17例抗高爾基體抗體陽性患者的臨床特點(diǎn)

周仁芳，王　勇，曾愛平，吳　鋒，陳　瑛，李云生，程勇軍

(溫州醫(yī)科大學(xué)附屬溫嶺醫(yī)院檢驗(yàn)科，浙江臺(tái)州 317500)

自身抗體作為自身免疫性疾病(autoimmune diseases，AID)的特征性標(biāo)志，對(duì)AID的臨床診斷和病情監(jiān)測(cè)起重要作用[1]。某些特異性自身抗體已成為系統(tǒng)性AID或器官特異性AID的血清學(xué)標(biāo)志。部分特異性自身抗體除了可出現(xiàn)在AID中，還可見于感染性疾病、腫瘤患者甚至健康人群等[2]。因此，為了解自身抗體的確切臨床意義需進(jìn)行長(zhǎng)期、大規(guī)模的臨床實(shí)踐?？垢郀柣w抗體(anti-golgi autoantibodies，AGAs)作為以間接免疫熒光法(indirect immunofluorescence，IIF)進(jìn)行抗核抗體(anti-nuclear antibody，ANA)檢測(cè)時(shí)呈現(xiàn)特征性熒光模式的特異性自身抗體，1982年首次報(bào)道在干燥綜合征(Sjgren’s syndrome，SS)合并淋巴瘤患者中出現(xiàn)[3]。隨后，AGAs可見于其他AID、病毒感染性疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病等相關(guān)臨床報(bào)道中[4]。而國(guó)內(nèi)對(duì)于臨床標(biāo)本中AGAs檢出情況和相關(guān)臨床、實(shí)驗(yàn)室特征卻少有報(bào)道。對(duì)此，本研究收集2008年6月至2013年9月溫州醫(yī)科大學(xué)附屬溫嶺醫(yī)院門診和住院患者ANA臨床檢測(cè)標(biāo)本中AGAs陽性結(jié)果及相關(guān)資料進(jìn)行回顧性分析，以了解AGAs在臨床患者中的陽性分布情況及其相關(guān)臨床意義。

對(duì)象和方法

對(duì)象

收集2008年6月至2013年9月溫州醫(yī)科大學(xué)附屬溫嶺醫(yī)院基本資料較全的門診和住院患者中進(jìn)行ANA檢測(cè)者資料，篩選AGAs陽性患者。入選的AGAs陽性患者各臨床診斷均符合相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。

方法

詳細(xì)收集納入患者的相關(guān)臨床和實(shí)驗(yàn)室資料，包括年齡、性別、臨床診斷、關(guān)節(jié)癥狀(關(guān)節(jié)痛、關(guān)節(jié)炎)、心肺相關(guān)疾病(心包炎、胸膜炎、肺纖維化等)、肝功能、類風(fēng)濕因子(rheumatoid factor，RF)、ANA特異性抗體譜(ANAs)等。

結(jié)　　果

基線資料

共納入ANA檢測(cè)者20 471例，男5 056例(24.70%)，年齡1～89歲，平均年齡41歲；女15 415例(75.30%)，年齡1～93歲，平均年齡40歲。20 471例就診患者送檢臨床標(biāo)本中，包括風(fēng)濕免疫科6 854例、腎內(nèi)科4 632例、神經(jīng)內(nèi)科2 412例、感染科2 298例、皮膚科1 514例及其他科室2 761例。

AGAs特征性熒光染色模式

資料中典型AGAs特征性熒光染色模式：分裂間期HEp-2胞漿毗鄰細(xì)胞核一端或圍繞核周呈現(xiàn)大小不均的顆粒狀熒光染色，常呈現(xiàn)細(xì)胞核周特征性的“新月形”；核漿及核仁為陰性。分裂期細(xì)胞由于高爾基體溶解，核漿呈彌漫型熒光染色，染色體周圍更為濃密。猴肝組織冰凍切片可見散在分布的顆粒狀熒光染色(圖1)。

AGAs陽性檢出率

20 471例患者ANA臨床檢測(cè)標(biāo)本中，ANA陽性者為5 387例，其中AGAs陽性者17例。AGAs在20 471例臨床標(biāo)本中的陽性率為0.08%，在ANA陽性標(biāo)本中的陽性率為0.32%。

