實間質(zhì)評和室內(nèi)質(zhì)控在微生物室中應(yīng)用分析

【摘 要】 目的為了分析室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評在微生物檢驗中作用，經(jīng)常參加室間質(zhì)評活動有利于提高基層疾控微生物檢驗人員對細菌診斷水平及室內(nèi)質(zhì)控能力。我中心依據(jù)《青海省食品安全風險監(jiān)測方案》、《青海省疾控中心質(zhì)量計劃》的要求，我中心檢驗室于2012年3月-2014年3月參加省疾控檢驗中心發(fā)放的食品安全風險監(jiān)測質(zhì)控盲樣質(zhì)控菌六株。方法《中華人民共和國國家標準》GB/T4789-2010及《國家食品污染和有害因素風險工作手冊》。結(jié)果六株菌通過分離鑒定，分別是沙門氏菌、志賀氏菌、阪崎腸桿菌、蠟樣芽孢桿菌、金黃色葡萄球、銅綠假單胞菌。實驗室結(jié)果報告和省疾控檢驗檢測中心結(jié)果完全一致。結(jié)果報告正確率100%。結(jié)論經(jīng)常參加室間質(zhì)評及室內(nèi)質(zhì)控。有利于提高檢驗人員檢測能力水平、提高檢驗結(jié)果的可靠性、準確性、及時性。

【關(guān)鍵詞】 室間質(zhì)評；室內(nèi)質(zhì)控；細菌鑒定；質(zhì)量控制

【中圖分類號】 R446.5【文獻標識碼】 B室間質(zhì)評和室內(nèi)質(zhì)控是微生物檢驗質(zhì)量控制的兩個重要環(huán)節(jié)、室間質(zhì)評是在室內(nèi)質(zhì)控的基礎(chǔ)上進行，其水平的高低不僅反應(yīng)實驗室標本鑒定能力高低的一種重要指標，更是提高檢驗人員工作能力、提高室內(nèi)質(zhì)控工作的重要指標。為了進一步提高實驗室標本鑒定檢測質(zhì)量。我中心于2012年3月-2014年3月參加省疾控中心檢驗中心發(fā)放微生物盲樣的細菌鑒定質(zhì)控工作。

1資料與方法

1.1質(zhì)控樣品室間質(zhì)評標本來源于青海省疾控檢驗檢測中心下發(fā)的盲樣6份菌株。編號分別是1號菌、19號菌、81號菌、47號菌、75號菌、2號菌。時間跨度為2012-2014年，本試驗在室內(nèi)質(zhì)控的規(guī)范條件下進行。

1.2培養(yǎng)基及試劑肉湯增菌液、MAC、BS、CN、MYP、BP、營養(yǎng)瓊脂、DFI、血瓊脂培養(yǎng)基、生化反應(yīng)等試劑均由中國檢驗檢疫北京路橋技術(shù)有限公司提供；診斷血清蘭州生物研究所提供，有效期內(nèi)使用。

