紫外可見分光光度法測定白菜中硝酸鹽含量

趙杰

摘要 [目的]探究紫外分光光度法用于測定蔬菜中硝酸鹽的含量是否快捷、方便、準確。[方法]選取日常生活中常見的、代表性較強的白菜為材料，分別放置0、2、4、6、8 d，用亞鐵氰化鉀、乙酸鋅、硼酸、活性炭等試劑處理蔬菜勻漿，制得待測液。采用紫外分光光度法測定蔬菜樣品待測液中硝酸鹽含量，并做加標回收試驗，以判斷試驗準確度。[結(jié)果]該方法加標回收率較高，說明準確度較高，RSD小于3.7%，具有較高的精密度。[結(jié)論]此方法操作簡便、結(jié)果準確，適用于蔬菜中硝酸鹽含量的測定。

關(guān)鍵詞 紫外分光光度法；白菜；硝酸鹽；含量測定

中圖分類號 S609.9 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2014）27-09553-02

Determination of Nitrate in Vegetables by Ultraviolet Spectrophotometry Method

ZHAO Jie

（Guiyang University， Guiyang， Guizhou 550025）

Abstract [Objective] To explore the ultraviolet spectrophotometric method for determination of content of nitrate in vegetables is quick， convenient and accurate. [Method] Selecting common and representative vegetables in the daily life as materials， they were placed respectively 0， 2， 4， 6， 8 days， potassium ferrocyanide， zinc acetate， boric acid and activated carbon were used to process vegetable homogenate， so as to obtain test liquid. The content of nitrate in vegetables were determined by ultraviolet spectrophotometry， and standard addition recovery experiment was conducted， the accuracy of experiment was determined. [Result] The results showed that the standard addition recovery rate is higher， shows high accuracy， RSD is less than 3.7%， has higher precision. [Conclusion] This method is simple and accurate， and suitable for the determination of nitrate content in vegetables.

Key words Ultraviolet spectrophotometry； Vegetables； Nitrate； Content determination

蔬菜中硝酸鹽的來源有環(huán)境污染、農(nóng)藥的大量使用以及肥料的施用（尤其是氮肥）等，由于蔬菜體內(nèi)硝酸鹽還原的速度跟不上其吸收氮素的速度，硝酸鹽就會在蔬菜體內(nèi)蓄積，主要食用部位為葉和根的蔬菜極易富集硝酸鹽。

雖然硝酸鹽對人體危害不大，但其在一定條件下轉(zhuǎn)化成亞硝酸鹽后會對人體造成一定傷害。蔬菜中的硝酸鹽在食用之前就有部分被還原成亞硝酸鹽，亞硝酸鹽是一種有毒物質(zhì)，攝入量達到一定值可直接使動物出現(xiàn)血液缺氧中毒反應(yīng)，嚴重時甚至可導(dǎo)致死亡。NO-₂還可能與二級胺結(jié)合形成強致癌物亞硝胺，誘發(fā)人體消化系統(tǒng)的癌變。

硝酸鹽含量是無公害蔬菜的一個重要指標。為了便于人們在選用蔬菜時能夠作出更利于健康的判斷，探究出一種簡便、快速、準確的測定蔬菜中硝酸鹽含量的方法，顯得尤為重要。筆者以貴陽市某菜市場購買的白菜作為試驗樣品，以紫外分光光度法測定白菜中硝酸鹽的含量，進而了解蔬菜中硝酸鹽含量情況，為大批量蔬菜樣品中硝酸鹽含量的快速測定提供一定的參考。

1 材料與方法

1.1 材料

原料：市售大白菜。

主要儀器：

紫外分光光度計（UV250IPC），杭州科曉化工儀器設(shè)備有限公司；

搗碎機，上海昂尼儀器儀表有限公司；

水浴鍋，河南鄭州南北儀器設(shè)備有限公司；

電子天平（AL204），北京鑫聯(lián)康盛科技有限公司；

恒溫干燥箱（2022），天津市泰斯特儀器有限公司；

燒杯，上海雅東玻璃制品有限公司；

容量瓶，上海知瑞實業(yè)有限公司；

玻璃棒，廣東鑫盛源玻璃制品有限公司；

移液管，祁陽縣歐亞玻璃儀器有限公司。

主要試劑：

亞鐵氰化鉀，天津市福晨化學試劑廠；

乙酸鋅，山東淄博臨淄天德精細化工研究所；

氨基磺酸，煙臺三鼎化工有限公司；

鹽酸，杭州創(chuàng)高實業(yè)有限公司；

硝酸鉀，鄭州博軒化工產(chǎn)品有限公司；

硼砂，重慶齊星化工；

活性炭，國營重慶無機化學試劑廠；

純凈水，娃哈哈。

1.2 繪制標準曲線^[1-2]

