、地龍、桃仁、紅花等藥材購自北京同仁堂長沙藥店，按《醫(yī)林改錯》原方比例：生黃芪120g，地龍、桃仁、紅花、川芎各3g，當歸尾6g，赤芍4.5g。將上述藥材先用清水煎煮2次，并合并2次煎煮液，減壓、濃縮至2g/mL（相當于生藥量），-4℃冰箱保存，備用。

肌酸激酶（CK）試劑盒（批號130122），乳酸脫氫酶（批號130122）試劑盒，從南京建成生物研究所購買。

1.2試驗動物 清潔級Wistar大鼠，體重（180g±20）g，雌雄各50%，48只，購自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司。

1.3儀器 BL-420E生物機能實驗系統(tǒng)（成都泰盟科技）；CENI1 RIFUE 80-2B型低速離心機（上海安亭科學儀器廠）；XD-7100心電圖儀（上海醫(yī)療電子儀器廠）；7150型自動生化分析儀（日本日立有限公司產(chǎn)品）。

1.4方法

1.4.1急性心肌缺血模型的建立及分組、給藥 取大鼠48只，隨機分為6組，每組8只，分別為空白對照組，模型對照組，陽性對照組（復方丹參滴丸0.135g/kg），補陽還五湯高劑量組（44g生藥/kg）、補陽還五湯中劑量組（22g生藥/kg）、補陽還五湯低劑量組（11g生藥/kg）?？瞻捉M與模型組灌服同體積0.9%生理鹽水。所有分組灌胃1次/d，連續(xù)7d，除空白對照組外，其他組分在末次給藥后1h，均灌胃給予垂體后葉素（25u/kg），建立急性心肌缺血模型。

1.4.2指標檢測

1.4.2.1心電圖的測定 給予垂體后葉素后，用3% 戊巴比妥鈉（1ml/kg）麻醉正常對照組大鼠，仰臥位固定，接BL-420E生物機能實驗系統(tǒng)，即刻測定0、0.5、1、2、3和5h若干時間點心電圖。

1.4.2.2血清LDH、CK活性測定 腹主動脈取血，收集血液，靜置30min后，3500r，離心20min，取血清，按試劑盒說明書進行操作。

1.5統(tǒng)計學方法 實驗結(jié)果以均數(shù)±標準差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗。數(shù)據(jù)采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件處理。以P<0.05為統(tǒng)計學差異顯著。

2 結(jié)果

見表1、圖1。

圖1 補陽還五湯提取物對大鼠心電圖ST段的影響

由表1和圖1可見，急性心肌缺血模型造模成功后ST段明顯抬高，補陽還五湯高、中劑量組能使心肌缺血模型大鼠的心電圖ST段抬高值降低，與模型組比有顯著性差異，表明補陽還五湯提對急性心肌缺血模型大鼠的心電圖有改善作用。

3 討論

酶學法是估計心肌缺血損傷程度和范圍的一個重要方法。在正常心肌細胞中LDH和CK含量都較高，當心肌缺血受損時，血清肌酸激酶（CK）和乳酸脫氫酶（LDH）會釋放進入血中，加重對心肌的損傷，CK和LDH是診斷早期心肌受損比較好的指標[4]。當心肌受損時，細胞內(nèi)的酶被釋放出來，擴散進入血漿，這時測定相關血清酶的活性，能反映缺血心肌的病變。血清中CK的活性是心肌細胞損傷程度的敏感指標之一，它與心肌壞死程度是正相關的關系。CK在心肌中廣泛存在，當心肌細胞受損時，細胞內(nèi)的CK會減少釋放，血清中的CK含量會增加，這個過程反映了心肌損傷的情況。

在用垂體后葉素給大鼠造成心肌缺血模型后，模型組大鼠血清中的LDH、CK活性明顯升高，這說明大鼠心肌受到了損傷，心肌細胞內(nèi)酶的釋放增加，大鼠造模成功。陽性藥復方丹參滴丸組、補陽還五湯高、中劑量組都能抑制LDH、CK的升高，而且補陽還五湯高劑量組和陽性藥組均能抑制ST段抬高，對心肌缺血具有保護作用。

補陽還五湯治療大鼠急性心肌缺血的作用機制可能是與補陽還五湯提取物減小冠脈阻力，增加冠脈流量，提高血液供應有關。

參考文獻：

[1]雷燕.碩士論文《\"瓜蔞-薤白\"藥對大鼠抗急性心肌缺血的保護作用的研究》[D].湖北中醫(yī)藥大學，2013.

[2]馮其茂，董耀榮，楊祖福.益氣活血方對急性心肌梗死后左室重構(gòu)的干預[J].中國康復理論與實踐，2006，12（6）：475-477.

[3]許篤聰，羅演錚，劉憲俊，等.補氣活血化痰方治療動脈粥樣硬化的實驗研究[J].福建中醫(yī)藥，2003，34（5）：46-48.

[4]吳兆蘇，姚崇華，趙冬，等.我國多省市心血管病趨勢及決定因素的人群監(jiān)測（中國MONICA方案）發(fā)病率和死亡率監(jiān)測結(jié)果[J].中華心血管病雜志，1997，25（1）：6-11.

編輯/哈濤