AGAs陽性患者疾病分布及相關(guān)臨床、實(shí)驗(yàn)室特征

17例AGAs陽性患者中，女12例(70.59%)，男5例(29.41%)，年齡37～75歲，平均53歲。其中，AID患者6例(35.29%)[系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)2例，SS、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)、潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)、多發(fā)性肌炎(polymyositis，PM)各1例]；11例(64.71%)非AID患者，其中慢性乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus，HBV)感染相關(guān)疾病患者4例(慢性乙型肝炎1例，乙型肝炎肝硬化2例，HBV感染導(dǎo)致肝細(xì)胞癌1例)，其他疾病7例[子宮肌瘤、肺結(jié)核、藥物性皮疹、尿毒癥、單純皰疹病毒(herpes simplex virus，HSV)感染病毒性腦炎、結(jié)節(jié)性甲狀腺腫、卵巢癌]。AGAs陽性滴度范圍為1∶100～1∶3200，其中滴度1∶1000～1∶3200有3例，均見于系統(tǒng)性AID患者(SLE 2例，RA 1例)；滴度1∶100～1∶320有14例，除SS、UC、PM患者外，均見于其他各種臨床疾病患者(表1)。

17例AGAs陽性患者中，關(guān)節(jié)痛或關(guān)節(jié)炎者9例(52.94%)，心肺相關(guān)疾病者5例(29.41%)，肝功能異常者5例(29.41%)；RF陽性者6例(35.29%)(AGAs陽性的AID患者RF陽性率為50.00%)，ANAs陽性者4例(抗Ro52抗體陽性2例，抗SSA抗體、抗組蛋白抗體陽性各1例)(表1)。

AGAs陽性患者隨訪

8例AGAs陽性患者有隨訪記錄。3例系統(tǒng)性AID患者(SLE、PM、RA)在臨床隨訪中AGAs陽性滴度未發(fā)生改變，持續(xù)≥1∶320。其中，RA患者隨訪18個(gè)月，AGAs陽性滴度持續(xù)1∶1000。3例在臨床隨訪中AGAs轉(zhuǎn)為陰性，其中HSV感染相關(guān)病毒性腦炎患者隨訪AGAs轉(zhuǎn)陰時(shí)間最短(2個(gè)月)。另2例患者(結(jié)節(jié)性甲狀腺腫、卵巢癌)患者AGAs未發(fā)生明顯改變(表2)。

討　　論

高爾基體作為細(xì)胞質(zhì)中的細(xì)胞器，具有特殊結(jié)構(gòu)，其中包含多種與蛋白質(zhì)合成、翻譯后修飾及細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)的蛋白質(zhì)成分[5]。AGAs首次報(bào)道見于SS合并淋巴瘤患者后，近年來相繼報(bào)道可見于多種系統(tǒng)性AID(SLE、RA、PM、DM等)、病毒感染性疾病(HBV、EB病毒、巨細(xì)胞病毒、人類免疫缺陷病毒等)、小腦共濟(jì)失調(diào)、慢性疲勞綜合癥、淺靜脈炎、尿毒癥、酒精性肝病等其他疾病[4-8]。對(duì)此，本研究旨在通過回顧性分析本院就診患者ANA臨床檢測(cè)標(biāo)本中的AGAs陽性檢出情況及其臨床、實(shí)驗(yàn)室特征，以探討其相關(guān)的臨床意義。

表1　AGAs陽性患者臨床和實(shí)驗(yàn)室特征

AGAs：抗高爾基體抗體；RF：類風(fēng)濕因子；ANAs：抗核抗體譜；+：陽性；—：陰性

表2　部分臨床隨訪患者AGAs變化

AGAs：抗高爾基體抗體；*該患者18個(gè)月后疾病活動(dòng)度評(píng)分與首次AGAs陽性時(shí)一致，均>5.1分

本回顧性研究中典型病例資料顯示，以HEp-2細(xì)胞和猴肝組織冰凍切片為抗原基質(zhì)的IIF進(jìn)行臨床標(biāo)本檢測(cè)ANA時(shí)，呈現(xiàn)與以往研究報(bào)道[9]類似的多種熒光模式。除常見的核斑點(diǎn)型、核均質(zhì)型、核仁型外，還可出現(xiàn)在胞漿中以核周顆粒狀為主要特征的AGAs熒光模式。

本研究結(jié)果顯示，在20 471例患者ANA檢測(cè)標(biāo)本中，AGAs陽性率為0.08%。檢索到國(guó)外4篇文章報(bào)道了相關(guān)內(nèi)容，其AGAs陽性率分別為0.13%(13/9 841)[4]、0.20%(12/5 983)[6]、0.04%(20/51 586)[7]和0.07%(5/約8 000)[8]。本研究結(jié)果與Bizzaro等[8]報(bào)道基本一致，但與其他文獻(xiàn)報(bào)道[4，6-7]存在差異。究其原因，可能與各研究資料納入患者的疾病構(gòu)成比不同有關(guān)；也可能與報(bào)道中陽性判斷滴度存在差異有關(guān)。本研究的17例AGAs陽性臨床標(biāo)本可存在于多種疾病患者中，包括6例(35.29%)AID患者，除常見的系統(tǒng)性AID如SLE、RA和SS外，還可見于PM和UC；其他AGAs陽性主要見于非AID患者(64.71%)，如慢性HBV感染相關(guān)疾病、HSV感染病毒性腦炎、子宮肌瘤、肺結(jié)核等多種疾病患者。在AGAs陽性患者的滴度分析中，滴度≤1∶320有14例(82.35%)，主要見于非AID患者；而滴度為1∶1000～1∶3200者均見于SLE和RA。上述表明，AGAs并非系A(chǔ)ID的特征性自身抗體，本研究臨床標(biāo)本中的AGAs陽性以低滴度者為主，高滴度主要見于系統(tǒng)性AID患者如SLE和RA。