1.2.1 吸收波長的選擇。

吸取標準工作液1.2 ml于50 ml容量瓶中，用去離子水定容。于200～400 nm波長范圍隨同空白掃描，掃描結(jié)果顯示NO-₃在200 nm處有最大吸收。因200 nm處于近紫外區(qū)（200～400 nm）和遠紫外區(qū)（10～200 nm）分界值，故選擇210 nm為樣品中硝酸鹽的測量波長。

1.2.2 標準曲線的繪制。

分別準確吸取硝酸根標準貯備液0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、5.0 ml于8個50 ml容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻（此標準系列溶液分別含NO-₃濃度為：0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、5.0 mg/L）。用1 cm石英比色皿于波長210 nm處測其吸光度。

1.3 樣品待測液制備

1.3.1 樣品制備。

將樣品先用自來水沖洗，再用純凈水清洗干凈，晾干表面水分，切碎，于組織搗碎機中勻漿（部分少汁樣品可按一定質(zhì)量比例加入等量純凈水），在勻漿中加1滴正辛醇消除泡沫。

1.3.2 樣品待測液的制備^[1]。

稱取白菜勻漿5.000 g于燒杯中，加入2.5 ml飽和硼砂溶液，用70～80 ℃純凈水洗入100 ml容量瓶中，置沸水浴中加熱10 min（水浴時間采用蔡順香通過試驗選出的最佳水浴時間）^[3]。取出冷卻至室溫，分別加入5 ml亞鐵氰化鉀和乙酸鋅溶液，及2 g活性炭粉，充分混合，定容充分搖勻，放置5～10 min，用定量濾紙過濾（蔬菜濃度：0.5 g/L）。

1.3.3 共存離子的消除^[1]。

樣品提取液中含有亞硝酸根，它在210 nm處也有吸收，會對測定結(jié)果造成影響。每10～20 ml勻漿中，加入1 mol/L鹽酸溶液12 ml可消除碳酸鹽的干擾，再加1%氨基磺酸銨0.1 ml能很好消除NO-₂的干擾^[4]。100 ml中應(yīng)加入5～10 ml HCl，1%氨基磺酸0.5～10 ml。

1.4 樣品中硝酸鹽含量的測定^[2]

取待測液1～5 ml于50 ml容量瓶中，用水定容。搖勻后于紫外分光光度計上，以樣品空白溶液調(diào)零，用1 cm石英比色皿于波長210 nm處測定吸光度，從標準曲線上查得相應(yīng)濃度，計算白菜樣品中的硝酸鹽含量。

樣品中硝酸鹽含量用質(zhì)量分數(shù)W（mg/kg）表示，計算公式^[5]：

W=X×V₁×V₃/m×V₂

式中，V₁為提取液定容體積（ml）；V₂為吸取濾液體積（ml）；V₃為待測液定容體積（ml）；X為從工作曲線中查得測試液中硝酸鹽質(zhì)量濃度（mg/L）；m是樣品質(zhì)量（g）。計算結(jié)果保留到整數(shù)位。

1.5 硝酸鹽回收率及精密度測定

稱取樣品勻漿液5.003 g，加入一定量的硝酸鹽標準溶液，試驗方法同“1.4”，于波長210 nm處測定吸光值。

2 結(jié)果與分析

2.1 標準曲線的繪制

經(jīng)檢測，不同濃度的硝酸根吸光值見表1。

3 結(jié)論

該試驗結(jié)果表明，使用紫外分光光度法在波長210 nm處測定白菜中硝酸鹽含量具有較高的準確度，其加標回收率在98.2%～103.0%，同時也具有較高的精密度，其相對標準偏差在0.48%～3.68%，能滿足檢測分析的要求。紫外分光光度法測定白菜中硝酸鹽含量方便、快捷、計算方法簡單，具有很高的可行性，可推廣應(yīng)用到其他蔬菜及水果中硝酸鹽含量的測定。

參考文獻

[1] 蔡順香.紫外分光光度法快速測定蔬菜中的硝酸鹽含量[J].福建農(nóng)業(yè)學報， 2005，20（2）：125-127.

[2] 曹書杰.紫外分光光度法測定蔬菜中硝酸鹽含量[J].南陽師范學院學報，2008，7（3）：53-54.

[3] 王曉菁，張艷，陳玲，等.紫外吸收光度法測定蔬菜中硝酸鹽含量[J].寧夏農(nóng)林科技，2005（6）：36-37.

[4] 楊錨，邵華，金芬，等.新鮮蔬菜和水果中硝酸鹽紫外分光光度法的測定[J].華中農(nóng)業(yè)大學學報，2009，28（1）：102-105.

[5] 張德純，劉肅，錢洪.淺析我國蔬菜產(chǎn)品安全質(zhì)量標準[J].中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報，2002，4（5）：9-15.