1.3方法《中華人民共和國國家標準》GP/T4789.1-2010，《國家食品污染和有害因素風險工作手冊》。

2結(jié)果

①以無菌操作分別取菌種接種于10ml新鮮肉湯培養(yǎng)基中，置37℃培養(yǎng)24小時，觀察生長情況。②分別取肉湯培養(yǎng)液劃種于8種選擇培養(yǎng)基MAC、BS、CN、MYP、BP、營養(yǎng)瓊脂、DFI、血平板中、置于37℃24小時。觀察生長情況詳見表1。③根據(jù)革蘭氏染色及各培養(yǎng)基菌落形態(tài)、初步判斷為1號、19號、81號為腸道菌，因此將1號、81號，分別接種于三糖鐵及腸道生化管。19號菌接種于相應(yīng)的生化管，47號、75號為革蘭氏陽性菌，2號菌為革蘭氏陰性菌，將此三株菌接種于血平板及營養(yǎng)瓊脂平板上，置于37℃24-48小時，觀察生長情況。上述各培養(yǎng)基中生長特點接種相應(yīng)生化管、做氧化酶試驗、血漿凝固酶試驗。④根據(jù)形態(tài)學、選擇培養(yǎng)基上的特征、革蘭氏染色、血清學鑒定及生化特性，1號菌根據(jù)培養(yǎng)基及三糖鐵的特征、產(chǎn)生硫化氫、斜面產(chǎn)檢、底層產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，靛介質(zhì)（-）、尿素（-）、氰化鉀（-）、賴氨酸（+）等生化反應(yīng)及A-F多價血清凝集判斷為沙門氏菌；81號菌根據(jù)選擇培養(yǎng)及三糖鐵的特征、斜面產(chǎn)堿、底層產(chǎn)酸、不產(chǎn)氣、葡萄糖半固體（+）、葡萄糖銨（-）、鳥氨酸及賴氨酸（-）、尿素（-）、氰化鉀（-）、水楊苷（-）、七葉苷（-）、β-半乳糖（-）、甘露醇（+）等生化反應(yīng)及四種多價血清凝集判斷為志賀氏菌；19號菌根據(jù)選擇培養(yǎng)基上的特征、賴氨酸（-）、鳥氨酸（+）、檸檬酸水解（+）、山梨醇（—）、鼠李糖（+）、蔗糖（+）、D-蜜二糖（+）、苦杏仁甘（-）、黃色素產(chǎn)生（+）等生化反應(yīng)判斷為阪崎腸桿菌；47號菌根據(jù)革蘭氏染色、血平板生長特點以及血漿凝固酶（+）、判斷為金黃色葡萄球菌；75號菌根據(jù)培養(yǎng)特性及革蘭氏染色、過氧化氫酶（+）、利用葡萄糖、還原硝酸鹽、溶菌酶（+）甘露醇（—）、V-P(+)等生化反應(yīng)判斷為蠟樣芽孢桿菌；2號菌根據(jù)革蘭氏染色、血平板及CN培養(yǎng)基上生長特性、氧化酶試驗（+）、乙酰胺肉湯（+）等生化反應(yīng)相符判斷為銅綠假單胞菌。實驗結(jié)果與省疾控檢驗中心的完全一致。

3討論

做好室間質(zhì)評的前提首先要加強室內(nèi)質(zhì)量控制，根據(jù)多年來的工作經(jīng)驗，我們基層微生物檢驗室必須積極參加室間質(zhì)評活動，給予基層疾控中心微生物檢驗的一個平臺，才能對檢驗質(zhì)量和檢驗?zāi)芰ψ龀鲆粋€客觀的評價。室內(nèi)質(zhì)控是一個系列整體，首先：（1）檢驗專業(yè)人員有一定的工作經(jīng)驗和理論基礎(chǔ)；（2）按國標操作；（3）儀器設(shè)備（高壓鍋，恒溫培養(yǎng)箱）正常運行；（4）培養(yǎng)基及試劑、染液均在有效期內(nèi)使用，標準菌有效保存（不論做質(zhì)控或做樣品，用標準菌做對照，防止試劑失控以及對有資質(zhì)的廠家便于監(jiān)控，同時也提高檢驗結(jié)果的可靠性、準確性、及時性）等。所以每個環(huán)節(jié)都要進行質(zhì)量控制。

通過幾次室間考核提高了我微生物實驗室的常規(guī)工作水平、細菌學的診斷水平、質(zhì)量控制水平以及工作人員專業(yè)能力水平?？傊?，細菌檢驗質(zhì)量控制直接關(guān)系到細菌學檢測結(jié)果的可靠性和準確性，是衛(wèi)生檢測不可缺少的部分，參加質(zhì)量控制考核，有利于督促和提高檢驗人員的專業(yè)檢測水平，更有利于應(yīng)急處置工作，因此非常有必要開展室間及室內(nèi)質(zhì)量控制工作。

參考文獻

[1] 《中華人民共和國國家標準》GP/T4789.1-2010[M].北京：中國標準出版社，2010，447-532.

[2] 陳文勝.微生物實驗室室間質(zhì)量評價探討[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2004，14（5）:624-625.