AGAs陽性患者可出現(xiàn)關(guān)節(jié)痛、關(guān)節(jié)炎、心肺相關(guān)疾病、肝功能異常、RF陽性及ANA特異性抗體陽性。本研究并未見AGAs與關(guān)節(jié)痛、關(guān)節(jié)炎、心肺相關(guān)疾病存在明確相關(guān)性，這可能與疾病本身臨床表現(xiàn)和病情進(jìn)展有一定關(guān)系。而AGAs陽性患者中的肝功能異常者卻主要出現(xiàn)在慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化、HBV感染導(dǎo)致的肝細(xì)胞癌患者中，與Hong等[6]報(bào)道12例AGAs陽性患者中6例出現(xiàn)肝功能異常相似。AGAs與肝功能異常的相關(guān)性有待進(jìn)一步深入研究。RF最初被發(fā)現(xiàn)與RA相關(guān)，但也可見于其他AID、感染性疾病和健康人群(尤其是老年人)[5]。本研究結(jié)果示，AGAs陽性的AID患者RF陽性率為50.00%，低于文獻(xiàn)[10]的匯總結(jié)果。AGAs陽性標(biāo)本中，ANAs陽性者均見于系統(tǒng)性AID(SLE、SS、PM)患者，且以抗Ro52抗體、抗SSA抗體及抗組蛋白抗體為主。上述自身抗體的產(chǎn)生是否與系統(tǒng)性AID本身或AGAs有關(guān)，仍需進(jìn)一步分析。Hattori等[11]報(bào)道中了1例炎癥性肌病患者同時(shí)存在AGAs和抗SSA抗體陽性，此種情況可能作為特發(fā)性炎癥性肌病的一種特殊亞型，該患者具有特殊的臨床病程，且甾類化合物治療有效。由此提示，AGAs和ANA某些特異性自身抗體可共同影響AID如特發(fā)性炎癥性肌病的發(fā)病機(jī)制和治療應(yīng)答。

本研究中，3例系統(tǒng)性AID患者經(jīng)11～18個(gè)月隨訪，AGAs持續(xù)高滴度陽性。其中RA患者18個(gè)月后隨訪，AGAs滴度仍持續(xù)1∶1000；且該患者疾病活動(dòng)度評(píng)分與首次AGAs陽性時(shí)一致，均>5.1分，屬高活動(dòng)組。因此，AGAs持續(xù)高滴度陽性是否參與RA的發(fā)病機(jī)制、是否與高疾病活動(dòng)度相關(guān)，仍有待進(jìn)一步深入分析。5例非AID患者在隨訪中均未進(jìn)展為AID，且3例患者2～10個(gè)月后AGAs轉(zhuǎn)為陰性。在AGAs轉(zhuǎn)為陰性的臨床隨訪患者中，其中發(fā)熱、藥物性皮疹和HSV感染相關(guān)病毒性腦炎患者為愈后隨訪；而乙型肝炎肝硬化患者首次AGAs陽性時(shí)為進(jìn)行聚乙二醇干擾素α治療過程中，經(jīng)治療后患者HBV-DNA持續(xù)低滴度，隨訪AGAs轉(zhuǎn)為陰性時(shí)已停用上述藥物3個(gè)月。因此，AGAs在非AID患者中作為一種短暫的自身免疫現(xiàn)象，可能與病毒感染或藥物作用使其他潛在抗原暴露有關(guān)[4]，但確切的產(chǎn)生機(jī)制需進(jìn)一步研究。

總之，AGAs在臨床就診患者中存在較低的陽性檢出率；AGAs并非為AID的特征性自身抗體，其陽性結(jié)果可見于多種臨床疾病患者。臨床標(biāo)本中的AGAs陽性以低滴度者為主，高滴度和持續(xù)陽性主要見于系統(tǒng)性AID患者，低滴度和短暫陽性主要見于非AID患者。

(本文圖1見插頁Ⅰ)

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